專利名稱：剌激水生生物生長及抗病性的方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及增加商品魚類和甲殼動物的生長速度的化學(xué)合成方法。已經(jīng)報道了Leu和Met腦啡肽的肽類似物的合成，并示出它們在動物體內(nèi)刺激生長激素(GH)釋放(Bowers C，Momany，G，ReynoldsG和A.Hong.1984，On the in vitro and in vivo activity of a new synthetichexapeptide that acts on the Pituitary to specifically release growthhormone.Endocrinology 1141537-45)。
對GH釋放肽(GHRP)結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系的研究導(dǎo)致鑒別了GHRP-6(His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2)，已經(jīng)證明其在動物包括人體中是一種非常強(qiáng)力及安全的GH促分泌素(GHS)，但目前還沒有在水生生物中使用這種化合物的報道。
考慮到?jīng)]有刺激甲殼動物生長的信號級聯(lián)跡象(下丘腦—腦垂體—靶器官)，我們證實了一種新的事實，即單獨的肽GHRP-6在甲殼動物中就能發(fā)揮與在哺乳動物中相似的一種生物學(xué)功能。
淡水魚是水生業(yè)的主要產(chǎn)品，但最近的十年中海藻、軟體動物和甲殼動物的培養(yǎng)明顯增多。增加對培育的生物體的遺傳、繁殖、營養(yǎng)及生理學(xué)的了解是改良水生業(yè)生產(chǎn)的第一步(Gomez-Chiarri M，SmithGJ，de la Fuente J and Powers DA.1998，Gene transfer in shellfish andalgae.In de la Fuente J and Castro FO，editors.Gene transfer in aquaticorganisms.Austin，TexasRG Landes Company and GermanySpringerVerlag；p107-125)。
研究參與商品魚和甲殼動物物種中生長機(jī)制的激素和肽的分子特征對改良水產(chǎn)業(yè)是非常重要的。
一個實施例是Silverstein等于1999年使用促性腺激素釋放激素(GnRH)及多巴胺受體拮抗劑以調(diào)節(jié)和誘導(dǎo)鯰魚(Ictalaruspunctatus)的繁殖(Silverstein JT.Bosworth BG.and Wolters WR.1999，Evaluation of dual injection of LHRHa and the dopamine receptorantagonist pimozide in cage spawning of channel catfish Ictalaruspunctatus.，Journal ofthe World Aquaculture Society，第30卷，No.2，6月，263-268)。這個物種在世界水產(chǎn)業(yè)具有極高重要性。
Hashizume等于1997年報道了使用一種合成肽增加農(nóng)場動物的生產(chǎn)力(Hashizume T.，Sasaki M.，Tauchi S.and Masuda H.，1997，The effect of new growth Hormone-releasing peptide(KP102)on therelease of growth hormone in goats，，Animal Science and Technology，第68卷，No.3，3月，247-256)。他們證實了在山羊中注射一種新的生長激素釋放合成肽誘導(dǎo)了生長激素。
