專利名稱：一種治療更年期綜合征的藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療更年期綜合征的藥物，尤其是治療婦女老年性、萎縮性陰道炎的藥物。
背景技術(shù)：
女性約在40歲前后，或早或晚將進(jìn)入更年期。此時(shí)期的女性將經(jīng)受或輕或重的一系列更年期綜合征，給她們帶來痛苦。目前，國內(nèi)外常采用激素替代療法(HRT)來治療婦女更年期綜合征。國內(nèi)外激素替代療法常用藥有倍美麗、利維愛(Livial)等。倍美麗有某些潛在的副作用，已被許多國家停止使用。利維愛(Livial)具有雌激素、雄激素和孕酮的作用，作為仿甾體人工合成物質(zhì)，對(duì)子宮內(nèi)膜的刺激作用較大。
通常，婦女在絕經(jīng)后，約有30％以上患萎縮性陰道炎。這種病癥也會(huì)發(fā)生在手術(shù)切除卵巢后或惡性腫瘤盆腔放射治療后的病人。萎縮性陰道炎的外陰多呈老年性萎縮外觀?；颊叱榘讕г龆啵怅庰W、疼痛等癥狀而煩躁不安。這些病癥的內(nèi)分泌學(xué)方面的主要原因是雌激素缺乏。目前，國內(nèi)外通常采用陰道清潔療法、抗菌藥物和雌激素來治療。
雖然激素治療法對(duì)更年期綜合征和萎縮性陰道炎均有療效，但臨床上不主張經(jīng)常應(yīng)用雌激素來治療萎縮性陰道炎，因?yàn)檫^量服用雌激素常會(huì)引起子宮出血，從而增加致癌的危險(xiǎn)性。也就是說，激素療法有增加子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌危險(xiǎn)性(《關(guān)于絕經(jīng)的研究8.更年期和絕經(jīng)后期使用雌激素和孕酮類藥物進(jìn)行治療產(chǎn)生的各種危害，特別是致癌的危害》人民衛(wèi)生出版社1985；55-84)等副作用，人們需要尋求更安全、治療效果更好的藥物。
理想的性激素替代療法應(yīng)既能有效緩解癥狀，預(yù)防泌尿生殖器官萎縮，預(yù)防絕經(jīng)后骨加速丟失，保護(hù)心血管功能，促進(jìn)心理健康，提高社交能力；又不會(huì)引起陰道出血；不會(huì)增加致癌的危險(xiǎn)。
普拉睪酮是人體腎上腺皮質(zhì)網(wǎng)狀層產(chǎn)生分泌的一種激素前體?？蓞⑴c合成腎上腺皮質(zhì)、睪丸、卵巢等部位的多種甾體激素。在體內(nèi)，它本身可由膽固醇合成。游離的普拉睪酮主要與硫酸根結(jié)合成硫酸脂的形式，即硫酸普拉睪酮鈉進(jìn)入血液循環(huán)。普拉睪酮和硫酸普拉睪酮鈉作為一種激素前體，在體內(nèi)可根據(jù)人體激素內(nèi)環(huán)境的需要，顯示雄激素和雌激素的雙向活性。硫酸普拉睪酮鈉水平對(duì)于維持人體內(nèi)分泌環(huán)境，保持正常體能和機(jī)能，對(duì)人體生理和心理壽命都發(fā)揮著極其重要的作用。體內(nèi)硫酸普拉睪酮鈉含量的下降會(huì)導(dǎo)致一系列與年齡相關(guān)疾病的發(fā)生(國外醫(yī)學(xué)情報(bào)1999；20(1)32)。
硫酸普拉睪酮鈉主要的藥學(xué)用途是用于妊娠晚期，產(chǎn)程中、晚期引產(chǎn)，促使宮頸軟化，減輕分娩痛苦。作為孕婦子宮口發(fā)育不良的促成熟藥物。到目前為止，并未作為治療更年期綜合征，尤其是老年性、萎縮性陰道炎的藥物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種治療更年期綜合征，尤其是老年性、萎縮性婦女陰道炎的藥物，該藥物無激素所引起的致癌危險(xiǎn)性，無利維愛或常規(guī)雌激素替代療法等所用的甾體物質(zhì)對(duì)子宮內(nèi)膜較大的刺激作用。
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種治療更年期綜合征，尤其是老年性、萎縮性婦女陰道炎的藥物，它含有藥用有效量的硫酸普拉睪酮鈉。
本發(fā)明提供的一種治療更年期綜合征，尤其是老年性、萎縮性婦女陰道炎的藥物含有藥用有效量的硫酸普拉睪酮鈉，所述硫酸普拉睪酮鈉是粒度范圍為0.1微米～500微米的微粉顆粒。
