專利名稱：一種復(fù)方丹參凍干粉針及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥制劑及其制備方法。具體的說是一種含有丹參和三七的水溶性成分提取物以及冰片的羥丙基-β-環(huán)糊精包合物的凍干粉針及其制備方法。
背景技術(shù)：
復(fù)方丹參片為治療心血管疾病的中成藥，《中國藥典》2000年版一部收載，由丹參、三七、冰片三味藥物組成，其中丹參為君藥，三七為臣藥，冰片為佐使藥。丹參為唇形科植物丹參Salvia miltiorrhiza Bge的干燥根及根莖；三七為五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根；冰片為合成龍腦或龍腦香科喬木植物龍腦香Dryobalanops arornatica Gaertn.f.樹脂的加工品，或龍腦香的樹干經(jīng)蒸餾冷卻而得的結(jié)晶。丹參、三七有祛瘀生新，消腫止痛，活血通經(jīng)，清心除煩之功能；冰片則有開竅醒神，清熱祛痛之效。三藥合用作為治療心腦血管疾病的藥物，在臨床上具有廣泛的應(yīng)用。
丹參中主要有效成分有水溶性成分和脂溶性成分兩大類脂溶性成分為二萜醌類化合物，主要是丹參酮、丹參酮IIA、隱丹參酮等；水溶性成分為酚酸類化合物，是丹參心血管系統(tǒng)藥理活性的主要物質(zhì)基礎(chǔ)，主要有丹參酚酸、丹參素、原兒茶醛等。藥理研究表明丹參酚酸類成分具有抗血小板聚集作用，抗血栓形成作用，改善微循環(huán)作用，抗氧化損傷作用和多途徑發(fā)揮心肌保護(hù)作用。丹酚酸B有抗心肌缺血，抗血小板聚集，提高心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞、心肌細(xì)胞耐缺氧能力，減輕炎性因子對內(nèi)皮、心肌細(xì)胞的損害的作用。丹參素有縮小心肌梗塞范圍和減輕病變程度的作用，還具有保護(hù)超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化酶的作用。
三七中的主要有效成分為皂苷，具有水溶性。能明顯降低心肌氧消耗量，改善心肌缺氧，減小乳酸脫氫酶的活性，縮小心肌缺血面積，保護(hù)心肌缺血再灌流損傷，降低全血粘度、血漿粘度、血沉速度，抑制血小板聚集，降低血液凝固性。
冰片主含龍腦和異龍腦，不溶于水。具有活血化瘀和醒神開竅作用，能促進(jìn)藥物透過血腦屏障，增加藥物在腦組織中的分布，增強(qiáng)藥效；有利于冠脈痙攣的防治，減輕缺血所致心肌損傷。
但由于冰片主含脂溶性成分，在水中幾乎不溶，很難制成注射劑，因而限制了復(fù)方丹參方(丹參、三七、冰片)制成注射劑應(yīng)用于臨床。而丹參中含有丹參素、原兒茶醛等多種水溶性酚類化合物，在水溶液中性質(zhì)不穩(wěn)定，易被氧化從而導(dǎo)致成品色澤加深；有的還含有丹參酮等脂溶性成分，在水溶液中易發(fā)生水解、氧化、聚合等理化變化，使活性物質(zhì)含量下降，毒性增加，不宜做成水針。因此，目前，該方僅有片劑、膠囊、滴丸、顆粒劑、口服液、含片、軟膠囊等口服劑型，而無注射劑劑型。而注射劑是心血管疾病治療藥物的最佳劑型之一。

發(fā)明內(nèi)容
為突破目前丹參方制成注射劑存在的瓶頸，本發(fā)明提供一種質(zhì)量穩(wěn)定、有效成分含量高的復(fù)方丹參凍干粉針及其制備方法。
本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是一種復(fù)方丹參凍干粉針，它是由丹參和三七的水溶性成分提取物與冰片的羥丙基-β-環(huán)糊精包合物組成。其中丹參水溶性成分提取物(以含丹參藥材的量計(jì))20-80份；三七水溶性成分提取物(以含三七藥材的量計(jì))4-35份；冰片的羥丙基-β-環(huán)糊精包合物(以含冰片的量計(jì))1-8份，其中羥丙基-β-環(huán)糊精與冰片的比例為8-30∶1。
