專利名稱：包含有肽類藥物的納米復合物滴眼液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含有肽類藥物滴眼藥及其制備方法，尤其是一種以β-胡蘿卜素包封磷酸鈣納米粒子作為載體傳遞肽類藥物的，能穿透眼生物屏障的包含有肽類藥物的納米復合物滴眼液及其制備方法。
背景技術(shù)：
隨著生物技術(shù)的發(fā)展，肽類藥物日益受到重視，尤其是DNA重組技術(shù)的發(fā)展使得這類藥物能以大規(guī)模進行生產(chǎn)。然而肽類藥物在實際應用中受到一定的限制，這是由于肽容易被各種蛋白酶迅速降解，而且半衰期短，通常采取靜脈頻繁給藥方式，同時肽類藥物穿過生物屏障的能力較弱，這歸因于它的弱擴散作用和低分配系數(shù)。為了解決這些問題，對于肽類藥物的安全而有效的靜脈給藥以及局部給藥(如眼局部、鼻局部)，人們迫切希望提供一種新的載藥系統(tǒng)。
鈣納米粒子是一種可生物降解的納米傳遞系統(tǒng)，由于體積小(10nm～850nm)，使鈣納米粒子具有一定的粘滯性，延長藥物與生物屏障的接觸時間，利于納米的傳遞作用；由于鈣納米的緩釋作用，延長了藥物在體內(nèi)維持治療濃度的時間；鈣納米本身可以生物降解，其副產(chǎn)物為磷和碳，為人體骨頭和牙齒等組織的組成成分，對人體無副作用，具有良好的生物相容性。
眼部特殊的組織結(jié)構(gòu)和藥代特點，使肽類藥物難以通過角膜等生物屏障進入眼內(nèi)，通常臨床上采用靜脈注射和眼內(nèi)注射等手段，使肽類藥物在眼局部的治療難以普及。
比如細菌性眼內(nèi)炎是臨床常見的眼內(nèi)嚴重感染，原因分為外因性和內(nèi)因性。臨床最多見的是外因性眼內(nèi)炎，病原體由外界直接進入眼內(nèi)，常見于眼球穿孔傷、內(nèi)眼手術(shù)及角膜潰瘍。例如白內(nèi)障手術(shù)后并發(fā)感染性眼內(nèi)炎在發(fā)達國家的發(fā)病率為0.072％～0.092％，在發(fā)展中國家發(fā)病率更高。因眼內(nèi)炎預后極差，嚴重影響視力，甚至眼球摘除，故是白內(nèi)障手術(shù)中最嚴重的并發(fā)癥。如何預防和有效治療眼內(nèi)炎在臨床上愈加受到關(guān)注。
以萬古霉素為例，眾所周知引起外因性眼內(nèi)炎的細菌絕大多數(shù)為革蘭氏陽性菌，萬古霉素對多種革蘭氏陽性球菌和桿菌有良好的殺滅作用，尤其對革蘭氏陽性球菌有特異性抑菌作用如金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、甲型乙型鏈球菌、肺炎球菌、腸球菌、淋球菌，特別對耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌球菌以及難辯型梭型芽孢桿菌等具有極高的體內(nèi)和體外抗菌活性。萬古霉素已被證實是治療眼內(nèi)炎的首選藥物。但是，由于萬古霉素分子量大，親水性高，用于眼睛局部給藥時會很快被淚液沖洗掉，不能有效地穿過角膜，因為藥物傳遞問題不能充分發(fā)揮藥效，目前國內(nèi)外尚未作為滴眼藥直接用于眼部抗細菌感染。臨床上只能采取靜脈用藥途徑、玻璃體直接注射途徑，兩個途徑均存在嚴重的副作用。靜脈用藥使藥物除了到達眼部以外，通過血液循環(huán)也在其他非靶部位形成一定的濃度，引起一系列副作用，如耳毒性、腎毒性、血栓性靜脈炎、發(fā)熱、皮疹等。