本發(fā)明提供的一種治療更年期綜合征，尤其是老年性、萎縮性婦女陰道炎的藥物含有藥用有效量的硫酸普拉睪酮鈉及可藥用的載體和/或賦形劑。
本發(fā)明的藥物可采用的劑型是片劑、膠囊、顆粒劑、栓劑、軟膏劑、粉針劑或其他劑型。
當(dāng)本發(fā)明的藥物采用的劑型是針劑時(shí)，可含有硫酸普拉睪酮鈉和常規(guī)溶劑，例如注射用水。當(dāng)本發(fā)明的藥物采用的劑型是軟膏劑時(shí)，可含有硫酸普拉睪酮鈉和常規(guī)的軟膏基質(zhì)。
本發(fā)明提供的藥物是片劑、顆粒劑或膠囊劑時(shí)，可含有硫酸普拉睪酮鈉0.5～98％(重量百分?jǐn)?shù))，優(yōu)選1～50％，及可藥用的輔料。所述的硫酸普拉睪酮鈉的含量，按照常規(guī)制藥技術(shù)，根據(jù)劑型不同，用量差別很大，如膠囊，可達(dá)90％以上，片劑就要少得多。輔料的類型及含量按照常規(guī)制藥技術(shù)而定，例如，稀釋劑或填充劑可為0.1～95％，粘合劑可為0.1～30％，崩解劑可為0.5～30％，潤滑劑可為0.5～3％。如需要還可加適量矯味劑。本發(fā)明提供的藥物中還可含有維他命C、E、D、微量元素、抗氧化劑等。
所述硫酸普拉睪酮鈉的結(jié)構(gòu)式如下 其化學(xué)名稱為3β-羥基雄甾-5-烯-17-酮硫酸酯鈉鹽。
所述稀釋劑可選用稀釋劑是乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、淀粉及其衍生物、糊精、二氧化硅中的一種或數(shù)種。其含量按照常規(guī)制藥技術(shù)，以劑型和工藝而定，可為1％～95％。
所述粘合劑可選用粘合劑是糊精、淀粉、預(yù)膠化淀粉、聚乙烯醇、羧甲基纖維素納、羥丙基甲纖維素中的一種或數(shù)種。
所述崩解劑是淀粉、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基纖維素納、低取代羥丙纖維素中的一種或數(shù)種。其含量范圍可為1％～20％。
本發(fā)明的藥物可由活性組分硫酸普拉睪酮鈉和各種輔料按照常規(guī)方法制得。
本發(fā)明的藥物的制備方法可以是先按照常規(guī)方法將活性組分硫酸普拉睪酮鈉加工成粒度范圍為0.1微米～500微米的微粉顆粒，再將其與各種輔料按照常規(guī)方法制備出本發(fā)明的藥物。
本發(fā)明的藥物的施用方式有口服、粘膜或皮膚吸收、靜脈注射等。
本發(fā)明的藥物施用時(shí)的每日劑量可為10mg到2000mg。
本發(fā)明提供的藥物對(duì)更年期綜合征，尤其是老年性、萎縮性婦女陰道炎具有很好的療效，且本發(fā)明的藥物臨床作用緩和，毒副作用小，對(duì)子宮內(nèi)膜無刺激，不會(huì)引起陰道出血，沒有普通激素療法帶來的致癌危險(xiǎn)性。
本發(fā)明提供的藥物的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果也證明本發(fā)明的藥物具有促進(jìn)摘除卵巢大鼠子宮重量增加作用；使子宮腺體數(shù)目增多作用；有促進(jìn)摘除卵巢大鼠產(chǎn)生動(dòng)情期的作用，使陰道角化上皮細(xì)胞數(shù)目增加，且量效關(guān)系和時(shí)效關(guān)系高度相關(guān)。表明本發(fā)明的藥物具有雌激素樣作用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果還表明本發(fā)明藥物制劑對(duì)摘除卵巢動(dòng)物子宮內(nèi)膜的增生作用比正常動(dòng)物組和施用利維愛摘除卵巢的對(duì)照組均小。這些結(jié)果表明本發(fā)明藥物對(duì)子宮內(nèi)膜刺激作用很小。本發(fā)明藥物對(duì)清潔陰道有明顯作用。臨床實(shí)驗(yàn)也證明本發(fā)明的藥物對(duì)治療更年期綜合征，尤其是治療婦女老年性、萎縮性陰道炎，有很好的療效。