胰島素已經(jīng)口服施用于魚類并證明了參與鯉魚適應(yīng)不同溫度的受體和激素信號產(chǎn)生變化(Vera MI.，Romero F.，F(xiàn)igueroa J.，AmthauerR.，Leon G，Villanueva and Krauskopf M.，1993，Oral administrationof insulin in water-acclimatized carp(Cyprinus carpio)induces hepaticultrastructural changes，Comp.Biochem.Physiol.Vol.106A，No.4,677-682)。
Patchett等于1995年在哺乳動物中測試了生長激素釋放肽的合成變體。他們探查了肽MK-0677，其設(shè)計為在狗中是GH的強(qiáng)力口服激活劑，而在應(yīng)用后對酪氨酸和促乳素水平無作用(Patchett AA.，Nargund RP.，Tata JR.，Chen MH.，Barakat KJ，Johnston DBR，ChengK.，Chan WWS，Butler B.，Hickey G.，Jacks T.，Schleim K.，Pong SS.，Chaung LYP.，Chen HY，F(xiàn)razier E.，Leung KH，Chiu SHL and SmithRG.1995，Proc.Natl.Acad.Sci.USA.，第92卷，7001-7005)。
考慮到循環(huán)GH水平增加刺激乳汁產(chǎn)生，已經(jīng)在牛中開發(fā)了生長激素釋放激素的其它應(yīng)用，以增加牛奶產(chǎn)量(Soliman EB.，HashizumeT.，Ohashi S.and Kanematsu S.，1997，Effects of Growth hormone(GH)-releasing hormone and its analogs on GH secretion from culturedadenohypophysial cells in cattle，Domestic animal endocrinology，第14(1)卷，39-46)。
目前沒有在魚類或甲殼動物中使用GHRP-6的報道。本發(fā)明報道了在魚類和甲殼動物中使用GHRP-6而刺激生長，改良幼體質(zhì)量及增加對病原體的抗性、干重、肌肉中的蛋白質(zhì)濃度及RNA水平，包括一種改良培育的水生生物體的繁殖力的方法。
目前已有許多關(guān)于一些蝦物種如Penaeus japonicus和Litopenaeus vanname遺傳培育的初步結(jié)果，但這些不是足夠的，因為沒有關(guān)于這些生物體的遺傳和生物化學(xué)知識(Benzie，J.A.H.，1998，Penaeid genetics and biotechnology，Aquaculture 164，23-47；Fjalestadl，K.T.，Carr.W.H.，Lotz.，J.L.，Sweeney，J.N.，1999，Geneticvariation and selection response in body weight and disease resistance inthe Pacific White Shrimp Penaeus Oannamei，Aquaculture 173，10，僅摘要部分)。非常重要的是應(yīng)用生物技術(shù)學(xué)，分子生物學(xué)，遺傳工程和生物化學(xué)培育蝦類以改良生產(chǎn)力(Bachere，E.，Mialhe，E.，Noel.，D.，Boulo，V.，Morvan，A.，Rodriguez，J.(1995)，Knowledge andresearch prospects in marine mollusk and crustacean immunology，Aquaculture 132，17-32)。
本發(fā)明證實了GHRP-6單獨即能在魚類和甲殼動物中刺激生長，改良幼體質(zhì)量，及增加對病原體的抗性、干重、肌肉中的蛋白質(zhì)濃度及RNA水平。