在正常眼，由于血管通透性正常，血液中的萬古霉素無法穿透內(nèi)皮細胞到達眼內(nèi)以維持抑菌濃度，因此手術(shù)前靜脈用藥無法達到預防眼內(nèi)炎的發(fā)生。玻璃體注射雖然減少了全身用藥的副作用，但為了在眼內(nèi)能維持長時間有效濃度，需要反復注射，增加了醫(yī)源性眼部感染，易引起玻璃體出血，視網(wǎng)膜脫離等并發(fā)癥。由于操作技術(shù)要求高，手術(shù)復雜，病人治療時的心理恐懼均使玻璃體注射無法普及。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于由于肽類藥物分子量大，親水性高，半衰期短，用于眼睛局部給藥時會很快被排出不能有效地穿過角膜，而采用靜脈給藥途徑和玻璃體直接注射途徑，不僅存在嚴重的副作用而且病人治療痛苦。針對一類有效的眼用肽類藥物，因其藥物傳遞原因不能充分在眼內(nèi)發(fā)揮藥效的實際問題，提供一種以磷酸鈣、β-胡蘿卜素組成的納米顆粒作為載體，含有治療成分的肽類藥物的滴眼復合物及其制備方法。
本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的一種包含有肽類藥物的納米復合物滴眼液，含有肽類藥物和蒸餾水，其特征在于它以β-胡蘿卜素包封磷酸鈣納米粒子作為載體傳遞肽類藥物，每100ml滴眼液中含有下列成分磷酸鈣納米粒子0.01～2g，β-胡蘿卜素 0.1～50mg，肽類藥物 0.1～5g，滲透壓調(diào)節(jié)劑 0～1.0g，防腐劑0～0.1g，蒸餾水適量；PH值調(diào)節(jié)劑0～適量復合物滴眼液的PH值為6.5-7.5。
在本發(fā)明中，所述的肽類藥物為萬古霉素，或替考拉寧，或肽古霉素，或達托霉素，或雷莫拉寧，或硫酸多粘菌素B肽類抗生素，或干擾素，或更昔洛韋，或三氮唑核苷，或三氟尿苷，或環(huán)孢霉素，或表皮生長因子；所述的防腐劑為有機汞類，或季銨鹽類，或醇類，或酯類，或羥苯酯類，或酸類防腐劑；所述的滲透壓調(diào)節(jié)劑為氯化鈉、或硼酸、或葡萄糖；所述的PH值調(diào)節(jié)劑為磷酸緩沖液或硼酸緩沖液或鹽酸或氫氧化鈉。
在本發(fā)明中，所述的萬古霉素為鹽酸萬古霉素或去甲萬古霉素；所述的有機汞類為硫柳汞，或硝酸汞；所述的季銨鹽類為苯扎氯銨，或苯扎溴銨陽離子表面活性劑；所述的醇類為苯甲醇，或三氯叔丁醇；所述的酸類為山梨酸。
實現(xiàn)上述復合物滴眼劑的制備方法，其特征在于a)制備磷酸鈣納米粒子將0.01～1.0摩爾的氯化鈣溶液、0.01～1.0摩爾的磷酸溶液按1∶1混合后，在室溫下攪拌48小時，在環(huán)境溫度4℃，8500rpm離心15分鐘，去除含有游離鈣和磷上清液，用去離子水懸浮粒子，再超聲處45分鐘，在5mg/ml的濃度形成磷酸鈣納米粒子，其大小尺寸在10nm～850nm；b)在磷酸鈣納米粒子外再用β-胡蘿卜素包封室溫下取10～2000mg磷酸鈣納米粒子、0.1～50mgβ-胡蘿卜素，溶于100ml蒸餾水中，混勻，PH值6.8～7.0，置于4℃搖床過夜，形成包封β-胡蘿卜素物質(zhì)的納米粒子；c)制成復合物滴眼液肽類藥物與包封有β-胡蘿卜素的磷酸鈣納米粒子的質(zhì)量比為1∶2，將250mg肽類藥物加入已經(jīng)懸浮有500mg包封有β-胡蘿卜素的磷酸鈣納米粒子的蒸餾水中，4℃下繼續(xù)在搖床上搖動過夜，形成包含有肽類藥物的納米復合物滴眼液，PH值為6.5～7.5。
