專利名稱：一種用作殺菌劑的含有香芹酚和麝香草酚的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有天然物質(zhì)香芹酚和麝香草酚的組合物。該組合物對密螺旋體屬具有協(xié)同殺菌功效，其中的密螺旋體屬會引起嚴(yán)重的粘膜出血疾病，例如豬痢疾和嚴(yán)重的有蹄動物尤其是偶蹄動物如反芻動物感染性蹄疾病。該組合物適合通過食物或飲用水或獸用頓服藥浴給予動物。
由密螺旋體屬引起的疾病在動物家畜中是常見的。例如，厭氧螺旋體舌骨痢疾密螺旋體(Treponema hyodysenteriae)被認(rèn)為是豬痢疾(SD)主要病因。參見例如D.L.Harris和R.J.Lysons(1992)，豬痢疾，豬疾病，第7版，Iowa州立大學(xué)出版社，Ames，Iowa，美國。SD是一種嚴(yán)重的粘膜出血性腹瀉。真正感染SD的豬通常只消耗很少量的飼料，引起生長的明顯下降和可觀的經(jīng)濟(jì)損失。在Top Agrar(1998)第4卷第52頁中的報道指出，在德國三分之一的小豬群和多達(dá)一半以上的生長豬群可能呈密螺旋體屬陽性。所以應(yīng)當(dāng)作大量的努力來防止這種疾病的傳播。人們也都知道密螺旋體屬會引起嚴(yán)重的有蹄動物尤其是偶蹄動物如反芻動物感染性蹄疾病。
而且，在WO 97/01348中公開了一種含有以香芹酚和麝香草酚的草藥精油作為其主要成分和藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。在該精油中香芹酚和麝香草酚的總量至少為55％，優(yōu)選70％(按精油重量計)，并且香芹酚與麝香草酚的比率至少為10。該藥用組合物能夠用于預(yù)防和治療家禽的球蟲病。
現(xiàn)已報道廣譜抗生素如鏈霉素、桿菌肽、新霉素、泰洛星、慶大霉素、金霉素、維吉霉素和林可霉素在SD的治療中都有效。當(dāng)該疾病是地方性的，通常把預(yù)防藥劑加入動物飼料中。但是似乎抗生素變得越來越低效，并且在1997年，Top Agrar(1998)第4卷第52頁中報道密螺旋體屬對泰洛星的耐藥性比率為99％，對林可霉素的耐藥性比率為92％，對硫姆林的耐藥性比率為48％。
但是，近年來在關(guān)于化學(xué)的和抗菌生長促進(jìn)劑的使用上存在激烈的爭論，并且在許多國家中正在考慮禁用這種類型的飼料添加劑。因此，迫切需要為農(nóng)業(yè)開發(fā)具有可靠和通?？山邮艿膶?shí)施而且不具藥物性質(zhì)的物質(zhì)。
本發(fā)明的一個目的就是提供作為活性劑的天然物質(zhì)，它們適合于通過食物、飲用水或獸用頓服藥浴對動物給藥來治療、預(yù)防或緩解由密螺旋體引起的疾病。本發(fā)明的另一個目的是降低對生長的負(fù)面影響。
根據(jù)本發(fā)明，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)一種含有5ppm到90％(按干重計)天然物質(zhì)香芹酚和5ppm到80％(按干重計)的麝香草酚，而且香芹酚與麝香草酚的重量比為1∶5到10∶1，優(yōu)選在2∶3到4∶1的組合物，顯示有抗密螺旋體屬的協(xié)同作用，并且由此減少了這些細(xì)菌對動物健康和生長的副作用。在本文中“天然物質(zhì)”的表述可以理解為由天然產(chǎn)生的化合物組成，并且其可從天然產(chǎn)物或通過合成獲得的物質(zhì)。該組合物通常以含有占包括營養(yǎng)物質(zhì)在內(nèi)的食物組合物的干重或飲用水重量的5-2000ppm、優(yōu)選20-600ppm的香芹酚和麝香草酚的食物組合物或飲用水給藥。該組合物也可以占獸用頓服藥浴重量的0.2-30％的含量來提供，從而治療有蹄動物尤其是偶蹄動物如反芻動物的蹄。本發(fā)明也包括預(yù)混物和食物添加劑，它們可以用于制備食物組合物和飲用水補(bǔ)充劑以及獸用頓服藥浴補(bǔ)充劑。
