專利名稱：Il-12/p40結(jié)合蛋白的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及IL_12p40結(jié)合蛋白，具體來(lái)說(shuō)，涉及其在預(yù)防和/或治療急性和慢性炎性疾病中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
人白介素-12(IL_12)是具有獨(dú)特結(jié)構(gòu)和多向作用(Kobayashi，等人(1989) JExp Medl7O:827-845 ；Seder,等人(1993) Proc.Natl.Acad.Sd.90:10188-10192, Ling,等人(1995) J Exp Medl54:116-127 ;Podlaski，等人(1992) Arch.Biochem.Biophys.294:230-237)。IL-12在與涉及免疫和炎性反應(yīng)的幾種疾病有關(guān)的病理學(xué)中起作用。有關(guān)IL-12、其生物活性和其在疾病中的作用的綜述可參見(jiàn)Trinchieri，G.(2003)Nat.Rev.1mmun.3:133-146。在結(jié)構(gòu)上，IL-12是異二聚體蛋白(稱為“p70”蛋白)，其包括35kDa亞單位(p35)和40kDa亞單位(p40),這兩個(gè)亞單位是通過(guò)二硫橋連接在一起的。異二聚體蛋白主要是通過(guò)抗原呈遞細(xì)胞例如單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹(shù)狀細(xì)胞產(chǎn)生的。相對(duì)于P70亞單位，這些類型細(xì)胞還分泌過(guò)量P40亞單位。p40和p35亞單位在基因上是無(wú)關(guān)的，并且沒(méi)有報(bào)道具有生物活性，雖然P40同二聚體可以起IL-12拮抗劑的作用。在功能上，IL-12在調(diào)控抗原特異性T輔助細(xì)胞I型(Thl)與2型(Th2)淋巴細(xì)胞之間的平衡中起關(guān)鍵作用。Thl和Th2細(xì)胞控制自身免疫性病癥的開(kāi)始和發(fā)展，并且IL-12在Thl-淋巴細(xì)胞分化和成熟的調(diào)控中起關(guān)鍵作用。通過(guò)Thl細(xì)胞釋放的細(xì)胞因子是炎性的，并且包括Y干擾素(IFN-y)、IL-2和淋巴毒素(LT)。Th2細(xì)胞分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10和IL-13以幫助體液免疫、變態(tài)反應(yīng)和免疫抑制。與自身免疫性疾病中Thl反應(yīng)占優(yōu)勢(shì)以及IFN- Y的促炎活性相一致的是，IL-12可以在與很多自身免疫性疾病和炎性疾病例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、多發(fā)性硬化(MS)、牛皮癬(PS)和局限性回腸炎(CD)有關(guān)的病理學(xué)中起主要作用。已經(jīng)證實(shí)患有MS的人類患者具有IL-12表達(dá)提高，這是通過(guò)在急性MS斑中的p40mRNA 水平證實(shí)的(Windhagen 等人，(1995) J Exp.Med.182:1985-1996)。此外，與對(duì)照 T細(xì)胞相比，具有得自MS患者的CD40L表達(dá)T細(xì)胞的抗原呈遞細(xì)胞的外體內(nèi)刺激導(dǎo)致IL-12生成增加，這與⑶40/⑶40L相互作用是IL-12的有效誘導(dǎo)劑的觀測(cè)相一致。已經(jīng)觀測(cè)到，與健康對(duì)照相比，在RA患者的滑液中具有增高水平的IL-12p70 (Morita等人(1998)Arth.and Rheumat.41:306-314)。RA滑液中的細(xì)胞因子信使核糖核酸(mRNA)表達(dá)狀況主要鑒定出了 Thl 細(xì)胞因子(Bucht 等人(1996)Clin.Exp.1mmunol.103:347-367)。IL-12 似乎還在與局限性回腸炎有關(guān)的病理學(xué)中起關(guān)鍵作用。已經(jīng)在患有該疾病的患者的腸粘膜中觀測(cè)到 EMF-Y 和 IL-12 表達(dá)的增加(Fais 等人(1994) J Interferon Res.14:235-238 ；Parronchi 等人(1997) Am.J.Path.150:823-832 ；Monteleone 等人(1997) Gastroent.112:1169-1178，and Berrebi 等人(1998)Am.J Pathl52:667-672)。來(lái)自 CD 患者的固有層的T細(xì)胞的細(xì)胞因子分泌的特征在于主要是Thl反應(yīng)，板塊大大增加大IFN-Y水平(Fuss，等人(1996) J Immunol.157:1261-1270)。此外，得自⑶患者的結(jié)腸組織切片表明富含表達(dá)IL-12的巨嗜細(xì)胞和表達(dá)IFN-Y的T細(xì)胞(Parronchi等人，(1997) Am.J.Path.150:823-832)。