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一種寧心安神膠囊及其制備方法

文檔序號:10633382閱讀:516來源:國知局
一種寧心安神膠囊及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種寧心安神膠囊的制備方法,取黃連100g、琥珀50g、石菖蒲250g、制遠(yuǎn)志417g、茯苓417g、丹參417g、甘草250g、紅棗417g、小麥833g、煅磁石833g、珍珠母833g,以上十味,加藥材10倍重量的水,浸泡0.5h,煎煮1小時(shí),過濾,藥渣再加入藥材8倍重量的水,煎煮1小時(shí),藥液濾出,合并兩次煎煮液,濃縮至60℃相對密度為1.05,加乙醇使含醇量的體積百分比達(dá)75%,攪拌,靜置,過濾,濾液濃縮至65℃時(shí)相對密度為1.25,并回收乙醇,得濃縮液,使用超臨界萃取,得超臨界萃取物,繼續(xù)濃縮,將濃縮液進(jìn)行干燥,制粒,灌膠囊,得寧心安神膠囊,并采用特有的濃縮和干燥設(shè)備,制備得到的寧心安神膠囊提取物含量高,并發(fā)現(xiàn)在制備抑制人胚腎HEK?293細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用。
【專利說明】
-種寧心安神膠囊及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及中藥提取技術(shù)領(lǐng)域,具體設(shè)及一種寧屯、安神膠囊及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 寧屯、安神膠囊,鎮(zhèn)驚安神,寬胸寧屯、。用于更年期綜合征,神經(jīng)衰弱?,F(xiàn)有技術(shù)中的 制備方法,工藝粗糖、落后,雜質(zhì)多,有效成分含量低,導(dǎo)致患者用量過大,不方便服用,嚴(yán)重 影響了本品在臨床上應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 發(fā)明目的:為了解決上述問題,本發(fā)明的目的在于提供一種寧屯、安神膠囊及其制 備方法。
[0004] 技術(shù)方案:本發(fā)明的目的是通過如下的方案實(shí)現(xiàn)的:
[0005] -種寧屯、安神膠囊,制備方法為:取黃連lOOg、班巧50g、石富蒲250g、制遠(yuǎn)志417g、 巧等417g、丹參417g、甘草250g、紅要417g、小麥833g、般磁石833g、珍珠母833g,W上十味, 加藥材10倍重量的水,浸泡0.化,煎煮1小時(shí),過濾,藥渣再加入藥材8倍重量的水,煎煮1小 時(shí),藥液濾出,合并兩次煎煮液,濃縮至60°C相對密度為1.05,加乙醇使含醇量的體積百分 比達(dá)75%,攬拌,靜置,過濾,濾液濃縮至65°C時(shí)相對密度為1.25,并回收乙醇,得濃縮液,使 用超臨界萃取,得超臨界萃取物,繼續(xù)濃縮,將濃縮液進(jìn)行干燥,制粒,灌膠囊,得寧屯、安神 膠囊。
[0006] 所述寧屯、安神膠囊,上述制備方法中超臨界萃取方法為:將水提醇沉濃縮液加入 至化02超臨界萃取器中,乙醇作為夾帶劑,夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4-6%,萃取 壓力15-30MPa,溫度30-50°C,C02流量l-3ml/g生藥· min,萃取時(shí)間150-180min,得超臨界 萃取物,優(yōu)選條件為:所述C02超臨界萃取夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為5%,所述 C02超臨界萃取的萃取壓力20MPa,溫度40°C,C02流量2ml/g生藥· min,萃取時(shí)間leOmin。
