一種具有溶血栓功效的淡豆豉粉的制備方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明設及一種淡豆鼓粉的制備方法，具體是W五類大豆為原料經(jīng)過發(fā)芽發(fā)酵制 得一種具有溶血栓功效的淡豆鼓粉的制備方法，屬于食品加工領域。 技術背景
[0002] 血栓性疾病是嚴重危害人類健康的常見病、多發(fā)病，其致殘和致死率均較高，主要 包括動脈粥樣血栓形成、靜脈血栓栓塞和外周動脈栓塞。據(jù)估計，全世界每年屯、血管病死亡 人數(shù)約1300萬，僅美國急性屯、肌梗死人數(shù)即為150萬，約1/3致命，占美國疾病總死亡率的 30%，據(jù)統(tǒng)計，我國急性血栓病年平均發(fā)病率為64.55人/10萬人，屯、肌梗塞平均發(fā)病率為 42人/10萬人。目前在治療諸如肺栓塞、急性屯、肌梗塞、腦血栓等血栓疾病溶栓療法，即注射 溶栓劑使血管再通。從溶栓劑開始作為藥物使用到現(xiàn)在，溶栓劑的開發(fā)基本分為=代。臨床 上常用的第一代溶栓劑是尿激酶和鏈激酶。兩者均為外源性纖維蛋白溶解系統(tǒng)激活劑。主 要特征是無纖維蛋白特異性，副作用大，易誘發(fā)全身纖溶亢進，并伴有嚴重出血癥狀。其中 尿激酶無抗原性和致熱性，但在人體內(nèi)持續(xù)作用時間短(僅為30min)。鏈激酶具有抗原性， Ig-SK復合物引起免疫復合體病癥表現(xiàn)為發(fā)熱、關節(jié)痛、白細胞分裂性脈管炎等。如果靜脈 滴速過快(正常劑量50滴/min)會引起低血壓，循環(huán)中原有的SK抗體可令SK溶栓失效。另外， 尿激酶和鏈激酶大量進入血液循環(huán)后，由于凝血酶原、纖維蛋白原等凝血因子的消耗及纖 維蛋白原降解物(FDP)的積累，會造成全身性出血傾向。第二代溶栓劑主要包括甲氧苯甲酯 纖溶酶原鏈激酶復合物（APSAC)、單鏈尿激酶型纖溶酶原激活劑（t-PA)、蝴激酶 (Lumbrukinase)、葡激酶（SAK)和納豆激酶等。特征是有一定程度的纖維蛋白特異性，但連 續(xù)滴注仍可導致出血。
[0003] 第=代溶栓劑是應用現(xiàn)代分子生物學技術，對第一代和第二代溶栓劑進行改進， 在特異性、半衰期及溶栓效率方面都有較大提高的新型溶栓劑。第=代溶栓劑主要包括突 變體、嵌合體及導向溶栓劑=大類。它們均能夠高度選擇性溶栓，作用時間長，但仍具有抗 原性過敏反應。
[0004] 綜上所述，在臨床上使用的溶栓劑均在不同程度上存在一定的缺陷或毒性較強、 副作用大或在體內(nèi)半衰期短，藥效難W發(fā)揮，或來源緊缺、價格昂貴。為了解決第一、二代溶 栓劑副作用大，半衰期短等特點，研究人員除了致力于第=代溶栓劑的開發(fā)W外，同時也在 尋找天然的較具優(yōu)勢和發(fā)展前途的溶栓物質(zhì)，將具有溶栓作用的天然食物研制開發(fā)成具有 溶血栓功效的產(chǎn)品。
[0005] 豆鼓是W大豆為主要原料，經(jīng)過浸泡、蒸煮、攤涼、制曲、發(fā)酵等一系列工藝而制成 的一種傳統(tǒng)調(diào)味副食品。根據(jù)發(fā)酵時是否使用食鹽，可分為淡豆鼓和咸豆鼓。在我國，豆鼓 一般W家庭小作坊的形式進行生產(chǎn)和加工，具有加工工藝復雜，生產(chǎn)周期漫長等缺點，并且 加工制作過程中通常采用自然接種制曲的方法，無法實現(xiàn)豆鼓的大規(guī)模生產(chǎn)，也影響了豆 鼓的進一步推廣。而同樣源于我國豆鼓的日本納豆和印度天培，由于實現(xiàn)了純種培養(yǎng)，并且 對其生理功能的研究也較為深入，工業(yè)化水平相對中國豆鼓也更高，所W目前在食品界的 現(xiàn)狀和影響都得到較大的發(fā)展。