IL-23也是異二聚細(xì)胞因子，并且屬于由5個(gè)這樣的異二聚細(xì)胞因子組成的家族，5個(gè)這樣的異二聚細(xì)胞因子包括IL-12和IL-27 (Trinchieri等人，(2003) Immunity 19:641-644)。IL-23與IL-12具有相同的p40亞單位，但是與pl9亞單位經(jīng)由二硫鍵結(jié)合。pl9亞單位在結(jié)構(gòu)上與IL-6、粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)以及IL-12的p35亞單位有關(guān)，IL-23是通過(guò)與JLL-12類似大細(xì)胞類型產(chǎn)生的，并且其受體是在T細(xì)胞、NK細(xì)胞以及吞噬和樹(shù)狀造血細(xì)胞上表達(dá)的。IL-23通過(guò)與由BL-23R和IL-12 0 I組成的異二聚受體結(jié)合而介導(dǎo)信號(hào)傳遞。IL-12受體也具有EL-12 β I亞單位，IL-12受體是由IL-12 β I和IL-12 β 2組成的。DL-23與IL-12有重疊功能(通過(guò)誘導(dǎo)IFN-Y生成、Thl細(xì)胞分化以及激活樹(shù)狀細(xì)胞的抗原呈遞功能)，然而，其選擇性地誘導(dǎo)記憶T細(xì)胞的增殖(Oppmann等人(2000)Immunity 13:715-725, Parham,等人(2002) J.1mmunol.168:5699-5708)。IL-23在自身免疫炎癥中的作用已經(jīng)通過(guò)用pl9剔除的小鼠進(jìn)行的試驗(yàn)而得到了部分探明(Murphy 等人 J Exp Medl98: 1951-1957 ；Cua 等人(2003) Nature421:744-748)。研究已經(jīng)證明IL-23調(diào)節(jié)對(duì)于感染的免疫反應(yīng)(參見(jiàn)例如Pirhonen，等人(2002) J.1mmunol.169:5673-5678 ;Broberg,等人(2002) J.1nterferon Cytokine Res.22:641-651 ；Elkins,等人(2002) Infection Immunity70: 1936-1948 ；Cooper,等人(2002)J.1mmunol.168:1322-1327)。據(jù)信IL-23在免疫介導(dǎo)的炎性疾病中起作用(Langrish等人，(2004)Immunological Reviews202:96-105)。由于人IL-12在多種人類病癥中的作用，已經(jīng)設(shè)計(jì)了治療策略來(lái)抑制或抵抗IL-12活性。特別是，已經(jīng) 尋找了與IL-12結(jié)合并中和IL-12的抗體來(lái)作為抑制IL-12活性的手段。某些較早發(fā)現(xiàn)的抗體是鼠單克隆抗體(mAb)，由用IL-12免疫接種的小鼠淋巴細(xì)胞制得的雜交瘤分泌的(參見(jiàn)例如Strober等人，PCT公開(kāi)W097/15327 ；Gately等人，W09937682A2 ；Neurath 等人，J Exp.Medl82:1281-1290(1995) ；Duchmarm 等人，JImmunol.26:934-938 (1996))。這些鼠IL-12抗體在體內(nèi)應(yīng)用方面是有限的，因?yàn)榘研∈罂贵w施用給人類會(huì)帶來(lái)一些問(wèn)題，例如短的血清半存留期，不能夠引發(fā)一些人類效應(yīng)子功能，以及在人類中引起抗小鼠抗體的不希望的免疫反應(yīng)(“人抗小鼠抗體”(HAMA)反應(yīng))?？朔谌祟愔惺褂萌罂贵w帶來(lái)的問(wèn)題的一種方法是產(chǎn)生全人抗體，例如Salfeld等人，PCT公開(kāi)W000/56772A1中描述的方法?？朔谌祟愔惺褂萌罂贵w帶來(lái)的問(wèn)題的其他方法已經(jīng)涉及對(duì)抗體進(jìn)行基因工程處理，使得其更“類似人”。例如，已經(jīng)制備了嵌合型抗體，其中抗體鏈的可變區(qū)是源自鼠，并且抗體鏈的恒定區(qū)是源自人(Junghans，等人(1990)Cancer Res.50:1495-1502 ;Brown 等人(1991)Proc.Natl.Acad.Sc1.88:2663-2667 ;Kettleborough 等人(1991) Prot.Engineer.4:773-783)。這樣的抗 IL-12 的嵌合型抗體還公開(kāi)在Peritt等人PCT公開(kāi)W02002097048A2中。然而，由于這些嵌合型抗體仍然保留著鼠可變鏈序列，當(dāng)長(zhǎng)時(shí)間施用時(shí)，他們?nèi)匀挥锌赡芤鸩幌Ｍ拿庖叻磻?yīng)，尤其是人抗嵌合抗體(HACA)反應(yīng)。本領(lǐng)域需要能夠結(jié)合IL-12的p40亞單位(IL_12p40)的改進(jìn)的抗體。這樣的抗體優(yōu)選結(jié)合IL-12和/或IL-23。這樣的抗體優(yōu)選能夠結(jié)合IL-12和/或IL-23。本發(fā)明提供了一個(gè)新家族的結(jié)合蛋白、CDR接枝抗體、人源化抗體及其片段，其能夠結(jié)合IL-12p40，以高親合力結(jié)合，以及結(jié)合并中和IL-12和/或IL-23。