專利名稱：左西孟旦冷凍干燥組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明的左西孟旦粉末是藥用，主要給藥途徑是靜脈注射。本發(fā)明的注射用粉末有良好的穩(wěn)定性，它們特別適用于輸液。左西孟旦，化學(xué)名(R)-(-)-2-[4(4甲基-6氧代-1，4，5，6-四氫噠嗪-3)-基-苯基亞肼基]丙二腈，臨床上用于充血性心衰的治療。
發(fā)明的背景左西孟旦，是(-)-2-[4(4-甲基-6氧代-1，4，5，6-四氫噠嗪-3)-基-苯基亞肼基]丙二腈的左旋體，EP 565546 B1與WO97/35841公開了制備方法。左西孟旦對治療心衰是有效的，與肌鈣蛋白的結(jié)合呈顯著的依賴性。左西孟旦的結(jié)構(gòu)式如下 左西孟旦在人體的血流效應(yīng)由Sundberg，S.等人公開發(fā)表在Am.J.Cardiol.1995；751061～1066。左西孟旦在靜脈注射與口服后人體的藥動學(xué)由Sandell E-P等人發(fā)表在J.Cardiovasc.Pharmacol.，26(Suppl.1)，S57-S62，1995.左西孟旦用于治療心肌缺血公開在WO93/21921。左西孟旦的經(jīng)皮給藥制劑公開于WO98/01111。臨床研究已證實了左西孟旦對心衰患者的有利效應(yīng)。
通過血管途徑給藥，例如，靜脈注射由許多優(yōu)點，主要包括(1)靜脈注射或靜脈輸液幾乎可立即獲得響應(yīng)；(2)治療響應(yīng)通過血管給藥更易于控制；(3)因意識喪失無法口服藥物的患者可通過血管給藥，或因為胃腸道失活而影響吸收。
左西孟旦注射用溶液的制備公開于WO01/19334，注射液特別是適于靜脈途徑的注射液，涉及由于對化學(xué)與物理因素引起的左西孟旦穩(wěn)定性的許多問題。左西孟旦溶液對化學(xué)因素更敏感，這樣就限制了溶液的貨架壽命，產(chǎn)生不必要的降解產(chǎn)物。左西孟旦對熱敏感，歐洲上市的左西孟旦注射液貯存溫度是在2～8℃，隨著貯存時間的延長，注射液的顏色可由黃綠色加深至橙色，含量下降、有關(guān)物質(zhì)增多。左西孟旦難溶于水，易于從水溶液中沉淀出來。靜脈注射用溶液中一旦產(chǎn)生沉淀是十分危險的，因為顆?？赡芏伦⊙堋．?dāng)pH值從中性開始下降時，左西孟旦的溶解度迅速降低，因此，低pH值原則上對溶解度是不利的。這樣，有必要改善左西孟旦水溶液制劑能在長期貯存過程中能對化學(xué)因素、物理因素均穩(wěn)定，并適于靜脈給藥。
因此，本領(lǐng)域非常需要將左西孟旦制成具有良好溶解性和穩(wěn)定性的制劑。
專利說明書全文經(jīng)過對處方與制備工藝的大量研究，發(fā)現(xiàn)采用冷凍干燥工藝可有效地解決上述問題，在此基礎(chǔ)上的進(jìn)一步研究即完成了本發(fā)明。
常規(guī)的粉針劑雖可解決制劑的穩(wěn)定性問題，但是產(chǎn)品中左西孟旦的溶解性能并未得到明顯改善，還需加入其他賦性劑，除加入pH調(diào)節(jié)劑——有機(jī)酸以確保左西孟旦穩(wěn)定以外，還需加入磷脂、泊洛沙姆、聚乙二醇、β-環(huán)糊精及其衍生物或表面活性劑，經(jīng)冷凍干燥可制得穩(wěn)定的凍干制品，在使用時加入藥用水性稀釋劑，即可迅速重分散成澄明膠體分散體或溶液。另外，本發(fā)明組合物中不含乙醇等有機(jī)溶劑，因此避免了刺激性反應(yīng)。
