專利名稱：一種含α－淀粉酶抑制劑的固體混合物及其制備工藝和在制藥中的應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含α-淀粉酶抑制劑的固體混合物，本發(fā)明還涉及該混合物的制備工藝和在制藥中的應用。
背景技術(shù)：
α-淀粉酶抑制劑是從小麥粉中提取的一種純天然生物活性物質(zhì)，屬于糖水解酶抑制劑的一種，存在于植物種子的胚乳中，國外稱之為“starch blocker”。α-淀粉酶抑制劑通過對淀粉酶的抑制作用而發(fā)揮減肥效應，并經(jīng)胃腸道排出體外，因此不必進入血液循環(huán)系統(tǒng)，不作用于大腦中樞，減肥的同時不抑制食欲，使用劑量很高時也無副作用，與羅氏賽尼可的減肥機制極為相似，符合世界衛(wèi)生組織的減肥原則。由于α-淀粉酶抑制劑能抑制人體α-淀粉酶，使之不能分解淀粉類物質(zhì)，從而阻遏人體對糖類物質(zhì)的吸收，降低血糖，起到預防糖尿病作用；由于沒有了糖類物質(zhì)向脂肪的轉(zhuǎn)化，相當于沒有了外來燃料的攝取，這樣就會燃燒體內(nèi)貯存的多余脂肪，從而達到減肥作用。因此α-淀粉酶抑制劑具有防治肥胖和糖尿病的雙重功效。這在當今社會有很大的科研價值和應用前景。
將α-淀粉酶抑制劑粗提液進行噴霧干燥，得到α-淀粉酶抑制劑產(chǎn)品粉末。但是粉末中α-淀粉酶抑制劑抑制比活下降了25％甚至更多，同時在保存過程中會出現(xiàn)吸潮而且粘性大，再溶解時出現(xiàn)粉末凝集。
糖醇包括山梨醇、木糖醇、甘露醇、麥芽糖醇、乳糖醇和異麥芽酮糖醇等。大部分糖醇的最突出的特性是具有與蔗糖相類似的化學和物理性質(zhì)，但熱值較蔗糖低，多數(shù)情況下不致齲齒，因而在食品和醫(yī)藥上得到廣泛的應用。甘露醇(D-mannitol、D-mannital、mannite、mannasugar)學名己六醇[C6H8(OH)6]，又稱D-甘露糖醇、木蜜醇，分子式C6H14O6。D-甘露醇是一種白色針狀或斜方柱狀晶體或結(jié)晶性粉末，熔點165～168℃，沸點290～295℃(0.466～0.467kPa)，相對密度1.489(20/40)，α25D-0.40(10％水溶液)，熔解熱-120.92J·g/l(25℃)，能量為8.368J·g/l，無臭、味甜，其甜度相當于蔗糖50％，溶于水(22g·100mL/l)、吡啶和苯胺，微溶于甲醇、乙醇，不溶于醚類，無吸濕性。甘露醇與山梨醇[D(L)-sorbitol]、艾杜糖醇[D(L)-iditol]、塔里糖醇[D(L)-talitd]、衛(wèi)矛醇[dulcitol]、蒜糖醇[allitd]互為同分異構(gòu)體具有多元醇的化學性質(zhì)，可以被酯化、醚化、氧化、脫水，因此在醫(yī)藥、食品、紡織、化工、火工等方面大量應用。甘露醇性質(zhì)相對穩(wěn)定，空氣中不氧化，對稀酸、稀堿、熱穩(wěn)定，在人體內(nèi)代謝與體內(nèi)胰島素無關(guān)，不是口腔微生物作用的適合底物而不致牙齒齲變，故大量應用于食品行業(yè)，特別是高檔食品作無糖甜味劑，如用于生產(chǎn)口香糖、膠姆糖。此類產(chǎn)品適用于特殊病人(肥胖癥和糖尿病患者)食用。在干燥狀態(tài)下甘露醇能與大多數(shù)制劑配伍，在相對濕度極高的條件下，不具有吸濕性，摻入引濕性強的賦形劑中可降低引濕性，并具有抗粘性、可壓性較強，造料性好等特點。山梨醇又名D-山梨糖醇，是甘露醇的同分異構(gòu)體，常溫下有液體和固體2種狀態(tài)。液態(tài)山梨醇即山梨糖醇液，產(chǎn)品質(zhì)量分數(shù)為50％～70％；固態(tài)山梨醇統(tǒng)稱固體山梨醇或結(jié)晶山梨醇，有α、β、γ、δ4種晶體結(jié)構(gòu)(晶型)。山梨醇是一種重要的化工原料、食品甜味劑和利尿藥，可廣泛應用于醫(yī)藥、食品、化工、輕工、煙草業(yè)，且應用領(lǐng)域還在不斷拓寬。
目前尚未有將糖醇加入到α-淀粉酶抑制劑粗提液中實現(xiàn)α-淀粉酶抑制劑干燥后能保持活性的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種易保存、能保持α-淀粉酶抑制劑生物活性的固體混合物。