[0007] 所述寧屯、安神膠囊,上述制備方法中Ξ次濃縮使用裝置,包括罐體,設(shè)置在所述罐 體上的進(jìn)料口和設(shè)置在所述罐體底部的出料管,在所述出料管上設(shè)有出料閥口和過濾器, 在所述罐體內(nèi)設(shè)有攬拌軸,在所述攬拌軸上設(shè)有攬拌獎(jiǎng),在所述罐體的頂部設(shè)有與所述攬 拌軸相連接的攬拌電機(jī),在所述罐體內(nèi)的底壁設(shè)有震動腔,在所述震動腔內(nèi)設(shè)有震動板,在 所述震動板與所述震動腔之間設(shè)有震動器,在所述罐體內(nèi)的側(cè)壁上設(shè)有凹腔,在所述震動 板的頂面設(shè)有刮板,在所述刮板與所述凹腔之間設(shè)有伸縮氣缸,所述刮板在所述伸縮氣缸 的作用下實(shí)現(xiàn)對震動板表面的刮擦,在所述震動板的中屯、設(shè)有與所述出料管相連通的出料 P。
[000引所述寧屯、安神膠囊,上述制備方法中濃縮裝置所述震動板與所述震動腔的連接處 設(shè)有密封金屬條,在所述罐體上設(shè)有與所述震動器相連接的震動控制器。
[0009]所述寧屯、安神膠囊,上述制備方法中濃縮裝置所述刮板的底部設(shè)有金屬刮絲層, 所述金屬刮絲層抵壓在所述震動板上,在所述罐體上設(shè)有與所述伸縮氣缸相連接的伸縮控 制按鈕。
[0010] 所述寧屯、安神膠囊,上述制備方法中濃縮裝置所述罐體內(nèi)設(shè)有水份測試儀,在所 述出料管內(nèi)設(shè)有冷卻器。
[0011] 所述寧屯、安神膠囊,上述制備方法中干燥使用裝置,包括機(jī)體,設(shè)置在所述機(jī)體內(nèi) 的中軸,設(shè)置在所述中軸外壁上的旋轉(zhuǎn)盛放盤,在所述中軸的下端設(shè)有震動電機(jī),在所述機(jī) 體的頂部設(shè)有熱蒸汽輸送管道,其特征在于:在所述中軸內(nèi)設(shè)有空腔,在所述中軸的頂部設(shè) 有圓盤,所述圓盤設(shè)置在所述旋轉(zhuǎn)盛放盤的頂部,在所述圓盤上設(shè)有上下通透的細(xì)孔,在所 述圓盤內(nèi)設(shè)有與所述空腔相連接的導(dǎo)熱柱桿,在所述空腔內(nèi)設(shè)有電加熱塊,所述導(dǎo)熱柱桿 上設(shè)有導(dǎo)熱刺柱,所述導(dǎo)熱刺柱伸入所述細(xì)孔內(nèi),在所述機(jī)體內(nèi)設(shè)有溫度傳感器、在所述空 腔內(nèi)設(shè)有與所述溫度傳感器相連接的驅(qū)動器,所述驅(qū)動器與所述電加熱塊的控制開關(guān)相連 接。
[0012] 所述寧屯、安神膠囊,上述制備方法中干燥使用裝置所述細(xì)孔為頂部大底部小的卿 趴狀孔,所述導(dǎo)熱刺柱伸入所述卿趴狀孔的中部,在所述卿趴狀孔上設(shè)有上下通透的傳導(dǎo) 網(wǎng)孔。
[0013] 所述寧屯、安神膠囊,上述制備方法中干燥使用裝置所述機(jī)體的底面設(shè)有箱口,所 述箱口設(shè)置在旋轉(zhuǎn)盛放盤的最底端,所述導(dǎo)熱柱桿為銀或侶或銅質(zhì)柱桿。
[0014] 所述寧屯、安神膠囊在制備抑制人胚腎HEK-293細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用。
[0015] 現(xiàn)有技術(shù)中,寧屯、安神膠囊采用水提的方法,工藝粗糖、落后,雜質(zhì)多,導(dǎo)致患者用 量過大,不方便服用,本發(fā)明制備的寧屯、安神膠囊中丹參酬ΠΑ得率增加,含量高,本發(fā)明中 的濃縮設(shè)備結(jié)構(gòu)簡單、操作便捷,其設(shè)有震動板和震動器,而還設(shè)有刮板和與所述刮板相連 接的伸縮氣缸,可有效防止罐體底部結(jié)塊,一定程度上可大大提高加熱效率,有效解決了傳 統(tǒng)技術(shù)中藥濃縮設(shè)備中容易出現(xiàn)底部結(jié)塊而影響加熱效率的技術(shù)不足,使用穩(wěn)定性好且適 用性強(qiáng),藥物的有效成分穩(wěn)定不被破壞。