發(fā)明實質(zhì)本發(fā)明的實質(zhì)和新穎性是證實了單獨的所述肽GHRP-6即能在魚類和甲殼動物中刺激生長，改良幼體質(zhì)量，及增加對病原體的抗性、干重、肌肉中的蛋白質(zhì)濃度及RNA水平。通過口服，注射或者浸沒(immersion)方式施用單獨的促分泌素GHRP-6即刺激魚類和甲殼動物生長。
發(fā)明詳述首先，在哺乳動物和鳥類中證實了具有序列His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2的六肽GHRP-6(生長激素釋放肽)的促進(jìn)GH釋放的生物學(xué)活性(Bowers C，Momany，G，Reynolds Gand A.Hong，1984，On the in vitro and in vivo activity of a new synthetichexapeptide that acts on the Pituitary to specifically release growthhormone.Endocrinology 1141537-45)。
由于硬骨魚的GH水平每天的變化明顯，每條魚在處理之前和之后取血清樣品。結(jié)果示出在腹膜內(nèi)經(jīng)所述六肽處理之后15分鐘的時程內(nèi)，血清GH水平增加。在硬骨魚中，如在其它脊椎動物中同樣，GH的生長促進(jìn)作用主要通過誘導(dǎo)IGF而介導(dǎo)。應(yīng)答腹膜內(nèi)注射GHRP-6，第30分鐘時，肝臟IGF mRNA的水平明顯增加，在注射后6小時期間恢復(fù)到正常值(實施例1)。
本發(fā)明證實了單獨的所述肽GHRP-6在魚類中發(fā)揮與在哺乳動物和鳥類中相似的生物學(xué)作用，提示該作用機(jī)制是相似的。
分析了GHRP-6在體內(nèi)控制淡水幼羅非魚(tilapia)機(jī)體生長的作用。與對照組相比，使用不同的施用方式用GHRP-6處理明顯刺激生長，通過在用三種不同施用方式處理三周后生長速度的增加而確定，所述施用方式是a)腹膜內(nèi)注射，b)口服及c)浸沒(實施例2)。
在1g羅非魚幼體中表明通過浸沒應(yīng)用的所述六肽GHRP-6在增加病原體抗性及肌肉質(zhì)量中有作用(實施例3)。結(jié)果示出用GHRP-6處理的羅非魚組重量及蛋白質(zhì)濃度增加而病原體侵染的強(qiáng)度和范圍及肌肉中水含量降低。這個結(jié)果提示所述六肽在蛋白質(zhì)合成中的陽性作用。
在南美白對蝦(Litopenaeus Schmitt)中分析GHRP-6表明通過不同的施用方式單獨施用即能改良甲殼動物的生長速度，所述施用方式是a)腹膜內(nèi)注射，b)口服及c)浸沒(實施例4)。
將所述六肽在南美白對蝦中分析表明其單獨在不同的幼體階段通過應(yīng)用4-浸沒室應(yīng)用即能改良生長速度。在幼體培養(yǎng)周期最后階段幼體的性質(zhì)通過所述肽得以改良。所述幼體示出重量，大小，腮分支數(shù)，喙骨修飾，肌肉中蛋白質(zhì)濃度和RNA水平明顯增加。這顯然是代謝活性增加。
幼體性質(zhì)改良通過成體蝦產(chǎn)生增加的生物量及所述動物的重量和大小更一致而得以維持。通過肌內(nèi)注射，GHRP-6能促進(jìn)成體蝦南美白對蝦的生長速度。在注射GHRP-6 15天后，處理組動物示出比對照組增加100％-150％(實施例5)。
在南美白對蝦中以在食物中或以包在Artemia salina中的形式口服施用促分泌素GHRP-6，改良了生長速度，與對照組相比增加30％-40％(實施例6)。
附圖簡述
圖1羅非魚IGF mRNA水平及用GHRP-6肽注射的幼羅非魚血清GH水平。每組三只動物經(jīng)腹膜內(nèi)注射。在注射后15分鐘、30分鐘、1小時和6小時取肝臟和血清樣品。在處理之前從每個動物取一份血清樣品。*明顯不同于對照組(p＜0.001 ANOVA，Duncan test)。