本發(fā)明藥物中的活性組分硫酸普拉睪酮鈉可選擇性地作用于靶組織。因此，對(duì)子宮內(nèi)膜刺激作用很小，不會(huì)引起陰道出血，沒有激素所帶來的致癌危險(xiǎn)性。而普通激素療法容易引起陰道出血等副作用，存在致癌的危險(xiǎn)性。所以本發(fā)明藥物克服了已有藥物的缺點(diǎn)，是治療更年期綜合征、尤其是治療婦女老年性、萎縮性陰道炎，療效好、副作用小的藥物。


圖1是正常組子宮內(nèi)膜及腺體切片的顯微鏡照片。
圖2是摘除組子宮內(nèi)膜及腺體切片的顯微鏡照片。
圖3是本發(fā)明藥物制劑小劑量組子宮內(nèi)膜及腺體切片的顯微鏡照片。
圖4是本發(fā)明藥物制劑中劑量組子宮內(nèi)膜及腺體切片的顯微鏡照片。
圖5是本發(fā)明藥物制劑大劑量組子宮內(nèi)膜及腺體切片的顯微鏡照片。
圖6是對(duì)比制劑組子宮內(nèi)膜及腺體切片的顯微鏡照片。
圖7是患者口服本發(fā)明提供的藥物制劑后，體內(nèi)血液中藥物濃度和服藥時(shí)間的關(guān)系圖。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1將硫酸普拉睪酮鈉(藥用硫酸普睪酮鈉，符合中國藥典2000年版，江蘇揚(yáng)州制藥廠生產(chǎn))25克通過氣流粉碎機(jī)等方法加工成粉狀使粒徑為20～100微米。將粉狀硫酸普拉睪酮鈉與39克預(yù)膠化淀粉(預(yù)膠化淀粉，藥用，中國藥典2000年版，湖州食品化工聯(lián)合公司生產(chǎn))和16克微晶纖維素(微晶纖維素，藥用，中國藥典2000年版，上海趙屯制藥廠生產(chǎn))混合均勻，加入濃度為10％(重量百分?jǐn)?shù))的淀粉漿適量(其加入量以使所得混合物按常規(guī)方法適合制粒為宜)，混合均勻，制成軟材，20目尼龍篩制粒，50℃干燥2小時(shí)，18目篩整粒，加入5％(占成品重量)硬脂酸鎂，混勻，壓片，制得直徑為6毫米的1000片本發(fā)明提供的藥物制劑A。
實(shí)施例2按照實(shí)施例1的方法將市售普通粒度的硫酸普拉睪酮鈉(藥用硫酸普睪酮鈉，符合中國藥典2000年版，江蘇揚(yáng)州制藥廠生產(chǎn))與其他組分混合制備本發(fā)明藥物制劑B。
實(shí)施例3考察實(shí)施例1所得制劑A的顆粒流動(dòng)性、壓片難易程度以及壓片后的崩解、溶出性能，結(jié)果列于下表中。從表中數(shù)據(jù)可見，制劑A顆粒流動(dòng)性好，藥片成型良好，崩解度、溶出度等均符合要求。
表1 壓片后質(zhì)量檢查結(jié)果 實(shí)施例4一、供試樣品的制備1、根據(jù)實(shí)驗(yàn)分組的要求，取實(shí)施例1所得的制劑A一定量，用乳缽磨碎成粉末，加注射用水100ml，按照不同用量配制不同濃度的供試液。
2、對(duì)比制劑由活性組分利維愛(7-甲基異炔諾銅2.5mg/片，荷蘭歐加農(nóng)公司進(jìn)口，南京歐加農(nóng)制藥有限公司在荷蘭歐加農(nóng)公司的監(jiān)督和獨(dú)家授權(quán)下分裝的市售商品，批號(hào)L9-4750-10，批準(zhǔn)文號(hào)(96)衛(wèi)藥準(zhǔn)字J-08號(hào))。加注射用水100ml，制得一定濃度的利維愛混懸液。大鼠給藥量為0.284mg/kg。
3、正常組，模型對(duì)照組，給予注射用水。
二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SD大白鼠，雌性，體重200-220g，(由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部提供。合格證號(hào)醫(yī)動(dòng)字第01-3049)。動(dòng)物飼養(yǎng)條件室溫25℃，濕度65％，24小時(shí)排風(fēng)，自由飲水。飼料北京實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供，普通鼠全價(jià)顆粒飼料1號(hào)，京動(dòng)管準(zhǔn)字(1994)第009號(hào)，京動(dòng)管質(zhì)字(1994)第007號(hào)。