本干燥設(shè)備結(jié)構(gòu)簡單,操作便捷,在中軸的頂部設(shè) 有圓盤,并且在圓盤上設(shè)有細(xì)孔,可W使熱蒸汽通過圓盤,并且在中軸內(nèi)設(shè)有電加熱塊和導(dǎo) 熱柱桿,可W根據(jù)需要啟動電加熱塊,并通過導(dǎo)熱柱桿實(shí)現(xiàn)溫度傳遞,并與通過圓盤的熱蒸 汽進(jìn)行混合,從而可W保證熱蒸汽的溫度,調(diào)節(jié)性能好,使用穩(wěn)定性強(qiáng),有效解決了傳統(tǒng)技 術(shù)中熱蒸汽加熱干燥機(jī)中溫度無法控制的技術(shù)不足。并發(fā)現(xiàn)所述寧屯、安神膠囊在制備抑制 人胚腎HEK-293細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用。
【附圖說明】
[0016] 為了使本發(fā)明的內(nèi)容更容易被清楚的理解,下面根據(jù)具體實(shí)施例并結(jié)合附圖,對 本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明,其中:
[0017] 圖1為本發(fā)明濃縮裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0018] 圖2為本發(fā)明干燥裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0019] W下通過實(shí)施例形式,對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說明,但不應(yīng)將此 理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于W下的實(shí)例,凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均 屬于本發(fā)明的范圍。
[0020] 實(shí)施例1
[0021] 取黃連lOOg、班巧50g、石富蒲250g、制遠(yuǎn)志417g、巧等417g、丹參417g、甘草250g、 紅要417g、小麥833g、般磁石833g、珍珠母833g,W上十味,加藥材10倍重量的水,浸泡0.化, 煎煮1小時(shí),過濾,藥渣再加入藥材8倍重量的水,煎煮1小時(shí),藥液濾出,合并兩次煎煮液,濃 縮至60°C相對密度為1.05,加乙醇使含醇量的體積百分比達(dá)75%,攬拌,靜置,過濾,濾液濃 縮至65°C時(shí)相對密度為1.25,并回收乙醇,得濃縮液,使用超臨界萃取,得超臨界萃取物,繼 續(xù)濃縮,將濃縮液進(jìn)行干燥,制粒,灌膠囊,得寧屯、安神膠囊。
[0022] 所述寧屯、安神膠囊的制備方法,所述超臨界萃取方法為:將水提醇沉濃縮液加入 至化02超臨界萃取器中,乙醇作為夾帶劑,夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4%,萃取壓 力30MPa,溫度30°C,C02流量3ml/g生藥· min,萃取時(shí)間150min,得超臨界萃取物。
[0023] 見圖1:所述寧屯、安神膠囊的制備方法,上述Ξ次濃縮裝置,包括罐體1,設(shè)置在所 述罐體1上的進(jìn)料口 2和設(shè)置在所述罐體1底部的出料管3,在所述出料管3上設(shè)有出料閥口 4 和過濾器5,在所述罐體1內(nèi)設(shè)有攬拌軸6,在所述攬拌軸6上設(shè)有攬拌獎(jiǎng)7,在所述罐體1的頂 部設(shè)有與所述攬拌軸6相連接的攬拌電機(jī)8,在所述罐體1內(nèi)的底壁設(shè)有震動腔9,在所述震 動腔9內(nèi)設(shè)有震動板10,在所述震動板10與所述震動腔9之間設(shè)有震動器11,通過震動器可 W使震動板震動,從而可有效防止藥物顆粒集結(jié)在震動板上,從而可防止藥物顆粒在震動 板上結(jié)塊,在所述罐體1內(nèi)的側(cè)壁上設(shè)有凹腔12,在所述震動板10的頂面設(shè)有刮板13,在所 述刮板13與所述凹腔12之間設(shè)有伸縮氣缸14,可W根據(jù)需要控制伸縮氣缸,使刮板在震動 板的表面刮動,從而將部分集結(jié)在震動板表面的藥物顆粒刮動,所述刮板13在所述伸縮氣 缸14的作用下實(shí)現(xiàn)對震動板10表面的刮擦,在所述震動板10的中屯、設(shè)有與所述出料管3相 連通的出料口 15。