發(fā)明概述本發(fā)明涉及IL_12p40結(jié)合蛋白，特別是能夠結(jié)合人IL-12的p40亞單位和人IL-23的p40亞單位的抗體。此外，本發(fā)明提供了制備和使用IL-12p40結(jié)合蛋白的方法。本發(fā)明的一個(gè) 方面涉及包括能夠結(jié)合IL-12的p40亞單位的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的結(jié)合蛋白。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包括至少一個(gè)包含選自下列的氨基酸序列的CDR:CDR-H1.X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7 (SEQ ID N0:55)，其中父1是0、1(、1'或S;X2 是 Y、S 或 T ;父3是丫、￥、6、胃、5或？；X4 是 I 或 M ;X5 是 H、G、E 或 V ;X6是V，或者不存在；且X7是S，或者不存在；CDR-1X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-Xic1-X11-X12-X13-X14-X15-X16-X17-X18-X19-X20 (SEQID NO:56)，其中父1是!1、0、6、胃、5、￥或1 ;X2 是 I 或 F ;X3 是 Y、W、L、S、N、D 或G ;X4是 W、P、H、T 或S ;X5 是0、63、八或 I ;X6 是D、G、S、T 或N;父7是0、6、3或P;X8 是K、N、S、E、T 或H;X9 是 Y、T、P、I 或N;Xltl 是 Y、N、T、H、K、S 或G ;X11 是 N 或 Y ;
X12是P、N,A 、D或S ;X13是S、E、D或 P;X14是L.K.D.T或Y ;X15是K.F.V.M.R或A;X16是S.K.Q.P或者不存在；X17是D.G.R或者不存在；X18是F，或者不存在；X19是Q，或者不存在；且X2Q是D，或者不存在；CDR-H3. X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13 (SEQ ID N0:57)，其中Xi 是 R、N 或 W ;X2 是6、1\1 、？或H ;X3 是 I、R、F、Y 或Q ;X4 是 R、V、Y、F 或 A ;X5是5、隊(duì)6、六或R;X6 是 A、Y、L、F 或 M ;X7 是 M、A、D、L 或F ;X8是D.M.Y或F
X9 是 Y、D 或 N ;X10是Y、A,或者不存在；Xn是M，或者不存在；X12是0，或者不存在；且X13是Y，或者不存在；CDR-L1. X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15(SEQ ID N0:58)，其中Xi 是 K 或 R ;X2 是 A ;X3 是 S ;X4 是 Q 或 E ;X5 是 S 或 N ;X6 是 V 或 I ;X7 是 S、G 或 D;父8是隊(duì)1'或1(;X9 是D、N或 Y;X1Q 是 V、G 或 L ;Xn 是 A、I 或 H ;父12是5，或者不存在；父13是？，或者不存在；X14是M，或者不存在；且X15是N，或者不存在；
CDR-L2.X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8 (SEQ ID NO:59)，其中X1 是 Y 或 S ;x2是八或Τ;X3 是 S 或 A ;X4 是 N、H、S 或 Q ;X5 是 R、N 或 S ;X6 是 Y、Q 或 I ;X7 是 T、S 或 G ;且X8是S，或者不存在；和CDR-L3.X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9(SEQ ID Ν0:60)，其中X1 是 Q ;X2 是0;X3 是 D、Y 或 S ;X4 是 Y、N、K 或 I ;父5是隊(duì)1\3或Ε;X6 是 S、Y、V或 W;X7 是 P ;X8 是胃、？、￥、1^ 或P ;且X9 是 T 或 S。優(yōu)選地，抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包括至少一個(gè)包含選自下列的氨基酸序列的⑶R:SEQ IDN0.:35 的殘基 31-37 ；SEQ ID N0.:35 的殘基 52-67 ；SEQ ID N0.:35 的殘基 100-108 ；SEQID N0.:36 的殘基 24-34 ;SEQ ID N0.:36 的殘基 50-56 ;SEQ ID N0.:36 的殘基 89-97 ;SEQID N0.:37 的殘基 31-37 ；SEQ ID N0.:37 的殘基 52-67 ；SEQ ID N0.:37 的殘基 100-109 ；SEQ ID N0.:38 的殘基 24-34 ;SEQ ID N0.:38 的殘基 50-56 ;SEQ ID N0.:38 的殘基89-97 ；SEQ ID N0.:39 的殘基 31-35 ;SEQ ID N0.:39 的殘基 50-66 ;SEQ ID N0.:39 的殘基99-106 ；SEQ ID N0.:40 