專利名稱：在影響呼吸道的炎癥病狀中氣道施用組織因子途徑抑制物的制作方法
在影響呼吸道的炎癥病狀中氣道施用組織因子途徑抑制物在申請(qǐng)中或在當(dāng)前申請(qǐng)中引用的所有專利和非專利文獻(xiàn)也通過整體引 用而將它們?cè)诖艘?。發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明提供了阻止兒童和成年人與血纖蛋白沉積相關(guān)的任何疾病中呼 吸道(特別是肺泡和/或細(xì)支氣管)空隙中急性、復(fù)發(fā)性和慢性血纖蛋白沉積的方法。這些疾病包括炎癥性肺部疾病(例如急性肺損傷(acute lung injury, ALI))，其可與直接或間接的肺部創(chuàng)傷有關(guān)，例如，在呼吸器治 療之后(呼吸器i秀導(dǎo)的月申損傷(ventilatory Induced Lung Injury, VLLI)); 炎癥病況，例如自體免疫疾病、胰腺炎、吸入性肺炎；有毒煙霧的吸入； 急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)，其是急性肺損傷的更嚴(yán)重的表現(xiàn)；感染， 如敗血癥、嚴(yán)重的敗血癥和膿毒性休克；任何原因的肺炎；急性和慢性支 氣管肺泡疾病，纖維化性肺泡炎，細(xì)支氣管炎，囊性纖維化以及具有嚴(yán)重 氣道高反應(yīng)性的疾病，例如支氣管哮喘和藥物誘發(fā)的肺功能不全，例如， 在化療如博來霉素化療之后。在本發(fā)明的方法中，抗凝血?jiǎng)├缃M織因子 途徑抑制物通過氣道施用向氣管內(nèi)、支氣管內(nèi)或肺泡腔施用，無論這些抗 凝血?jiǎng)┦窃醋匝獫{還是通過重組DNA技術(shù)制備的。這些方法在臨床醫(yī)學(xué)、 特別是危重或重癥監(jiān)護(hù)醫(yī)學(xué)和呼吸醫(yī)學(xué)中是有用的。發(fā)明背景血纖蛋白在呼吸道的空隙、特別是肺泡和細(xì)支氣管空隙中的沉積是以 下病況的常見并發(fā)癥例如由創(chuàng)傷引起的全身性炎癥病狀，敗血癥，嚴(yán)重 敗血癥和膿毒性休克，藥物(例如，由于氨曱喋呤、博來霉素或西羅莫司) 誘發(fā)的ALI、 ARDS或肺炎(Amigues L， Klouche K, Massanet P， Gaillard N, Garrigue V, Beraud JJ, Mourad G. Sirolimus-associated acute respiratory distress syndrome in a renal transplant recipient. Transplant Proc. 2005;37:2830-1.)，呼 口及器i秀導(dǎo)的月市4員傷(VILI) ( Maclntyre NR. Current issues in mechanicalventilation for respiratory failure. Chest. 2005;128:561 S-567S )禾口繼發(fā)于才幾才成通 氣的肺部損傷(VILI (The Acute Respiratory Distress Synd rome Network: Ventilation with lower tidal volumes as compared with traditional tidal volumes for acute lung injury and the acute respiratory distress syndrome. N Engl J Med. 2000;342:1301-1308 )。這些病況引起凝結(jié)的全身激活，最終引起血纖蛋白在血管內(nèi)和血管外 間隙(即肺泡和支氣管區(qū)室中)沉積。同時(shí)，炎癥性活化引起致炎細(xì)胞因 子，例如腫瘤壞死因子a (TNF-a)、白細(xì)胞介素l-卩(IL-1卩)、白細(xì)胞介 素6 (IL-6)和白細(xì)胞介素8 (IL-8)從活化的炎性細(xì)胞釋放。血管內(nèi)血纖 蛋白沉積和肺部空隙中致炎細(xì)胞因子的釋放引起組織損傷，所述組織損傷 的特征是肺泡毛細(xì)血管膜的通透性提高，伴有彌散性肺泡損傷以及富含血 漿蛋白(包括凝血系統(tǒng)成分)的水腫液體在肺泡中累積，以及降低表面活 性劑的產(chǎn)生。結(jié)果，在肺泡管和空隙中形成富含血纖蛋白的透明膜。在后 期，發(fā)生嗜中性粒細(xì)胞和其他炎性細(xì)胞的大量浸潤(rùn)，隨后是滲出物的結(jié)構(gòu) 4匕禾口纟千纟1^匕。Bellingan GJ, 2002: "The pathogenesis of ALI/ARDS", Thorax 5 7:540—546已經(jīng)描述和綜述了這種病理順序。對(duì)應(yīng)于這種病理的臨床病況被 稱為ALI或ARDS，不同之處僅在于ARDS更嚴(yán)重、并且特征是更嚴(yán)重的 低氧血癥，使得動(dòng)脈Po2與吸入氧氣分率的比例(Pa02/FI02) S200mmHg。 ALI和ARDS作為全身炎癥反應(yīng)綜合癥(systemic inflammatory response syndrome, SIRS)的一部分發(fā)生，其可以由于感染性或非感染性原因引起， 例如胰腺炎或直接或間接肺部創(chuàng)傷；當(dāng)SIRS的原因是感染性的時(shí)，它稱為 敗血癥；當(dāng)與器官功能障礙相關(guān)聯(lián)時(shí)敗血癥被定義為嚴(yán)重?cái)⊙Y；當(dāng)與顯 著低血壓相關(guān)時(shí)敗血癥被定義為膿毒性休克。相似順序的病理事件也在由于各種原因(包括病毒、細(xì)菌和真菌媒介 物)導(dǎo)致的月巿炎(例如月巿孑包子蟲性月巿炎(Pneumocystis carinii pneumonia, PCP))、細(xì)支氣管炎(例如繼發(fā)于病毒性肺炎和/或肺移植物抗宿主疾病 (GVHD)中發(fā)生。在受炎性過程影響的那些肺區(qū)域中也引起肺泡滲出物和 血纖蛋白沉積。已經(jīng)指出的是(例如，Levi M et al.， 2003: "Bronchoalveolar coagulation and fibrinolysis in endotoxemia and pneumonia", Crit Care Med 31:S238-S242)，肺部對(duì)于敗血癥的血纖蛋白沉積特別敏感，比其他器官顯示出更大的程度的這一現(xiàn)象。廣泛局部血纖蛋白沉積提示可能涉及凝結(jié)的 局部活化或局部生理調(diào)節(jié)系統(tǒng)被擾動(dòng)。在支氣管肺泡區(qū)室中，在肺泡巨噬 細(xì)胞和在上皮細(xì)胞中局部表達(dá)的組織因子(TF)似乎在凝結(jié)起始中起到關(guān) ^t作用，而抗凝血酶和蛋白C系統(tǒng)導(dǎo)致的生理性抗凝作用不起作用。