三、實(shí)驗(yàn)分組以灌胃方式，按每100g體重0.5ml的容量給予以下各組大鼠供試樣品。
正常對(duì)照組稱正常組，給予未摘除卵巢的大鼠等容量注射用水。
模型對(duì)照組稱摘除組，給予已摘除卵巢的大鼠等容量注射用水。
大劑量組給予已摘除卵巢的大鼠適量實(shí)施例1制得的含本發(fā)明提供的藥物制劑A的供試液，以使給藥量為250mg/kg的硫酸普拉睪酮鈉。
中劑量組給予已摘除卵巢的大鼠適量實(shí)施例1制得的含本發(fā)明提供的藥物制劑A的供試液，以使給藥量為50mg/kg的硫酸普拉睪酮鈉。
小劑量組給予已摘除卵巢的大鼠適量實(shí)施例1制得的含本發(fā)明提供的藥物制劑A的供試液，以使給藥量為10mg/kg的硫酸普拉睪酮鈉。
陽性對(duì)照組，稱對(duì)比制劑組，給予已摘除卵巢的大鼠0.284mg/kg利維愛。
四、實(shí)驗(yàn)方法1、老年性、萎縮性陰道炎模型建立摘除卵巢手術(shù)將試驗(yàn)鼠用戊巴比妥鈉麻醉，腹位固定，取最末肋骨下，腑中線和距脊柱外側(cè)約2cm交叉處，剪除長毛，切開皮膚和背肌約1.5-2cm，切口視野中可見一乳白色發(fā)亮的脂肪團(tuán)，便可見到粉紅色或黃紅色的卵巢，剪取時(shí)，先將卵巢下輸卵管連同脂肪一起結(jié)扎，再摘除卵巢，術(shù)后順勢將子宮角送回腹腔中，同法摘除另一側(cè)卵巢(朱愉，多秀瀛主編《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的疾病模型》天津科技翻譯出版公司出版，1997)。
涂片用滴管吸取少量生理鹽水，插入術(shù)后經(jīng)過清潔飼養(yǎng)5天的大鼠陰道內(nèi)約0.5cm，反復(fù)抽吸數(shù)次。然后將所吸液體滴于載玻片，自然晾干后，泡入5％的美蘭染色液中10分鐘，用水沖凈，干后于顯微鏡下觀察。
動(dòng)情期觀察間情期主要有大量多核的白細(xì)胞，也有少量的上皮細(xì)胞。動(dòng)情前期有大量上皮細(xì)胞，呈粒狀胞漿，尚有少量角化上皮細(xì)胞，但無白細(xì)胞。動(dòng)情期主要有大量角化上皮細(xì)胞，形狀大而不規(guī)則，間有少量上皮細(xì)胞。動(dòng)情后期有大量白細(xì)胞，有融合的角化上皮細(xì)胞。
陰道清潔度參照臨床人體陰道清潔度判定方法(江森、滕清柱主編《婦科學(xué)》山東科學(xué)技術(shù)出版社、1986年月3月9頁)以陰道涂片中的白細(xì)胞計(jì)數(shù)判定清潔度。
制片方法將經(jīng)美蘭染色的陰道涂片用10％福爾馬林固定10分鐘，沖洗后經(jīng)H.E(蘇木精、伊紅)染色，再用各級(jí)酒精(70％-80％-90％-95％-95％-100％-100％-二甲苯-二甲苯)分色脫水透明-封固(樹膠)。
觀察方法在高倍顯微鏡下統(tǒng)計(jì)白細(xì)胞數(shù)，每一張涂片計(jì)數(shù)5個(gè)不同的視野，再計(jì)算均值清潔度I-5個(gè)視野白細(xì)胞數(shù)均值少于50個(gè)。
清潔度II-5個(gè)視野白細(xì)胞計(jì)數(shù)均值在50～200個(gè)。
清潔度III-5個(gè)視野白細(xì)胞計(jì)數(shù)＞200～1500個(gè)。
判定方法(1)以涂片中白細(xì)胞數(shù)多少的動(dòng)物數(shù)判定(經(jīng)確切概率法計(jì)算)。
(2)以白細(xì)胞計(jì)數(shù)(進(jìn)行t檢驗(yàn))。
2、試驗(yàn)選用連續(xù)涂片五天，均未出現(xiàn)動(dòng)情期的大鼠進(jìn)行以下試驗(yàn)。
給藥分三批進(jìn)行，分別按照下述方法給藥20天、30天、50天。并于末次給藥后的次日進(jìn)行涂片檢查，稱體重然后斷頭處死大鼠，于腹正中線，剪開腹腔，摘除子宮，稱重，然后泡于10％福爾馬林液中進(jìn)行病理切片，作鏡下檢查。
觀察指標(biāo)陰道角化上皮細(xì)胞(陰道涂片)、陰道清潔度、子宮重量(稱重法)、子宮內(nèi)膜及腺體(病理切片)。
