專利名稱：化橘紅中活性成分揮發(fā)油在制藥中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及化橘紅中活性成分揮發(fā)油的用途，尤其涉及在制藥中的用途。
背景技術(shù)：
化橘紅為蕓香科植物化州柚Citrus grandis‘Tomentosa’或柚Citrus grandis(L.)Osbeck的未成熟或近成熟的干燥外層果皮。前者習(xí)稱“毛橘紅”，后者習(xí)稱“光七爪”“光五爪”。具散寒，燥濕，利氣，消痰之功效。用于風(fēng)寒咳嗽，喉癢痰多，食積傷酒，嘔惡痞悶。[1]化橘紅為廣東省名貴的地道藥材，其主要化學(xué)成分有揮發(fā)油、黃酮、多糖等，關(guān)于化橘紅止咳化痰的活性成分，說(shuō)法不一至。周榮漢等認(rèn)為，其黃酮類成分是消炎、止咳、平喘活性成分[2]；周博文等認(rèn)為多糖是祛痰鎮(zhèn)咳作用的活性成分之一[3]；化橘紅揮發(fā)油含有51個(gè)成分，已鑒定出28個(gè)成分，其化學(xué)組成以單萜類及其衍生物為主體，含量較高的成分有D-檸檬烯(53.57％)、3-蒈烯(15.62％)、β-月桂烯(8.17％)、α-蒎烯(1.09％)、β-蒎烯(0.60％)、2-蒈烯(1.76％)等[4]。目前，對(duì)化橘紅揮發(fā)油的止咳化痰作用尚未有研究報(bào)導(dǎo)。為此，有必要對(duì)化橘紅的止咳化痰作用的活性成分進(jìn)行進(jìn)一步研究。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供化橘紅中活性成分揮發(fā)油的新用途，即在制藥中的新應(yīng)用。
實(shí)際上，本發(fā)明涉及化橘紅中活性成分作為制備治療或預(yù)防止咳化痰藥中的應(yīng)用。
同時(shí)，化橘紅中具有止咳化痰作用的必要活性成分是化橘紅揮發(fā)油。其可用于制成具有止咳化痰作用的單方或復(fù)方藥物。
為了更好地理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，下面將用化橘紅不同提取物的止咳化痰活性研究來(lái)說(shuō)明其在制藥領(lǐng)域中的新用途。
1.氨水引咳法鎮(zhèn)咳試驗(yàn)1.1試驗(yàn)材料1.1.1受試藥物化橘紅揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物，化橘紅總黃酮，化橘紅多糖，本室自制；陽(yáng)性對(duì)照藥金蕎麥片，批號(hào)021105，南通精華制藥有限公司；陰性對(duì)照藥0.5％CMC-Na溶液。
1.1.2揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物的制備稱取化橘紅藥材顆粒300g，加10倍量水浸泡過(guò)夜，在揮發(fā)油提取器中提取揮發(fā)油6小時(shí)，收集油水混合液，乙醚萃取，回收乙醚，得化橘紅揮發(fā)油0.4ml，用4gβ-環(huán)糊精進(jìn)行包合，得化橘紅揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物4g。
1.1.3總黃酮及總多糖的制備將1.1.2項(xiàng)下水提液過(guò)濾，藥渣續(xù)用10倍量水提取1小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮，得濃度為1g生藥/ml水液，上D101大孔樹(shù)脂柱，先用水洗脫至無(wú)色，收集合并水洗脫液，減壓濃縮至比重為1.05水液，用5倍量酒精醇沉，靜置24小時(shí)，抽濾，用95％乙醇洗滌，干燥，得化橘紅多糖35.4g。水洗脫盡多糖類成分后，改用70％乙醇進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，合并，濃縮，干燥，得化橘紅總黃酮粉末12g。
1.1.4其余試劑為市售分析純?cè)噭?br> 1.1.5動(dòng)物昆明種小鼠，雄性，18～22g。
1.2方法與結(jié)果小鼠隨機(jī)分為化橘紅揮發(fā)油、化橘紅總黃酮、化橘紅多糖、金蕎麥組和陰性對(duì)照組，分別灌胃給予小鼠化橘紅揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物0.9mg/kg，化橘紅總黃酮3mg/kg，化橘紅多糖10mg/kg和金蕎麥1.2片/kg及同體積空白溶媒。連續(xù)三天，每日一次，末次給藥前15小時(shí)給小鼠禁食，末次給藥后1hr將小白鼠置于500ml玻璃鐘罩內(nèi)，通過(guò)空氣壓縮機(jī)連接玻璃噴霧頭，以400mmHg恒壓將濃氨水(25～28％氫氧化銨)均勻地噴入鐘罩內(nèi)，持續(xù)5s，觀察并記錄小鼠的咳嗽潛伏期及兩分鐘內(nèi)的咳嗽次數(shù)，作為指標(biāo)。結(jié)果見(jiàn)表1。
表1.化橘紅提取物對(duì)小鼠氨水致咳作用的影響(n＝10)組別 劑量(mg/kg) 潛伏期(s) 咳嗽次數(shù)(次/2min)陰性對(duì)照-- 35.3±9.7 51.6±18.2化橘紅揮發(fā)油1.8 45.1±5.6*37.5±9.9*化橘紅總黃酮6.0 43.0±11.2 45.9±14.4化橘紅總多糖20.0 45.7±14.8 43.6±9.7金蕎麥片 0.004片/只 56.3±15.9*28.9±13.1**p＜0.05，與陰性對(duì)照組比注化橘紅各給藥組劑量均相當(dāng)于0.2g生藥/kg小鼠。
2.酚紅排泌法祛痰試驗(yàn)2.1試驗(yàn)材料。