已經(jīng)記載，在患有由于敗血病性和非敗血病性原因?qū)е碌腁LI/ARDS的患者中， 蛋白C系統(tǒng),皮顯著地破壞，并有在ALI/ARDS中存在蛋白C途徑的循環(huán)和 月市泡內(nèi)4尤舌L的i正才居(Ware LB et al" 2003: "Protein C and thrombomodulin in human acute lung injury", Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 285丄514-L521 )。同時(shí)，局部纖維蛋白溶解作用顯著抑制，即，在受損傷的肺中凝結(jié)被 局部上調(diào)，而纖維蛋白溶解作用活性被顯著降低。發(fā)明概述本發(fā)明的目的是通過向氣道內(nèi)局部施用來應(yīng)用相關(guān)抗凝劑或能夠阻斷 凝結(jié)的局部起始的試劑，通過解決凝結(jié)系統(tǒng)的局部肺部活化和抗凝機(jī)制的 局部缺陷，來改進(jìn)ALI、 ARDS、肺炎和炎癥性肺部疾病的治療。通過這種 方式，可以在受影響的氣道中達(dá)到這些試劑的高局部濃度，從而與同一試 劑的全身性(靜脈內(nèi))施用相比，血管外血纖蛋白沉積可以被更有效地抑 制，但同時(shí)避免或降低了全身性副作用。這些試劑的氣道施用可以單獨(dú)給 予，或作為對(duì)同一試劑或其他試劑的靜脈內(nèi)施用的補(bǔ)充來給予。由于凝結(jié) 和炎癥之間的"串音"，這些試劑的氣道施用預(yù)期也通過降低局部凝血酶活化本發(fā)明的一個(gè)方面涉及在患有引起這種血纖蛋白沉積的炎癥性和/或傳 染性肺部狀況的人受試者中降低氣道中、特別是在肺泡或支氣管肺泡間隙 中血管外血纖蛋白沉積的方法，所述方法包括經(jīng)由氣道施用無論是從血漿 純化的還是通過DNA重組技術(shù)獲得的抗凝劑。發(fā)明的詳細(xì)說明本發(fā)明涉及通過任何適合的方法，向包括成年人和兒童的人受試者氣 道施用，無論怎樣制備的純化或濃縮的天然人組織因子途徑抑制物(tissue factor pathway inhibitor ， TFPI)或其衍生物，包括但不限于，氣管內(nèi)的、支氣管內(nèi)的或肺泡內(nèi)的施用，來防止或降低氣道、特別是肺泡或支氣管肺泡 空隙中的血管外血纖蛋白沉積。這種血纖蛋白沉積可能由急性狀況、復(fù)發(fā) 性狀況或慢性狀況引起，可以由于各種原因引起，包括但不限于直接或間 接的創(chuàng)傷、炎癥或感染，由于藥物誘發(fā)的氣道和肺間質(zhì)中血纖蛋白沉積、 先天疾病如嚢性纖維化，或由于這些可能的原因的組合。例如，據(jù)信本發(fā)明的方法在治療以ALI或ARDS為特征的肺泡血纖蛋白沉積中是有用的， 所述ALI或ARDS在大部分患有不同程度的敗血癥的患者中、在患有嚴(yán)重 的肺炎、梗阻性細(xì)支氣管炎和纖維化肺泡炎的患者中出現(xiàn)。定義親和性在受體和它們的配體之間，例如抗體和它的抗原之間的結(jié)合 強(qiáng)度。氨基酸殘基存在于多肽鏈中的氨基酸的部分，在所述多肽鏈中氨基 酸與其他氨基酸通過肽(酰胺)鍵連接。在此描述的氨基酸殘基優(yōu)選的是"L" 同分異構(gòu)形式。然而，氨基酸涵蓋每種氨基酸，例如L-氨基酸、D-氨基酸、 ot-氨基酸、P-氨基、Y-氨基酸、天然氨基酸和合成氨基酸等等，只要多肽保 持了期望的功能性質(zhì)。進(jìn)一步包括的是已經(jīng)被修飾的天然或合成氨基酸。 NH2是指存在于多肽的氨基末端的游離氨基。COOH是指存在于多肽的羧 基末端的游離羧基。在此使用氨基酸殘基的標(biāo)準(zhǔn)多肽縮寫。要注意的是，在此通過公式表示的所有氨基酸殘基序列在常規(guī)的氨基 末端到羧基末端的方向上具有從左到右的方向。此外，要注意的是，在氨 基酸殘基序列開始或末端的破折號(hào)代表與具有一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基的其 它序列之間的肽鍵，或與氨基末端基團(tuán)如NH2或乙?；?、或與羧基末端基 團(tuán)如COOH之間的共價(jià)鍵。修飾的氨基酸其中其任意基團(tuán)被化學(xué)修飾的氨基酸。特別是，在a-氨基酸中a-碳原子處被化學(xué)修飾的修飾氨基酸是優(yōu)選的。多肽用語多肽是指包含氨基酸殘基的分子，所述氨基酸殘基在鄰近 氨基酸殘基之間不含有酰胺鍵之外的鍵。術(shù)語"肽"也相應(yīng)地被使用。TFPI分子本發(fā)明涉及一個(gè)或多個(gè)TFPI分子在制備用于局部治療急性和血管外肺部血纖蛋白沉積的藥物中的用途。在此使用術(shù)語"TFPI分子，，來指代能夠直接或間接地結(jié)合并抑制凝血因子VIIa、 Xa和/或組織因子(TF )的任何分子。 通常，TFPI作為全長(zhǎng)分子以及作為各種羧基末端截短形式存在于血漿中。 TFPI也以與血漿脂蛋白的復(fù)合物的形式循環(huán)。分析用于本發(fā)明的TFPI分子的功能活性的方法包括由Bajaj et al., J Clin Invest 79, p 1874-1878, 1987; Sandset et al., Thromb Res 47, p 389-400， 1987描述的那些。要理解的是，本發(fā)明中使用的TFPI分子的活性與天然TFPI相比其效 力可以較低或較高。TFPI是內(nèi)源的絲氨酸蛋白酶抑制物，由內(nèi)皮細(xì)胞合成和分泌，其也被 稱為月旨蛋白相關(guān)凝結(jié)抑制物(lipoprotein-associated coagulation inhibitor, LACI)、組織因子抑制物(tissue factor inhibitor, TFI)和內(nèi)在途徑抑制物 (intrinsic pathway inhibitor, EPI) 。 TFPI具有抗凝血?jiǎng)┬再|(zhì)。人TFPI是 276個(gè)氨基酸的多肽，其含有18個(gè)半胱氨酸殘基，當(dāng)正確折疊時(shí)形成9個(gè) 二硫鍵。 一級(jí)序列含有三個(gè)N-連接的共有糖基化位點(diǎn)(Asn-X-Ser/Thr )。 糖基化位點(diǎn)的天冬酰胺殘基位于位置145、 195和256。 TFPI多肽含有三個(gè) Kunitz型酶抑制物結(jié)構(gòu)域。本發(fā)明進(jìn)一步包括重組的或合成地或轉(zhuǎn)基因產(chǎn)生的人TFPI肽的用途。 因而在一個(gè)實(shí)施方式中，所述TFPI分子是TFPI的同源物。意圖根據(jù)本發(fā)明施用的人組織因子途徑抑制物包括天然發(fā)生的人組織 因子途徑抑制物，或其生物學(xué)活性類似物，無論是從血漿制備的還是重組 地或轉(zhuǎn)基因地或合成地產(chǎn)生的。