五、試驗(yàn)結(jié)果(1)對(duì)陰道角化上皮細(xì)胞的影響除正常組外，給藥前各組陰道涂片角化上皮細(xì)胞均為零，以下為各組涂片所處周期的動(dòng)物數(shù)占該組動(dòng)物總數(shù)的百分?jǐn)?shù)。
表2.對(duì)大鼠陰道角化上皮細(xì)胞的影響

備注0未見角化細(xì)胞，+偶見角化細(xì)胞，++稍多角化細(xì)胞，+++較多角化細(xì)胞，++++大量角化細(xì)胞；n為動(dòng)物數(shù)，其他數(shù)據(jù)均為％，--為0。
大鼠陰道涂片結(jié)果見表2，從中可看出①正常組動(dòng)物大部分處于稍多角化細(xì)胞(10～30％)、較多角化細(xì)胞(20％～40％)和大量角化細(xì)胞(30～80％)狀態(tài)。
②摘除組動(dòng)物大部分涂片無角化細(xì)胞(40％)和偶見角化細(xì)胞(40、50、60％)狀態(tài)，少部分是稍多角化細(xì)胞(10～20％)狀態(tài)。
③陽性藥對(duì)照組小部分動(dòng)物是偶見角化細(xì)胞(10％)狀態(tài)，部分是稍多角化細(xì)胞(10～20％)和較多角化細(xì)胞(20～30％)狀態(tài)，主要是大量角化細(xì)胞(60、80、40％)狀態(tài)。故隨著給藥時(shí)間的延長角化細(xì)胞有增多趨勢。
④使用本發(fā)明藥物制劑A的小劑量組(10mg/kg)20天時(shí)主要是偶見角化細(xì)胞(60％)狀態(tài)，部分是稍多角化細(xì)胞(30％)和較多角化細(xì)胞(10％)狀態(tài)。30天時(shí)部分是無角化細(xì)胞(30％)和偶見角化細(xì)胞(20％)狀態(tài)，主要是稍多角化細(xì)胞(50％)狀態(tài)。50天時(shí)部分是偶見角化細(xì)胞(20％)，主要是稍多角化細(xì)胞(45％)和較多角化細(xì)胞(33％)狀態(tài)。所以，角化上皮細(xì)胞隨給藥時(shí)間的延長有增多趨勢。
⑤使用本發(fā)明藥物制劑A的中劑量組(50mg/kg)20天時(shí)動(dòng)物分布于偶見角化細(xì)胞(30％)、稍多角化細(xì)胞(30％)、較多角化細(xì)胞(20％)和大量角化細(xì)胞(20％)狀態(tài)。30天時(shí)主要是稍多角化細(xì)胞(45％)、較多角化細(xì)胞(33％)和大量角化細(xì)胞(22％)狀態(tài)。50天時(shí)部分是稍多角化細(xì)胞(25％)，主要分布于較多角化細(xì)胞(50％)和大量角化細(xì)胞(25％)狀態(tài)。
⑥使用本發(fā)明藥物制劑A的大劑量組(250mg/kg)
20天時(shí)部分是偶見角化細(xì)胞(10％)狀態(tài)、主要是稍多角化細(xì)胞(40％)、較多角化細(xì)胞(10％)和大量角化細(xì)胞(40％)狀態(tài)。30天時(shí)主要分布于較多角化細(xì)胞(50％)和大量角化細(xì)胞(50％)狀態(tài)。50天時(shí)部分稍多角化細(xì)胞(11％)和較多角化細(xì)胞(33％)狀態(tài)，主要是大量角化細(xì)胞(56％)狀態(tài)。
從上述結(jié)果可看出，本發(fā)明的藥物具有促進(jìn)摘除卵巢大鼠產(chǎn)生動(dòng)情期作用，量效關(guān)系呈現(xiàn)劑量依賴性的使陰道角化上皮細(xì)胞數(shù)目增加。給藥20、30、50天以增加陰道角化上皮細(xì)胞數(shù)目最多時(shí)，三個(gè)劑量組按藥理學(xué)常規(guī)統(tǒng)計(jì)方法計(jì)算出的相關(guān)系數(shù)r分別為0.9333(20天)、0.9559(30天)0.9537(50天)，表明高度相關(guān)(即藥物的用量與陰道角化上皮細(xì)胞數(shù)目增加有很大的關(guān)系)。時(shí)效關(guān)系按藥理學(xué)常規(guī)統(tǒng)計(jì)方法計(jì)算20、30、50天的相關(guān)系數(shù)分別為r＝0.9972(50mg/kg)、r＝0.9449(250mg/kg)，表明高度相關(guān)(即藥物的使用時(shí)間與陰道角化上皮細(xì)胞數(shù)目增加有很大的關(guān)系)。說明本發(fā)明藥物起到了雌激素樣作用，明顯促進(jìn)陰道恢復(fù)正常，有效緩解老年性、萎縮性陰道炎患者因缺乏雌激素所導(dǎo)致的陰道不適、干燥、易發(fā)炎等癥狀。