上述制備方法a步驟中獲得的磷酸鈣納米粒子，其大小尺寸集中在10nm～850nm，主要集中在25～75nm，PH值為6.2～7.5。
上述制備方法c步驟中的肽類藥物為萬古霉素，或替考拉寧，或肽古霉素，或達托霉素，或雷莫拉寧，或硫酸多粘菌素B多肽類抗生素，或干擾素，或更昔洛韋，或三氮唑核苷，或三氟尿苷，或環(huán)孢霉素，或表皮生長因子；其中萬古霉素為鹽酸萬古霉素或去甲萬古霉素。
上述制備方法中，包含有肽類藥物的β-胡蘿卜素磷酸鈣納米粒子的復合物顆粒的大小范圍125～1200nm，其中50％的顆粒為325-850nm，濃度范圍1～30mg/ml，其zeta potential(mv)-5～-12，粘滯度范圍(mPas)21～45。
上述制備方法中在形成包含有肽類藥物的納米復合物滴眼液后，選擇使用磷酸緩沖液或硼酸緩沖液或鹽酸或氫氧化鈉將PH值調(diào)整到6.5～7.5。
上述制備方法中在制備過程中按照常規(guī)方法添加滲透壓調(diào)節(jié)劑和防腐劑，所述的滲透壓調(diào)節(jié)劑為氯化鈉、或硼酸、或葡萄糖。，所述的防腐劑可以選擇有機汞類、季銨鹽類、醇類、酯類、羥苯酯類、酸類防腐劑。所述的有機汞類防腐劑為硫柳汞，或硝酸汞；所述的季銨鹽類防腐劑為苯扎氯銨，或苯扎溴銨陽離子表面活性劑；所述的醇類防腐劑為苯甲醇，或三氯叔丁醇；所述的酸類防腐劑為山梨酸。
本發(fā)明的優(yōu)點在于由于納米的小體積，具有一定的粘滯性，使納米粒子可以有效的增加局部藥物濃度和延長藥物與角膜的接觸時間，利于納米的傳遞作用，使藥物能通過角膜，增加了房水中藥物濃度；由于納米的緩釋作用，延長了藥物在眼內(nèi)維持治療濃度的時間；納米本身可以生物降解，其副產(chǎn)物為磷和碳，為人體骨頭和牙齒等組織的組成成分，對人體無副作用，能隨房水循環(huán)途徑排出；改變了傳統(tǒng)的肽類藥物的用藥途徑，直接滴入眼部，不僅方便，而且減小了風險和由其產(chǎn)生的副作用，提高了肽類藥物的生物利用度；本發(fā)明制備工藝簡單，成本低；且PH值6.5～7.5為生理范圍。
具體實施例方式
實施例1，包封β-胡蘿卜素活性物質(zhì)的納米粒子的制備制備前的準備鹽溶液用去離子水制備0.01～1.0摩爾的氯化鈣。
磷酸溶液用去離子水制備0.01～1.0摩爾的磷酸溶液。
中藥的活性物質(zhì)溶液按每100ml生理鹽水+450μg的比例制備中藥β-胡蘿卜素的活性物質(zhì)溶液。
PH值為6.8-7.0，0.01摩爾的磷酸緩沖液可以外購。
主要設備回轉(zhuǎn)式振蕩恒溫培養(yǎng)箱(760/760R美國)。
制備過程a)將0.01～1.0摩爾的氯化鈣溶液、0.01～1.0摩爾的磷酸溶液按1∶1混合后，在室溫下攪拌48小時，在環(huán)境溫度4℃，8500rpm離心15分鐘，去除含有游離鈣和磷上清液，用去離子水懸浮粒子，再超聲處理45分鐘，在5mg/ml的濃度下形成磷酸鈣納米粒子，其大小尺寸為10nm～850nm，主要集中在25～75nm，PH值為6.2～7.5。
b)室溫下取500mg磷酸鈣納米粒子、450ugβ-胡蘿卜素，溶于100ml蒸餾水中，混勻，置于4℃搖床過夜，形成包封中藥β-胡蘿卜素活性物質(zhì)的磷酸鈣納米粒子。
實施例2 復合物滴眼劑的制備萬古霉素250mg，包封有β-胡蘿卜素的磷酸鈣納米粒子500mg，蒸餾水100ml。