重組的組織因子途徑抑制物可以包括修飾 (例如，氨基酸取代和/或缺失和/或異源氨基酸序列的添加)，其可以產(chǎn)生 具有增強(qiáng)的生物活性的類似物。例如，TFPI可以使用真核細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)(例 如，人腎臟293、 HEPG-2、 SKHep、 LLC-MK2、 CHO或AV12細(xì)胞)、轉(zhuǎn) 基因動(dòng)物、轉(zhuǎn)基因植物或體外系統(tǒng)來產(chǎn)生。在這些系統(tǒng)中，蛋白可以作為 無活性的前體產(chǎn)生，其在純化之后被蛋白水解地裂解并被配制用于以其成 熟形式施用。產(chǎn)生、純化、活化和配制TFPI的細(xì)節(jié)是本領(lǐng)域已知的，例如，在美國(guó) 專利NO. 5,212,091中描述了，通過完全引用將其合并在此。并且，在美國(guó) 專利NO. 4,966,852中描述了可以用于這些方法的TFPI基因和質(zhì)粒，通過引用將其合并在此。組織因子途徑抑制物也可以從商業(yè)來源獲得。例如，可以用于本發(fā)明的TFPI的特定實(shí)例是由Chiron Corporation,以TifacoginTM(重 組組織因子途徑抑制物)的名稱生產(chǎn)的。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述TFPI分子是TFPI類似物。 "TFPI類似物"被定義為相對(duì)于TFPI具有一個(gè)或多個(gè)(例如，20個(gè)或更少， 例如17個(gè)或更少，例如15個(gè)或更少，例如13個(gè)或更少，例如11個(gè)或更 少，例如9個(gè)或更少，例如7個(gè)或更少，例如5個(gè)或更少，例如3個(gè)或更 少，例如2個(gè)或更少，例如1個(gè)或更少)的氨基酸取代、缺失、倒位或添 加的分子，并且可以包括D-氨基酸形式。美國(guó)專利No. 5,106,833中已經(jīng)描述了 TFPI類似物，其公開了類似物和 片段，美國(guó)專利NO. 5,312,736和5,378,614、和WO 2004/062689中也公開 了類似物和片段，通過完全引用將它們合并在此。本發(fā)明中使用的優(yōu)選的TFPI分子還包括TFPI的類似物以及其衍生物， 在所述TFPI類似物中在原始序列中存在的一個(gè)或多個(gè)氨基酸被添加或缺 失。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，TFPI類似物與野生型蛋白相比展現(xiàn)了增 強(qiáng)的抗凝血?jiǎng)┗钚浴Ｔ趦?yōu)選的實(shí)施方式中，所述類似物具有比野生型蛋白 更高的對(duì)其結(jié)合配偶體的結(jié)合親和性，所述結(jié)合配偶體例如因子VIIa、 Xa 和TF。在進(jìn)一步的實(shí)施方式中，所述修飾引起TFPI類似物的穩(wěn)定化。TFPI 類似物可以^^據(jù)本發(fā)明單獨(dú)地、或與其他TFPI類似物和/或同源物和/或衍 生物和/或共軛物組合地使用。例如，具有對(duì)因子VIIa、 Xa和/或TF的更高 結(jié)合親和性的TFPI類似物可以與穩(wěn)定的TFPI同源物組合使用。在本發(fā)明的另 一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述TFPI分子是TFPI衍生物。 'TFPI衍生物"被定義為具有TFPI或TFPI的類似物的氨基酸序列、但另外 包含一個(gè)或多個(gè)其氨基酸側(cè)鏈基團(tuán)、a-碳原子、末端氨基或末端羧基的化學(xué) 修飾的分子?；瘜W(xué)修飾包括但不限于，添加化學(xué)部分、產(chǎn)生新的鍵、以及 除去化學(xué)部分。氨基酸側(cè)鏈上的修飾包括，無限制地，賴氨酸s-氨基的酰 化作用、精氨酸、組氨酸或賴氨酸的N-烷基化、谷氨酸或天冬氨酸羧基基 團(tuán)的烷基化、以及谷氨酰胺或天冬酰胺的脫酰胺作用。末端氨基的修飾包 括，但不限于，脫氨基、N-低級(jí)烷基、N-二低級(jí)烷基和N-?；揎?。末端 羧基的修飾包括，但不限于，酰胺、低級(jí)烷基酰胺、二烷基酰胺和低級(jí)烷基酯修飾。低級(jí)烷基是Cl-C4烷基。此外， 一個(gè)或多個(gè)側(cè)鏈基團(tuán)或末端基團(tuán)，可以由普通的熟練蛋白質(zhì)化學(xué)家已知的保護(hù)性基團(tuán)來保護(hù)。氨基酸的a-碳可以被單甲基化或二曱基化。 TFPI分子的同源物在此指定的一種或多種序列的同源物可以與限定的序列相比在一個(gè)或 多個(gè)氨基酸上改變，但能夠行使相同的功能，即，同源物可以被視為預(yù)先 確定的序列的功能等效物。因而，在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述TFPI分子是任何在此 公開的分子的同源物，例如選自由以下組成的組的任何分子的同源物-TFPI'Tifacogin因而，在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述TFPI分子是與在此公 開的任何分子相比含有一個(gè)或多個(gè)氨基酸取代、倒位、添加或缺失的肽， 例如選自由以下組成的組的分子 TFPI'Tifacogin在一個(gè)實(shí)施方式中，所述取代、缺失或添加的數(shù)目是20個(gè)氨基酸或更 少，例如15個(gè)氨基或更少、例如10個(gè)氨基或更少、例如9個(gè)氨基或更少、 例如8個(gè)氨基或更少、例如7個(gè)氨基或更少、例如6個(gè)氨基或更少、例如5 個(gè)氨基或更少、例如4個(gè)氨基或更少、例如3個(gè)氨基或更少、例如2個(gè)氨 基或更少(例如l)、或這些數(shù)量之間的任何整數(shù)。在本發(fā)明的一個(gè)方面， 所述取代包括一個(gè)或多個(gè)保守性取代，例如20個(gè)或更少的保守性取代、例 如18個(gè)或更少、例如16個(gè)或更少、例如14個(gè)或更少、例如12個(gè)或更少、 例如10個(gè)或更少、例如8個(gè)或更少、例如6個(gè)或更少、例如4個(gè)或更少、 例如3個(gè)或更少、例如2個(gè)或更少的保守性取代。"保守的"取代表示氨基酸 殘基被另一個(gè)屬于同一氨基酸組的相關(guān)氨基酸殘基取代，例如，具有疏水 性側(cè)鏈的那些、具有芳香族側(cè)鏈的那些、具有堿性側(cè)鏈的那些、具有酸性 側(cè)鏈的那些、具有羥基側(cè)鏈的那些以及具有非電離極性側(cè)鏈的那些。