圖2在幼羅非魚中注射GHRP-6三周后對體重和生長速度的作用。將每組7只羅非魚均腹膜內(nèi)注射0.1μg肽/gbw，一周兩次，對照組接受鹽水載體。*明顯不同于對照組(p＜0.029，Student’test)。條桿(bar)表示標(biāo)準(zhǔn)誤差。三角形表示平均生長速度。
圖3為幼羅非魚口腔插管服用未包囊化的GHRP-6三周后對體重和生長速度的作用。將每組5只羅非魚用0.1μg肽/gwb處理，一周兩次，對照組接受鹽水載體。*明顯不同于對照組(p＝0.015，Multiple Range test)。條桿表示標(biāo)準(zhǔn)誤差。三角形表示平均生長速度。
圖4為幼羅非魚口服包囊化的GHRP-6三周后對體重和生長速度的作用。將每組5只羅非魚用0.1μg肽/gwb處理，對照組接受鹽水載體。*明顯不同于對照組(p＝0.007，Multiple Range test)。條桿表示標(biāo)準(zhǔn)誤差。三角形表示平均生長速度。
圖5GHRP-6在用GHRP-6浸沒處理的南美白對蝦中的生長促進(jìn)活性。
A在用GHRP-6處理的三個組及對照組中重量增加的毫克數(shù)。B用GHRP-6處理的三個組及對照組中大小增加的毫米數(shù)。C用GHRP-6處理的三個組及對照組中腮分支的絕對頻數(shù)分布(absolutefrequency distribution)。D用GHRP-6處理的三個組及對照組中喙骨的絕對頻數(shù)分布。I組10.001mg/L；II組20.01mg/L；III組30.1mg/L和對照組1mg BSA/L。***p＜0.001。條桿表示標(biāo)準(zhǔn)誤差(±DS)。隨后通過DUNCAN test的ANOVA用于統(tǒng)計學(xué)計算重量和大小的差異。Kolmogorov-Smmimov用于喙骨及腮分支。
圖6用GHRP-6處理的組及對照組的蝦的干重。***t-test p＜0.001。條桿表示標(biāo)準(zhǔn)誤差。
圖7用GHRP-6處理的組及對照組的蝦的RNA，蛋白質(zhì)和DNA之間的關(guān)系。***t-test p＜0.001。條桿表示標(biāo)準(zhǔn)誤差。
圖8在GHRP-6浸沒處理的生產(chǎn)條件下的南美白對蝦幼蝦的生長速度。實驗進(jìn)行6周。***t-test p＜0.001。條桿表示標(biāo)準(zhǔn)誤差。
實施例實施例1證實GHRP-6在魚類中的生物學(xué)活性將15只平均重量為71±28g的羅非魚用于該實驗。以0.1μg/gbw注射六肽GHRP-6。在處理之前及注射后15分鐘、30分鐘、1小時及6小時取肝臟和血液樣品(每組3只動物)。收集血清和肝臟樣品并貯存在-70℃直至用于總RNA分離及Northern印跡分析。在所有動物處理之前均取血清樣品。
Northern印跡分析用于測定所述肽注射的羅非魚中相對的IGFmRNA水平。如Chomczynski和Sacchi所述從肝臟樣品中純化總RNA(Chomczynski P.，Sacchi N.，Single step method of RNA isolation byacid guanidium thiocyanate-phenol-chloroform extraction.Anal Biochem1987，162156-59)。將20μg RNA在1％甲醛瓊脂糖凝膠上分級分離并移至尼龍膜上(Hybond N，Amersham UK)，與羅非魚IGF-IcDNA探針雜交，隨后與人甘油醛-3-磷酸脫氫酶cDNA再雜交(GAPDH，由Dr.Bryan Williams惠贈，Cleveland Foundation，OH，USA)以將信號標(biāo)準(zhǔn)化。用Hewlett Packard Scanjet Plus掃描儀經(jīng)掃描凝膠的數(shù)字圖像處理而量化雜交信號。將圖像用Bandleader計算機(jī)程序處理。結(jié)果以RNA任意單位表示。
血清GH水平通過ELISA使用羅非魚的兩個單克隆抗體加以確定(Munoz等，待發(fā)表)。
