專利名稱：一種利用gh1基因啟動(dòng)子區(qū)單核苷酸多態(tài)性預(yù)測(cè)優(yōu)秀冰雪運(yùn)動(dòng)員身高的細(xì)胞生物學(xué)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種預(yù)測(cè)優(yōu)秀冰雪運(yùn)動(dòng)員身高的細(xì)胞生物學(xué)方法。適合于優(yōu)秀冰雪運(yùn)動(dòng)員在基因和蛋白水平上的早期選材，屬于體育科學(xué)與生命科學(xué)交叉的學(xué)科領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
人的身高是一種復(fù)雜的數(shù)量性狀。冰雪運(yùn)動(dòng)員的最終身高由遺傳、環(huán)境、心理、疾病等因素相互作用而決定。研究表明，正常人身高和體質(zhì)量受遺傳因素影響的比例為37% 53%。對(duì)于這種復(fù)雜的數(shù)量性狀而言，除去發(fā)生率很低的單基因突變外，一些關(guān)聯(lián)基因上的單核苷酸多態(tài)性(singlenucleotidepolymorphism, SNP)是引起人類身高差別的遺傳基礎(chǔ)。冰雪運(yùn)動(dòng)員線性生長(zhǎng)有賴于生長(zhǎng)激素釋放激素-生長(zhǎng)激素-胰島素樣生長(zhǎng)因子-內(nèi)分泌軸的穩(wěn)定。其中由腺垂體合成分泌的生長(zhǎng)激素(growth hormone,GH)的質(zhì)和量至關(guān)重要。人生后GH的編碼基因?yàn)镚Hl基因。正常人GHl基因定位于17q22_q24，包括了由5個(gè)相關(guān)基因(GH1、GH2、CSH1、CSH2、CSHP1)組成的一個(gè)長(zhǎng)約66kb的基因簇。GHl基因啟動(dòng)子區(qū)，尤其是5’端表現(xiàn)出了高度的多態(tài)性，在GHl基因啟動(dòng)子近端區(qū)域535bp的長(zhǎng)度中，出現(xiàn)了 16個(gè)單核甘酸多態(tài)性(SNP)。研究表明，GHl基因啟動(dòng)子區(qū)存在密集分布的SNP，并提示在成人身高的變異中，至少有3.3%是由于GHl基因啟動(dòng)子區(qū)的多態(tài)性所引起。GHl基因啟動(dòng)子區(qū)單核苷酸多態(tài)性變化是引起人類身高差別的遺傳基礎(chǔ)?？偟膩碚f，GHl基因遺傳特點(diǎn)相當(dāng)復(fù)雜。而其表達(dá)產(chǎn)物GH又對(duì)于人的生長(zhǎng)發(fā)育起著十分重要的作用。因此，GHl基因的多態(tài)性對(duì)正常人身高應(yīng)當(dāng)存在著較重要的影響。

運(yùn)動(dòng)員的成長(zhǎng)過程中伴隨著身體形態(tài)的變化，對(duì)運(yùn)動(dòng)員身體形態(tài)尤其是身高的研究是體育科學(xué)研究中基礎(chǔ)而又重要的一個(gè)環(huán)節(jié)。我國優(yōu)秀冰雪運(yùn)動(dòng)員身高特征的研究結(jié)果，將有助于完善、系統(tǒng)的科學(xué)研究體系的建立，同時(shí)對(duì)構(gòu)建科學(xué)、系統(tǒng)的我國優(yōu)秀冰雪運(yùn)動(dòng)員的高模型起到積極作用，并為今后的身體機(jī)能、技戰(zhàn)術(shù)、心理以及形成系統(tǒng)的研究體系奠定一定的理論基礎(chǔ)。自1998年長(zhǎng)野冬季奧運(yùn)會(huì)短道速滑由表演項(xiàng)目正式獲準(zhǔn)成為比賽項(xiàng)目以來，該項(xiàng)目的6枚金牌倍受冰雪強(qiáng)國矚目。短道運(yùn)動(dòng)員的選材和育材也理所當(dāng)然的受到關(guān)注。身高作為身體形態(tài)的一個(gè)主要方面，有哪些特點(diǎn)，頂尖選手和非頂尖選手之間的身高是否有差別，根據(jù)項(xiàng)目的特點(diǎn)究竟哪種身高更為適宜，此前曾有過專門研究，但隨著時(shí)間的推移，該項(xiàng)目水平的提高，運(yùn)動(dòng)員的身高又有哪些新的特點(diǎn)，需要我們進(jìn)一步做出更科學(xué)的研究和推斷，探討當(dāng)今世界優(yōu)秀冰雪運(yùn)動(dòng)員的身高特征會(huì)對(duì)我國的該項(xiàng)目的選材和育材方面有一定的參考價(jià)值。