該組合物和食物組合物也可以含有其它能夠改善健康和促進(jìn)生長的天然物質(zhì)。在食物組合物中，這些物質(zhì)一般以0.1到30ppm的(按干重計)含量存在。這類物質(zhì)及它們的含量的例子是1-5ppm愈創(chuàng)木酚、1-5ppm丁子香酚、0.1-2ppm辣椒堿和1-20mg鞣酸。食物組合物中的其它適當(dāng)成分是天然物質(zhì)的食用香料。它們通常以食物組合物干重的0.2-50ppm的含量存在。適當(dāng)食用香料及它們的含量的例子是0.05-0.5ppm甲氧甲酚、0.1-5mg茴香腦、0.1-2ppm十-、十一-和/或十二內(nèi)酯、0.1-2ppm喹啉(quinoleine)、0.1-2ppm紫羅酮和/或鳶尾酮、0.05-1ppm姜醇、0.05-2ppm胡椒堿、0.05-1ppm亞丙基2-苯并[c]呋喃酮和/或亞丁基2-苯并[c]呋喃酮以及0.1-5ppm水楊酸戊酯和/或水楊酸芐酯。
通?？梢酝ㄟ^制備活性化合物香芹酚和麝香草酚以及其它適當(dāng)?shù)奶砑觿┑念A(yù)混物把活性成分摻入食物組合物。這種預(yù)混物可以含有1-10％(按干重計)的香芹酚和麝香草酚、0-40％(按干重計)促進(jìn)生長添加劑、食用香料和改善健康的添加劑以及50-99％(按重量計)的吸收支持物。該支持物例如可以含有40-50％(按重量計)的木纖維、8-10％(按重量計)的硬脂精、4-5％(按重量計)的姜黃粉、4-5％(按重量計)的迷迭香粉、22-28％(按重量計)的石灰石、1-3％(按重量計)的膠如阿拉伯膠、5-50％(按重量計)的糖和/或淀粉和5-15％(按重量計)的水。
在制備含有0.2-5％(按重量計)預(yù)混物的食物組合物添加劑過程中，可以把預(yù)混物與常用的飼料組份如維生素、酶、礦物鹽、谷粉、含蛋白的組份、含碳水化合物的組份、小麥粗粉和/或糠混合。最后把食物組合物添加劑以這樣的量即使飼料含有5-2000ppm、優(yōu)選20-600ppm的活性混合物加入到食物組合物中。該食物組合物添加劑一般占食物組合物的0.3-3.5％(按重量計)。
根據(jù)本發(fā)明，食物組合物通常含有占飼料干重的下列組份a)0-80％、優(yōu)選10-70％(按重量計)谷類，b)0-30％、優(yōu)選1-12％(按重量計)脂肪，c)0-85％、優(yōu)選10-50％(按重量計)非谷類類型的含蛋白營養(yǎng)物和d)1-500ppm、優(yōu)選10-100ppm的該混合物。a)-d)總量優(yōu)選至少為80％(按重量計)。