本發(fā)明的另一目的是提供該固體混合物的制備方法。
本發(fā)明還有一個目的是提供該固體混合物在制藥中的應用。
本發(fā)明的目的是通過下列措施實現(xiàn)的一種含α-淀粉酶抑制劑的固體混合物，該混合物是通過下列方法制備得到的常規(guī)方法制備α-淀粉酶抑制劑粗提液；在α-淀粉酶抑制劑粗提液中加入與α-淀粉酶抑制劑粗提液重量比為0.1-99.9％的糖醇，攪勻后干燥即得該混合物。
所述的混合物，其中干燥方法為在流速為20-120ml/min，空氣壓力為0.1-0.4MPa，溫度為70-180℃的條件下進行噴霧干燥。
所述的混合物，其中α-淀粉酶抑制劑是從小麥粉中提取得到。
所述的混合物，其中糖醇為山梨醇、木糖醇、甘露醇、麥芽糖醇、乳糖醇或異麥芽酮糖醇。
所述的混合物的制備方法，其制備步驟為常規(guī)方法制備α-淀粉酶抑制劑粗提液；在α-淀粉酶抑制劑粗提液中加入與α-淀粉酶抑制劑粗提液重量比為0.1-99.9％的糖醇，攪勻后干燥即可。
所述的制備方法，其中干燥方法為在流速為20-120ml/min，空氣壓力為0.1-0.4MPa，溫度為70-180℃的條件下進行噴霧干燥。
所述的制備方法，其中α-淀粉酶抑制劑粗提液是從小麥粉中提取得到。
所述的制備方法，其中糖醇為山梨醇、木糖醇、甘露醇、麥芽糖醇、乳糖醇或異麥芽酮糖醇；優(yōu)選甘露醇、木糖醇、山梨醇。
所述的混合物在制備預防和治療肥胖癥、脂肪過多癥、動脈硬化癥、高血脂或糖尿病藥物中的應用。
本發(fā)明的有益效果本發(fā)明根據(jù)α-淀粉酶抑制劑粗提液在干燥過程活性下降，得到的產(chǎn)品粘性大易吸潮等缺點，通過添加糖醇作為賦形劑進行干燥，設計出一種保持α-淀粉酶抑制劑生物活性的干燥方法。其中糖醇加入比例是0.1-99.9％(與α-淀粉酶抑制劑粗提液的重量比)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，加入糖醇進行噴霧干燥，得到的粉末蛋白(即α-淀粉酶抑制劑，下同)活性高，流動性好，粘性小而且在保存過程中不易吸潮，尤其當糖醇加入量在1-50％時效果更佳。這一方法為α-淀粉酶抑制劑藥用開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。
本發(fā)明制得混合物中α-淀粉酶抑制劑比不添加糖醇直接噴干得到的α-淀粉酶抑制劑具有以下優(yōu)點1.保持產(chǎn)品的生物活性和穩(wěn)定性。在室溫條件下，糖醇添加比例分別按上述工藝進行添加，然后進行干燥，檢測干粉中蛋白含量和蛋白抑制比活。結(jié)果見圖1。結(jié)果顯示干燥后α-淀粉酶抑制劑的抑制比活隨著加入糖醇量增多而發(fā)生變化，先升后降得到一個最大值，抑制比活比沒有加入賦形劑直接進行干燥的相應提高一倍多。另外，本發(fā)明產(chǎn)品穩(wěn)定性較好(詳見實施例部分的對比數(shù)據(jù))。
2.在保存過程中不易吸潮。由于甘露醇、木糖醇等糖醇無吸濕性，所以用于對水分敏感的α-淀粉酶抑制劑粉末特別有價值，其顆粒易干燥。
3.工藝操作簡單，易于生產(chǎn)放大。


圖1是本發(fā)明按不同比例加入甘露醇后得到的α-淀粉酶抑制劑產(chǎn)品活性比較圖。
具體實施例方式
下面結(jié)合甘露醇、木糖醇、山梨醇等實施例更詳細地描述本發(fā)明，但是本發(fā)明并不局限于這三種物質(zhì)。
一般性說明1、抑制比活的計算式為AU=[(OD1-OD2)-0.0085808]13.419×n×c×1000]]>其中OD1為加α-淀粉酶抑制劑后的吸光值，OD2為只加α-淀粉酶時的吸光值，n為加入α-淀粉酶抑制劑的體積(μl)數(shù)，1000是從μl換算到毫升的系數(shù)。
C為α-淀粉酶抑制劑溶液的蛋白濃度單位mg/ml2、α-淀粉酶抑制劑抑制活性的測定方法碘顯色法利用淀粉溶液在I-KI作用下顯藍色，在660nm處的吸光值于一定淀粉濃度范圍內(nèi)和淀粉的量呈線性關(guān)系的特點，根據(jù)α-淀粉酶抑制劑加入前后α-淀粉酶分解淀粉量的差值即可計算出抑制劑的活性。