由于硬骨魚GH水平一天中變化非常明顯，因此在處理之前和處理之后針對每條魚均取血清樣品。圖1示出在腹膜內(nèi)經(jīng)所述六肽處理后15分鐘的時程內(nèi)血清GH水平增加。在硬骨魚中，與在其它脊椎動物中一樣，GH的生長促進(jìn)作用主要通過誘導(dǎo)IGF而介導(dǎo)。應(yīng)答腹膜內(nèi)注射GHRP-6，在30分鐘時肝臟IGF mRNA水平明顯增加，在注射后6小時期間恢復(fù)正常水平(圖1)。
實施例2在幼羅非魚(Oreochromis sp)中GHRP-6的生長促進(jìn)活性2.1腹膜內(nèi)注射將Aquadique Aquaculture Station(Havana，Cuba)提供的幼雜種羅非魚(Oreochromis aureus)在500升容器中馴化，所述容器中具有25℃的再循環(huán)淡水，恒定光周期(14小時光照及10小時黑暗)，并喂食商業(yè)制備的飼料(CENPALAB，Havana，Cuba)。每日施用二次占體重5％的日常定量飼料直至用于實驗。
將GHRP-6(BACHEM，Switzerland)在PBS中稀釋，并在三周期間每周注射兩次0.1μg/g魚體重(gbw)。將所述肽施用于一組8條平均體重為61±14.3g的雄性羅非魚中，并將7條平均體重為61.41±29.67g的雄性羅非魚注射PBS作為對照。
每周測定體重克數(shù)。在所有實驗中，將動物均用微芯片標(biāo)記(Stoelting Co.Wood Dale，美國)。
通過在腹膜內(nèi)注射0.1μg/gbw處理三周后生長速度的增加確定了腹膜內(nèi)施用GHRP-6進(jìn)行處理明顯刺激生長(p＜0.05)(圖2)。
2.2口服施用評價口腔插管服用所述肽(圖3)及包囊化的所述肽(圖4)的其它肽釋放途徑，與各自對照組相比在這兩種處理中生長速度在統(tǒng)計學(xué)上明顯增加，在后者情況中，在處理結(jié)束時體重存在統(tǒng)計學(xué)差異。這兩種口腔插管處理之間的對比示出用包囊化肽處理組體重增加較高(p＜0.05)。
將GHRP-6肽在磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中稀釋并通過一個塑料管施用于平均體重為87.22±14.1g的一組7條雄性羅非魚的咽腔中。平均體重為89.22±7.66g的對照組施用PBS(7條，均為雄性羅非魚)。在三周期間用0.1μg/gbw一周處理兩次。每周測定體重克數(shù)(圖3)。
為將所述肽包囊化，如Knorr等于1988年所述使用脫乙酰殼多糖和藻酸包囊化的肽獲得所述膠囊。所述六肽GHRP-6通過一個塑料管施用于平均體重為89.09±8.38g的7條雄性羅非魚的咽腔。將無所述肽的聚合物珠施用于平均體重為89.86±13.54的7條雄性羅非魚作為對照。以0.14μg/gbw每周處理兩次(圖4)。
表3A本發(fā)明的組合物對不同蘋果品種中褐斑形成的影響
bCA是指如實施例2所示的控制環(huán)境。
本發(fā)明的組合物可用于抑制許多品種蘋果中形成褐斑。如表3A所示，本發(fā)明的組合物減少了各種蘋果中形成褐斑，例如但不限于Morspur麥金托什蘋果、Marshall麥金托什蘋果、可得蘭蘋果和紅富士。本發(fā)明的組合物對Empire蘋果(耐褐斑)的影響用作對照。
這些結(jié)果暗示本發(fā)明的制劑不損傷水果。而且，在大多數(shù)蘋果中觀察到減少了褐斑形成，無論這些蘋果是貯藏在空氣中還是貯藏在控制環(huán)境條件下。
C)本發(fā)明的組合物對蘋果的表皮褐斑形成的影響在最佳成熟期收獲蘋果，所述最佳成熟期是通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的淀粉試驗指示的。將蘋果(50-60個)在實施例1的制劑(以10ml/l稀釋)中浸泡5分鐘并在室溫下干燥。將這些浸泡過的蘋果<p>表2在用GHRP-6通過浸沒處理的羅非魚的不同組群中血細(xì)胞比容值
*無顯著差異，多秩檢驗表3在通過GHRP-6浸沒處理的羅非魚中原生動物車輪蟲(Trichodina sp)的侵潤強(qiáng)度(I)和范圍(extension，E)