保守 性取代的實(shí)例包括一個(gè)疏水性殘基例如異亮氨酸、纈氨酸、亮氨酸或曱硫 氨酸對(duì)另一個(gè)的取代，或一個(gè)堿性殘基對(duì)另一個(gè)的取代，例如精氨酸對(duì)賴氨酸的取代，或一個(gè)酸性殘基對(duì)另一個(gè)的取代，例如谷氨酸對(duì)天冬氨酸的 取代，或一個(gè)非電離極性殘基對(duì)另一個(gè)的取代，例如谷氨酰胺對(duì)天冬酰胺 的取代，等等。以下的表格列出了說明性的、但非限制性的保守性氨基酸 取代。初始?xì)埢痉缎缘娜〈鶤laSer, Thr, Val, GlyArgLysAsnHis， SerAspGlu, AsnCysSerGinAsn, HisGluAsp, GluGlyAla， SerHisAsn, GinlieLeu, Val, ThrLeulie, ValLysArg， Gin, Glu， Th.MetLeu, lie, ValPheLeu, TyrSerThr, Ala, AsnThrSer, AlaTipArg, SerTyrPheValIk, Leu, AlaProAla子具有大于百分之50的序列同一性、優(yōu)選的大于百分之90的序列同一性 (例如,大于91。/。的序列同一性,例如大于92%的序列同一性，例如大于 93%的序列同一性，例如大于94。/。的序列同一性，例如大于95。/。的序列同10一性，例如大于96%的序列同一性，例如大于97%的序列同一性，例如大 于98%的序列同一性，例如大于99%的序列同一性，例如大于99.5°/。的序 列同一性)的肽序列，所述在此公開的任何分子例如選自以下構(gòu)成的組的 分子
TFPI
-Tifacogin
如在此使用的，序列同一性是指使用本領(lǐng)域公知的標(biāo)準(zhǔn)算法在兩個(gè)分 子之間進(jìn)行的比較。對(duì)于本發(fā)明用于計(jì)算序列同一性的優(yōu)選的算法是
同一性百分比。對(duì)于匹配、錯(cuò)配以及插入和缺失的參數(shù)值選擇是任意的， 盡管某些參數(shù)值已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)與其他值相比產(chǎn)生生物學(xué)上更現(xiàn)實(shí)的結(jié)果。對(duì) 于Smith-Waterman算法的一個(gè)優(yōu)選的參數(shù)值組在"最大相似性片段"方法中 闡述，其使用了 1的值用于匹配的殘基，-1/3的值用于錯(cuò)配的殘基(殘基是 單個(gè)核苷酸或單個(gè)氨基酸)(Waterman, Bull. Math. Biol. 46， 473-500 (1984))。插入和缺失(indels) , x,被加權(quán)為 xk=l+k/3，
其中k是給定的插入或缺失中殘基的數(shù)目(同上)。
例如，與42個(gè)氨基酸殘基序列除了 18個(gè)氨基酸取代和3個(gè)氨基酸的
插入之外其余都相同的序列，將由以下給出同 一性百分比/42=81%同一性 在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，當(dāng)計(jì)算序列同一性時(shí)分子末端的
截?cái)嗖槐豢紤](即，如果一個(gè)分子比另一個(gè)長(zhǎng)，僅分子的重疊段被用于序
列同一性分析)；在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，截?cái)啾凰阕魅笔А?TFPI同源物可以包括D-氨基酸形式，可以是相對(duì)于在此公開的任何分
子具有一個(gè)或多個(gè)氨基酸取代、缺失、倒位或添加的分子，所述在此公開
的分子例如選自由以下組成的組的分子 -TFPI ■ Tifacogin
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，TFPI分子是與TFPI相比含有一個(gè) 或多個(gè)氨基酸取代、倒位、添加或缺失的肽。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述取 代、缺失或添加的數(shù)目是20個(gè)氨基酸或更少，例如15個(gè)氨基或更少、例如10個(gè)氨基或更少、例如9個(gè)氨基或更少、例如8個(gè)氨基或更少、例如7個(gè)氨基或更少、例如6個(gè)氨基或更少、例如5個(gè)氨基或更少、例如4個(gè)氨 基或更少、例如3個(gè)氨基或更少、例如2個(gè)氨基或更少(例如l)、或這些 數(shù)量之間的任何整數(shù)。在本發(fā)明的一個(gè)方面，所述取代包括一個(gè)或多個(gè)保 守性取代。以上給出了適合的保守性取代的實(shí)例。適合于本發(fā)明的用途和方法的其他TFPI同源物是來自蛋白C序列的肽 序列，與(1) SEQ ID NO: 1和/或與(2)其截短的序列具有大于百分之 50的序列同一性、和優(yōu)選的大于百分之90的序列同一性(例如，大于91% 的序列同一性，例如大于92%的序列同一性，例如大于93%的序列同一性， 例如大于94%的序列同一性，例如大于95%的序列同一性，例如大于96% 的序列同一性，例如大于97%的序列同一性，例如大于98。/。的序列同一性， 例如大于99。/。的序列同一性，例如大于99.5%的序列同一性)。如在此使用 的，序列同 一性是指使用本領(lǐng)域公知的標(biāo)準(zhǔn)算法在兩個(gè)分子之間進(jìn)行的比 較。對(duì)于本發(fā)明計(jì)算序列同一性的優(yōu)選的算法是如上所述的Smith-Waterman 算法。TFPI同源物也可以是相對(duì)于人TFPI具有 一 個(gè)或多個(gè)氨基酸取代、缺失、 倒位或添加的分子，并可以包括D-氨基酸形式。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，在此的任何預(yù)先確定序列例如SEQ ID NO: l的所述同源物，可以定義為i) 包含能選擇性結(jié)合凝血因子VIIa、 Xa和/或TF的氨基酸序列的同 源物，和/或ii) 與人TFPI相比對(duì)凝血因子VIIa、 Xa和/或TF具有基本上相似的或更高的結(jié)合親和性的同源物，和/或iii) 在氣道中沉積之后具有基本上相似的、更高的或更低的半衰期的 同源物?；瘜W(xué)衍生的TFPI分子進(jìn)一步理解的是，適合用于本發(fā)明的TFPI分子可以是化學(xué)上衍生的或 改變的肽，例如，具有非天然氨基酸殘基(如，氨基乙磺酸殘基、(3-和 氨基酸殘基和D-氨基酸殘基)、C-末端功能基團(tuán)修飾，例如酰胺、酯和C-末端酮修飾，以及N-末端功能基團(tuán)修飾，例如?；陌贰⑾驂A、或環(huán)化，例如存在于氨基酸焦谷氨酸中的環(huán)化。