專利名稱：一種治療慢性肝炎的藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療慢性肝炎的藥物組合物，特別是涉及以植物中草藥的有效部位為原料制備的治療慢性肝炎的藥物。
背景技術(shù)：
病毒性肝炎臨床表現(xiàn)可分為急性肝炎與慢性肝炎兩大類型。根據(jù)臨床表現(xiàn)差異，慢性肝炎又可分為以下數(shù)種臨床類型慢性遷延性肝炎病程超過半年以上，癥狀輕，無黃疸或黃疸輕微。肝臟輕度腫大，質(zhì)地中等偏軟，脾臟一般不可觸及，肝功能改變以單項(xiàng)ALT波動為特點(diǎn)。一般無肝外器官表現(xiàn)。
慢性活動性肝炎病程超過半年，癥狀較重，慢性肝病面容，肝臟大而質(zhì)地中等偏硬，多數(shù)脾大，肝功能損害明顯，ALT持續(xù)或反復(fù)升高，血漿白蛋白低下，或白/球蛋白比例降低等表現(xiàn)。
慢性肝炎病程冗長，臨床演變并發(fā)癥較多。其中重要有①肝炎后脂肪肝，以超聲濾檢查顯大特殊脂肪肝波形為主要表現(xiàn)。②肝硬化乙型肝炎、非甲非乙型肝炎可演變?yōu)閴乃篮笮?、膽汁性或門靜脈性肝硬化。
我國為乙型肝炎的高發(fā)區(qū)，有60％的人群受過乙肝病毒的感染，乙型肝炎表面抗原(HBsAg)攜帶者約為1.3億人。目前我國患慢性乙型肝炎的病人超過3000萬，其中不少人可能發(fā)展成肝硬化或肝癌。每年我國死于乙肝后肝硬化、肝癌者達(dá)40萬人。因此慢性乙型肝炎的治療(包括能阻斷、減輕乃至逆轉(zhuǎn)肝纖維化的治療)是我國迫切需要解決的重大疾病之一。有專家認(rèn)為“誰控制了肝纖維化，誰就控制了慢性肝炎”。
從70年代中期以來，隨著人們對肝纖維化發(fā)生、發(fā)展認(rèn)識的不斷深化，現(xiàn)已公認(rèn)肝纖維化是細(xì)胞外基質(zhì)的合成與降解失去平衡的結(jié)果，故纖維組織的形成可看作是一個動態(tài)過程，并證明人類的肝纖維化是可以逆轉(zhuǎn)的。多年來，我國醫(yī)務(wù)工作者不斷致力于中醫(yī)中藥治療慢性肝炎和逆轉(zhuǎn)肝纖維化的研究，取得了可喜的成績，這是中醫(yī)中藥在肝病治療上的一大優(yōu)勢。大量文獻(xiàn)資料表明，中醫(yī)中藥在抗肝纖維化方面以其可靠的療效和較少的副作用而獨(dú)樹一幟。目前國內(nèi)外有關(guān)肝纖維化治療的研究多處于實(shí)驗(yàn)階段，尚缺乏有治療前景的逆轉(zhuǎn)肝纖維化或肝硬化的藥物。
《醫(yī)家金》曰“肝為木氣，全賴土以滋培，以水灌溉，若中土虛則木不升而郁”。濕為陰邪，最易傷陽，脾陽受困，而致脾虧氣虛。氣虛失運(yùn)，木郁失達(dá)，則肝部氣滯。氣滯日久，氣病及血，血行不暢，瘀血內(nèi)阻，絡(luò)道失和，以致痞塊形成，青筋暴露，病至險境，纏綿難愈。針對病機(jī)所在，治法當(dāng)以黃芪益氣扶脾為重，丹參活血化瘀為先，緩緩圖治，以收遠(yuǎn)效。黃芪和丹參自古以來就是治療肝病的主要中藥。近年來國內(nèi)眾多學(xué)者對其藥理學(xué)、藥效學(xué)等進(jìn)行了廣泛深入的研究，并開發(fā)了以黃芪、丹參為主要原料的口服液、注射液、針劑等藥物以治療肝病。但這些藥物大多使用黃芪、丹參的粗提物。

發(fā)明內(nèi)容
黃芪藥材中含有多糖、皂苷、黃酮、氨基酸、酚類和微量元素等，其中多糖和皂苷為免疫調(diào)節(jié)作用的主要活性成分。丹參藥材中所含的丹參酮和酚酸類是其藥理作用的主要活性成分。本發(fā)明首先對黃芪、丹參進(jìn)行提取得到粗提物，然后自粗提物中分離出主要含黃芪總皂苷、總丹參酮和總酚酸的各有效部位，最后將各有效部位按一定比例混合均勻得到組合物。該組合物可以按公知的工藝加工成口服制劑，如顆粒劑、片劑、膠囊等。其特征在于組合物中主要含總酚酸、總丹參酮和黃芪總皂苷的各有效部位有以下質(zhì)量比總酚酸∶總丹參酮∶黃芪總皂苷＝15～50∶3～7∶0.5～4。