當(dāng)制備該食物組合物時，可以把該食物組合物添加劑與干組份混合，所述干組份由谷類如磨成粉或碾碎的小麥、燕麥、大麥、玉米和水稻；以菜籽、大豆和向日葵為主的植物蛋白飼料；動物蛋白飼料如血粉、肉、骨粉和魚粉；糖蜜和；奶產(chǎn)品如各種奶粉和乳清粉組成?；旌纤械母尚蕴砑觿┖?，加入液體組份和加熱后變成液體的組份。液體組份可由脂質(zhì)如脂肪、例如任選加熱液化的動物脂肪和植物脂肪和/或羧酸如脂肪酸組成。充分混合后，按照組分研磨的程度得到粉狀或顆粒狀的密度。為了防止儲藏過程中的分離，應(yīng)當(dāng)優(yōu)選把水加入動物飼料中，然后使其經(jīng)歷常規(guī)的制粒、膨脹或壓制加工。干燥除去任何多余的水份。如果需要的話，也可以把所得到的顆粒狀動物飼料粉碎成粒度較小的顆粒。
飲用水補(bǔ)充劑可以含有2-90％(按干重計)、優(yōu)選10-50％(按干重計)的香芹酚和麝香草酚。除了香芹酚和麝香草酚外，該補(bǔ)充劑還含有10-98％(按干重計)的大量的其它組份。常用的組份是礦物鹽、維生素、促進(jìn)健康和生長的天然物質(zhì)、食用香料、水溶性或可水分散載體，如糖、奶粉、奶副產(chǎn)品和纖維素衍生物，分散劑和穩(wěn)定劑，如水溶性或可水分散的聚合物。促進(jìn)健康和生長的天然物質(zhì)的適當(dāng)例子已在上文中進(jìn)行了描述。當(dāng)制備飲用水時，一般把補(bǔ)充劑以能夠使天然物質(zhì)達(dá)到5-2000ppm、優(yōu)選20-600ppm濃度的量加入水中。
獸用頓服藥浴補(bǔ)充劑可以含有30-98％(按干重計)的香芹酚和麝香草酚和2-70％(按重量計)的礦物鹽、水溶性或可水分散的載體、分散劑和/或穩(wěn)定劑，如水溶性或可水分散的聚合物。
在本發(fā)明的范圍內(nèi)，也有可能制備食物組合物的懸浮液。如果制備用于立即食用的飼料，這是非常方便的。
現(xiàn)在通過下列實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)說明本發(fā)明。
實(shí)施例1在體外測定本發(fā)明組合物對無害密螺旋體(Treponema innocens)和舌骨痢疾密螺旋體的抗菌活性。在該試驗(yàn)中，適用下列有機(jī)物、培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件和評估方法。有機(jī)體無害密螺旋體ATTC 29796舌骨痢疾密螺旋體ATCC 31212生長培養(yǎng)基酪蛋白-胨豆粉-胨瓊脂USP(Caso-Agar，Merch第5458號)+5％羊血培養(yǎng)條件在37℃厭氧孵育4-6天評估方法瓊脂稀釋試驗(yàn)(按照DIN 58940，teil 6)用向其中加入了10％(按重量計)香芹酚和/或麝香草酚的聚丙二醇溶液的生長培養(yǎng)基來制備瓊脂平皿。
制備每種有機(jī)體濃度為10.9cfu/ml的細(xì)胞懸浮液。然后用多點(diǎn)孵育器以1μl對大約0.5cm2的最終表面的量把單一懸浮液分布在瓊脂表面。各種濃度的香芹酚和/或麝香草酚孵育兩個平行平皿，并且在每個平皿上各采用兩種有機(jī)物的三個孵育點(diǎn)。孵育期后，觀察有機(jī)體的生長。如果沒有觀察到生長，下一個試驗(yàn)把香芹酚和/或麝香草酚的濃度減半。記錄導(dǎo)致細(xì)菌生長總抑制的香芹酚和/或麝香草酚的最小濃度，將其作為活性組份或化合物的MIC值(最小抑制濃度)。得到下列試驗(yàn)結(jié)果。
表1.最小抑制濃度試驗(yàn)編號 活性化合物MIC值，ppm無害密螺旋體 舌骨痢疾密螺旋體1 麝香草酚 625 6252 香芹酚 313 3133 2/3麝香草酚156 1561/3香芹酚4 1/2麝香草酚156 1561/2香芹酚5 1/3麝香草酚＜78 ＜782/3香芹酚從結(jié)果中顯示本發(fā)明組合物對受試有機(jī)體具有協(xié)同抗菌作用。