所述的丹參和三七的水溶性成分提取物，是采用水或任意比例的乙醇提取，經(jīng)大孔吸附樹脂分離純化制成，具體步驟包括(1).分別取丹參和三七藥材粉碎成粗粒；分別用水或任意比例的乙醇提取，提取方法包括反復(fù)煎煮、熱回流、滲漉、超聲、微波；提取液經(jīng)減壓(60～70℃)濃縮或不經(jīng)濃縮；提取液除盡乙醇后經(jīng)大孔吸附樹脂柱，水洗脫雜質(zhì)，用30％-70％的乙醇洗脫；收集洗脫液，除盡乙醇，分別得丹參及三七水溶性成分提取物；或(2).取丹參和三七藥材粉碎成粗粒；混合后用水或任意比例的乙醇提取，提取方法包括反復(fù)煎煮、熱回流、滲漉、超聲、微波；提取液經(jīng)減壓(60～70℃)濃縮或不經(jīng)濃縮；提取液除盡乙醇后經(jīng)大孔吸附樹脂柱，水洗脫雜質(zhì)，用30％-70％的乙醇洗脫；收集洗脫液，除盡乙醇，得丹參和三七水溶性成分混合提取物。
其中，大孔吸附樹脂可以是HPD-100、D101、AB-8或者LSA-30。
所述的羥丙基-β-環(huán)糊精包合冰片，是將冰片的乙醇溶液緩慢滴加到羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中制成。其中，羥丙基-β-環(huán)糊精與冰片的比例為1-100∶1，較好為5-50∶1，最佳為8-30∶1。
復(fù)方丹參凍干粉針的制備包括下列方法(1).取丹參、三七水溶性成分提取物，加入羥丙基-β-環(huán)糊精攪拌溶解，在30～70℃水浴中，將溶解于適量乙醇中的冰片緩慢滴加到劇烈攪拌的上述溶液中，滴加完畢后繼續(xù)劇烈攪拌30～300分鐘，靜置，得冰片的羥丙基-β-環(huán)糊精包合物藥液；或(2).采用注射用水溶解羥丙基-β-環(huán)糊精，照上述方法包合冰片后再與丹參、三七水溶性成分提取物混合。
(3).將上述兩種方法制得的溶液，經(jīng)超濾膜濾過，微濾膜濾過，分裝，冷凍干燥，得復(fù)方丹參凍干粉針。
丹參水溶性成分提取物以丹酚酸B為含量測定指標(biāo)，采用高效液相色譜法測定含量，色譜條件C18柱(200×4.6mm，5μm)，流動相甲醇-乙腈-水-冰醋酸(33∶9∶56∶2)，流速1.OmL/min，檢測波長280nm；三七水溶性成分提取物以人參皂苷Rg1和人參皂苷Rb1為含量測定指標(biāo)，采用高效液相色譜法測定含量，色譜條件為C18柱(200×4.6mm)，流動相乙腈-0.05％冰醋酸水液(23∶77)和乙腈-0.05％冰醋酸水液(31∶69)；檢測波長203nm；冰片采用氣相色譜法測定含量，色譜條件PEG-20M ChromosorbWHP2m×2mm不銹鋼柱，氫火焰檢測器，柱溫140℃，汽化室250℃，檢測室溫度240℃，載氣氮?dú)?0mL·min-1；燃?xì)鈿錃?0mL·min-1；助燃?xì)饪諝?00mL·min-1。
經(jīng)初步試驗(yàn)，丹參、三七水溶性成分凍干粉針穩(wěn)定性好，藥理作用強(qiáng)；冰片與羥丙基-β-環(huán)糊精按一定比例包合后，冰片的溶解度極大地提高，穩(wěn)定性也有較大提高。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于(1).有效成分明確，便于質(zhì)量控制丹酚酸B和三七總皂苷、冰片為主要有效成分，成分清楚，含量高，質(zhì)量控制準(zhǔn)確，提高了產(chǎn)品質(zhì)量。
(2).冰片經(jīng)羥丙基-β-環(huán)糊精包合后，溶解性極大地增強(qiáng)，含量均勻度提高、劑量準(zhǔn)確、質(zhì)量穩(wěn)定，解決了冰片難以做成注射劑的技術(shù)難點(diǎn)。將復(fù)方丹參方(丹參、三七、冰片)制成注射劑，填補(bǔ)了市場空白。
(3).復(fù)方丹參方(丹參、三七、冰片)制成注射劑，直接進(jìn)入血液系統(tǒng)，克服了口服制劑有效成分的胃內(nèi)分解，肝首過效應(yīng)等缺點(diǎn)。起效快，作用強(qiáng)，生物利用度高，適合用于治療心血管系統(tǒng)疾病。
(4).克服了口服冰片對胃的刺激。
(5).粉針劑穩(wěn)定性好，由于已除去水分，能有效地防止有效成分在水中的氧化、水解、失活、聚合、沉淀，可以更好地保證制劑的質(zhì)量和療效。