主要設備
回轉(zhuǎn)式振蕩恒溫培養(yǎng)箱(760/760R美國)。
低溫離心機(BECKMAN美國)。
制備過程萬古霉素與包封有β-胡蘿卜素的磷酸鈣納米粒子的質(zhì)量比為1∶2，取萬古霉素250mg，將實施例1中b步驟獲得的包封有β-胡蘿卜素的磷酸鈣納米粒子500mg置于蒸餾水中懸浮，將萬古霉素加入已經(jīng)懸浮有包封有β-胡蘿卜素的磷酸鈣納米粒子的蒸餾水中，4℃下繼續(xù)在搖床上搖動過夜，獲得包封中藥β-胡蘿卜素的活性物質(zhì)和萬古霉素的磷酸鈣納米粒子，制成復合物滴眼劑，PH值為6.5～7.5。
本實施例中，萬古霉素采用的是鹽酸萬古霉素，具體實施時，也可以采用去甲萬古霉素，無論是鹽酸萬古霉素還是去甲萬古霉素，其用量相同。
按照本方法制備的復合物滴眼劑，其磷酸鈣納米粒子1～20mg/ml，多肽類抗生素濃度為1～50mg/ml，β-胡蘿卜素濃度為1～500ug/ml，PH值為6.5-7.5。
實施例3 體外抑菌實驗比較實驗材料1.藥物按照實施例1、2的方法生產(chǎn)的去甲萬古霉素復合物溶液；去甲萬古霉素。
2.細菌金黃色葡萄球菌(菌株號26112)18-24小時培養(yǎng)物；細菌均用生理鹽水調(diào)整至106/ml。
3.肉湯瓊脂培養(yǎng)基實驗過程將去甲萬古霉素復合物溶液和去甲萬古霉素分別用生理鹽水配成1.2mg/ml和1mg/ml，并倍比稀釋成0.6mg/ml和0.5mg/ml；0.3mg/ml和0.25mg/ml；0.15mg/ml和0.125mg/ml；0.075mg/ml和0.063mg/ml；0.0375mg/ml和0.032mg/ml共6個濃度。將上述兩種不同濃度的藥物分別加入平皿中，并按1∶10加入肉湯瓊脂培養(yǎng)基，趁熱搖勻。每一濃度做兩個平皿，同時用生理鹽水代替藥物做為對照平皿。待平皿冷卻后點種細菌，每點2ul，37℃孵育24小時后觀察結(jié)果。
實驗結(jié)果由表1可見納米與藥物的結(jié)合不影響原來藥物的生物活性，納米去甲萬古霉素復合物與去甲萬古霉素能體外特異性抑制金黃色葡萄球菌。
表1、去甲萬古霉素制備的復合物溶液與去甲萬古霉素溶液體外抑菌實驗比較

注+表示有細菌生長-表示沒有細菌生長實施例4 藥效實驗動物模型的建立新西蘭白兔12只，雌性，隨機分為新藥組(使用包含有萬古霉素的納米復合物滴眼液)，老藥組(使用鹽酸萬古霉素溶液)和對照組(使用蒸餾水)，每組4只動物。分別在結(jié)膜囊內(nèi)點入受試物為包含有萬古霉素的納米復合物滴眼液(按照實施例2方法制備，下同)、鹽酸萬古霉素水溶液(自配，鹽酸萬古霉素濃度10mg/ml)、蒸餾水(外購，下同)。
實驗過程；實驗前，用裂隙燈以及間接檢眼鏡檢查，證實每只眼前后段均正常。然后分別給每組動物結(jié)膜囊內(nèi)點相應的受試物，用法為滴眼，每日三次，每次100ul，連續(xù)點藥3天。第4天兔耳緣靜脈緩慢注射3％戊巴比妥鈉注射液，動物全麻后，在眼球顳上方角膜緣后2～3mm處注入金黃色葡萄球菌混懸液0.1ml，注射前于角膜緣內(nèi)1mm處前房穿刺抽取房水0.1ml以保持眼壓平衡。注射結(jié)束后，每日仍繼續(xù)給予受試物，用法同前。
實驗指標測定(1)在玻璃體注入細菌后第12h、36h、50h分別對各組動物采用盲法進行裂隙燈顯微鏡和間接檢眼鏡檢查，并以眼內(nèi)炎臨床表現(xiàn)進行分級，分級標準參Peyman，并拍照記錄。