TFPI分子共軛物本發(fā)明的TFPI分子也可以用非肽部分來修飾以產(chǎn)生具有對(duì)例如蛋白水 解降解的失活抗性提高的TFPI化合物。因而，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，使用的TFPI分子是N-糖基化的 TFPI肽或其類似物。因而，在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，使用的TFPI分子是O-糖基化的 TFPI肽或其類似物。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，使用的TFPI分子是進(jìn)一步含有N-連接 的或 -連接的脂肪酸的TFPI多肽或其類似物。TFPI片段在一個(gè)實(shí)施方式中，所述TFPI分子可以是TFPI片段。所述片段是TFPI、 TFPI同源物或TFPI衍生物的一部分。片段的實(shí)例包括Kunitz結(jié)構(gòu)域1 、 2 或3， Kunitz結(jié)構(gòu)域1和2或2和3、或N-末端或C-末端或兩者的缺失。 TFPI的片段包含來自SEQIDNO: 1的至少20個(gè)連續(xù)氨基酸。例如，片段 長(zhǎng)度可以是20個(gè)氨基酸或更多，例如25個(gè)氨基酸或更多，例如30個(gè)氨基 酸或更多，例如50個(gè)氨基酸或更多，例如100個(gè)氨基酸或更多，例如150 個(gè)氨基酸或更多，例如200個(gè)氨基酸或更多，例如250個(gè)氨基酸或更多， 例如275個(gè)氨基酸或更多，或這些數(shù)量之間的任何整數(shù)。氣管內(nèi)、支氣管內(nèi)或肺泡內(nèi)施用施用的方法包括但不限于，噴霧、灌洗、吸入、沖洗或滴注，使用其 中已經(jīng)溶解了 一種或多種血液凝結(jié)因子的作為液體的生理學(xué)可接受的組合 物。當(dāng)在此使用時(shí)，術(shù)語"氣管內(nèi)、支氣管內(nèi)或肺泡內(nèi)的施用"包括這些施用 的所有形式，借此凝結(jié)因子被分別施用到氣管、支氣管或肺泡中，無論是 通過因子溶液的滴注、通過以粉末形式應(yīng)用因子、或通過作為煙霧或噴霧 的溶液或粉末或凝膠吸入因子來容許因子到達(dá)氣道的相關(guān)部分，其中添加 或者沒有添加穩(wěn)定劑或其他賦形劑。在另一個(gè)實(shí)施方式中，氣管內(nèi)、支氣管內(nèi)或肺泡內(nèi)的施用不包括產(chǎn)物的吸入，但包括滴注或應(yīng)用因子的溶液或含有因子的粉末或凝膠到氣管或 低位氣道中。
支氣管內(nèi)/肺泡內(nèi)施用的方法，包括但不限于，根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員公
知的方法的支氣管肺泡灌洗(bronchoalveolar labage, BAL )施用，使用其 中溶解了 TFPI和/或TFPI同源物和/或衍生物和/或共軛物的生理學(xué)可接受的 組合物作為灌洗液體，或?qū)嶋H上通過任何其他有效的支氣管內(nèi)施用形式， 包括使用干燥形式的含有抗凝劑的噴霧粉末(有或者沒有賦形劑)，或在 支氣管鏡檢期間在溶液或粉末或凝膠形式中直接施用抗凝血?jiǎng)?。氣管?nèi)施 用的方法包括但不限于，用溶解的組織因子途徑抑制物的類似溶液進(jìn)行盲 端氣管洗滌，或吸入含有溶解的組織因子途徑抑制物的噴霧化的液滴，這 種液滴通過使用適合于這種目的的任何噴霧設(shè)備獲得。
本發(fā)明為治療ALI、 ARDS、肺炎和與支氣管肺泡血纖蛋白沉積相關(guān)的 其他狀況的方法提供了有用的新補(bǔ)充。此外，抗凝血?jiǎng)┙?jīng)由氣道的施用預(yù) 計(jì)避免了抗凝血?jiǎng)├鏣FPI的全身性施用的不希望的出血副作用，抗凝血 劑例如TFPI的靜脈內(nèi)使用與包括腦出血在內(nèi)的內(nèi)出血的高發(fā)生率相關(guān)。同 時(shí)，當(dāng)與全身性施用相比時(shí)，抗凝血?jiǎng)┙?jīng)由氣道的應(yīng)用預(yù)計(jì)強(qiáng)化了它們對(duì) 肺中的血管外血纖蛋白沉積的作用。預(yù)計(jì)的是，抗凝血?jiǎng)┖涂寡装Y試劑例 如TFPI的總劑量可以在空隙內(nèi)局部地單獨(dú)使用，或可以在常規(guī)的靜脈途徑 和本發(fā)明的氣道途徑之間分配以獲得治療的全身性和局部肺部效果之間的 最佳平衡以及降低藥物副作用的發(fā)生率，例如，在患有嚴(yán)重?cái)⊙Y、膿毒 性休克和ARDS的患者中。此外，時(shí)間間隔("機(jī)會(huì)窗口")(在這種時(shí)間 間隔中靜脈內(nèi)使用TFPI可能是有益的)是有限的。當(dāng)試劑被用在敗血癥后 階段(post-septic phase)或甚至肺泡血纖蛋白沉積占優(yōu)勢(shì)的晚期ARDS階 段(例如在ALI和ARDS中所見的)，可能期望藥物反應(yīng)的更長(zhǎng)時(shí)間間隔。
本發(fā)明的優(yōu)選的實(shí)施方式包括通過用其中已經(jīng)溶解了適合劑量(例如， 2 mg到5 mg或更多)的TFPI的灌洗液體(例如，25 ml到100 ml等滲鹽 水)進(jìn)行支氣管肺泡灌洗的方式向患有ARDS的人患者局部支氣管內(nèi)施用 TFPI。取決于ALI或ARDS的早期或晚期階段的持續(xù)時(shí)間，在一天或多天 期間以 一 定間隔重復(fù)這種施用。在滿足TFPI靜脈內(nèi)施用指標(biāo)的患者中作為 補(bǔ)充性或組合性的治療，TFPI也可以通過靜脈內(nèi)輸注來給予。
其他優(yōu)選的施用方法可以包括使用以下設(shè)備1. 使用壓縮空氣/氧氣混合物的加壓噴霧器2. 超聲噴霧器3. 電子微泵噴霧器(例如Aeroneb Professional Nebulizer )4. 壓力定量氣霧劑(metered dose inhaler, MDI)5. 干粉吸入器系統(tǒng)(DPI),氣霧劑可以經(jīng)由a)面具遞送，或b)在插管的患者中在機(jī)械通氣期間 經(jīng)由氣管內(nèi)導(dǎo)管來遞送(設(shè)備1、 2和3)。只要患者能夠自己激活氣霧劑 設(shè)備，設(shè)備4和5也可以由患者不需協(xié)助地使用。包含TFPI和/或TFPI的同源物和/或衍生物溶液的優(yōu)選濃度在每ml溶 液0.1嗎到10000昭活性成分的范圍內(nèi)。使用化合物的單體形式，適合的 濃度通常在每ml溶液0.1 (ig到5000嗎的范圍內(nèi)，例如每ml溶液約0.1 (ig 到3000嗎的范圍內(nèi)，特別是在每ml溶液約0.1嗎到1000昭的范圍內(nèi)， 例如在每mi溶液約0.1嗎到250嗎的范圍內(nèi)。