2.1.1受試藥物同前2.1.2藥品及儀器酚紅，NaHCO3，NaOH，生理鹽水，752分光光度計(jì)，手術(shù)剪，眼科鑷，小試管2.1.3動(dòng)物昆明種小鼠，雄性，18～22g2.2酚紅標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密稱取酚紅5.2mg，置50ml容量瓶中，5％NaHCO3溶液定容至刻度，作為對(duì)照品溶液(104μg/ml)。量取對(duì)照品溶液1ml，置10ml容量瓶中，5％NaHCO3溶液定容至刻度，搖勻。再分別精密吸取1，2，3，4，5，6ml于5％NaHCO3溶液25ml中定容至刻度，搖勻，得濃度分別為1.664，3.328，4.992，6.656，8.320，9.984μg/ml酚紅溶液。以5％NaHCO3為空白，在558nm下測(cè)定A值，經(jīng)回歸得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程A＝0.0748C-0.0002，r＝0.9998(Cμg/ml)，酚紅在1.664～9.984μg/ml范圍內(nèi)線性良好。
2.3方法與結(jié)果小鼠隨機(jī)分組、給藥同1.2。末次給藥后30min每鼠ip5％酚紅生理鹽水溶液500mg/kg，30min后處死小鼠，分離氣管，取氣管一段，放入2ml5％NaHCO3溶液中浸泡，振搖，放置待沉淀后取上清液于558nm測(cè)定A值，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算酚紅濃度，為呼吸道分泌作用的指標(biāo)。結(jié)果見(jiàn)表2。
表2.化橘紅提取物對(duì)小鼠呼吸道分泌的影響(n＝10)組別劑量(mg/kg)A酚紅濃度(μg/m)陰性對(duì)照 -- 0.1 94±0.0462.60±0.61化橘紅揮發(fā)油1.8 0.291±0.063***3.90±0.849***化橘紅總黃酮6.0 0.215±0.044 2.87±0.59化橘紅總多糖20.00.223±0.050 2.99±0.67金蕎麥片0.004片/只 0.247±0.023**3.30±0.31****p＜0.01，與陰性對(duì)照組比注化橘紅各給藥組劑量均相當(dāng)于0.2g生藥/kg小鼠。
上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，化橘紅揮發(fā)油具有良好的止咳化痰作用，是化橘紅中具有止咳化痰作用的必要活性成分。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1化橘紅揮發(fā)油的制備稱取化橘紅藥材300g(粉碎成粗顆粒)，加10倍量水浸泡過(guò)夜，在揮發(fā)油提取器中提取揮發(fā)油6小時(shí)，收集油水混合液，乙醚萃取，回收乙醚，得化橘紅揮發(fā)油0.4ml。
實(shí)施例2化橘紅揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物的制備稱取β-環(huán)糊精6～12g，加入等量蒸餾水，用研棒順時(shí)針攪勻，將化橘紅揮發(fā)油1ml(已用0.8ml95％乙醇溶解)逐滴加入，邊加邊順時(shí)針攪拌，加完后繼續(xù)攪拌30min至近干，于40℃下真空干燥，得β-環(huán)糊精包合物6～12g。
實(shí)施例3化橘紅揮發(fā)油制劑取化橘紅揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物10g，加淀粉90g，混合均勻，制粒后真充膠囊或制成片劑。
實(shí)施例4化橘紅揮發(fā)油制劑取化橘紅揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物15g，加淀粉85g，混合均勻，制粒后真充膠囊或制成片劑。
實(shí)施例5化橘紅揮發(fā)油制劑取化橘紅揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物20g，加淀粉80g，混合均勻，制粒后真充膠囊或制成片劑。
實(shí)施例6化橘紅揮發(fā)油制劑取化橘紅揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物30g，加淀粉70g，混合均勻，制粒后真充膠囊或制成片劑。
參考文獻(xiàn)1、中華人民共和國(guó)藥典委員會(huì).《中華人民共和國(guó)藥典》2000年版一部[S].北京化學(xué)工業(yè)出版社，200056-572、周榮漢，等.藥用植物化學(xué)分類學(xué)[S]，1988873、周博文，胡文雅，吳俊景.化州橘紅多糖的藥用研究.中國(guó)藥學(xué)雜志[J]；1993，28(3)135-1364、徐國(guó)鈞，徐珞珊，王崢濤主編.常用中藥材品種整理和質(zhì)量研究南方協(xié)作組(第四冊(cè))[S]，福州福建科學(xué)技術(shù)出版社，2001，437-46權(quán)利要求
1.化橘紅中活性成分揮發(fā)油在制備治療或預(yù)防止咳化痰藥中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明對(duì)化橘紅中主要成分揮發(fā)油、總黃酮、總多糖的止咳化痰作用進(jìn)行了研究，結(jié)果表明揮發(fā)油是化橘紅中具有止咳化痰作用的必要活性成分，其可用于制成具有止咳化痰作用的單方或復(fù)方藥物。
文檔編號(hào)A61P11/14GK1559515SQ200410014069
公開(kāi)日2005年1月5日 申請(qǐng)日期2004年2月16日 優(yōu)先權(quán)日2004年2月16日
發(fā)明者韋英杰, 舒斌, 蘇國(guó)強(qiáng) 申請(qǐng)人:江蘇省藥物研究所