(2)陰道清潔度表3列出了大鼠的清潔度的結(jié)果。
表3.大鼠口服本發(fā)明藥物制劑和對(duì)比制劑30天不同清潔度的動(dòng)物數(shù)

經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)的確切概率法計(jì)算Δ表示差異度P＜0.05，ΔΔ表示差異度P＜0.01結(jié)果表明①摘除組大鼠陰道的自潔作用最差，故III度動(dòng)物數(shù)為7只，鏡下可見滿視野的白細(xì)胞。個(gè)別動(dòng)物涂片可見I、II度，可能與實(shí)驗(yàn)操作有關(guān)。②給予本發(fā)明藥物制劑A的三個(gè)劑量組，隨給藥量增大，III度動(dòng)物數(shù)明顯減少，小劑量組(10mg/kg)III度占33％(P＜0.05，表示有差異，即藥物與大鼠清潔度有關(guān)系)，中劑量組III度占22％(P＜0.05)，大劑量組III度占10％(P＜0.01，表示有明顯差異，即藥物與大鼠清潔度有顯著相關(guān))。I、II度小劑量組、中劑量組和大劑量組，分別為67％、78％和90％。③本發(fā)明藥物制劑A的大劑量組陰道自潔作用與對(duì)比制劑組(I、II度占89％、III度占11％)相似。所以本發(fā)明藥物可提高陰道的清潔度，可治療老年性、萎縮性陰道炎。
摘除組、對(duì)比制劑組及本發(fā)明制劑不同劑量組的大鼠陰道涂片H.E染色后在高倍鏡下的白細(xì)胞計(jì)數(shù)，結(jié)果見表4。
表4 大鼠口服本發(fā)明制劑對(duì)陰道清潔度的影響

與摘除組相比*表示P＜0.05，**表示P＜0.01括號(hào)內(nèi)的數(shù)為動(dòng)物數(shù)目。
從表中結(jié)果可見①摘除組陰道清潔度以III度為多(n＝7)，高倍視野下白細(xì)胞為滿視野，計(jì)數(shù)均值約1000-1500個(gè)。給藥組雖有III度，但細(xì)胞數(shù)明顯減少，本發(fā)明制劑的小劑量和中劑量組與摘除組相比均有顯著性差異(P＜0.05及P＜0.01，同上，即藥物與大鼠清潔度分別是有關(guān)系和顯著相關(guān))。②本發(fā)明制劑各劑量組陰道清潔度均以I度為多，而且細(xì)胞數(shù)明顯減少(2～8個(gè))，因摘除組I度動(dòng)物數(shù)為1故無法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
本發(fā)明藥物制劑可提高陰道的清潔度，使陰道內(nèi)白細(xì)胞數(shù)明顯減少。大劑量組的作用與對(duì)比制劑組相似。本發(fā)明藥物對(duì)治療老年性、萎縮性陰道炎、清潔陰道，有明顯療效。
(3).對(duì)子宮重量的影響對(duì)各組動(dòng)物的子宮重量的考察結(jié)果見表5和6。摘除組子宮重量各時(shí)間點(diǎn)基本無改變，均維持在0.16g水平，故將給藥組與摘除組相比較。
表5 本發(fā)明制劑對(duì)摘除卵巢大鼠子宮重量(g，X±SD)的影響

各組動(dòng)物數(shù)同表4，與摘除組比**表示p＜0.01，與對(duì)比制劑組相比ΔΔ表示p＜0.01表6 本發(fā)明制劑對(duì)摘除卵巢大鼠子宮系數(shù)(×10-5)的影響

n＝動(dòng)物數(shù)；子宮系數(shù)＝子宮重量/體重；與摘除組比*表示p＜0.05，**表示p＜0.01；與對(duì)比制劑組比Δ表示p＜0.05，ΔΔ表示p＜0.01。