的殘基 24-34 ;SEQ ID N0.:40 的殘基 50-56 ;SEQ ID N0.:40 的殘基 89-97 ；SEQ ID N0.:41 的殘基 31-35 ；SEQ ID N0.:41 的殘基 50-66 ；SEQ ID N0.:41 的殘基 99-106 ;SEQ ID N0.:42 的殘基 24-34 ;SEQ ID N0.:42 的殘基 50-56 ;SEQ ID N0.:42的殘基 89-97 ;SEQ ID JNU.:43 的殘基 31-35 ;SEQ ID N0.:43 的殘基 50-66 ;SEQ ID N0.:43 的殘基 99-106 ;SEQ ID N0.:44 的殘基 24-34 ;SEQ ID N0.:44 的殘基 50-56 ;SEQ IDN0.:44 的殘基 89-97 ;SEQ ID N0.:45 的殘基 31-35 ;SEQ ID N0.:45 的殘基 50-66 ;SEQ IDN0.:45 的殘基99-101 ;SEQ ID N0.:46 的殘基24-34 ;SEQ ID N0.:46 的殘基50-56 ;SEQ IDN0.:46 的殘基 89-97 ;SEQ ID N0.:47 的殘基 31-35 ;SEQ ID N0.:47 的殘基 50-66 ;SEQ IDN0.:47 的殘基99-106 ;SEQ ID N0.:48 的殘基24-34 ;SEQ ID N0.:48 的殘基50-56 ;SEQ IDN0.:48 的殘基 89-97 ;SEQ ID N0.:49 的殘基 31-35 ;SEQ ID N0.:49 的殘基 50-66 ;SEQ IDN0.:49 的殘基99-111 ;SEQ ID N0.:50 的殘基24-38 ;SEQ ID N0.:50 的殘基53-60 ;SEQ IDN0.:50 的殘基93-101 ;SEQ ID N0.:51 的殘基31-37 ;SEQ ID N0.:51 的殘基52-67 ;SEQ IDN0.:51 的殘基 100-109 ；SEQ ID N0.:52 的殘基 24-34 ；SEQ ID N0.:52 的殘基 50-56 ；SEQID N0.:52 的殘基 89-97 ;SEQ ID N0.:53 的殘基 31-35 ;SEQ ID N0.:53 的殘基47-66 ;SEQID N0.:53 的殘基 99-107 ;SEQ ID N0.:54 的殘基 24-34 ;SEQ ID N0.:54 的殘基 50-56 ;和SEQ ID N0.:54的殘基89-97。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，結(jié)合蛋白包括至少3個(gè)選自上述序列的⑶R。更優(yōu)選地，所選擇的3個(gè)⑶R來(lái)自選自下列的可變區(qū)⑶R組:
權(quán)利要求
1.編碼結(jié)合蛋白的氨基酸序列的經(jīng)分離的核酸，其中所述的結(jié)合蛋白包含抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域，所述結(jié)合蛋白能夠結(jié)合人IL-12的P40亞單位，所述抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域具有6個(gè)CDR:CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2,和 CDR-L3，其中:CDR-Hl 是:K-S-V-M-G-V-S (SEQ ID NO: 35 的第 31-37 位殘基)，CDR-H2 是:H-1-Y-W-D-D-D-K-Y-Y-N-P-S-L-K-S (SEQ ID NO: 35 的第 52-67 位殘基)，CDR-H3 是:R-G-1-R-S-A-M-D-Y(SEQ ID NO:35 的第 100-108 位殘基)，CDR-Ll 是:K-A-S-Q-S-V-S-N-D-V-A (SEQ ID NO: 36 的第 24-34 位殘基)，CDR-L2 是:Y-A-S-N-R-Y-T (SEQ ID NO: 36 的第 50-56 位殘基)， CDR-L3 是:Q-Q-D-Y-N-S-P-W-T(SEQ ID NO:36 的第 89-97 位殘基)。
2.權(quán)利要求1的經(jīng)分離的核酸，所述結(jié)合蛋白具有選自下述的重鏈可變區(qū)結(jié)構(gòu)域(VH)序列和輕鏈可變區(qū)結(jié)構(gòu)域(VL)序列:VH:SEQ ID NO:35，和 VL:SEQ ID NO:36 ；VH:SEQ ID NO:61，和 VL:SEQ ID NO:62 ；VH:SEQ ID NO:63，和 VL:SEQ ID NO:64 ；VH:SEQ ID NO:65，和 VL:SEQ ID NO:66 ；VH:SEQ ID NO:65，和 VL:SEQ ID NO:36 ；VH:SEQ ID NO:35，和 VL:SEQ ID NO:62 ；VH:SEQ ID N0:80，和 VL:SEQ ID NO:81 ；VH:SEQ ID NO:82，和 VL:SEQ ID NO:83 ；VH:SEQ ID N0:84，和 VL:SEQ ID NO:85 ；VH:SEQ ID NO:86，和 VL:SEQ ID NO:87。