[0024] 在所述震動板10與所述震動腔9的連接處設(shè)有密封金屬條16,在所述罐體上設(shè)有 與所述震動器相連接的震動控制器17。
[0025] 在所述刮板的底部設(shè)有金屬刮絲層18,所述金屬刮絲層抵壓在所述震動板上,在 所述罐體上設(shè)有與所述伸縮氣缸相連接的伸縮控制按鈕19。
[0026] 在所述罐體內(nèi)設(shè)有水份測試儀21,在所述出料管內(nèi)設(shè)有冷卻器20。
[0027] 見圖2,所述寧屯、安神膠囊的制備方法,上述干燥使用裝置,包括機(jī)體1,設(shè)置在所 述機(jī)體1內(nèi)的中軸2,設(shè)置在所述中軸2外壁上的旋轉(zhuǎn)盛放盤3,在所述中軸2的下端設(shè)有震動 電機(jī)4,在所述機(jī)體1的頂部設(shè)有熱蒸汽輸送管道5,在所述中軸2內(nèi)設(shè)有空腔6,在所述中軸2 的頂部設(shè)有圓盤7,所述圓盤7設(shè)置在所述旋轉(zhuǎn)盛放盤3的頂部,在所述圓盤7上設(shè)有上下通 透的細(xì)孔8,熱蒸汽經(jīng)過圓盤,進(jìn)入旋轉(zhuǎn)盛放盤,在所述圓盤7內(nèi)設(shè)有與所述空腔6相連接的 導(dǎo)熱柱桿9,在所述空腔6內(nèi)設(shè)有電加熱塊10,所述導(dǎo)熱柱桿9上設(shè)有導(dǎo)熱刺柱11,所述導(dǎo)熱 刺柱11伸入所述細(xì)孔8內(nèi),可W大大提高熱蒸汽與電加熱塊之間的溫度混合,提高溫度控制 的效率,在所述機(jī)體1內(nèi)設(shè)有溫度傳感器12、在所述空腔6內(nèi)設(shè)有與所述溫度傳感器12相連 接的驅(qū)動器13,所述驅(qū)動器13與所述電加熱塊10的控制開關(guān)相連接。本實(shí)施例中溫度傳感 器和驅(qū)動器為市面上已存在的產(chǎn)品,其在使用時(shí)只需要按照對應(yīng)的產(chǎn)品說明進(jìn)行連接即 可。
[0028] 所述細(xì)孔為頂部大底部小的卿趴狀孔,所述導(dǎo)熱刺柱伸入所述卿趴狀孔的中部, 在所述卿趴狀孔上設(shè)有上下通透的傳導(dǎo)網(wǎng)孔14。
[0029] 在所述機(jī)體的底面設(shè)有箱口 15,所述箱口設(shè)置在旋轉(zhuǎn)盛放盤的最底端。
[0030] 所述導(dǎo)熱柱桿為銀或侶或銅質(zhì)柱桿。
[0031] 實(shí)施例2
[0032] 取黃連lOOg、班巧50g、石富蒲250g、制遠(yuǎn)志417g、巧等417g、丹參417g、甘草250g、 紅要417g、小麥833g、般磁石833g、珍珠母833g,W上十味,加藥材10倍重量的水,浸泡0.化, 煎煮1小時(shí),過濾,藥渣再加入藥材8倍重量的水,煎煮1小時(shí),藥液濾出,合并兩次煎煮液,濃 縮至60°C相對密度為1.05,加乙醇使含醇量的體積百分比達(dá)75%,攬拌,靜置,過濾,濾液濃 縮至65°C時(shí)相對密度為1.25,并回收乙醇,得濃縮液,使用超臨界萃取,得超臨界萃取物,繼 續(xù)濃縮,將濃縮液進(jìn)行干燥,制粒,灌膠囊,得寧屯、安神膠囊。
[0033] 所述寧屯、安神膠囊的制備方法,所述超臨界萃取方法為:將水提醇沉濃縮液加入 至化02超臨界萃取器中,乙醇作為夾帶劑,夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為6%,萃取壓 力15MPa,溫度50°C,C02流量Iml/g生藥· min,萃取時(shí)間ISOmin,得超臨界萃取物。