本發(fā)明藥物制劑的中劑量組，大鼠子宮重量于給藥20天(0.2157g)、30天(0.2245g)，與摘除組(0.1692g)相比均有增加。本發(fā)明藥物制劑的大劑量組子宮重量于給藥20天(0.2555g)、30天(0.3301g)，與摘除組(0.1692g)相比均有增加。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法計(jì)算結(jié)果表明有顯著性差異(P＜0.01，即藥物與大鼠子宮重量顯著相關(guān))，給藥50天本發(fā)明藥物制劑C組(0.2299g)及本發(fā)明藥物制劑的大劑量組(0.2879，P＜0.01，即藥物與大鼠子宮重量顯著相關(guān))子宮重量稍有增加，見表5，本發(fā)明藥物制劑的大劑量組以子宮重量被體重除的子宮系數(shù)表示仍有顯著性差異(P＜0.01)，見表6。
給藥20、30天時(shí)本發(fā)明藥物制劑的大劑量組子宮重量(0.2555g，0.3301g)，與陽性對(duì)照藥對(duì)比制劑組(0.2621g，0.3375g)基本相似。本發(fā)明藥物制劑的中劑量組給藥20天、30天，子宮重量也有增加(P＜0.01)。
本發(fā)明藥物有促進(jìn)子宮重量增加的作用，即本發(fā)明藥物對(duì)大鼠子宮有顯著的雌激素樣作用。
(4)對(duì)子宮形態(tài)學(xué)的影響標(biāo)本處理取子宮，分別在分叉處下方約1cm處橫斷宮腔取材，常規(guī)石蠟包埋切片，HE染色。
觀察方法分別測量每只大鼠的子宮內(nèi)膜厚度，計(jì)數(shù)腺體數(shù)量，觀察腺體形態(tài)及間質(zhì)情況，每組動(dòng)物計(jì)算平均內(nèi)膜厚度及腺體數(shù)量。
內(nèi)膜厚度及腺體數(shù)量計(jì)算結(jié)果見表7，從中可看出，本發(fā)明藥物制劑的小劑量組子宮內(nèi)膜與摘除組相比無顯著差異(p＞0.05，即藥物與大鼠子宮內(nèi)膜厚度無關(guān)系)，20天、30天組與摘除組相比，有使子宮腺體數(shù)目增多作用。本發(fā)明藥物對(duì)子宮內(nèi)膜的增生無影響，說明對(duì)子宮內(nèi)膜無刺激作用。本發(fā)明藥物明顯促進(jìn)子宮腺體生長，從而有效緩解陰道的干燥，治療陰道炎。
表7 各組動(dòng)物平均內(nèi)膜厚度及腺體數(shù)量(X±SD)

內(nèi)膜厚度單位mm，腺體數(shù)量單位腺體數(shù)/每個(gè)切面；各組動(dòng)物數(shù)同表2，與摘除組比*表示p＜0.05，**表示p＜0.01；與利維愛組比Δ表示p＜0.05，ΔΔ表示p＜0.01。
30天后子宮的腺體形態(tài)及間質(zhì)情況的觀察結(jié)果見各實(shí)驗(yàn)組大鼠子宮內(nèi)膜及腺體切片的顯微鏡照片圖1，2，3，4，5及6。30天后，正常組內(nèi)膜間質(zhì)較疏松，腺體彎曲度增加，腺上皮立方形，有空泡化的現(xiàn)象，間質(zhì)以梭形細(xì)胞為主，較豐富，見圖1(放大倍數(shù)40)。摘除組變化較顯著，體積萎縮，內(nèi)膜變薄，間質(zhì)有纖維化，見圖2(放大倍數(shù)40)。施用本發(fā)明提供制劑組均以單管腺為主，腺體彎曲度增加不明顯，中劑量(50mg/kg)及大劑量組(250mg/kg)個(gè)別動(dòng)物出現(xiàn)分支管狀腺，腺體上皮均為立方或高柱狀空泡細(xì)胞，見圖3(放大倍數(shù)100)、4(放大倍數(shù)100)和5(放大倍數(shù)100)。對(duì)比制劑組內(nèi)膜較厚，腺體較稀疏，部分呈囊性萎縮，見圖6(放大倍數(shù)100)。從這些結(jié)果可看出，本發(fā)明提供的藥物制劑對(duì)子宮內(nèi)膜無刺激，能增加子宮腺體數(shù)目，有利于緩解更年期綜合征。
實(shí)施例5測量患者服藥后血清中的藥物濃度給45～55歲更年期婦女口服本發(fā)明提供的制劑A藥(劑量一次性口服100mg)后，測試不同時(shí)期人體內(nèi)血液中藥的濃度。