優(yōu)選的質(zhì)量比為總酚酸∶總丹參酮∶黃芪總皂苷＝20～45∶4～6∶1～3。
最佳的質(zhì)量比為總酚酸∶總丹參酮∶黃芪總皂苷＝25∶3.5∶2。
各有效部位中，總酚酸、總丹參酮和黃芪總皂苷的含量均≥50％。
黃芪皂苷既溶于水又溶于乙醇。用水或乙醇對黃芪進(jìn)行提取得到水或乙醇的粗提物，然后自粗提物中分離出主要含黃芪總皂苷的有效部位。
丹參酮為脂溶性成分，酚酸為水溶性成分。丹參藥材分別用乙醇和水進(jìn)行提取，得到乙醇和水的粗提物，然后自粗提物分離得到主要含總丹參酮和總酚酸的有效部位。
所述的分離主要是吸附分離，如薄層分離、色譜分離、大孔吸附樹脂分離等。
安徽醫(yī)科大學(xué)對上述各有效部位進(jìn)行了體內(nèi)外藥效學(xué)試驗(yàn)，證明了本發(fā)明的提取、分離工藝的可行性。同時對各有效部位按比例混合后的組合物亦進(jìn)行了體內(nèi)外藥效學(xué)試驗(yàn)(試驗(yàn)中，組合物編號為CAE)，如果如下CAE體外對HSC-T6細(xì)胞功能的抑制作用體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在60.3mg·L-1～mg·L-1濃度范圍內(nèi)，CAE對HSC-T6細(xì)胞增殖和產(chǎn)生膠原有濃度依賴性的抑制作用。提示CAE對HSC上述功能有直接抑制作用。
CAE體外對巨噬細(xì)胞功能的抑制作用實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，CAE在5.9～94.2mg·L-1濃度范圍內(nèi)，對LPS誘導(dǎo)大鼠PMΦs產(chǎn)生IL-1、NO和TNF-α也有明顯的濃度依賴性。提示CAE對PMΦs產(chǎn)生炎性細(xì)胞因子有直接的抑制作用。
CAE對小鼠D-GaIN性肝損傷的保護(hù)作用采用D-GaIN(800mg·L-1)誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷模型，CAE三個劑量(60、120、240mg·L-1)對D-GaIN升高的血清ALT水平、肝臟指數(shù)以及肝勻漿MDA的含量均顯著降低。表明CAE對D-GaIN致小鼠急性肝損傷有明顯的保護(hù)作用，并提示其作用可能與該藥的抗氧化作用有關(guān)。
CAE對CCl4致大鼠肝纖維化的防治作用實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，對CCl4致大鼠肝纖維化模型，CAE三個劑量(60、120、240gmg·kg-1×8wk)不僅可降低CCl4升高的ALT與AST水平和CCl4升高的大鼠肝、脾指數(shù)，以及肝組織MDA水平；還可升高CCl4降低的大鼠胸腺指數(shù)和肝組織T-SOD水平，而且可顯著降低CCl4升高的血清HA含量和肝組織HYP含量。病理組織學(xué)發(fā)現(xiàn)，CAE明顯減輕CCl4所致的肝細(xì)胞壞死、肝組織纖維化和肝硬化的程度。表明CAE有抗肝纖維化作用，該作用可能與其抗氧化和抗炎作用有關(guān)。
總之，CAE體外對HSC-T6細(xì)胞的增殖和產(chǎn)生膠原均有明顯的抑制作用；大鼠腹腔巨噬細(xì)胞產(chǎn)生IL-1、TNF-α和NO等炎性因子亦有明顯的抑制作用；對小鼠D- GaIN性肝損傷，CAE三個劑量均有明顯的保護(hù)作用；對大鼠CCl4性肝纖維化模型，CAE三個劑量亦有明顯的防治作用。