[0034] 濃縮和干燥裝置同上。
[0035] 實(shí)施例3
[0036] 取黃連lOOg、班巧50g、石富蒲250g、制遠(yuǎn)志417g、巧等417g、丹參417g、甘草250g、 紅要417g、小麥833g、般磁石833g、珍珠母833g,W上十味,加藥材10倍重量的水,浸泡0.化, 煎煮1小時(shí),過濾,藥渣再加入藥材8倍重量的水,煎煮1小時(shí),藥液濾出,合并兩次煎煮液,濃 縮至60°C相對密度為1.05,加乙醇使含醇量的體積百分比達(dá)75%,攬拌,靜置,過濾,濾液濃 縮至65°C時(shí)相對密度為1.25,并回收乙醇,得濃縮液,使用超臨界萃取,得超臨界萃取物,繼 續(xù)濃縮,將濃縮液進(jìn)行干燥,制粒,灌膠囊,得寧屯、安神膠囊。
[0037] 所述寧屯、安神膠囊的制備方法,所述超臨界萃取方法為:將水提醇沉濃縮液加入 到C02超臨界萃取器中,乙醇作為夾帶劑,夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為5%,所述 C02超臨界萃取的萃取壓力20MPa,溫度40°C,C02流量2ml/g生藥· min,萃取時(shí)間leOmin,得 超臨界萃取物。
[0038] 濃縮和干燥裝置同上。
[0039 ]上述實(shí)施例中藥物均符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。
[0040] 實(shí)施例4:本發(fā)明寧屯、安神膠囊提取物中丹參酬IIA含量測定實(shí)驗(yàn)研究資料
[0041] 1.1實(shí)驗(yàn)藥物:本發(fā)明寧屯、安神膠囊:按實(shí)施例1-3方法制備。對照組采用普通濃縮 方法制備寧屯、安神膠囊。
[0042] 1.2儀器:高效液相色譜儀系統(tǒng)包括高效液相色譜儀(Waters 515) ;P200高壓累; Waters2487紫外檢測器及GJ605型高壓六通進(jìn)樣閥;色譜柱為Hypersil 0DSC18柱(4.6mmX 250mm,5ym);數(shù)據(jù)采集及處理采用服色譜數(shù)據(jù)工作站V4.0+(杭州英譜科技)
[0043] 1.3測定條件:采用高效液相色譜法,采用色譜柱Hypersil 0DSC18柱(4.6mmX 250mm,扣m);流動相:甲醇:水=75:25 ;流速為1.2mL/min;柱溫為30 °C ;檢測波長為268~ 270nm。
[0044] 1.4實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0045] 各實(shí)施例制備的寧屯、安神膠囊中丹參酬IIA含量測定結(jié)果
[0046]

[0047] ~根據(jù)上表的試驗(yàn)結(jié)果可知,本發(fā)明實(shí)施例1-3制備的寧屯、安神膠囊中寧丹參酬IIA 含量明顯高于對照組。
[0048] 實(shí)施例5:本發(fā)明寧屯、安神膠囊抑制人胚腎HEK-293細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究資料
[0049] 1實(shí)驗(yàn)材料
[(K)加]1.1實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞株
[0051 ] 人胚腎HEK-293細(xì)胞,南京醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞庫,DMEM+10 %FBS常規(guī)培養(yǎng)。
[0化2] 1.2實(shí)驗(yàn)藥物
[0053]研究藥物:本發(fā)明寧屯、安神膠囊:按實(shí)施例1方法制備。
[0化4] 藥液儲液:稱取lOOmg寧屯、安神膠囊,溶于5ml無水乙醇中,0.2皿濾器過濾,500μ1 doff管分裝,-20°C存儲,同時(shí)0.2WI1濾器過濾無水乙醇W備對照組之用。