用美國Diagnostic Systems Laboratories，Inc生產(chǎn)的EIA血清專用DSL-10-3500實(shí)驗(yàn)藥盒測定血液樣品中硫酸普拉睪酮鈉濃度。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖7，圖中縱坐標(biāo)為硫酸普拉睪酮鈉濃度，橫坐標(biāo)為服藥至測量藥物濃度的時(shí)間。由圖可見，口服本發(fā)明提供的制劑A后血清中硫酸普拉睪酮鈉濃度很快升高，約1小時(shí)達(dá)到峰值，半衰期約為12～18小時(shí)。說明本發(fā)明藥物容易被人體吸收。
實(shí)施例6、觀察含不同粒度的硫酸普拉睪酮鈉的本發(fā)明提供的藥物制劑對(duì)12名患有婦女更年期綜合征病人的臨床效果(北京某大醫(yī)院)患者分為二組，第一組服用本發(fā)明提供的藥物B，另一組服用本發(fā)明藥物制劑A；每人每天口服100mg，服用3個(gè)月。以常規(guī)Kupperman評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)和陰道涂片觀察婦女更年期綜合征及老年萎縮性陰道炎的改善情況。
結(jié)果表明服用本發(fā)明的藥物后，婦女更年期綜合征和老年萎縮性陰道炎均有改善，其中服用本發(fā)明提供的藥物制劑A的6例更年期綜合征癥狀和萎縮性陰道炎患者的癥狀改善顯著優(yōu)于本發(fā)明提供的藥物制劑B的6例。
權(quán)利要求
1，一種治療更年期綜合征的藥物，其特征在于含有藥用有效量的硫酸普拉睪酮鈉。
2，按照權(quán)利要求1所述的治療更年期綜合征的藥物，其特征在于所述硫酸普拉睪酮鈉是粒度范圍為0.1微米～500微米的微粉顆粒。
3，按照權(quán)利要求1所述的治療更年期綜合征的藥物，其特征在于含有硫酸普拉睪酮鈉0.5～98％及余量的可藥用的常規(guī)載體和/或賦形劑。
4，按照權(quán)利要求3所述的治療更年期綜合征的藥物，其特征在于常規(guī)載體和/或賦形劑為0.1～95％(重量)稀釋劑，0.1～30％粘合劑，0.5～30％崩解劑和0.5～3％潤滑劑。
5，按照權(quán)利要求4所述的治療更年期綜合征的藥物，其特征在于所述稀釋劑是乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、淀粉及其衍生物、糊精、二氧化硅中的一種或數(shù)種。
6，按照權(quán)利要求4所述的治療更年期綜合征的藥物，其特征在于所述粘合劑是糊精、淀粉、預(yù)膠化淀粉、聚乙烯醇、羧甲基纖維素納、羥丙基甲纖維素中的一種或數(shù)種。
7，按照權(quán)利要求4所述的治療更年期綜合征的藥物，其特征在于所述崩解劑是淀粉、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基纖維素納、低取代羥丙纖維素中的一種或數(shù)種。
8，按照權(quán)利要求1所述的治療更年期綜合征的藥物，其特征在于本發(fā)明的藥物的劑型是片劑、膠囊、顆粒劑、栓劑、軟膏劑或粉針劑。
9，一種制備權(quán)利要求2所述的治療更年期綜合征的藥物的方法，其特征在于先按照常規(guī)方法將活性組分硫酸普拉睪酮鈉加工成粒度范圍為0.1微米～500微米的微粉顆粒，再將所述硫酸普拉睪酮鈉微粉顆粒與可藥用的常規(guī)載體和/或賦形劑按常規(guī)方法制備出所述藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療更年期綜合征，尤其是婦女老年性、萎縮性陰道炎的藥物及其制備方法，本發(fā)明提供的藥物含有硫酸普拉睪酮鈉。該藥物克服了已有藥物的缺陷，對(duì)治療更年期綜合征，尤其是婦女老年性、萎縮性陰道炎有很好的療效，且毒副作用小，對(duì)子宮內(nèi)膜無刺激，不會(huì)引起陰道出血，沒有普通激素療法帶來的致癌危險(xiǎn)性。
文檔編號(hào)A61P15/00GK1509719SQ0215854
公開日2004年7月7日 申請(qǐng)日期2002年12月25日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月25日
發(fā)明者楊維稼, 李建新 申請(qǐng)人:龐飛, 龐 飛