優(yōu)選的濃度將是約0.1到約 5.0mg，優(yōu)選的從約0.3mg到約3.0mg，例如從約0.5到約1.5 mg,特別是 在每ml溶液0.8到l.Omg的范圍內(nèi)。使用多聚體形式的化合物，適合的濃 度通常是在每ml溶液0.1嗎到1000嗎的范圍內(nèi)，例如每ml溶液約0.1嗎 到750嗎的范圍內(nèi)，特別是在每ml溶液約0.1嗎到500嗎的范圍內(nèi)，例 如在每ml溶液約0.1嗎到250嗎的范圍內(nèi)。優(yōu)選的濃度將是每ml溶液約 0.1到約5.0 mg,優(yōu)選的從約0.3 mg到約3.0 mg，例如從約0.5到約1.5 mg， 特別是在0.8到l.Omg的范圍內(nèi)。適應(yīng)癥本發(fā)明的 一個(gè)方面涉及治療或預(yù)防氣道中血管外血纖蛋白沉積的方 法。因而，本發(fā)明涉及治療患有由炎癥性肺部疾病引起的血管外血纖蛋白 沉積、或存在患有由炎癥性肺部疾病引起的血管外血纖蛋白沉積風(fēng)險(xiǎn)的個(gè) 體。在優(yōu)選的方面，所述炎癥性肺部疾病選自由以下組成的組 AU -ARDS -肺炎 急性支氣管肺泡疾病，慢性支氣管肺泡疾病
-纖維化肺泡炎(fibrosing alveolitis )或
支氣管哮喘
肺泡炎
細(xì)支氣管炎
-才更阻寸生纟田支氣管才幾4匕'1"生肺炎(Bronchiolitis obliterans-organizing pneumonia, BOPA )
移植物抗宿主疾病(GVHD) 肺孢子蟲性肺炎(PCP) -肺炎，例如吸入性肺炎
-藥物誘導(dǎo)的肺炎(例如，由于曱氨蝶呤、博來霉素或西羅莫司)
-纖維化肺泡炎，急性或慢性的
嚢性纖維化
特發(fā)性肺纖維化
在另一個(gè)實(shí)施方式中，所述炎癥性肺部疾病與選自由以下組成的組的 狀況相關(guān)
直接或間接的肺部創(chuàng)傷
胰腺炎
吸入性肺炎
- 敗血癥
.嚴(yán)重?cái)⊙Y，和/或 膿毒性休克
■肺孢子蟲性肺炎(PCP)，作為輔助預(yù)防性的或優(yōu)先的治療，或作為 PCP誘導(dǎo)的PCP明顯的ARDS的治療，即，在PCP階段之前或早期，或在 伴隨使用抗肺孢子蟲抗生素療法(例如磺胺曱嚅唑與曱氧芐啶)的明顯的 ARDS中。
藥物組合物
本發(fā)明中使用的藥物組合物或制劑包括組合于、優(yōu)選的溶于藥學(xué)上可 接受的載體、優(yōu)選的含水載體或稀釋劑的TFPI制品。所述藥物組合物可以 是固體、液體、凝膠或氣霧劑?？梢允褂酶鞣N含水載體，例如0.9%鹽水、緩沖鹽水、生理學(xué)相容的緩沖液，等等。這些組合物可以通過本領(lǐng)域技術(shù) 人員公知的常規(guī)技術(shù)來滅菌。產(chǎn)生的水溶液可以包裝使用、或在無菌條件 下過濾并凍千，凍干的制品可以在施用之前溶于無菌水溶液。所述組合物可以含有藥學(xué)上可接受的輔助物質(zhì)或佐劑，包括，但不限 于，pH調(diào)節(jié)和緩沖試劑和/或緊張性調(diào)節(jié)試劑，例如，醋酸鈉、乳酸鈉、氯 化鈉、氯化鉀、氯化鈣，等等。所述制劑可以含有藥學(xué)上可接受的載體和 賦形劑，包括微球體、脂質(zhì)體、微囊、納米顆粒等等。常規(guī)的脂質(zhì)體一般 由磷脂(中性的或帶負(fù)電的)和/或膽固醇組成。脂質(zhì)體是基于脂雙分子層 的嚢泡結(jié)構(gòu)，所述脂雙分子層圍繞含水區(qū)室。它們可以在它們的物理化學(xué) 性質(zhì)如大小、脂質(zhì)組成、表面電荷和磷脂雙分子層的數(shù)量和流動(dòng)性方面不同。對(duì)于脂質(zhì)體形成最常用的脂質(zhì)是i,2-二月桂酰基-sn-甘油-3-磷酸膽堿 (DLPC) ， 1，2-二肉豆蔻?；?sn-甘油-3-磷酸膽堿(DMPC ) ， 1,2-二棕櫚酰 基-sn-甘油-3 -磷酸膽堿(DPPC ) , 1 ，2- 二硬脂?；?sn-甘油-3-磷酸膽堿 (DSPC), 1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸膽堿(DOPC)， 1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DMPE ), 1,2-二棕櫚?；?sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DPPE ), 1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE) , 1,2-二肉豆蔻?；?sn-甘油-3-磷酸(單鈉鹽)(DMPA )， 1,2-二棕櫚酰基-sn-甘油-3-磷酸(單鈉鹽)(DPPA ), ，2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸(單鈉鹽)(DOPA ) , 1 ，2-二肉豆蔻酰基-sn-甘 油—3-[磷酸-rac- ( 1-甘油)](鈉鹽)(DMPG ) , 1，2-二棕櫚酰基-sn-甘油-3-[磷 酸-rac- ( 1-甘油)](鈉鹽)(DPPG ) , 1,2-二油?；?sn-甘油-3-[磷酸-rac- ( 1-甘油)](鈉鹽)(DOPG) ， l;二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-[磷酸-L-絲氨酸] (鈉鹽)(DMPS) ， 1,2-二棕櫚?；?sn-甘油-3-[磷酸-L-絲氨酸)(鈉鹽) (DPPS ) , 1,2-二油酰基-sn-甘油-3-[磷酸-L-絲氨酸](鈉鹽)(DOPS ) , 1,2-二油?；?51>甘油-3-磷酸乙醇胺^-(戊二酰基)(鈉鹽)和1,1',2，2'-四肉豆 蔻?；牧字?銨鹽)。由與其他脂質(zhì)或脂質(zhì)體的修飾物組合的DPPC組 成的制劑是優(yōu)選的，例如，與膽固醇和/或磷脂酰膽堿組合。長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體特征在于它們?cè)谘鼙谕高^性提高的身體位置上滲出的 能力上。產(chǎn)生長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體的最普通的途徑是將親水聚合物聚乙二醇(PEG) 共價(jià)連接到脂質(zhì)體的外表面。 一些優(yōu)選的脂質(zhì)是 1,2-二棕櫚?；?sn-甘 油—3-磷酸乙醇胺-N-[曱氧基(聚乙二醇)-2000](銨鹽),1,2-二棕櫚酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000](銨鹽)，1,2-二油?；?3-三曱基銨-丙烷(氯鹽)(DOTAP)。