[00對 1.3實(shí)驗(yàn)試劑
[0056] DMEM(GIBC0公司Cat .No. 12100-061Lot .No. 758137);胎牛血清(浙江天杭生物科 技有限公司Lot. No. 100419) ;NaHC03(上海久億化學(xué)試劑有限公司Cat. No. 11810- 03:3Lot.No. 1088387);時(shí)ypsin(AMRESC0 公司批號:2010/04);抓 TA(AMRESC0 公司批號: 2009/10) ;Penicillin G Sodium Salt(AMRESC0 公司批號:2010242) ;Streptomycin Sulfate (AMRESCO公司批號:2010382);無水乙醇(南京化學(xué)試劑有限公司批號: 080310182) ;MTT(Biosha巧批號:0793) ;PBS(實(shí)驗(yàn)室自配);
[0化7] 1.4實(shí)驗(yàn)器材
[0058]萊卡倒置顯微鏡(德國Leica型號:DM1L);可見-紫外光微孔板檢測儀(美國MD公司 型號:S陽CTRA MAX 190) ;C02培養(yǎng)箱(FORMA型號:3111);超凈臺(蘇凈集團(tuán)安泰公司制造型 號:SW-CJ-Z抑);純水儀(美國Spring公司型號:S/N 020579);精密移液器(法國吉爾森公司 型號:P2);電子天平(德國賽多利斯有限公司型號:BT323S);全自動高壓滅菌鍋(日本SANYO 公司型號:MLS-3020);臺式電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海精密實(shí)驗(yàn)設(shè)備公司型號:DHG9123A);冰箱 (西口子公司型號:KG18V21TI);液氮罐(CBS型號:2001);低速離屯、機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠 型號:KA-1000);0.2皿濾器(MILLIP0RE型號:SLGP033RB); 10cm培養(yǎng)皿(肥ST公司)、96孔培 養(yǎng)板(肥ST公司);細(xì)胞計(jì)數(shù)板;離屯、管、移液管、Tips若干。
[0化9] 2實(shí)驗(yàn)方法
[0060] 1)人胚腎皿K-293細(xì)胞用DMEM+10%FBS于37°C、5%C02進(jìn)行常規(guī)培養(yǎng)(10cm培養(yǎng) 皿),當(dāng)細(xì)胞生長至對數(shù)期時(shí),收集細(xì)胞,棄去培養(yǎng)液,PBS輕洗3遍,加入3ml 0.25 %膜蛋白 酶-0.04 %抓TA,37 °C消化2min后,向其中加入5ml完全培養(yǎng)基中和反應(yīng),吹打細(xì)胞后將其轉(zhuǎn) 入離屯、管中,1000巧m離屯、5min,調(diào)整細(xì)胞懸液濃度3 X 104個(gè)/ml。
[0061 ] 2)將細(xì)胞種入96孔培養(yǎng)板中,每孔加入細(xì)胞懸液18化1,培養(yǎng)板放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中 (37°C,5%C02)常規(guī)培養(yǎng)。
[0062] 3)根據(jù)細(xì)胞生長情況,一般長至50%-70%,加入寧屯、安神膠囊溶液,繼續(xù)培養(yǎng) 2地。
[0063] 4)24h 后加入 20μ1 MTT 溶液(5mg/ml,即 0.5%MTT),繼續(xù)培養(yǎng)地。
[0064] 5)4h后扣板法倒去上清,用吸水紙輕輕拍干,每孔加入20化1二甲基亞諷,置搖床 上低速振蕩lOmin,使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測儀490nm處測量各孔的吸光值。