Ia侵潤強(qiáng)度Eb侵潤范圍*顯著差異，多秩檢驗表4在通過GHRP-6浸沒處理的羅非魚中每條魚腮中Helmintosmonogeneos的侵潤強(qiáng)度(I)和范圍(E)
Ia侵潤強(qiáng)度Eb侵潤范圍*顯著差異，多秩檢驗表5通過GHRP-6浸沒處理后羅非魚肌肉中濕度平均值
*顯著差異，多秩檢驗表6通過GHRP-6浸沒處理后羅非魚中蛋白質(zhì)濃度平均值
*顯著差異，多秩檢驗實施例4在通過GHRP-6浸沒處理的南美白對蝦(Litopenaeusschmitti)中GHRP-6的生長促進(jìn)活性將三種不同劑量的GHRP-6通過浸沒用于蝦幼體組中。每三天應(yīng)用一次。每組應(yīng)用四次，對照組接受牛血清白蛋白(BSA)。所述處理為如下每1個小時在含有一定濃度的GHRP-6/升海水中進(jìn)行組10.001mg/L組20.01mg/L組30.1mg/L組41mgBSA/L用0.1mg/L GHRP-6處理組改良蝦幼體的質(zhì)量，示出平均重量增加153％，平均大小增加26％，腮分支數(shù)和喙骨數(shù)均增加。在所有情況中，所述差異均是有統(tǒng)計學(xué)意義的(圖5)。
全部處理的動物示出肌肉中較低的水含量及RNA/DNA、蛋白質(zhì)/DNA之間的比值增加提示GHRP-6對幼體肌肉中代謝的激活作用(圖6和7)。
這些結(jié)果對甲殼動物幼體培育質(zhì)量非常重要。
在生產(chǎn)條件下，GHRP-6處理組與非處理組相比幼體的存活率增加20％。在同樣的分析中，重量增加115％，大小增加37％。另一方面，所述六肽處理組中動物的一致性較高，重量和大小的變化系數(shù)較低(圖8)。
實施例5在肌內(nèi)注射GHRP-6處理的成體南美白對蝦中GHRP-6的生長促進(jìn)活性在大約15g的成體蝦的第二和第三腹部節(jié)段之間注射50μlGHRP-6。每三天注射一次，劑量為1μgGHRP-6/g蝦重。對照組接受相同濃度的BSA注射。每組15只動物。測定的變量是所述肽處理組重量和大小。在GHRP-6處理組動物中觀測到顯著差異(p＜0.001)，增加100％-150％。
將所述動物維持在池塘中的網(wǎng)中(0.8cm)。池塘水溫為25℃及自然光周期。
實施例6用包含在食物中的GHRP-6處理的南美白對蝦中GHRP-6的生長促進(jìn)活性在后幼體南美白對蝦的食物中包含1％的GHRP-6。所述肽通過Knorr報道的方法包囊化(Knorr D.和M.Daly(1988)，Mechanics anddiffusional changes observed in multi-layer chitosan/alginate coacervatecapsules.Process Biochemistry，48-50)。對照組喂食含有1％BSA的食物。在實驗開始及結(jié)束時測定平均重量和大小。實驗持續(xù)時間為30天。
在后幼體蝦的食物中包含GHRP-6與對照組相比生長速度改良30％-40％。顯著差異(p＜0.001)。
6.1豐年蝦(Artemia salina)包囊化將GHRP-6在Artemia中包囊化以喂食給后幼體南美白對蝦和Litopenaeus vanamei。為進(jìn)行包囊化，將所述肽以10mg/L濃度加入豐年蝦中1小時，收集Artemia并在鹽水溶液中洗滌。每天四次喂食所述后幼體蝦，持續(xù)一個月。對照組接受以同樣濃度在Artemia中包囊化的BSA。
在豐年蝦中包囊化的GHRP-6改良蝦幼體的重量和大小，增加30％-40％。與對照組相比有顯著差異(p＜0.001)。
序列表<110>遺傳和生物技術(shù)工程中心<120>刺激水生生物生長及抗病性的方法<130>organismos acauticos<140>
<141>
<150>CU 2002-0020<151>2002-01-24<160>1<170>PatentIn Ver.2.1<210>1<211>6<212>PRT<213>Secuencia Artificial<220>
<221>PEPTIDE<222>(1)..(6)<223>GHRP6<220>