本發(fā)明的一個目的是提供含有磷脂的左西孟旦凍干組合物，磷脂具有兩親性，使其特別適合于配制本發(fā)明溶液狀態(tài)下不太穩(wěn)定、且水溶性較差的左西孟旦。這對于延長左西孟旦制劑的貯存期、改善其溶解性是非常有益的。采用本領(lǐng)域常用的冷凍干燥法、薄膜干燥法及反相蒸發(fā)法，并對磷脂的用量加以調(diào)整可制得含有左西孟旦的脂質(zhì)體或脂質(zhì)復(fù)合物，然后再經(jīng)冷凍干燥制成穩(wěn)定的凍干粉末，所得凍干制品經(jīng)適量藥用水性稀釋劑稀釋后可迅速重分散成膠體分散體。本發(fā)明所用的磷脂并不局限于特定種類的磷脂，包括天然或合成磷脂，示例性磷脂包括但不限于卵磷脂、大豆磷脂、腦磷脂、磷脂酸、二棕櫚酸磷脂酰膽堿、氫磷脂酰乙醇氨、二氨膽固醇、大豆甾酰糖苷、大豆甾醇、麥角固醇及其混合物。有利地，左西孟旦與磷脂的重量比例約1∶1～1∶100，優(yōu)選為1∶5～1∶25。
左西孟旦在pH3.0～4.5的范圍較化學(xué)穩(wěn)定，因此可加入有機(jī)酸將pH調(diào)至此范圍，優(yōu)選的酸性化合物包括藥用可接受的pKa在2～4之間的有機(jī)酸，這些酸包括2-羥基烷醇酸，如枸櫞酸、乳酸、酒石酸或蘋果酸。如使用藥用可接受的緩沖體系，從緩沖劑類別中選擇可有效地維持pH在5.5以下，優(yōu)選的在5以下或更低，最優(yōu)選地在3～4.5范圍，緩沖劑的配制是使用廣為所知的方法。
本發(fā)明的另一個目的是提供含有環(huán)糊精的左西孟旦凍干混合物。難溶性藥物左西孟旦經(jīng)環(huán)糊精包合后，了顯著改善其物化特性，例如將藥物粉末化后可提高其穩(wěn)定性，增加其溶解性，優(yōu)選地，所述環(huán)糊精及其衍生物選自β-環(huán)糊精、2-羥丙基-β-環(huán)糊精、羥乙基-β-環(huán)糊精以及它們的化混合物，優(yōu)選為2-羥丙基-β-環(huán)糊精。其中左西孟旦與環(huán)糊精的摩爾比約為1∶1～1∶20，優(yōu)選為1∶1～1∶5。其中的包合溫度、分散力大小和攪拌速度等條件可采用常規(guī)方法來設(shè)計選擇。
本發(fā)明的另一個目的是提供含有表面活性劑的左西孟旦凍干組合物，如上所述含有左西孟旦的凍干制劑經(jīng)藥用稀釋劑稀釋后，時常回出現(xiàn)渾濁或結(jié)晶現(xiàn)象，這給臨床應(yīng)用帶來一定的風(fēng)險。本發(fā)明通過使用表面活性劑(例如泊洛沙姆)增溶左西孟旦促進(jìn)了其快速溶解，同時又避免了刺激性溶劑使用。研究表明聚維酮、聚乙二醇、泊洛沙姆、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氫化蓖麻油、土溫-20、土溫80或它們的混合體系。可通過常規(guī)實驗確定表面活性劑的用量，以確保重分散后得到澄清的溶液。有利地，左西孟旦與表面活性劑的重量比例約為1∶1～1∶200，優(yōu)選為1∶5～1∶50。
優(yōu)選地，本發(fā)明藥物組合物中還可加入藥用冷凍干燥賦性劑。優(yōu)選地，所述賦形劑選自甘露醇、山梨醇、氯化鈉、葡萄糖、果糖、木糖醇、乳糖以及它們的混合物。優(yōu)選為甘露醇。左西孟旦與賦形劑的重量比例為1∶50～1∶1∶1000，優(yōu)選為1∶100～1∶300。
以組合物的總重量計，活性物質(zhì)左西孟旦的用量約為2.5mg～25mg，優(yōu)選為5mg～12.5mg。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可根據(jù)臨床制劑的需求和具體的生產(chǎn)設(shè)備，來調(diào)整凍干的周期，通常，可將均勻的制劑置于5～50ml的西林瓶中，預(yù)凍溫度-20℃至-60℃，優(yōu)選為-30℃至-40℃，預(yù)凍時間1小時至6小時，優(yōu)選為3～4小時。凍干溫度-10℃至-30°，優(yōu)選為-20℃至-25℃，凍干時間10小時至40小時，優(yōu)選為20小時至24小時。凍干組合物的最終水分含量一般低于5％，優(yōu)選為1％至1.5％。
本發(fā)明這些馬上凍干組合物適于臨床應(yīng)用。在使用前，可加入適量無菌藥用水性稀釋劑(例如，注射用水、生理鹽水、葡萄糖水、木糖醇水和其他已知的水性載體)，重分散成肌肉注射或靜脈滴注(靜脈內(nèi)給藥)用的膠體分散體或溶液制劑。