[0006] 淡豆鼓是豆鼓種類的一個細分品類，是一劑中國傳統(tǒng)的中藥，克服了傳統(tǒng)豆鼓高 油高鹽的缺點，具有豐富的保健功能，傳統(tǒng)淡豆鼓在中藥中常作為解表劑，事實上通過特定 菌種發(fā)酵制得淡豆鼓里含有溶血栓酶，而溶血栓酶具有治療和預防屯、腦血管疾病的功效。 但目前淡豆鼓僅僅被用作中藥材中的解表劑，淡豆鼓單一的原料W及產(chǎn)品形式和運輸儲存 中的缺陷也限制了其進一步發(fā)展。另一方面目前淡豆鼓生產(chǎn)多沿用歷版《中國藥典》制法， 而《中國藥典》中對于淡豆鼓的炮制工藝并未給出詳細的參數(shù)。W致于市場上銷售的淡豆鼓 發(fā)酵程度不一，成品質(zhì)量參差不齊、偽劣混雜等，難W達到用藥功效，直接影響臨床用藥的 安全性和有效性。因此研制開發(fā)出一種具有溶血栓功效的淡豆鼓標準化大眾產(chǎn)品具有廣闊 的前景。將發(fā)酵好的淡豆鼓進行低溫熱累干燥處理，傳統(tǒng)的家庭作坊式生產(chǎn)干燥多利用太 陽等自然干燥方法，顯然運種干燥方式不適合工業(yè)化大生產(chǎn)，目前工業(yè)化生產(chǎn)多采用熱風 干燥方式，運種干燥方式生產(chǎn)效率高，干燥時間縮短，減少了生物污染，但運種干燥方式對 食品的質(zhì)構和功能性成分破壞性較大，另外運種干燥方式熱能利用率較低，并伴有熱量和 高濕廢氣的排出。而低溫熱累干燥具有作用條件溫和，干燥效率高的特點，在干制的過程中 可W最大限度的保留淡豆鼓中的活性成分。同時還需要將干燥后的淡豆鼓進行粉碎處理， 而目前常規(guī)粉碎方法在粉碎過程中會產(chǎn)生大量的熱，破壞了淡豆鼓粉的口感和功能性成 分。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的是克服目前淡豆鼓制作原料單一，加工工藝復雜，炮制工藝參數(shù)各 異，生產(chǎn)周期漫長，加工制作過程中采用自然接種制曲，無法實現(xiàn)淡豆鼓的大規(guī)模生產(chǎn)等缺 點，而公開一種具有溶血栓功效的淡豆鼓粉的制備方法。
[000引本發(fā)明首先從原料上進行了擴充，不僅僅局限于傳統(tǒng)原料黑豆，而選用黑豆、黃 豆、綠豆、紅豆和白蕓豆，并將原料進行人工發(fā)芽的預處理，發(fā)芽處理可W使豆類中的許多 不良性質(zhì)得W克服和改進，如氣味、抗膜蛋白酶抑制劑等；同時在發(fā)芽過程中大豆發(fā)生了一 系列化學和生理變化，蛋白質(zhì)、還原糖和Vc含量顯著增加，脂肪含量得到了降低。因此發(fā)芽 豆類在營養(yǎng)價值上得到進一步的提高，更有利于人體吸收，另一方面，發(fā)芽豆類營養(yǎng)上的變 化也使得后續(xù)純種發(fā)酵產(chǎn)生的酶活力更高。
[0009] 優(yōu)選中國根酶為純種發(fā)酵菌種發(fā)酵，發(fā)酵人工發(fā)芽后的發(fā)芽豆類。中國根霉（ 化izopus化inese) 12菌株是從我國生產(chǎn)的傳統(tǒng)酒藥中分離得到的，它能產(chǎn)生一種類似于 印尼的天培激酶(Tempeh kinase)和日本的納豆激酶（化to kinase )血栓溶酶，該酶對防 治屯、腦血管疾病具有顯著功效。
[0010] 本發(fā)明是通過W下步驟制備完成： a. 發(fā)芽:將大豆用清水沖洗干凈后加入2-5倍質(zhì)量的清水浸泡12-2地，取出大豆?jié)u干， 平鋪于泡沫箱中，蓋上經(jīng)潤濕后的紗布，避光放置，每隔4-化后再次潤濕紗布，36-72h后可 得發(fā)芽大豆； b. 挑選:選擇充分成熟，顆粒飽滿均勻、無蟲蝕、無霉爛變質(zhì)的發(fā)芽大豆； C.蒸煮滅菌：12rc高壓滅菌蒸煮15min，冷卻至35°CW下接種； d.根霉菌種的活化及擴大培養(yǎng):將根霉保藏菌種1~2環(huán)接入斜面活化培養(yǎng)基中，28°C- 35°C培養(yǎng)72h-12化，接種培養(yǎng)好的斜面菌種2環(huán)到S角瓶擴大培養(yǎng)液體培養(yǎng)基中，28°C-35 °(：震蕩培養(yǎng)72h-120h; e.接種發(fā)酵:將=角瓶擴大培養(yǎng)液體培養(yǎng)基按照0.05:1-0.15:1的質(zhì)量比接種到蒸煮 滅菌冷卻后的大豆中，在28°C-35°C培養(yǎng)5-1 Od，得到淡豆鼓； F.預干燥:采用低溫熱累干燥法對淡豆鼓進行干燥，機器型號:孤C06T化參數(shù)設置為30 。(:-50 °C，干燥 2-化； g. 粉碎:采用低溫液氮粉碎法進行粉碎，參數(shù)為：電壓:220V;主軸轉(zhuǎn)速:280化/min;電 機功率:1500W;通氮量:200~300ml/100g，粉碎后過60目篩，得到淡豆鼓粉； h. 后干燥:采用低溫熱累干燥法對淡豆鼓粉進行干燥，機器型號:孤C06T化參數(shù)設置為 30°C-5(rC，干燥地使淡豆鼓粉含水量在9%W下。