實(shí)施例2為了測定本發(fā)明混合物降低密螺旋體屬出現(xiàn)的效率，用生長豬(25kg到100kg)進(jìn)行了一些試驗(yàn)，該豬飼喂含下列組份的商用飼料。粗蛋白質(zhì)，％24.0粗脂肪，％ 6.0粗纖維，％ 3.5粗灰，％ 5.0賴氨酸，％1.35MJDE，kg 14.3通過把適當(dāng)量的小麥、羽扇豆仁、低芥酸菜子粉、稻糠(ricepollare)、肉粉、血粉和動物脂混合配制飼料。向試驗(yàn)組所給的飼料中加入100ppm含有67ppm香芹酚和33ppm麝香草酚的混合物。
在生長期中，監(jiān)控動物糞便中密螺旋體的出現(xiàn)情況，并記錄痢疾的發(fā)作。得到下列結(jié)果。
表2.豬痢疾和糞便中密螺旋體的出現(xiàn)所監(jiān)控的動物編號 糞便中密螺旋體的出現(xiàn) 豬痢疾的發(fā)作對照組23 8 1試驗(yàn)組10 0 0這些結(jié)果清楚地表明，與陰性對照組相比，當(dāng)本發(fā)明混合物加入飼料中時，密螺旋體的出現(xiàn)率低很多。
實(shí)施例3下列試驗(yàn)的目的是調(diào)查本發(fā)明組合物增加動物生長和抑制密螺旋體生長的作用。把兩圈中40頭雄性豬分配到各治療組中。在46日齡時分別稱量豬，再給予試驗(yàn)飼料。該試驗(yàn)持續(xù)42天。試驗(yàn)的所有飼料都含有下列基本組份。粗蛋白質(zhì)，％24.4粗脂肪，％ 6.3粗纖維，％ 3.5粗灰，％5.3賴氨酸，％ 1.35MJDE，kg14.5通過把適當(dāng)量的小麥、羽扇豆仁、低芥酸菜子粉、稻糠、肉粉、血粉和動物脂混合配制該組合物。
在對照試驗(yàn)A中，向基本組合物中加入100ppm的奧喹多司和25ppm的硫姆林，而在按照本發(fā)明的試驗(yàn)I和II中，飼料含有100ppm和200ppm的實(shí)施例2中所公開的香芹酚和麝香草酚混合物。在對照試驗(yàn)B中，飼料由基本組合物組成。得到下列結(jié)果。
表3.對46到67日齡之間的豬的表現(xiàn)的影響試驗(yàn) A B III起始體重(kg)15.3 15.2 15.3 15.2最終體重(kg)28.6 27.0 26.9 27.2每日增重(g) 666 588 578 595飼料攝入量(g/d) 1100 1000 933 971飼料增重1.65 1.70 1.61 1.63表4.對67到88日齡之間的豬的表現(xiàn)的影響試驗(yàn) ABI II最終體重(kg) 42.8 41.9 40.8 41.2每日增重(g) 665 695 655 671飼料攝入量(kg/d) 1.38 1.42 1.32 1.37飼料增重 2.04 2.05 2.02 2.05從這些結(jié)果中我們能夠清楚地看到，本發(fā)明混合物的加入增加了生長，尤其是在46到67天的年齡期間。
通過飼喂四組、每組5頭豬以對照試驗(yàn)A和B所用飲食以及試驗(yàn)I和II中所用飲食來調(diào)查含有本發(fā)明活性混合物的飲食的作用及糞便中密螺旋體的出現(xiàn)。在飼喂豬第4、8和16天后，就密螺旋體的出現(xiàn)檢查每只豬的糞便。得到下列結(jié)果。