以下實施例旨在進(jìn)一步說明本發(fā)明，并不對本發(fā)明的范圍加以限制。
實施例1制備含磷脂的粉針劑取左西孟旦12.5mg、枸櫞酸10mg、磷脂75mg和膽固醇10mg，加入無水乙醇5ml。攪拌至完全溶解，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上進(jìn)行減壓干燥，除去溶劑，加入水5ml攪拌至均勻，采用超聲振蕩，濾過，加入甘露醇300mg，置無菌西林瓶中，置冷凍干燥機(jī)內(nèi)進(jìn)行冷凍干燥，封口，即得淺黃色-淡黃色的左西孟旦粉針劑。
實施例2制備含環(huán)糊精的粉針劑取左西孟旦12.5mg及枸櫞酸10mg，用5ml無水乙醇，攪拌至完全溶解，另取2-羥丙基-β-環(huán)糊精150mg，加水25ml，攪拌下將左西孟旦溶液加入到2-羥丙基-β-環(huán)糊精的溶液中，制備成均勻的環(huán)糊精包合物。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上進(jìn)行減壓干燥，揮去乙醇。在攪拌條件下，加入甘露醇300mg，溶液用事先經(jīng)滅菌處理過的垂熔玻璃漏斗過濾，濾液置無菌西林瓶中，置冷凍干燥機(jī)內(nèi)進(jìn)行冷凍干燥，封口。即得淺黃色-淡黃色的左西孟旦粉針劑。
經(jīng)X-射線粉末衍射及熱分析(DSC)確認(rèn)，實施例3制得的藥物組合物為包合物形式。
實施例3制備含表面活性劑的粉針劑取左西孟旦12.5mg，聚乙二醇50.0mg、聚氧乙烯蓖麻油150mg和甘露醇0.3g，加水5ml，攪拌至完全溶解。用0.22μm的微孔濾膜過濾，置無菌西林瓶中，得微黃色澄清溶液，置冷凍干燥機(jī)內(nèi)進(jìn)行冷凍干燥，封口。即得淺黃色-淡黃色的左西孟旦粉針劑。
對左西孟旦粉針劑的質(zhì)量及穩(wěn)定性及動物過敏性、溶血性和血管刺激性進(jìn)行研究。
1.含量測定高效液相色譜法用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以磷酸鹽緩沖液(磷酸二氫鈉2.34g加水950ml使溶解，加5％磷酸溶液約3.7ml，調(diào)節(jié)pH值至3.0±0.1加水至1000ml)-乙腈(60∶40)為流動相；流速為每分鐘1ml；檢測波長為360nm。
測定法 將樣品配制成左西孟旦濃度為75μg/ml的樣品，具體配制方法略。取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取左西孟旦對照品約7.5mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加甲醇10ml使溶解，用流動相稀釋至刻度，搖勻，同法測定。按外標(biāo)法以峰面積計算，即得。
2.有關(guān)物質(zhì)將樣品配制成每1ml中分別含左西孟旦200μg與2μg的樣品溶液與對照溶液，具體配制方法略。照含量測定項下的方法試驗，取對照溶液20μl，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分峰高約為滿量程的20％，再取供試品溶液和對照溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的6倍。供試品溶液色譜圖中顯示的雜質(zhì)峰，除溶劑峰外，各雜質(zhì)峰面積的總和不得大于對照溶液主峰的面積的1.5倍(1.5％)。
3.粉針劑與注射液穩(wěn)定性比較將實施例3制得的左西孟旦粉針劑與常規(guī)小水針劑的穩(wěn)定性進(jìn)行考察，影響因素采用在40℃±2℃溫度下及4500LX±500LX照度的光照下放置10天，分別在第5天及第10天取樣測定，考察數(shù)據(jù)如下表1。
表1 影響因素試驗考察粉針劑與溶液劑的熱、光穩(wěn)定性