動物模型感染評分玻璃體注射細菌混懸液后，于16小時、36小時、50小時進行裂隙燈和間接眼底鏡觀察，根據(jù)《眼內(nèi)炎臨床分級標準表》評分記錄，并拍照。感染后16小時，新藥組有兩只動物眼睛無臨床癥狀，兩只輕度結(jié)膜充血，老藥組與對照組均出現(xiàn)不同程度的結(jié)膜充血和角膜渾濁。感染后36小時，新藥組臨床癥狀明顯輕于老藥組和對照組，感染后50小時老藥組有4只眼球破裂，對照組有4只眼球破裂流膿。運用配對t檢驗方法統(tǒng)計感染后16小時新藥組與對照組有顯著差異(p＝0.001)，老藥組與對照組無顯著差異(p＝0.1498)，36小時新藥組與對照組有顯著差異(p＝0.0018)，老藥組與對照組比較無顯著差異(p＝0.0147)，50小時新藥組與對照組比較有差異(p＝0.0056)，老藥組與對照組比較無差異(p＝0.082)。
(2)在玻璃體注入細菌后第16h分別抽取各組動物眼的玻璃體標本0.1ml，迅速接種于培養(yǎng)皿上，37℃培養(yǎng)48小時，如果沒有菌落生長記錄為陰性。
細菌培養(yǎng)在玻璃體注射細菌后16小時點抽取三組動物玻璃體0.1ml做細菌培養(yǎng)，結(jié)果見表2。運用確切概率法(Fisher′s exact)，比較新藥組與其他組有無差異。對照組(n＝8)在感染后16小時的培養(yǎng)率為100％；新藥組(n＝8)感染后16小時的培養(yǎng)率為50％；老藥組(n＝8)在感染后16小時的培養(yǎng)率為100％?？梢?，16小時新藥組與老藥組、對照組比較有顯著差異(p＝0.020)；
表2

在上述實施例中，所述的萬古霉素可以選擇鹽酸萬古霉素或去甲萬古霉素。
本發(fā)明涉及的上述實施例僅以萬古霉素為例，不是對本發(fā)明的唯一限制。通過上述實施例可以看出，以β-胡蘿卜素磷酸鈣納米粒子作為載體傳遞肽類藥物(萬古霉素)，并沒有對肽類藥物(萬古霉素)產(chǎn)生不利的影響，對提高肽類藥物(萬古霉素)的藥效卻發(fā)揮了積極的作用。在具體實施時，可以在制備方法中采用其他肽類藥物，如替考拉寧，或肽古霉素，或達托霉素，或雷莫拉寧，或硫酸多粘菌素B肽類抗生素，或干擾素，或更昔洛韋，或三氮唑核苷，或三氟尿苷，或環(huán)孢霉素，或表皮生長因子，在滿足每100ml滴眼液中含有下列成分磷酸鈣納米粒子0.01～2g，β-胡蘿卜素0.1～50mg，肽類藥物0.1～5g，同樣能夠?qū)崿F(xiàn)本發(fā)明的目的，獲得滿意的效果。
為了確保復合物滴眼液的PH值為6.5～7.5，在形成包含有肽類藥物的納米復合物滴眼液后，一旦PH值偏離，可以選擇使用磷酸緩沖液，或硼酸緩沖液，或鹽酸，或氫氧化鈉將PH值調(diào)整到上述生理范圍。
為了使復合物滴眼液的滲透壓與人淚液的生理滲透壓相近(280-310mOsm/L)，減少眼部用藥的不適感，在形成包含有肽類藥物的納米復合物滴眼液后，可以按照常規(guī)方法添加滲透壓調(diào)節(jié)劑，將滲透壓調(diào)整到與人淚液的生理滲透壓相近的生理范圍內(nèi)。滲透壓調(diào)節(jié)劑的添加量應該控制在每100ml滴眼液中0～1.0g的范圍內(nèi)，所述的滲透壓調(diào)節(jié)劑可以選擇使用氯化鈉、或硼酸、或葡萄糖。