Avanti， Polar Lipids, Inc， Alabaster, AL提供了可應(yīng)用于脂質(zhì)體的可能的 脂質(zhì)。此外，脂質(zhì)體懸浮液可以包括脂質(zhì)保護(hù)劑，其保護(hù)脂質(zhì)在5]i存時(shí)對(duì) 抗自由基和脂質(zhì)過氧化損傷。親脂性自由基猝滅劑，例如a-生育酚和水溶 性鐵特異性螯合劑，例如ferrioxianine,是優(yōu)選的。
可以獲得各種方法用于制備脂質(zhì)體，如在Szoka et al., Ann, Rev. Biophys. Bioeng. 9:467 ( 1980),美國(guó)專利NO. 4,235,871 4,501,728和4,837,028中描 述的，通過引用將它們所有的合并在此。另一種方法產(chǎn)生不同大小的多層 泡嚢。在這種方法中，形成泡嚢的脂質(zhì)溶解在適合的有機(jī)溶劑或溶劑系統(tǒng) 中，并在真空下或惰性氣體中干燥來形成薄的脂質(zhì)膜。如果期望，所述膜 可以再溶解在適合的溶劑，例如叔丁醇中，然后凍干來形成更均質(zhì)的脂質(zhì) 混合物，其處于更容易水化的粉末樣形式。用靶藥和靶成分的水溶液覆蓋 這種膜，并使其水化， 一般攪動(dòng)15-60分鐘。通過在更劇烈的攪動(dòng)條件下水 化所述脂質(zhì)，或通過添加增溶洗滌劑例如脫氧膽酸鹽，產(chǎn)生的多層泡嚢的 大小分布可以朝較小的尺寸移動(dòng)。
通過表面活性物質(zhì)在水溶液中形成微團(tuán)(含有疏水部分和一個(gè)或多個(gè) 離子基團(tuán)或者強(qiáng)親水性基團(tuán)的分子)。
本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常見表面活性劑可以用于本發(fā)明的微團(tuán)。適合 的表面活性劑包括月桂酸鈉、油酸鈉、十二烷基硫酸鈉、八氧乙二醇單十 二烷基醚(octaoxyethylene glycol monododecylether )、 辛苯聚醇9禾口 PLURONIC F-127 ( Wyandotte Chemicals Corp.)。優(yōu)選的表面活性劑是與靜 脈內(nèi)注射相容的非離子聚氧乙烯和聚氧丙烯洗滌劑，例如TWEEN-80、 PLURONIC F-68、 N-辛基-卩-D-p比喃葡萄糖苷，等等。此外，磷脂，例如用 于脂質(zhì)體的生產(chǎn)中所描述的那些，也可以用于膠團(tuán)形成。
在某些情況下，有益的是包括促進(jìn)活性物質(zhì)向其靶點(diǎn)遞送的化合物。
給藥方案
以與劑量制劑相容的方式和治療有效的量來施用制品。施用的量取決 于要治療的受試者，包括，受試者的體重和年齡、要治療的疾病和疾病的 狀態(tài)。適合的劑量范圍是每次施用每公斤體重通常數(shù)百微克活性成分的數(shù) 量級(jí)，優(yōu)選的范圍是每公斤體重約0.1嗎到ioooo嗎。使用化合物的單體形式，適合的劑量通常在每公斤體重0.1 到5000 |_lg的范圍內(nèi)，例如每公斤體重約0.1昭到3000嗎的范圍內(nèi)，特別是在每公斤體重約0.1昭到1000嗎 的范圍內(nèi)。使用化合物的多聚形式，適合的劑量通常在每公斤體重0.1 (ig 到1000嗎的范圍內(nèi)，例如每公斤體重約0.1 |iig到750 的范圍內(nèi)，特別 是在每公斤體重約O.l嗎到500嗎的范圍內(nèi)，例如每公斤體重約O.l嗎到 250 pg的范圍內(nèi)。優(yōu)選的劑量將是每次施用約0.1到約5.0 mg、優(yōu)選的約 0.3 mg到約3.0 mg,例如約0.5到約1.5 mg,特別是0.8到1.0 mg的范圍內(nèi)。 施用可以進(jìn)行一次，或可以隨后繼續(xù)施用。劑量還將取決于給藥途徑，并 將隨要治療的受試者的年齡、性別和體重改變。多聚體形式的優(yōu)選的劑量 將在每70公斤體重1 mg到70 mg之間。適合的每日劑量范圍是每公斤體重每天通常數(shù)百微克活性成分的數(shù)量 級(jí)，優(yōu)選的范圍每公斤體重每天約0.1嗎到10000 pg。 ^f吏用化合物的單體 形式，適合的劑量通常在每公斤體重每天0.1嗎到5000嗎的范圍內(nèi)，例如 每公斤體重每天約0.1嗎到3000嗎的范圍內(nèi)，特別是在每公斤體重每天約 0.1叱到1000 (ig的范圍內(nèi)。使用化合物的多聚形式，適合的劑量通常在每 公斤體重每天O.l嗎到1000 (ig的范圍內(nèi)，例如每公斤體重每天約0.1嗎到 750 (ig的范圍內(nèi)，特別是在每公斤體重每天約0.1 (ig到500嗎的范圍內(nèi)， 例如每公斤體重每天約0.1 pg到250 pg的范圍內(nèi)。優(yōu)選的劑量將是每公斤 體重每天約0.1到約100昭，優(yōu)選的約0.1昭到約50嗎，例如約O.3到約 30 |ag,特別是l.O到10[ig的范圍內(nèi)。施用可以進(jìn)行一次，或可以隨后繼續(xù) 施用。劑量還將取決于給藥途徑，并將隨要治療的受試者的年齡、性別和 體重改變。多聚體形式的優(yōu)選的劑量將在每70公斤體重每天1 mg到70 mg 之間。藥物包裝本發(fā)明中使用的化合物可以以單劑或多劑、單獨(dú)或與藥學(xué)上可接受的 載體或賦形劑組合施用。根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法，所述制劑可以 方便地以單位劑量的形式呈現(xiàn)。優(yōu)選的是根據(jù)本發(fā)明的化合物在試劑盒中提供。這種試劑盒一般含有 劑量形式的活性化合物用于施用。劑量形式含有足夠數(shù)量的活性化合物， 從而當(dāng)施用給受試者時(shí)可以獲得期望的效果。因而，優(yōu)選的是，藥物包裝包含與相關(guān)的劑量方案相應(yīng)的一定數(shù)量的 劑量單位。因而，在一個(gè)實(shí)施方式中，所迷藥物包裝包含藥物組合物，所 述藥物組合物包含以上定義的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上可接 受的載體、運(yùn)載體和/或賦形劑，所述包裝包含1到7個(gè)劑量單位，從而具
有用于一天或多天的劑量單位，或包含7到21個(gè)劑量單位，或其倍數(shù)，從
而具有用于一周的施用或幾周的施用的劑量單位。
所述劑量單位可以是如上述定義的。藥物包裝可以是用于氣管內(nèi)、支 氣管內(nèi)或肺泡內(nèi)施用的任何適合的形式。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述包裝 是小瓶、安瓿、管、泡罩包裝、盒或膠嚢的形式。
當(dāng)所述藥物包裝包含超過一個(gè)劑量單位時(shí)，優(yōu)選的是所述藥物包裝具 有一種能將每次施用調(diào)整到僅一個(gè)劑量單位的機(jī)制。