取一定量的α-淀粉酶和α-淀粉酶抑制劑于0.5ml磷酸緩沖液中，在37℃條件下預反應30min后，加入0.5ml的0.04％的淀粉溶液再反應15min，用0.3ml的2mol/L鹽酸中止反應，3.5ml蒸餾水稀釋反應液，加0.2ml0.01mol/L的碘液顯色，在600nm處測定吸光值。
抑制比活的定義一個單位的抑制劑比活定義為在上述條件下每毫升α-淀粉酶抑制劑溶液在15分鐘內(nèi)抑制α-淀粉酶消耗淀粉的量(mg)。
實施例1α-淀粉酶抑制劑與甘露醇噴霧干燥混合物的制備1.α-淀粉酶抑制劑的粗提。
●稱取100kg面粉，加入400L、0.1mol/L的NaCl溶液，置于轉(zhuǎn)速為100rpm/min攪拌罐中攪拌提取3小時，浸提液用管式離心機離心得清液365L，測得蛋白濃度為2.39mg/ml，抑制比活為41.3U/mgpro。
●離心清液用截流分子量為6000的超濾膜濃縮到體積為270升，測得蛋白濃度為5.61mg/ml，抑制比活為56.9。超濾濃縮液用25％飽和度的硫酸銨鹽析并離心得固體，然后用0.1mol/ml磷酸緩沖液溶解再次離心得清液100L，測得蛋白濃度為1.56mg/ml，抑制比活為70.7U/mgpro。
2.α-淀粉酶抑制劑與甘露醇噴霧干燥混合物的制備取α-淀粉酶抑制劑粗提液10L，按α-淀粉酶抑制劑粗提液重量的20％加入藥用的甘露醇并攪拌均勻，于70-180℃下進行噴干，流速控制在20-120ml/min，壓縮空氣0.1-0.4MPa，從而得到α-淀粉酶抑制劑霧干燥混合物產(chǎn)品。
3.檢測結(jié)果如下不加甘露醇直接進行噴干得到的干粉蛋白含量為20％，抑制比活為43.6U/mgpro；按20％的重量比加入甘露醇后進行噴干的產(chǎn)品蛋白含量為2％，抑制比活為81.1U/mgpro。
4.α-淀粉酶抑制劑產(chǎn)品的穩(wěn)定性實驗將上述得到的α-淀粉酶抑制劑產(chǎn)品填充于氣密、透明的小瓶中，分別在25℃、40℃條件下保存。保存3個月后，基于下述判定標準評價穩(wěn)定性。評定標準如下性狀外觀產(chǎn)品仍然為白色粉末，無顏色變化，判定為“無變化”。
溶液澄明度溶解于10ml重蒸水的α-淀粉酶抑制劑溶液為無色、澄明、無凝聚，判定為“無變化”。
蛋白含量根據(jù)考馬斯亮蘭結(jié)合法進行檢測。抑制活性根據(jù)碘顯色法測定。
結(jié)果發(fā)現(xiàn)，關(guān)于性狀，本發(fā)明產(chǎn)品的外觀和溶液澄明度都沒有發(fā)生變化，而沒有加入甘露醇的產(chǎn)品出現(xiàn)凝集。蛋白含量及抑制活性測量結(jié)果見表1和表2。表1和表2說明α-淀粉酶抑制劑水提液在加入甘露醇進行噴干后得到的產(chǎn)品不僅抑制活性得到了保護而且穩(wěn)定較好。
表1沒有加入甘露醇的產(chǎn)品穩(wěn)定性比較

表2加入甘露醇的產(chǎn)品穩(wěn)定性比較

實施例2α-淀粉酶抑制劑與木糖醇噴霧干燥混合物的制備1.α-淀粉酶抑制劑的粗提液如實施例1。
2.α-淀粉酶抑制劑與木糖醇噴霧干燥混合物的制備取α-淀粉酶抑制劑粗提液10L，按α-淀粉酶抑制劑粗提液重量的5％加入木糖醇并攪拌均勻，于70-180℃下進行噴干，流速控制在20-120ml/min，壓縮空氣0.1-0.4MPa。從而得到α-淀粉酶抑制劑產(chǎn)品。
3.檢測結(jié)果如下不加木糖醇直接進行噴干得到的干粉蛋白含量為20％，抑制比活為43.6U/mgpro；按5％的重量比加入木糖醇后進行噴干的產(chǎn)品蛋白含量為17.8％，抑制比活為71.9U/mgpro。
實施例3α-淀粉酶抑制劑與山梨醇噴霧干燥混合物的制備1.α-淀粉酶抑制劑的粗提液如實施例1。
2.α-淀粉酶抑制劑與山梨醇噴霧干燥混合物的制備取α-淀粉酶抑制劑粗提液10L，按α-淀粉酶抑制劑粗提液重量的70％加入山梨醇并攪拌均勻，于70-180℃下進行噴干，流速控制在20-120ml/min，壓縮空氣0.1-0.4MPa。從而得到α-淀粉酶抑制劑產(chǎn)品。