[0065] 6)同時(shí)設(shè)置本底(不加細(xì)胞,只加培養(yǎng)液),對照孔(細(xì)胞、相同濃度的藥物溶解介 質(zhì)、培養(yǎng)液、MTT、二甲基亞諷),每組設(shè)定6個(gè)復(fù)孔。
[0066] 7)結(jié)果W藥物對細(xì)胞的抑制率表示:
[0067] 細(xì)胞增值抑制率(% )=(對照孔0D值-給藥孔0D值)/對照孔0D值X 100%。實(shí)驗(yàn)重 復(fù)3次。
[006引 3統(tǒng)計(jì)處理
[0069] 采用Microsoft Excel 2003軟件中的相關(guān)分析和Student t檢驗(yàn),數(shù)據(jù)Wmean± S. D. 小 〇
[0070] 4實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0071] ΜΤΤ法實(shí)驗(yàn)后統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示,與對照組比較,當(dāng)劑量達(dá)到5mg/ml時(shí),對人胚腎皿Κ- 293細(xì)胞增殖抑制有差異(P<0.05),劑量在lOmg/ml時(shí)該差異具有顯著性(P<0.01),當(dāng)劑量 達(dá)到15-20mg/ml時(shí)有極顯著性差異(P<0.001)。
[0072] 寧屯、安神膠囊對人胚腎肥K-293細(xì)胞增殖抑制影響研究(1±漲)
[0073]
[0074] 注:與對照組比較,沖<0.01 ;*沖<0.001 [00巧]5實(shí)驗(yàn)結(jié)論
[0076]寧屯、安神膠囊可W抑制人胚腎皿K-293細(xì)胞增殖,減少人胚腎肥K-293細(xì)胞的細(xì)胞 生長數(shù)目,該作用呈劑量依賴性。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種寧心安神膠囊,其特征在于制備方法為:取黃連l〇〇g、琥珀50g、石菖蒲250g、制 遠(yuǎn)志417g、茯苓417g、丹參417g、甘草250g、紅棗417g、小麥833g、煅磁石833g、珍珠母833g, 以上十味,加藥材10倍重量的水,浸泡0.5h,煎煮1小時(shí),過濾,藥渣再加入藥材8倍重量的 水,煎煮1小時(shí),藥液濾出,合并兩次煎煮液,濃縮至60 °C相對密度為1.05,加乙醇使含醇量 的體積百分比達(dá)75%,攪拌,靜置,過濾,濾液濃縮至65°C時(shí)相對密度為1.25,并回收乙醇, 得濃縮液,使用超臨界萃取,得超臨界萃取物,繼續(xù)濃縮,將濃縮液進(jìn)行干燥,制粒,灌膠囊, 得寧心安神膠囊。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述寧心安神膠囊,其特征在于所述制備方法中超臨界萃取方法為: 將水提醇沉濃縮液加入到C02超臨界萃取器中,乙醇作為夾帶劑,夾帶劑占總萃取溶劑的體 積百分比為4-6%,萃取壓力15-30MPa,溫度30-50°C,C0 2流量l-3ml/g生藥· min,萃取時(shí)間 150-180min,得超臨界萃取物,優(yōu)選條件為:所述C02超臨界萃取夾帶劑占總萃取溶劑的體 積百分比為5%,所述C0 2超臨界萃取的萃取壓力20MPa,溫度40°C,C02流量2ml/g生藥· min, 萃取時(shí)間160min。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述寧心安神膠囊,其特征在于所述制備方法中三次濃縮使用裝置, 包括罐體,設(shè)置在所述罐體上的進(jìn)料口和設(shè)置在所述罐體底部的出料管,在所述出料管上 設(shè)有出料閥門和過濾器,在所述罐體內(nèi)設(shè)有攪拌軸,在所述攪拌軸上設(shè)有攪拌槳,在所述罐 體的頂部設(shè)有與所述攪拌軸相連接的攪拌電機(jī),在所述罐體內(nèi)的底壁設(shè)有震動腔,在所述 震動腔內(nèi)設(shè)有震動板,在所述震動板與所述震動腔之間設(shè)有震動器,在所述罐體內(nèi)的側(cè)壁 上設(shè)有凹腔,在所述震動板的頂面設(shè)有刮板,在所述刮板與所述凹腔之間設(shè)有伸縮氣缸,所 述刮板在所述伸縮氣缸的作用下實(shí)現(xiàn)對震動板表面的刮擦,在所述震動板的中心設(shè)有與所 述出料管相連通的出料口。