以上結(jié)果表明本發(fā)明粉針劑加水后可迅速重分散成澄清液體；在相同實驗條件下，粉針劑的穩(wěn)定性優(yōu)于溶液劑，尤其外觀上遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于溶液劑。這種良好的溶解性及穩(wěn)定性，不但保證了臨床用藥的安全性，也相應(yīng)延長了左西孟旦的有效期。
4.過敏性、溶血性和血管刺激性研究本發(fā)明左西孟旦粉針劑無過敏性(豚鼠試驗)、溶血性和血管刺激性(大耳白家兔試驗)。
權(quán)利要求
1.一種凍干藥物組合物，其中包括左西孟旦和選自有機(jī)酸、磷脂、環(huán)糊精及其衍生物或表面活性劑的藥用輔料。
2.如權(quán)利要求1的組合物，其中有機(jī)酸選自枸櫞酸、乳酸、酒石酸或蘋果酸，其中左西孟旦與有機(jī)酸的重量比例約1∶0.1～1∶10。
3.如權(quán)利要求1的組合物，其中磷脂選自卵磷脂、大豆磷脂、腦磷脂、磷脂酸、二棕櫚酸磷脂酰膽堿、氫磷脂酰乙醇氨、磷脂酰絲氨酸以及它們的混合物。
4.如權(quán)利要求3的組合物，其中一種或多種磷脂混合物的重量比例約為1∶1～1∶75，優(yōu)選為1∶1～1∶5。
5.如權(quán)利要求1的組合物，其中環(huán)糊精及其衍生物選自β-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精、羥乙基-β-環(huán)糊精以及它們的混合物。
6.如權(quán)利要求5的組合物，其中左西孟旦和環(huán)糊精及其衍生物的重量比例月為1∶1～1∶15。
7.如權(quán)利要求1的組合物，其中表面活性劑選自聚維酮、聚乙二醇、泊洛沙姆、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氫化蓖麻油、土溫-20、土溫80等以及它們組成的混合體系。
8.如權(quán)利要求7的組合物，其中左西孟旦與表面活性劑的重量比例約1∶1～1∶100。
9.如權(quán)利要求8的組合物，還包括可藥用的冷凍干燥賦形劑，所述選自甘露醇、山梨醇、氯化鈉、葡萄糖、果糖、蔗糖、木糖醇、乳糖以及它們的混合物。
10.制備按照權(quán)利要求1～9的凍干粉末制劑的方法，其特征在于將所述粉末制劑溶于水中，任選過濾除菌后直接凍干，之后進(jìn)行凍干粉末分裝?；?qū)⑷芤悍盅b于5ml、10ml、20ml或50ml的凍干用小瓶中；未封口放入與凍干箱尺寸相應(yīng)的金屬盤內(nèi)，對凍干箱進(jìn)行滅菌處理，并將其擱板溫度降至-30℃～-40℃維持1～2小時，然后對凍干箱進(jìn)行真空處理，使箱內(nèi)的真空度在0.2～0.1Pa，再將擱板升溫，并嚴(yán)格控制其在熔點以下5度，保持12～24小時，最后升溫至25～30℃，保持一定時間，使制劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制制劑的含水量在0.1～3％，迅速封口即可。
11.如權(quán)利要求1～9的組合物，為注射用凍干制品。適用于短期治療因器質(zhì)性心臟病或心臟手術(shù)后的心肌因收縮力衰弱的成人。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種包含左西孟旦作為活性成分的藥物組合物及其制備方法。具體地說，本發(fā)明涉及一種包含左西孟旦作為活性成分的粉針劑及其制備方法。同已有的同類注射液相比，本發(fā)明的粉針劑具有穩(wěn)定性好，貯存期長，運輸、存放、使用均方便的優(yōu)點。本發(fā)明組合物中還含有枸櫞酸、磷脂、環(huán)糊精及其衍生物或表面活性劑，該制品具有良好的溶解性和穩(wěn)定性。
文檔編號A61P9/04GK1611220SQ20031010227
公開日2005年5月4日 申請日期2003年10月30日 優(yōu)先權(quán)日2003年10月30日
發(fā)明者王晉, 妥福軍 申請人:西安宏盛醫(yī)藥開發(fā)有限公司