(6).粉針劑便于儲存、運(yùn)輸。
下面通過藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步說明本發(fā)明的有益效果本發(fā)明的復(fù)方丹參凍干粉針?biāo)幮W(xué)實(shí)驗(yàn)是采用結(jié)扎大鼠冠狀動脈前降支的方法，造成急性實(shí)驗(yàn)性心肌缺血的動物模型，并觀察復(fù)方丹參粉針對模型動物心電圖，心肌缺血范圍、血清生化指標(biāo)的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明
(1).可以明顯降低大鼠結(jié)扎冠脈前降支后造成的心電圖S-T段抬高，給藥組S-T段抬高顯著低于空白對照組。
(2).可以改善結(jié)扎大鼠冠狀動脈前降支所致實(shí)驗(yàn)性急性心肌缺血程度，縮小心肌梗死范圍，給藥組的梗死面積占左心室面積明顯小于空白對照組。
(3).有降低血清乳酸脫氫酶活性升高的作用，給藥組血清乳酸脫氫酶含量顯著低于空白對照組。
結(jié)論本發(fā)明的復(fù)方丹參粉針劑對急性心肌缺血具有較好的保護(hù)作用?？梢越档陀捎谛募∪毖鸬男碾妶DS-T段抬高，縮小由于梗塞造成的心肌缺血范圍，減低血清乳酸脫氫酶含量。
本發(fā)明的復(fù)方丹參凍干粉針穩(wěn)定性考察(一)加速實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果本品在包裝條件下，于40℃，相對濕度75％條件下放置3個(gè)月，結(jié)果見表1。
表1復(fù)方丹參粉針加速試驗(yàn)考察結(jié)果

(二)結(jié)果與討論樣品在40℃，相對濕度75％條件下放置3個(gè)月，含量變化小于1％，其它各項(xiàng)指標(biāo)均符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，按照規(guī)定可以初步確定本品的有效期為兩年。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的說明，實(shí)施例僅為解釋性的，決不意味著它以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例1取丹參、三七藥材適量，粉碎，過10目篩。分別稱取丹參粗粉68g，三七粗粉21g，混合后加入濃度60％乙醇浸泡24h，移至滲漉筒中，以0.6mL/min的速度滲漉，收集900mL滲漉液，減壓濃縮至無醇味(O.1MP，60℃)。濃縮液通過HPD-100型大孔吸附樹脂柱(400mL)純化，先用4BV蒸餾水洗脫，再用60％乙醇6BV洗脫，收集60％乙醇洗脫液，并減壓濃縮(0.1MP，60℃)至100mL(丹酚酸B18.7mg/mL，人參皂苷Rg13.96mg/mL和人參皂苷Rb14.32mg/mL)。再向濃縮液中加入12g羥丙基-β-環(huán)糊精，待羥丙基-β-環(huán)糊精溶解后，置于40℃水浴中，將1.2g冰片溶于少量乙醇中緩慢滴加于上述溶液中，同時(shí)劇烈電力攪拌60min。靜置24h后，超濾膜過濾(6000分子量)，每只西林瓶2mL灌裝，冷凍干燥，得復(fù)方丹參凍干粉針。
實(shí)施例2取丹參、三七藥材適量，粉碎，過10目篩，稱取丹參粗粉62g，加入濃度50％乙醇加熱回流1h，濾出藥液，藥渣同上再提取一次，合并藥液，減壓濃縮至無醇味(0.1MP，60℃)。濃縮液通過D101型大孔吸附樹脂柱(200mL)純化，先用4BV蒸餾水洗脫，再用30％乙醇6BV洗脫，收集30％乙醇洗脫液，并減壓濃縮(0.1MP，60℃)至50mL(丹酚酸B37.9mg/mL)。稱取三七粗粉56g，同上操作，收集70％乙醇洗脫液，并減壓濃縮(0.1MP，60℃)至1OOmL(人參皂苷Rg110.4mg/mL和人參皂苷Rb111.5mg/mL)。將0.8g冰片溶于少量乙醇中得冰片的乙醇溶液，將22g羥丙基-β-環(huán)糊精溶于120mL注射用水中，置于50℃水浴，電力劇烈攪拌下，緩慢滴加冰片的乙醇溶液，繼續(xù)攪拌180min，靜置12h，得冰片的羥丙基-β-環(huán)糊精包合物水溶液，將上述三種溶液混合均勻，微孔濾膜過濾，每只西林瓶3mL灌裝，冷凍干燥，得復(fù)方丹參凍干粉針。