優(yōu)選的，試劑盒含有說明書，其標(biāo)明劑量形式實(shí)現(xiàn)希望的效果的用途， 以及在指定的時(shí)間階段內(nèi)服用的劑型數(shù)量。因而，在一個(gè)實(shí)施方式中，所 述藥物包裝包含用于施用所述藥物組合物的說明書。
實(shí)施例
實(shí)施例1
使用TFPI通過支氣管肺泡灌洗(bronchoalveolar lavage, BAL )的局部 肺部治療方案
I. 要治療的患者組
盡管針對(duì)分離的微生物媒介物使用完全抗生素覆蓋治療或?qū)ο嚓P(guān)疾病 給予治療，仍患有繼發(fā)于細(xì)菌性鏈球菌性肺炎的呼吸器相關(guān)性肺炎、肺孢 子蟲性肺炎(PCP)或其他類型的肺炎、或繼發(fā)于敗血癥的ARDS、彌漫性 血管內(nèi)凝血(DIC)、創(chuàng)傷、肺吸入性肺炎、或嚴(yán)重胰腺炎、或正在使用機(jī) 械換氣治療的博來霉素誘導(dǎo)的ARDS的患者，以及發(fā)生ARDS、氧容量降 低的患者(氧容量降低由Pa(VFi02比例(以mmHg表示的動(dòng)脈血氧張力/ 吸入氧氣分率)降低，即< 200 mmHg顯示)。
II. 治療方案
經(jīng)由支氣管肺泡灌洗(BAL )局部施用溶于20 ml生理鹽水的5 mg TFPI。
III. 結(jié)果的分析
a)通過監(jiān)視Pa02/Fi02比例(以mmHg表示的動(dòng)脈血氧張力/吸氣的氧分?jǐn)?shù))監(jiān)視氧容量。成功的治療導(dǎo)致氧容量增加，Pa02/Fi02比例〉200 mmHg。b)治療之前和之后對(duì)肺進(jìn)行放射性成像。由于患者在肺中有浸潤(rùn)， 如放射性成像所監(jiān)視的，成功的治療引起這些浸潤(rùn)的減少。實(shí)施例2用TFPI通過吸入進(jìn)行局部肺部治療的方案I. 要治療的患者組盡管針對(duì)分離的微生物媒介物使用完全抗生素覆蓋治療或?qū)ο嚓P(guān)疾病 給予治療，仍患有繼發(fā)于細(xì)菌性鏈球菌性肺炎的呼吸器相關(guān)性肺炎、肺孢 子蟲性肺炎(PCP)或其他類型的肺炎、或繼發(fā)于敗血癥的ARDS、彌漫性 血管內(nèi)凝血(DIC)、創(chuàng)傷、肺吸入性肺炎、或嚴(yán)重胰腺炎、或正在使用機(jī) 械換氣治療的博來霉素誘導(dǎo)的ARDS的患者，以及發(fā)生ARDS、氧容量降 低的患者(氧容量降低由PaCVFi02比例(以mmHg表示的動(dòng)脈血氧張力/ 吸氣的氧分?jǐn)?shù))降低，即〈200mmHg顯示)。II. 治療方案經(jīng)由噴霧器(Aeroneb )局部施用3x5mgTFPI。III. 結(jié)果的分析a )通過監(jiān)視Pa02/Fi02比例(以mmHg表示的動(dòng)脈血氧張力/吸氣的氧 分?jǐn)?shù))監(jiān)視氧容量。成功的治療導(dǎo)致氧容量增加，Pa02/Fi〇2比例> 200 mmHg。b)治療之前和之后對(duì)肺進(jìn)行放射性成像。由于患者在肺中有浸潤(rùn)， 如放射性成像所監(jiān)視的，成功的治療引起這些浸潤(rùn)的減少。2權(quán)利要求
1. 一種治療或預(yù)防人受試者中氣道中、特別是肺泡或支氣管肺泡間隙中血管外血纖蛋白沉積的方法，包括通過氣管內(nèi)、支氣管內(nèi)或肺泡內(nèi)施用的方式經(jīng)由氣道向所述受試者施用人組織因子途徑抑制物或其生物學(xué)活性衍生物。
2. 權(quán)利要求l的方法，其中所述血纖蛋白沉積由炎癥性肺部疾病引起。
3. 權(quán)利要求2的方法，其中所述炎癥性肺部疾病選自以下組成的組 ALI、 ARDS、肺炎、急性支氣管肺泡疾病、慢性支氣管肺泡疾病、纖維化 肺泡炎或支氣管哮喘。
4. 前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的方法，其中所述炎癥性肺部疾病與選自由 以下組成的組的病況相關(guān)直接或間接的肺部創(chuàng)傷、胰腺炎、吸入性肺炎、 敗血癥、嚴(yán)重?cái)⊙Y和/或膿毒性休克和/或藥物誘發(fā)的急性肺功能不全。
5. 前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的方法，其中所述組織因子途徑抑制物通過 組織因子途徑抑制物溶液的支氣管肺泡灌洗來施用。
6. 前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的方法，其中所述組織因子途徑抑制物通過 使用組織因子途徑抑制物溶液的盲端氣管洗滌來施用。
7. 前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的方法，其中所述組織因子途徑抑制物通過 引起組織因子途徑抑制物噴霧溶液的吸入來施用。
8. 前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的方法，其中所述組織因子途徑抑制物通過 弓1起噴霧粉末形式的組織因子途徑抑制物的吸入來施用。
9. 前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的方法，其中所述組織因子途徑抑制物通過 在支氣管鏡檢期間直接應(yīng)用組織因子途徑抑制物來施用。
10. 權(quán)利要求1到9的任一項(xiàng)的方法，其中所述人是成年人。
11. 權(quán)利要求1到9的任一項(xiàng)的方法，其中所述人是兒童。
12. 前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的方法，其中所述TFPI以每天0.1 (ig/kg-約10mg/kg體重的量施用。
13. 權(quán)利要求1到9的任一項(xiàng)的方法，進(jìn)一步包括向所述人受試者全身 地施用抗凝血?jiǎng)┳鳛檩o助治療。
14. 權(quán)利要求13的方法，其中所述人是成年人。
15. 權(quán)利要求13的方法，其中所述人是兒童。
全文摘要
本發(fā)明提供了通過氣管內(nèi)、支氣管內(nèi)、或肺泡內(nèi)的途徑經(jīng)由氣道向受試者施用天然抗凝血?jiǎng)┗蚱渖飳W(xué)活性衍生物，局部治療急性和慢性血管外肺部血纖蛋白沉積和/或降低與天然抗凝血?jiǎng)┑娜硇允┯孟嚓P(guān)的對(duì)受試者的不希望的影響的方法。
文檔編號(hào)A61P11/00GK101262880SQ200680031072
公開日2008年9月10日 申請(qǐng)日期2006年6月23日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月24日
發(fā)明者拉斯·O·厄滕格爾 申請(qǐng)人:德拉格雷丘爾公司