由于我國對(duì)優(yōu)秀冰雪運(yùn)動(dòng)員最適身高的研究起步比較晚，而且冰雪運(yùn)動(dòng)員的育材和選材大部分都是靠經(jīng)驗(yàn)，沒有建立在生命科學(xué)的基礎(chǔ)上。近些年來，隨著體育科學(xué)和生命科學(xué)的飛速發(fā)展及兩者在理論、方法、技術(shù)和手段上的相互交叉和滲透，強(qiáng)有力地推動(dòng)者冰雪運(yùn)動(dòng)員早期選材向著科學(xué)化和系統(tǒng)化的方向轉(zhuǎn)型和發(fā)展。因此，有必要建立一套完善的、科學(xué)的、系統(tǒng)的細(xì)胞生物學(xué)方法，從細(xì)胞水平上有效地預(yù)測(cè)優(yōu)秀冰雪運(yùn)動(dòng)員的最適身高。研究對(duì)象中分析部分多態(tài)性位點(diǎn)基因型與身高之間的關(guān)系。從而推斷出軟骨組織中特定基因表達(dá)量的差異情況，從細(xì)胞生物學(xué)水平上預(yù)測(cè)基因表達(dá)與身高的聯(lián)系。GHl基因啟動(dòng)子區(qū)S3:G-308T和S7:T_57G兩個(gè)位點(diǎn)的多態(tài)性變化都影響冰雪運(yùn)動(dòng)員的身高，引起冰雪運(yùn)動(dòng)員身材矮小。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種在細(xì)胞生物學(xué)水平上預(yù)測(cè)優(yōu)秀冰雪運(yùn)動(dòng)員身高的方法。本發(fā)明從細(xì)胞生物學(xué)水平上預(yù)測(cè)了優(yōu)秀冰雪運(yùn)動(dòng)員的最適身高，分析GHl部分多態(tài)性位點(diǎn)基因型與身高之間的關(guān)系。方法簡(jiǎn)單，易操作。
具體實(shí)施例方式由下面的一個(gè)實(shí)施例來說明具體實(shí)施方式
:選取普通人和優(yōu)秀冰雪運(yùn)動(dòng)員的外周血液分別作為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。

(I)基因組DNA的提取:采用苯酚-氯仿法從外周血中提取基因組DNA，_20°C保存?zhèn)溆谩?2)PCR擴(kuò)增GHl基因啟動(dòng)子鄰近區(qū)域:采用降落PCR，反應(yīng)參數(shù)為:94°C，5min ；94°C, 30s ;69 59°C，30s(循環(huán)每10循環(huán)降低退火溫度I °C，后15個(gè)循環(huán)退火溫度為59°C )，72°C lmin，循環(huán)25次；72°C，7min。PCR產(chǎn)物經(jīng)1.5%的LMA電泳觀察結(jié)果。(3) PCR產(chǎn)物純化、克隆和測(cè)序:產(chǎn)物的純化和克隆分別按照試劑盒中說明書進(jìn)行，克隆后送測(cè)序。(4) SNP的檢測(cè)和分析:找出兩個(gè)SNP位點(diǎn)，分別是S3:G_308T和S7:T_57G。(5)這兩個(gè)位點(diǎn)的多態(tài)性變化都影響冰雪運(yùn)動(dòng)員的身高，引起冰雪運(yùn)動(dòng)員身材矮小。
權(quán)利要求
1.一種在細(xì)胞生物學(xué)水平上預(yù)測(cè)優(yōu)秀冰雪運(yùn)動(dòng)員身高的方法。
2.根據(jù)權(quán)利要求1，此方法特征在于分析GHl部分多態(tài)性位點(diǎn)基因型尤其是S3:G-308T和S7:T-57G 位點(diǎn)與身高之間的關(guān)系。
全文摘要
本發(fā)明實(shí)現(xiàn)了一種在細(xì)胞生物學(xué)水平上預(yù)測(cè)優(yōu)秀冰雪運(yùn)動(dòng)員身高的方法。此方法是分析GH1基因啟動(dòng)子近側(cè)區(qū)域內(nèi)的單核苷酸多態(tài)性(SNP)與人體身高調(diào)控的關(guān)系與身高之間的關(guān)系。利用這種方法探討當(dāng)今世界優(yōu)秀冰雪運(yùn)動(dòng)員的身高特征，會(huì)對(duì)我國的該項(xiàng)目的選材和育材方面有一定的參考價(jià)值。
文檔編號(hào)C12Q1/68GK103160595SQ20131011590
公開日2013年6月19日 申請(qǐng)日期2013年4月7日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月7日
發(fā)明者郭俊清, 劉義峰, 謝長(zhǎng)福, 王文杰, 單志強(qiáng), 關(guān)偉軍 申請(qǐng)人:哈爾濱體育學(xué)院