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述寧心安神膠囊,其特征在于所述制備方法中濃縮裝置所述震動 板與所述震動腔的連接處設(shè)有密封金屬條,在所述罐體上設(shè)有與所述震動器相連接的震動 控制器。5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述寧心安神膠囊,其特征在于所述制備方法中濃縮裝置所述刮板 的底部設(shè)有金屬刮絲層,所述金屬刮絲層抵壓在所述震動板上,在所述罐體上設(shè)有與所述 伸縮氣缸相連接的伸縮控制按鈕。6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述寧心安神膠囊,其特征在于所述制備方法中濃縮裝置所述罐體 內(nèi)設(shè)有水份測試儀,在所述出料管內(nèi)設(shè)有冷卻器。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述寧心安神膠囊,其特征在于所述制備方法中干燥使用裝置,包括 機(jī)體,設(shè)置在所述機(jī)體內(nèi)的中軸,設(shè)置在所述中軸外壁上的旋轉(zhuǎn)盛放盤,在所述中軸的下端 設(shè)有震動電機(jī),在所述機(jī)體的頂部設(shè)有熱蒸汽輸送管道,其特征在于:在所述中軸內(nèi)設(shè)有空 腔,在所述中軸的頂部設(shè)有圓盤,所述圓盤設(shè)置在所述旋轉(zhuǎn)盛放盤的頂部,在所述圓盤上設(shè) 有上下通透的細(xì)孔,在所述圓盤內(nèi)設(shè)有與所述空腔相連接的導(dǎo)熱柱桿,在所述空腔內(nèi)設(shè)有 電加熱塊,所述導(dǎo)熱柱桿上設(shè)有導(dǎo)熱刺柱,所述導(dǎo)熱刺柱伸入所述細(xì)孔內(nèi),在所述機(jī)體內(nèi)設(shè) 有溫度傳感器、在所述空腔內(nèi)設(shè)有與所述溫度傳感器相連接的驅(qū)動器,所述驅(qū)動器與所述 電加熱塊的控制開關(guān)相連接。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述寧心安神膠囊,其特征在于所述制備方法中干燥使用裝置所述 細(xì)孔為頂部大底部小的喇叭狀孔,所述導(dǎo)熱刺柱伸入所述喇叭狀孔的中部,在所述喇叭狀 孔上設(shè)有上下通透的傳導(dǎo)網(wǎng)孔。9. 根據(jù)權(quán)利要求7所述寧心安神膠囊,其特征在于所述制備方法中干燥使用裝置所述 機(jī)體的底面設(shè)有箱門,所述箱門設(shè)置在旋轉(zhuǎn)盛放盤的最底端,所述導(dǎo)熱柱桿為銀或鋁或銅 質(zhì)柱桿。10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述寧心安神膠囊在制備抑制人胚腎HEK-293細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng) 用。
【文檔編號】A61K33/26GK105998841SQ201610563400
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年7月16日
【發(fā)明人】卞毓平
【申請人】南京正寬醫(yī)藥科技有限公司
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