<223>Descripción de la Secuencia ArtificialGHRP-6<400>1His D-Trp Ala Trp D-Phe Lys1
權(quán)利要求
1.一種刺激魚類和甲殼動物生長及抗病性的方法，其特征在于使用具有以下序列的肽GHRP-6His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2。
2.權(quán)利要求1的方法，所述方法的特征在于在配制的飼料中使用GHRP-6以刺激魚類和甲殼動物生長及抗病性，濃度為0.01-50μg肽/g動物濕重。
3.權(quán)利要求1的方法，所述方法的特征在于定期注射使用GHRP-6以刺激魚類和甲殼動物生長及抗病性，濃度為0.01-50μg肽/g動物濕重。
4.權(quán)利要求1的方法，所述方法的特征在于通過浸沒在淡水和海水中使用GHRP-6刺激魚類和甲殼動物生長及抗病性，濃度為10-500μg肽/升，間隔1到7天。
5.權(quán)利要求1的方法，所述方法的特征在于在飼料中以包囊化形式使用GHRP-6以刺激魚類和甲殼動物生長及抗病性，濃度為0.05-10μg肽/g動物濕重，間隔1到7天。
6.權(quán)利要求1-5的方法，所述方法的特征在于其在羅非魚(Oreochromis sp.)中應(yīng)用。
7.權(quán)利要求1-5的方法，所述方法的特征在于其在鮭魚(Salmonsp.)中應(yīng)用。
8.權(quán)利要求1-5的方法，所述方法的特征在于其在南美白對蝦(Litopenaeus schmitti)，Litopenaeus vanamei中應(yīng)用。
9.權(quán)利要求8的方法，所述方法的特征在于其在對蝦(Penaeussp.)中應(yīng)用。
10.權(quán)利要求1-9的方法，所述方法的特征在于其用于預(yù)防和治療寄生蟲感染及其它疾病。
11.權(quán)利要求10的方法，所述方法的特征在于其用于預(yù)防和治療由Trichodina sp.和Helmintos monogeneos所致寄生蟲感染。
12.權(quán)利要求10的方法，所述方法的特征在于其用于預(yù)防和治療海虱所致寄生蟲感染。
13.權(quán)利要求10的方法，所述方法的特征在于其用于預(yù)防和治療外寄生物所致的寄生蟲感染。
14.一種刺激魚類和甲殼動物生長及抗病性的獸醫(yī)學(xué)配方，所述配方的特征在于使用具有以下序列的肽GHRP-6His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2。
15.權(quán)利要求14的應(yīng)用，所述應(yīng)用的特征在于其以注射、口服或浸沒施用方式應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于增加商品魚和甲殼動物生長速度的化學(xué)合成方法。本發(fā)明的目的是提供GHRP－6以直接或間接誘導(dǎo)生長激素等的釋放，使魚類血液中循環(huán)生長激素水平增加。所述肽是穩(wěn)定的，可溶的及是生物學(xué)活性的。所述肽能刺激魚類和甲殼動物生長，改良幼體質(zhì)量，及增加抗病原體抗性、干重、肌肉中的蛋白質(zhì)濃度及RNA。
文檔編號A61K38/04GK1622821SQ03802778
公開日2005年6月1日 申請日期2003年1月22日 優(yōu)先權(quán)日2002年1月24日
發(fā)明者馬里奧·巴勃羅·埃斯特拉達(dá)加西亞, 麗貝卡·馬丁內(nèi)斯羅德里格斯, 阿米爾卡·阿雷納爾克魯斯, 拉斐爾·馬科斯·皮門特爾佩雷斯, 安東尼奧·莫拉萊斯羅哈斯, 歐洛希奧·皮門特爾巴斯克斯, 亞歷山大·埃斯皮諾薩巴斯克斯, 卡門·阿達(dá)伊·加西亞莫利納, 埃德奈達(dá)·卡布雷拉岡薩雷斯, 米爾塔·維恩諾伊坎帕, 塞爾希奧·托萊多佩雷斯, 奧林匹婭·卡里略法爾內(nèi)斯, 克勞迪納·薩爾迪瓦穆尼奧斯 申請人:遺傳和生物技術(shù)工程中心