3.權(quán)利要求2的分離的核酸，其中所述的重鏈可變區(qū)結(jié)構(gòu)域(VH)序列是SEQIDNO:82，所述輕鏈可變區(qū)結(jié)構(gòu)域序列是SEQ IDNO:83。
4.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的分離的核酸，其中所述的結(jié)合蛋白能結(jié)合選自人IL-12和人IL-23的靶。
5.權(quán)利要求4的分離的核酸，其中所述的結(jié)合蛋白能調(diào)節(jié)選自人IL-12和人IL-23的靶的生物功能。
6.權(quán)利要求4的分離的核酸，其中所述的結(jié)合蛋白能中和選自人IL-12和人IL-23的靶的生物功能。
7.載體，其包含權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的分離的核酸。
8.權(quán)利要求7的載體，其中所述載體選自pcDNA、pTT、pTT3、pEFBOS、pBV、pJV和pBJ。
9.包含權(quán)利要求7或8的載體的宿主細(xì)胞。
10.權(quán)利要求9的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是原核細(xì)胞。
11.權(quán)利要求10的宿主細(xì)胞,其中所述宿主細(xì)胞是大腸桿菌細(xì)胞。
12.權(quán)利要求9的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是真核細(xì)胞。
13.權(quán)利要求12的宿主細(xì)胞，其中所述真核細(xì)胞選自原生生物細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞、植物細(xì)胞和真菌細(xì)胞。
14.權(quán)利要求13的宿主細(xì)胞，其中所述真核細(xì)胞是酵母細(xì)胞。
15.權(quán)利要求13的宿主細(xì)胞，其中所述真核細(xì)胞是選自哺乳動(dòng)物細(xì)胞、鳥(niǎo)類細(xì)胞和昆蟲(chóng)細(xì)胞的動(dòng)物細(xì)胞。
16.權(quán)利要求15的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是CHO細(xì)胞或COS細(xì)胞。
17.制備能夠結(jié)合人IL-12的p40亞基的結(jié)合蛋白的方法，所述方法包括在足以產(chǎn)生所述結(jié)合蛋白的條件下在培養(yǎng)基中培養(yǎng)權(quán)利要求9-16任一項(xiàng)的宿主細(xì)胞。
18.結(jié)合蛋白在制備用于治療其中IL-12活性是有害的疾病或病癥的藥物中的用途，其中，所述結(jié)合蛋白具有抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域，所述結(jié)合蛋白能夠結(jié)合人IL-12的p40亞基，所述抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域具有6個(gè)⑶R:⑶R-H1,⑶R-H2,⑶R-H3,⑶R-L1,⑶R-L2,和⑶R-L3，其中:CDR-Hl 是:K-S-V-M-G-V-S (SEQ ID NO: 35 的第 31-37 位殘基)，CDR-H2 是:H-1-Y-W-D-D-D-K-Y-Y-N-P-S-L-K-S (SEQ ID NO: 35 的第 52-67 位殘基)，CDR-H3 是:R-G-1-R-S-A-M-D-Y(SEQ ID NO:35 的第 100-108 位殘基)，CDR-Ll 是:K-A-S-Q-S-V-S-N-D-V-A (SEQ ID NO: 36 的第 24-34 位殘基)，CDR-L2 是:Y-A-S-N-R-Y-T (SEQ ID NO: 36 的第 50-56 位殘基)， CDR-L3 是:Q-Q-D-Y-N-S-P-W-T(SEQ ID NO:36 的第 89-97 位殘基)。
19.權(quán)利要求18所述的、結(jié)合蛋白在制備藥物中的用途，所述結(jié)合蛋白具有選自下述的重鏈可變區(qū)結(jié)構(gòu)域(VH)序列和輕鏈可變區(qū)結(jié)構(gòu)域(VL)序列:VH:SEQ ID N0:35，和 VL:SEQ ID NO:36 ； VH:SEQ ID N0:61，和 VL:SEQ ID NO:62 ；VH:SEQ ID N0:63，和 VL:SEQ ID NO:64 ；VH:SEQ ID N0:65，和 VL:SEQ ID NO:66 ；VH:SEQ ID NO:65，和 VL:SEQ ID NO:36 ；VH:SEQ ID NO:35，和 VL:SEQ ID NO:62 ；VH:SEQ ID NO:80，和 VL:SEQ ID NO:81 ；VH:SEQ ID NO:82，和 VL:SEQ ID NO:83 ；VH:SEQ ID NO:84，和 VL:SEQ ID NO:85 ；VH:SEQIDNO: 86，和 VL: SEQIDNO: 87。
20.權(quán)利要求19所述的、結(jié)合蛋白在制備藥物中的用途，其中所述的重鏈可變區(qū)結(jié)構(gòu)域(VH)序列是SEQ ID NO:82，所述輕鏈可變區(qū)結(jié)構(gòu)域序列是SEQ ID NO:83。