[0011] 所述大豆為黑豆、黃豆、綠豆、紅豆和白蕓豆的一種或幾種，接種率指接入的=角 瓶擴大液體培養(yǎng)基與大豆質(zhì)量的百分比。
[0012] 本發(fā)明的效果在于選用了發(fā)芽的黑豆、黃豆、綠豆、紅豆和白蕓豆等5種大豆為原 料，在豐富傳統(tǒng)豆鼓原料的同時，創(chuàng)新性發(fā)芽預處理提升了淡豆鼓的生物活性，同時也使淡 豆鼓產(chǎn)品更具差異化，可將五色豆鼓粉進行復配從而滿足不同人群的個性化需求。在加工 過程中，優(yōu)選菌種進行純種發(fā)酵克服自然發(fā)酵的缺陷，創(chuàng)造性的引進低溫熱累干燥工藝和 低溫液氮粉碎技術，并將淡豆鼓的生產(chǎn)工藝進行標準化，從而確保最終產(chǎn)品的穩(wěn)定性，并且 在最大限度的保留淡豆鼓生物學活性的同時，將傳統(tǒng)淡豆鼓的產(chǎn)品形態(tài)轉(zhuǎn)化為粉末，有利 于淡豆鼓的運輸保藏和再加工利用。
【具體實施方式】
[0013] W下結合實施例對本發(fā)明做進一步詳細描述： 實施例一：制備黑豆淡豆鼓粉，該淡豆鼓粉除了具有溶血栓功效還富含豐富的優(yōu)質(zhì)蛋 白質(zhì)，具體包括W下制備步驟： a. 發(fā)芽:取300g黑豆用清水沖洗干凈后加入900ml清水浸泡24h，取出黑豆?jié)u干，平鋪于 泡沫箱中，蓋上經(jīng)潤濕后的紗布，避光放置，每隔化后再次潤濕紗布，7化后可得發(fā)芽黑豆； b. 挑選:選擇充分成熟，顆粒飽滿均勻、無蟲蝕、無霉爛變質(zhì)的發(fā)芽黑豆； C.蒸煮滅菌：12rC高壓滅菌蒸煮15min，冷卻至35°CW下接種； d. 根霉菌種的活化及擴大培養(yǎng):將根霉保藏菌種1~2環(huán)接入斜面活化培養(yǎng)基中，35 °C 培養(yǎng)12化，接種培養(yǎng)好的斜面菌種2環(huán)到=角瓶擴大培養(yǎng)液體培養(yǎng)基中，28°C震蕩培養(yǎng)72h; e. 接種發(fā)酵:取22.5ml =角瓶擴大培養(yǎng)液體培養(yǎng)基接種到蒸煮滅菌冷卻后的發(fā)芽黑豆 中，在28 °C培養(yǎng)5d，得到黑豆淡豆鼓； f. 預干燥：采用低溫熱累干燥法對發(fā)酵好的發(fā)芽黑豆淡豆鼓進行干燥，機器型號： 孤C06T化參數(shù)設置為50°C，干燥化； g. 粉碎:采用低溫液氮粉碎法進行粉碎，參數(shù)為：電壓:220V;主軸轉(zhuǎn)速:280化/min;電 機功率:1500W;通氮量:200~300 ml/lOOg，粉碎后過60目篩，得到黑豆淡豆鼓粉； h. 后干燥：采用低溫熱累干燥法對粉碎后的黑豆淡豆鼓粉進行干燥，機器型號： 孤C06T化參數(shù)設置為50°C，干燥地使黑豆淡豆鼓粉含水量在9%W下。
[0014] 實施例二：制備白蕓豆淡豆鼓粉，該淡豆鼓粉除了具有溶血栓功效還具有減肥功 效，包括W下制備步驟： a. 發(fā)芽:取300g白蕓豆用清水沖洗干凈后加入900ml清水浸泡1她，取出白蕓豆?jié)u干，平 鋪于泡沫箱中，蓋上經(jīng)潤濕后的紗布，避光放置，每隔化后再次潤濕紗布，4化后可得發(fā)芽白 蕓豆； b. 挑選:選擇充分成熟，顆粒飽滿均勻、無蟲蝕、無霉爛變質(zhì)的發(fā)芽白蕓豆； C.蒸煮滅菌：12rc高壓滅菌蒸煮15min，冷卻至35°C接種； d. 根霉菌種的活化及擴大培養(yǎng):將根霉保藏菌種1~2環(huán)接入斜面活化培養(yǎng)基中，32 °C 培養(yǎng)72h，接種培養(yǎng)好的斜面菌種2環(huán)到=角瓶擴大培養(yǎng)液體培養(yǎng)基中，32°C震蕩培養(yǎng)72h; e. 接種發(fā)酵:取22.5ml =