具體實(shí)施例方式
現(xiàn)以大孔吸附樹脂吸附分離為例，非限定實(shí)施例敘述如下。
1、黃芪總皂苷的制備黃芪藥材粉碎后用70～85％的乙醇回流提取兩次，第一次10倍量，回流1～2小時，第二次8倍量，回流1小時，合并兩次濾液，減壓蒸餾，回收乙醇，當(dāng)乙醇脫盡時，加水溶解，靜置12小時，分離，用D101大孔吸附樹脂吸附分離，分別用水、30％、70％乙醇洗脫，減壓濃縮70％乙醇洗脫液，60℃真空干燥得到主要含黃芪總皂苷浸膏(I)。
以黃芪甲苷為對照品，采用人光光度法測定浸膏(I)中總皂苷含量，總皂苷含量≥50％。
2、總丹參酮的制備丹參藥材經(jīng)粉碎后用90～95％的乙醇回流提取兩次，第一次8倍量，回流1～2小時，第二次6倍量回流1～2小時，合并兩次濾液，減壓蒸餾，回收乙醇，用D101大孔吸附樹脂吸附分離，經(jīng)洗脫、濃縮得到主要含總丹參酮浸膏(II)。
以丹參酮IIA為對照品，用分光光度法測定浸膏(II)中總丹參酮的含量，總丹參酮含量≥50％。
3、在實(shí)施例2中，經(jīng)乙醇提取后的丹參濾渣脫盡乙醇，繼續(xù)用水提取兩次，每次8倍量水，回流或煎煮1.5～2.5小時，合并兩次濾液，減壓脫水濃縮，用D101大孔吸附樹脂吸附分離，經(jīng)洗脫、濃縮得到主要含總酚酸浸膏(III)。
以原兒茶醛為對照品，用分光光度法測定浸膏(III)中總酚酸的含量，總酚酸含量≥50％。
4、顆粒劑的制備取浸膏(I)0.5份，浸膏(II)3份，浸膏(III)20份，按顆粒劑制備工藝制備顆粒劑。
5、片劑的制備取浸膏(I)4份，浸膏(II)7份，浸膏(III)50份，按片劑制備工藝制備片劑。
6、膠囊的制備取浸膏(I)3份，浸膏(II)5份，浸膏(III)30份，按膠囊劑制備工藝制備膠囊。
7、軟膠囊的制備取浸膏(I)2份，浸膏(II)3.5份，浸膏(III)25份，按軟膠囊制備工藝制備軟膠囊。
本制備患者口服劑量，以有效部位組合物計為120～240mg。
權(quán)利要求
1.一種治療慢性肝炎的藥物，是由黃芪和丹參的粗提物中分離出的有效部位構(gòu)成的組合物，其特征在于主要含總酚酸、總丹參酮和黃芪總皂苷的各有效部位有以下質(zhì)量比總酚酸∶總丹參酮∶黃芪總皂苷＝15～50∶3～7∶0.5～4，各有效部位中，總酚酸、總丹參酮和黃芪總皂苷的含量均≥50％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物，其特征在于各有效部位優(yōu)選以下質(zhì)量比總酚酸∶總丹參酮∶黃芪總皂苷＝20～45∶4～6∶1～3。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的藥物，其特征在于各有效部位最佳質(zhì)量比總酚酸∶總丹參酮∶黃芪總皂苷＝25∶3.5∶2。
全文摘要
一種治療慢性肝炎的藥物，是由黃芪、丹參的粗提物中分離出的有效部位構(gòu)成的組合物，各有效部位總酚酸、總丹參酮和黃芪總皂苷的質(zhì)量比為15～50∶3～7∶0.5～4。經(jīng)藥效學(xué)試驗(yàn)表明，本發(fā)明明顯減輕大鼠CCl
文檔編號A61P31/14GK1759855SQ200410064999
公開日2006年4月19日 申請日期2004年10月15日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月15日
發(fā)明者魏偉, 金繼曙, 陳敏珠, 雷紅 申請人:合肥恒星藥物研究所