為了防止復合物滴眼液中微生物生長與繁殖，可以采用日劑量包裝形式，每支裝量僅0.4ml～0.8ml，每日一支，用完即棄，不需要添加防腐劑，避免防腐劑在使用中帶來的副作用。對于需要單次包裝，多次使用的，為了延長復合物滴眼液開封后的有效使用時間，可以在復合物滴眼液中添加防腐劑，所述的防腐劑可以選擇有機汞類防腐劑如硫柳汞、硝酸汞；季銨鹽類防腐劑如苯扎氯銨、苯扎溴銨等陽離子表面活性劑；醇類如苯甲醇、三氯叔丁醇；酸類如山梨酸，還可以選擇酯類或羥苯酯類防腐劑等。防腐劑的添加量為每100ml滴眼液中可以添加0～0.1g，例如選擇尼泊金甲酯每100ml中可以添加0.023g，選擇尼泊金丙酯每100ml中可以添加0.011g，選擇硝酸苯汞每100ml中可以添加0.002g，選擇氯化苯甲羥銨溶液每100ml中可以添加0.02g，選擇醋酸苯汞每100ml中可以添加0.002g。
權(quán)利要求
1.一種包含有肽類藥物的納米復合物滴眼液，其特征在于它以β-胡蘿卜素包封磷酸鈣納米粒子作為載體傳遞肽類藥物，每100ml滴眼液中含有下列成分磷酸鈣納米粒子0.01～2g，β-胡蘿卜素 0.1～50mg，肽類藥物 0.1～5g，滲透壓調(diào)節(jié)劑 0～1.0g，防腐劑0～0.1g，蒸餾水適量，PH值調(diào)節(jié)劑0～適量；復合物滴眼液的PH值為6.5～7.5。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的包含有肽類藥物的納米復合物滴眼液，其特征在于所述的肽類藥物為萬古霉素，或替考拉寧，或肽古霉素，或達托霉素，或雷莫拉寧，或硫酸多粘菌素B肽類抗生素，或干擾素，或更昔洛韋，或三氮唑核苷，或環(huán)孢霉素，或表皮生長因子；所述的防腐劑為有機汞類，或季銨鹽類，或醇類，或酯類，或羥苯酯類，或酸類防腐劑；所述的滲透壓調(diào)節(jié)劑為氯化鈉、或硼酸、或葡萄糖；所述的PH值調(diào)節(jié)劑為磷酸緩沖液，或硼酸緩沖液，或鹽酸或氫氧化鈉。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的包含有肽類藥物的納米復合物滴眼液，其特征在于所述的萬古霉素為鹽酸萬古霉素或去甲萬古霉素；所述的有機汞類為硫柳汞，或硝酸汞；所述的季銨鹽類為苯扎氯銨，或苯扎溴銨陽離子表面活性劑；所述的醇類為苯甲醇，或三氯叔丁醇；所述的酸類為山梨酸。
4.如權(quán)利要求1或2所述的復合物滴眼液的制備方法，其特征在于a)制備磷酸鈣納米粒子將0.01～1.0摩爾的氯化鈣溶液、0.01～1.0摩爾的磷酸溶液按1∶1混合后，在室溫下攪拌48小時，在環(huán)境溫度4℃，8500rpm離心15分鐘，去除含有游離鈣和磷上清液，用去離子水懸浮粒子，再超聲處理45分鐘，在5mg/ml的濃度形成磷酸鈣納米粒子，其大小尺寸在10nm～850nm；b)在磷酸鈣納米粒子外再用β-胡蘿卜素包封室溫下取10～2000mg磷酸鈣納米粒子、0.1～50mg β-胡蘿卜素，溶于100ml蒸餾水中，混勻，置于4℃搖床過夜，形成包封β-胡蘿卜素物質(zhì)的納米粒子，PH值6.8-7.0；c)制成復合物滴眼液肽類藥物與包封有β-胡蘿卜素的磷酸鈣納米粒子的質(zhì)量比為1∶2，將250mg肽類藥物加入已經(jīng)懸浮有500mg包封有β-胡蘿卜素的磷酸鈣納米粒子的蒸餾水中，4℃下繼續(xù)在搖床上搖動過夜，形成包含有肽類藥物的納米復合物滴眼液，PH值為6.5～7.5。