21.權(quán)利要求18-20中任一項(xiàng)所述的、結(jié)合蛋白在制備藥物中的用途，其中所述的結(jié)合蛋白能結(jié)合選自人IL-12和人IL-23的靶。
22.權(quán)利要求21所述的、結(jié)合蛋白在制備藥物中的用途，其中所述的結(jié)合蛋白能調(diào)節(jié)選自人IL-12和人IL-23的靶的生物功能。
23.權(quán)利要求21所述的、結(jié)合蛋白在制備藥物中的用途，其中所述的結(jié)合蛋白能中和選自人IL-12和人IL-23的靶的生物功能。
24.權(quán)利要求18-23任一項(xiàng)所述的、結(jié)合蛋白在制備藥物中的用途，其中，IL-12活性是有害的疾病或病癥選自:類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、幼年慢性關(guān)節(jié)炎、膿毒性關(guān)節(jié)炎、萊姆關(guān)節(jié)炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、脊椎關(guān)節(jié)病、全身紅斑狼瘡、局限性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、炎性腸病、胰島素依賴性糖尿病、甲狀腺炎、哮喘、變態(tài)反應(yīng)疾病、牛皮癬、皮炎、硬皮病、移植物抗宿主病、器官移植排異、與器官移植相關(guān)的急性免疫疾病、與器官移植相關(guān)的慢性免疫疾病、肉狀瘤病、動(dòng)脈粥樣硬化、傳播性血管內(nèi)凝血、Kawasaki’s病、Grave’s病、腎病綜合征、慢性疲勞綜合征、Wegener’s肉芽腫病、Henoch-Schoenlein紫癜、腎微小性血管炎、慢性活性肝炎、眼色素層炎、膿毒性休克、中毒休克綜合征、膿毒癥綜合征、惡病質(zhì)、傳染病、由寄生蟲(chóng)引起的疾病、急性橫向骨髓炎、亨廷頓舞蹈病、帕金森病、早老性癡呆、中風(fēng)、原發(fā)膽汁性肝硬化、溶血性貧血、惡性腫瘤、心力衰竭、心肌梗塞、Addison’s病、散發(fā)性I型多腺缺乏、II型多腺缺乏，(Schmidt’s綜合征)、成人(急性)呼吸窘迫綜合征、脫發(fā)、斑形脫發(fā)、血清反應(yīng)陰性關(guān)節(jié)病、關(guān)節(jié)病、Reiter s病、牛皮癬性關(guān)節(jié)病、潰瘍性結(jié)腸關(guān)節(jié)病、腸病性滑膜炎、衣原體(Chlamydia)-、鼠疫(Yersinia) —和沙門氏菌(Salmonella) —相關(guān)關(guān)節(jié)病、脊椎關(guān)節(jié)病、動(dòng)脈粥樣化疾病/動(dòng)脈硬化、特應(yīng)性變態(tài)反應(yīng)、自身免疫大皰病、尋常性天皰瘡、落葉性天皰瘡、類天皰瘡、線性IgA病、自身免疫性溶血性貧血、Coombs陽(yáng)性溶血性貧血、獲得性性惡性貧血、少年惡性貧血、肌痛性大腦炎/Royal Free病、慢性粘膜皮膚念珠菌病、巨細(xì)胞關(guān)節(jié)炎、原發(fā)性硬化性肝炎、起因不明自身免疫性肝炎、獲得性免疫缺陷病綜合征、獲得性免疫缺陷相關(guān)疾病、乙肝、丙肝、普通各式各樣的免疫缺陷(普通各式各樣的血丙種球蛋白減少癥)、膨脹心肌病、女性不孕癥、卵巢衰竭、早產(chǎn)卵巢衰竭、纖維變性肺病、起因不明的纖維組織形成牙槽炎、炎后間質(zhì)性肺病、間質(zhì)性肺炎、與間質(zhì)性肺病相關(guān)的結(jié)締組織疾病、與肺病相關(guān)的混合結(jié)締組織疾病、與間質(zhì)性肺病相關(guān)的全身硬化、與間質(zhì)性肺病相關(guān)的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、與肺病相關(guān)的全身紅斑狼瘡、與肺病相關(guān)的皮膚肌炎/多肌炎、與肺病相關(guān)的Sjogren’s病、與肺病相關(guān)的僵硬脊椎炎、結(jié)節(jié)性血管炎彌散肺病、與肺病相關(guān)的含鐵血黃素沉著病、藥物引起的間質(zhì)性肺病、纖維化、輻射纖維化、閉塞性毛細(xì)支氣管炎、慢性嗜酸性肺炎、淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)性肺病、傳染病后間質(zhì)性肺病、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、自身免疫性肝炎、1-型自身免疫性肝炎(典型自身免疫性或狼瘡樣肝炎)、2-型自身免疫性肝炎(抗-LKM抗體肝炎)、自身免疫介導(dǎo)的低血糖、具有黑色棘皮癥的B型胰島素抗性、甲狀旁腺機(jī)能減退、骨關(guān)節(jié)炎、原發(fā)性硬化性膽管炎、I型牛皮癬、2型牛皮癬、特發(fā)性白細(xì)胞減少、自身免疫中性 