實(shí)施例3取丹參、三七藥材適量，粉碎，過10目篩，分別稱取丹參粗粉136g，三七粗粉18g，混合后加入濃度30％乙醇加熱回流1h，濾出藥液，藥渣同上再提取一次，合并藥液，減壓濃縮至無醇味(0.1MP，60℃)，濃縮液通過LSA-30型大孔吸附樹脂(600mL)純化，先用4BV蒸餾水洗脫，再用50％乙醇6BV洗脫，收集50％乙醇洗脫液，并減壓濃縮(0.1MP，60℃)至200mL(丹酚酸B23.46mg/ml，人參皂苷Rg11.6mg/mL和人參皂苷Rb11.8mg/mL)。再向濃縮液中加入40g羥丙基-β-環(huán)糊精，溶解，置于70℃水浴中。將2.5g冰片溶于少量乙醇中緩慢滴加于上述溶液中，同時(shí)劇烈電力攪拌30min。靜置10h，超濾膜過濾(6000分子量)，微孔濾膜過濾，每只西林瓶3mL灌裝，冷凍干燥，得復(fù)方丹參凍干粉針。
權(quán)利要求
1.一種復(fù)方丹參凍干粉針，它是由丹參和三七的水溶性成分提取物與冰片的羥丙基-β-環(huán)糊精包合物組成。
2.如權(quán)利要求1所述的復(fù)方丹參凍干粉針，其特征在于它是由下述重量份數(shù)的原料組成丹參水溶性成分提取物(以含丹參藥材的量計(jì))20-80份三七水溶性成分提取物(以含三七藥材的量計(jì))4-35份冰片的羥丙基-β-環(huán)糊精包合物(以含冰片的量計(jì))1-8份，其中羥丙基-β-環(huán)糊精與冰片的比例為8-30∶1。
3.如權(quán)利要求1或2所述的復(fù)方丹參凍干粉針，其特征在于所述的丹參和三七的水溶性成分提取物，是以水或任意比例乙醇為溶劑將丹參、三七藥材單獨(dú)提取或?qū)⒌ⅰ⑷咚幉幕旌虾筇崛?，提取液濃縮后，經(jīng)大孔吸附樹脂分離純化，濃縮，即得。
4.如權(quán)利要求1或2所述的復(fù)方丹參凍干粉針，其特征在于所述的羥丙基-β-環(huán)糊精包合物，是將冰片的乙醇溶液緩慢滴加到羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中，劇烈攪拌制成。
5.權(quán)利要求1所述復(fù)方丹參凍干粉針的制備方法(1).取丹參、三七水溶性成分提取物加入羥丙基-β-環(huán)糊精攪拌溶解，在30～70℃水浴中，將溶解于適量乙醇中的冰片緩慢滴加到劇烈攪拌的上述溶液中，滴加完畢后繼續(xù)劇烈攪拌30-300分鐘，靜置，濾過，分裝，冷凍干燥；或(2).采用注射用水首先溶解羥丙基-β-環(huán)糊精，然后將冰片的乙醇溶液緩慢滴加到此溶液中，劇烈攪拌30-300分鐘，再與丹參、三七水溶性成分提取物混合，濾過，分裝，冷凍干燥。
全文摘要
本發(fā)明提供一種含有丹參、三七水溶性成分提取物和冰片的羥丙基－β－環(huán)糊精包合物的凍干粉針及其制備方法。其中，丹參水溶性成分提取物(以含丹參藥材的量計(jì))20－80份；三七水溶性成分提取物(以含三七藥材的量計(jì))4－35份；冰片的羥丙基－β－環(huán)糊精包合物(以含冰片的量計(jì))1－8份，羥丙基－β－環(huán)糊精與冰片的比例為8－30∶1。本發(fā)明的復(fù)方丹參凍干粉針具有溶解性好，性質(zhì)穩(wěn)定，質(zhì)量控制準(zhǔn)確的特點(diǎn)；解決了冰片的水溶性問題，首次將復(fù)方丹參方(丹參、三七、冰片)制成注射劑，可直接進(jìn)入血液系統(tǒng)，克服了口服制劑有效成分的胃內(nèi)分解，肝首過效應(yīng)等缺點(diǎn)，起效快，作用強(qiáng)，生物利用度高，適合用于治療心血管系統(tǒng)疾病。
文檔編號A61K31/045GK1795894SQ20041009405
公開日2006年7月5日 申請日期2004年12月28日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月28日
發(fā)明者張鐵軍, 王靖, 許浚, 胡靜 申請人:天津藥物研究院