3.檢測結(jié)果如下不加山梨醇直接進行噴干得到的干粉蛋白含量為20％，抑制比活為43.6U/mgpro；按70％的重量比加入山梨醇后進行噴干的產(chǎn)品蛋白含量為0.8％，抑制比活為82.9U/mgpro。
實施例4取按照實施例1獲得的α-淀粉酶抑制劑與木糖醇噴霧干燥混合物100g，加入片劑常規(guī)輔料，按照片劑常規(guī)制備方法制成預防和治療肥胖癥、脂肪過多癥、動脈硬化癥、高血脂或糖尿病的藥物。
實施例5
取按照實施例2獲得的α-淀粉酶抑制劑與甘露醇噴霧干燥混合物100g，加入顆粒劑常規(guī)輔料，按照顆粒劑常規(guī)制備方法制成預防和治療肥胖癥、脂肪過多癥、動脈硬化癥、高血脂或糖尿病的藥物。
實施例6取按照實施例2獲得的α-淀粉酶抑制劑與山梨醇噴霧干燥混合物100g，加入膠囊劑常規(guī)輔料，按照膠囊劑常規(guī)制備方法制成預防和治療肥胖癥、脂肪過多癥、動脈硬化癥、高血脂或糖尿病的藥物。
實施例7取按照實施例1獲得的α-淀粉酶抑制劑與木糖醇噴霧干燥混合物100g及二甲雙胍100g，加入片劑常規(guī)輔料，按照片劑常規(guī)制備方法制成預防和治療糖尿病的復方藥物。
權(quán)利要求
1.一種含α-淀粉酶抑制劑的固體混合物，其特征在于該混合物是通過下列方法制備得到的常規(guī)方法制備α-淀粉酶抑制劑粗提液；在α-淀粉酶抑制劑粗提液中加入與α-淀粉酶抑制劑粗提液重量比為0.1-99.9％的糖醇，攪勻后干燥即得該混合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的混合物，其特征在于干燥方法為在流速為20-120ml/min，空氣壓力為0.1-0.4MPa，溫度為70-180℃的條件下進行噴霧干燥。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的混合物，其特征是α-淀粉酶抑制劑是從小麥粉中提取得到。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的混合物，其特征是糖醇為山梨醇、木糖醇、甘露醇、麥芽糖醇、乳糖醇或異麥芽酮糖醇。
5.如權(quán)利要求1所述的混合物的制備方法，其特征是制備步驟為常規(guī)方法制備α-淀粉酶抑制劑粗提液；在α-淀粉酶抑制劑粗提液中加入與α-淀粉酶抑制劑粗提液重量比為0.1-99.9％的糖醇，攪勻后干燥即可。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于干燥方法為在流速為20-120ml/min，空氣壓力為0.1-0.4MPa，溫度為70-180℃的條件下進行噴霧干燥。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征是α-淀粉酶抑制劑粗提液是從小麥粉中提取得到。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征是糖醇為山梨醇、木糖醇、甘露醇、麥芽糖醇、乳糖醇或異麥芽酮糖醇。
9.如權(quán)利要求1所述的混合物在制備預防和治療肥胖癥、脂肪過多癥、動脈硬化癥、高血脂或糖尿病藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種含α－淀粉酶抑制劑的固體混合物及其制備工藝和在制藥中的應用。該固體混合物是通過下列方法制備得到的常規(guī)方法制備α－淀粉酶抑制劑粗提液；在α－淀粉酶抑制劑粗提液中加入與α－淀粉酶抑制劑粗提液重量比為0.1－99.9％的糖醇，攪勻后干燥即得該混合物。該混合物可用于制備預防和治療肥胖癥、脂肪過多癥、動脈硬化癥、高血脂或糖尿病的藥物。該混合物能保持α－淀粉酶抑制劑的生物活性，保存過程中不易吸潮，穩(wěn)定性高；該制備方法工藝操作簡單，易于生產(chǎn)放大。
文檔編號A61P3/00GK1772216SQ20051009495
公開日2006年5月17日 申請日期2005年10月21日 優(yōu)先權(quán)日2005年10月21日
發(fā)明者應漢杰, 呂浩, 徐國梅, 魏秀麗, 吳永宏, 趙谷林, 陳曉春, 歐陽平凱 申請人:南京工業(yè)大學