白細(xì)胞減少、腎病N0S、腎小球腎炎、萊姆病、盤形紅斑狼瘡、特發(fā)性男性不孕癥或N0S、精液自身免疫性、多發(fā)性硬化(所有亞型)、交感神經(jīng)眼炎、結(jié)締組織疾病繼發(fā)性高血壓、Goodpasture’s綜合征、結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎的肺表現(xiàn)、急性風(fēng)濕性發(fā)燒、類風(fēng)濕性脊椎炎、Still’s病、全身硬化、Sjogren’s綜合征、Takayasu’ s病/動(dòng)脈炎、自身免疫性血小板減少、特發(fā)性血小板減少、自身免疫性甲狀腺病、甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)、甲狀腺腫性自身免疫性甲狀腺機(jī)能減退(Hashimoto’ s病)、萎縮性自身免疫性甲狀腺機(jī)能減退、原發(fā)性粘液水腫、晶狀體原性眼色素層炎、原發(fā)性血管炎、白癜風(fēng)、急性肝病、慢性肝病、酒精性肝硬化、酒精引起的肝損傷、choleosatatis、特應(yīng)性肝病、藥物引起的肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、變態(tài)反應(yīng)、B族鏈球菌(GBS)感染、精神病(例如抑郁癥和精神分裂癥)、Th2型和Thl型介導(dǎo)的疾病，急性和慢性疼痛(不同形式的疼痛)、肺癌、乳腺癌、胃癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、卵巢癌、前列腺癌、直腸癌、造血惡性腫瘤(白血病和淋巴瘤)，無(wú)β脂蛋白血癥、手足發(fā)紺、急性和慢性寄生或感染過(guò)程、急性白血病、急性成淋巴細(xì)胞性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、急性或慢性細(xì)菌感染、急性胰腺炎、急性腎衰竭、腺癌、空異位搏動(dòng)、AIDS癡呆綜合征、酒精誘導(dǎo)的肝炎、過(guò)敏性結(jié)膜炎、過(guò)敏性接觸性皮炎、過(guò)敏性鼻炎、同種移植物排斥、α-1-抗胰蛋白酶缺乏、肌萎縮性側(cè)索硬化、貧血、心絞痛、前角質(zhì)細(xì)胞變性、抗-CD3治療、抗磷脂綜合征、抗-受體過(guò)敏反應(yīng)、主動(dòng)脈和周圍動(dòng)脈瘤、主動(dòng)脈切開(kāi)、動(dòng)脈高血壓、動(dòng)脈硬化、動(dòng)靜脈瘺、共濟(jì)失調(diào)、心房纖維性顫動(dòng)(持續(xù)或陣發(fā)性的)、心房撲動(dòng)、房室阻滯、B細(xì)胞淋巴瘤、骨移植排斥、骨髓移植(BMT)排斥、束支傳導(dǎo)阻滯、Burkitt’s淋巴瘤、燒傷、心臟心律不齊、心臟震顫綜合征、心臟腫瘤、心肌病、心肺旁路炎癥反應(yīng)、軟骨移植排斥、腦皮層變性、混亂或多灶性心房性心博過(guò)速、與化療有關(guān)的病癥、慢性髓細(xì)胞性白血病(CML)、慢性酒精中毒、慢性炎性病變、慢性淋巴細(xì)胞性白血病(CLL)、慢性阻塞性肺病(COPD)、慢性水楊酸中毒、結(jié)腸直腸癌、充血性心力衰竭、結(jié)膜炎、接觸性皮炎、肺原性心臟病、冠狀動(dòng)脈疾病、Creutzfeldt-Jakob病、培養(yǎng)陰性膿毒癥、囊性纖維化、與細(xì)胞因子治療有關(guān)的病癥、拳擊手癡呆、脫髓鞘性疾病、登革熱出血熱、皮膚病癥、糖尿病、糖尿病癥、糖尿病性動(dòng)脈粥樣疾病、彌散性雷維小體病、擴(kuò)張性充血性心肌病、基底神經(jīng)節(jié)病癥、中年Down’s綜合征、阻斷CNS多巴胺的藥物誘導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)障礙、藥物敏感性、濕疹、腦脊髓炎、心內(nèi)膜炎、內(nèi)分泌病、會(huì)厭炎、愛(ài)-巴病毒感染、紅斑性肢痛癥、錐體束外和腦病癥、家族性噬紅細(xì)胞細(xì)胞淋巴組織細(xì)胞增多癥、胎兒胸腺移植排斥、Friedreich's共濟(jì)失調(diào)、功能性周圍動(dòng)脈病癥、真菌膿毒癥、氣性壞疽、胃潰瘍、腎小球性腎炎、任何器官或組織的移植物排斥、革蘭氏陰性膿毒癥、革蘭氏陽(yáng)性膿毒癥、由于細(xì)胞內(nèi)生物體導(dǎo)致的肉芽腫、毛細(xì)胞白血病、Hallerrorden-Spatz疾病、橋本氏甲狀腺炎、 枯草熱、心臟移植排斥、血色素沉著癥、血液透析、溶血尿毒癥綜合征/溶血栓血小板生成紫癜、出血、肝炎(A)、希斯束心律失常、EQV感染/HIV神經(jīng)病、Hodgkin’s病、運(yùn)動(dòng)機(jī)能允進(jìn)病癥、過(guò)敏反應(yīng)、過(guò)敏性肺炎、高血壓、運(yùn)動(dòng)機(jī)能減退病癥、海馬-垂體-腎上腺軸評(píng)估、特發(fā)性Addison’s病、特發(fā)性肺纖維化、抗體介導(dǎo)的細(xì)胞毒性、衰弱、嬰兒脊髓肌肉萎縮、主動(dòng)脈炎癥、甲型流感、離子輻射暴露、虹膜睫狀體炎/眼色素層炎/視神經(jīng)炎、缺血-再灌注損傷、缺血性中風(fēng)、幼年類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、幼年脊髓肌肉萎縮、Kaposi’s肉瘤、腎移植排斥、軍團(tuán)菌病、利什曼病、麻風(fēng)病、皮質(zhì)脊髓系統(tǒng)損傷、脂肪水腫、肝臟移植排斥、淋巴水腫、瘧疾、惡性淋巴瘤、惡性組織細(xì)胞增多癥、惡性黑素瘤、軟膜蛛網(wǎng)膜炎、腦膜炎球菌血癥、代謝性偏頭痛、特發(fā)性偏頭痛、線粒體多系統(tǒng)病癥、混合型結(jié)締組織疾病、單克隆Y _球蛋白病、多骨髓瘤、多系統(tǒng)變性(Mencel Dejerine-Thomas Sh1-Drager和Machado-Joseph)、重癥肌無(wú)力、細(xì)胞內(nèi)鳥(niǎo)分枝桿菌、結(jié)核分枝桿菌、脊髓發(fā)育不良綜合征、心肌缺血性病癥、鼻咽癌、新生兒慢性肺病、腎炎、腎變病、神經(jīng)變性疾病、神經(jīng)原性I型肌肉萎縮、粒細(xì)胞缺乏性發(fā)熱、非何杰氏淋巴瘤、腹部主動(dòng)脈及其分枝閉塞、閉塞性動(dòng)脈病癥、0KT3治療、睪丸炎/附睪炎、睪丸炎/輸精管切除述逆向操作、器官巨大癥、骨質(zhì)疏松、胰腺移植排斥、胰腺癌、腎瘤形成綜合征/惡性高鈣血癥、甲狀旁腺移植排斥、骨盆炎癥疾病、常年性鼻炎、心包病、周圍動(dòng)脈粥樣硬化疾病、周圍血管病癥、腹膜炎、惡性貧血、卡氏肺囊蟲(chóng)肺炎、肺炎、POEMS綜合征(多精神病、器官巨大癥、內(nèi)分泌病、單克隆Y-球蛋白病和皮膚改變綜合征)、灌注后綜合征、泵后綜合征、MI心臟切開(kāi)術(shù)后綜合征、子癇前期、進(jìn)行性核上性麻痹、原發(fā)性肺動(dòng)脈高血壓、放療、Raynaud’s現(xiàn)象、Raynoud’ s病、Ref sum’s病、規(guī)律性窄QRS心搏過(guò)速、腎血管高血壓、再灌注損傷、限制性心肌病、肉瘤、老年舞蹈病、雷維小體型老年癡呆、血清反應(yīng)陰性關(guān)節(jié)病、休克、鐮狀細(xì)胞性貧血、皮膚同種移植物排斥、皮膚改變綜合征、小腸移植排斥、實(shí)體瘤、特異性心律失常、脊髓性共濟(jì)失調(diào)、脊髓小腦變性、鏈球菌肌炎、小腦結(jié)構(gòu)損傷、亞急性硬化性全腦炎、昏厥、心血管系統(tǒng)梅毒、全身性過(guò)敏反應(yīng)、全身性炎性反應(yīng)綜合征、全身性發(fā)作型幼年類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、T-細(xì)胞或FAB ALL、毛細(xì)管擴(kuò)張、閉塞性血栓血管炎、血小板減少癥、中毒、移植、創(chuàng)傷/出血、III型過(guò)敏反應(yīng)、IV型過(guò)敏反應(yīng)、不穩(wěn)定心絞痛、尿毒癥、尿膿毒癥、蕁麻疹、瓣性心臟病、靜脈曲張、血管炎、靜脈疾病、靜脈血栓形成、心室纖維性顫動(dòng)、病毒和真菌感染、病毒性腦炎/無(wú)菌性腦膜炎、與病毒有關(guān)的噬血細(xì)胞綜合征、Wernicke-Korsakoff綜合征、Wilson’s病、任何器官或組織的異種移植排斥。
25.權(quán)利要求18-24任一項(xiàng)所述的、結(jié)合蛋白在制備藥物中的用途，其中所述的藥物適合于選自下述的方式施用:胃腸外、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、支氣管內(nèi)、腹內(nèi)、囊內(nèi)、軟骨內(nèi)、腔內(nèi)、腹腔內(nèi)、小腦內(nèi)、腦室內(nèi)、結(jié)腸內(nèi)、子宮頸內(nèi)、胃內(nèi)、肝內(nèi)、心肌內(nèi)、骨內(nèi)、骨盆內(nèi)、心包內(nèi)、腹膜內(nèi)、胸膜內(nèi)、前列腺內(nèi)、肺內(nèi)、直腸內(nèi)、腎內(nèi)、視網(wǎng)膜內(nèi)、脊柱內(nèi)、滑液內(nèi)、胸內(nèi)、子宮內(nèi)、膀胱內(nèi)、快速濃注、 經(jīng)陰道、經(jīng)直腸、頰、舍下、鼻內(nèi)和經(jīng)皮。
全文摘要
本申請(qǐng)包括IL-12p40結(jié)合蛋白，特別是結(jié)合人白介素-12(hIL-12)和/或人IL-23(hIL-23)的抗體。具體來(lái)說(shuō)，本發(fā)明涉及的抗體是嵌合型抗體、CDR接枝抗體和人源化抗體。優(yōu)選的抗體對(duì)于hIL-12和/或hIL-23具有高親和力，并且在體外和天內(nèi)中和hIL-12和/或hIL-23活。本發(fā)明抗體可以是全長(zhǎng)抗體或其抗原結(jié)合部分。本發(fā)明還提供了制備和使用本發(fā)明抗體的方法。本發(fā)明抗體或抗體部分可用于檢測(cè)hIL-12和/或hIL-23和抑制hIL-12和/或hIL-23活性，例如在患有其中hIL-12和/或hIL-23活性是有害的病癥的人個(gè)體中。
文檔編號(hào)C12N15/13GK103146708SQ20131005235
公開(kāi)日2013年6月12日 申請(qǐng)日期2006年6月29日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月30日
發(fā)明者S.E.萊西, E.馮, J.P.貝爾克, R.W.迪克松, M.羅古斯卡, P.R.辛頓, S.庫(kù)馬 申請(qǐng)人:Abbvie 公司