表5.糞便中密螺旋體的出現(xiàn)率含有密螺旋體的樣本時間，天 對照組A 對照組B 試驗(yàn)I試驗(yàn)II4 1 3 448 3 3 0016 0 0 00從結(jié)果可見，顯然8天后，飼喂本發(fā)明飲食的豬在其糞便中沒有密螺旋體，而飼喂對照組A和B中飲食的豬需要16天的治療。
權(quán)利要求
1.一種組合物，其特征在于它含有5ppm到90％按干重計的天然物質(zhì)香芹酚和5ppm到80％按干重計的天然物質(zhì)麝香草酚，香芹酚與麝香草酚的重量比為1∶5到10∶1。
2.一種組合物，其特征在于重量比為2∶3到4∶1。
3.權(quán)利要求1或2所述的食物組合物，其特征在于它含有占食物組合物干重的5-2000ppm、優(yōu)選20-600ppm的香芹酚和麝香草酚。
4.權(quán)利要求3所述的食物組合物，其特征在于該食物組合物含有0.1-30ppm按干重計的選自下述的天然物質(zhì)愈創(chuàng)木酚、丁子香酚、辣椒堿和鞣酸，它們能夠促進(jìn)健康和加速生長；和/或含有0.2-50ppm按干重計的選自下述的天然物質(zhì)甲氧甲酚、茴香腦、十-、十一-和/或十二內(nèi)酯、喹啉、紫羅酮和/或鳶尾酮、姜醇、胡椒堿、亞丙基2-苯并[c]呋喃酮和/或亞丁基2-苯并[c]呋喃酮、水楊酸戊酯和/或水楊酸芐酯。
5.權(quán)利要求4所述的食物組合物，其特征在于它含有a)10-70％按重量計的谷類，b)1-12％按重量計的飼料脂肪，和c)10-50％按重量計的非谷類含蛋白營養(yǎng)物。
6.權(quán)利要求1或2所述的預(yù)混物，其特征在于它含有1-10％按干重計的香芹酚和麝香草酚、0-40％按干重計的生長促進(jìn)添加劑、健康改善添加劑和食用香料以及50-99％按干重計的吸收支持物。
7.一種食物添加劑，其特征在于它含有0.2-5％按干重計的權(quán)利要求6中所述的預(yù)混物、80-99％按干重計的維生素、酶、礦物鹽、谷粉、蛋白組份、碳水化合物組份、麥粗粉和/或糠。
8.權(quán)利要求1或2所述的飲用水補(bǔ)充劑，其特征在于它含有2-90％按干重計的香芹酚和麝香草酚。
9.權(quán)利要求1或2所述的獸用頓服藥浴補(bǔ)充劑，其特征在于它含有30-98％按干重計的香芹酚和麝香草酚。
10.權(quán)利要求1或2中所述的組合物作為殺菌劑的用途。
11.權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的用作藥劑的組合物。
12.權(quán)利要求11所述的組合物，其中藥劑可用于抵抗豬痢疾。
13.權(quán)利要求11所述的組合物，其中該藥劑可以用于獸用頓服藥浴治療有蹄動物的蹄。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種含有天然物質(zhì)香芹酚和麝香草酚的組合物。香芹酚的含量為5ppm到90%(按干重計),麝香草酚的含量為5ppm到80%(按干重計),香芹酚與麝香草酚的重量比是1∶5到10∶1。該組合物對密螺旋體屬具有協(xié)同殺菌功效,其中的密螺旋體屬可以引起嚴(yán)重的粘膜出血疾病,例如豬痢疾和嚴(yán)重的有蹄動物尤其是偶蹄動物如反芻動物的感染性蹄疾病。該組合物適合通過食物或飲用水或獸用頓服藥浴對動物給藥。
文檔編號A61P31/04GK1350435SQ00807423
公開日2002年5月22日 申請日期2000年4月17日 優(yōu)先權(quán)日1999年5月12日
發(fā)明者R·羅薩 申請人:阿克佐諾貝爾公司