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的復合物滴眼液的制備方法，其特征在于a步驟中獲得的磷酸鈣納米粒子，其大小尺寸在10nm～850nm，主要集中在25～75nm，PH值為6.2～7.5。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的復合物滴眼液的制備方法，其特征在于c步驟中的肽類藥物為萬古霉素，或替考拉寧，或肽古霉素，或達托霉素，或雷莫拉寧，或硫酸多粘菌素B多肽類抗生素，或干擾素，或更昔洛韋，或三氮唑核苷，或環(huán)孢霉素，或表皮生長因子；其中萬古霉素為鹽酸萬古霉素或去甲萬古霉素。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的復合物滴眼液的制備方法，其特征在于包含有肽類藥物的β-胡蘿卜素磷酸鈣納米粒子的復合物顆粒的大小尺寸范圍125～1200nm，主要集中在325-850nm，濃度范圍1～30mg/ml，其zetapotential(mv)-5～-12，粘滯度范圍(mPas)21～45。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的復合物滴眼劑的制備方法，其特征在于在形成包含有肽類藥物的納米復合物滴眼液后，選擇使用磷酸緩沖液或硼酸緩沖液或鹽酸或氫氧化鈉將PH值調(diào)整到6.5～7.5。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的復合物滴眼劑的制備方法，其特征在于在制備過程中按照常規(guī)方法添加滲透壓調(diào)節(jié)劑和防腐劑，其中，所述的滲透壓調(diào)節(jié)劑為氯化鈉、或硼酸、或葡萄糖，所述的防腐劑擇一選擇有機汞類、季銨鹽類、醇類、酯類、羥苯酯類、酸類防腐劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的復合物滴眼劑的制備方法，其特征在于所述的有機汞類防腐劑為硫柳汞，或硝酸汞；所述的季銨鹽類防腐劑為苯扎氯銨，或苯扎溴銨陽離子表面活性劑；所述的醇類防腐劑為苯甲醇，或三氯叔丁醇；所述的酸類防腐劑為山梨酸。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種包含有肽類藥物的納米復合物滴眼液及其制備方法。它以β－胡蘿卜素包封磷酸鈣納米粒子作為載體傳遞肽類藥物，滴眼液中含有磷酸鈣納米粒子、β－胡蘿卜素、肽類藥物、蒸餾水，適量的滲透壓調(diào)節(jié)劑、防腐劑；pH值為6.5～7.5。其制備方法包括制備磷酸鈣納米粒子；在磷酸鈣納米粒子外再用β－胡蘿卜素包封；肽類藥物與包封有β－胡蘿卜素的磷酸鈣納米粒子制成復合物滴眼液。本發(fā)明的優(yōu)點在于改變了肽類藥物的用藥途徑，直接滴入眼部，不僅方便，而且減小了風險和由其產(chǎn)生的副作用，納米的粘滯性延長了藥物與角膜的接觸時間，使藥物能通過角膜，房水中藥物濃度高；藥物在眼內(nèi)維持治療濃度的時間長；生物利用度高，且無副作用。
文檔編號A61K9/08GK1814275SQ20061003860
公開日2006年8月9日 申請日期2006年3月6日 優(yōu)先權(quán)日2006年3月6日
發(fā)明者王淼, 河清, 馮振卿 申請人:南京凱瑞爾納米生物技術(shù)有限公司