專利名稱：一種提高膠紅酵母對(duì)水果采后病害生物防治效力的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及利用植酸(phytic acid)增強(qiáng)膠紅酵母菌種(Mhocbtorula ^/ci^^i/^m)對(duì)水果采后病害防治效力的方法，屬于水果采后生物防治領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
水果在采摘、運(yùn)銷、儲(chǔ)藏過(guò)程中因腐爛造成的損失是巨大的，已成為全球關(guān)注的問(wèn)題。據(jù)報(bào)道，發(fā)達(dá)國(guó)家由此造成的損失為10%-2596，而在缺乏冷藏設(shè)施的發(fā)展中國(guó)家則高達(dá)40%-50%，我國(guó)水果采后損失為20% -25%左右。2007年3月國(guó)家統(tǒng)計(jì)局發(fā)布的《中華人民共和國(guó)2006年國(guó)民經(jīng)濟(jì)和社會(huì)發(fā)展統(tǒng)計(jì)公報(bào)》顯示，2006年我國(guó)水果總產(chǎn)量達(dá)17050萬(wàn)噸。據(jù)此估算，我國(guó)水果采后的損失每年將達(dá)到數(shù)百億元人民幣的水平。病原微生物侵染造成的腐爛是水果采后損失的主要原因，這些病原微生物主要有灰葡萄抱(Bo trytis cinerea )、葡枝根霉{Rhizopus s toloniger )、青霉{Penicillium spp.)、毛毒(ifocor spp. ) λ IjI ^ (^7 tern aria spp.)禾口曲毒 046/7^/^/77^/61 spp.)等。 病原微生物對(duì)采后水果的危害不僅在于其導(dǎo)致水果在數(shù)量上造成的嚴(yán)重?fù)p失，而且由于許多病原真菌能分泌產(chǎn)生許多次生代謝產(chǎn)物從而引起嚴(yán)重的食品安全問(wèn)題，如擴(kuò)展青霉 iP.權(quán)/？浙仰產(chǎn)生的棒曲霉素(patulin)、灰葡萄孢U徹)產(chǎn)生的葡雙醛霉素 (botrydial)等。目前最常用的控制水果采后腐爛的方法是低溫貯藏和化學(xué)殺菌劑處理。近年來(lái)低溫貯藏技術(shù)在我國(guó)得到了廣泛的發(fā)展和應(yīng)用，但已有的冷藏設(shè)備往往不能滿足大多數(shù)水果的需要。同時(shí)，在低溫條件下仍有相當(dāng)數(shù)量的致病菌能夠在水果上生長(zhǎng)，并造成水果腐爛。 而那些對(duì)低溫敏感的水果只能在不低于使產(chǎn)品受冷害的溫度下貯藏。長(zhǎng)期以來(lái)，控制水果采后病害的主要措施是使用殺菌劑?；瘜W(xué)殺菌劑對(duì)防治病害可以起到立竿見(jiàn)影的效果，但是，長(zhǎng)期和大量的使用，不僅導(dǎo)致病原微生物產(chǎn)生抗藥性，同時(shí)嚴(yán)重污染環(huán)境，有損于人類健康。美國(guó)國(guó)家科學(xué)院(National Academy of kinces)的一份報(bào)告顯示，在用于處理食品的全部農(nóng)藥中，殺菌劑構(gòu)成60%的致瘤危險(xiǎn)。隨著國(guó)家經(jīng)濟(jì)發(fā)展和消費(fèi)水平的提高，人們對(duì)食品安全和環(huán)境保護(hù)意識(shí)的日益增強(qiáng)，目前多種化學(xué)殺菌劑^WCaptaruBenomyl等)已被明令禁止使用或者在部分水果產(chǎn)品上限制使用，其直接的后果是目前許多水果采后病害已經(jīng)沒(méi)有殺菌劑能予以控制。因此，各國(guó)科學(xué)家都在積極地探索能代替化學(xué)殺菌劑的安全、高效的新型水果采后病害防治方法。當(dāng)前國(guó)際上對(duì)用拮抗微生物進(jìn)行水果采后病害的生物防治的研究已經(jīng)取得了階段性的成果， 并認(rèn)為這是最有希望取代化學(xué)殺菌劑的方法之一。隨著酵母分類、生態(tài)、生理、生物化學(xué)和分子生物學(xué)的研究取得進(jìn)展，人們對(duì)果蔬貯藏中利用酵母的興趣日益提高。國(guó)內(nèi)外的研究表明，許多酵母菌應(yīng)用于水果表面，可以防治水果由致病霉菌引起的病害，這些酵母被稱為拮抗酵母。酵母菌遺傳穩(wěn)定，抑菌譜廣、效價(jià)高，一般不產(chǎn)生對(duì)人和寄主植物有害的代謝產(chǎn)物，安全性高，且對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求低，生長(zhǎng)快，并對(duì)多種脅迫、逆境具有較強(qiáng)的耐受力，對(duì)大多數(shù)殺菌劑不敏感，對(duì)其它化學(xué)和物理處理能夠相容。因此近年來(lái)拮抗酵母作為水果采后病害生防菌，受到國(guó)際上的廣泛關(guān)注。我國(guó)水果采后病害生物防治研究起步較晚。范青等Q001)對(duì)果實(shí)病害生物防治拮抗菌進(jìn)行了篩選和分離，結(jié)果表明季也蒙假絲酵母(Pandida guiliennondii)、f} 檬形克勒克酵母iKloGckerei、漢遜德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)對(duì)甜櫻桃褐腐病都表現(xiàn)出顯著的抑制效果，季也蒙假絲酵母和檸檬形克勒克酵母能有效地防治核果類果實(shí)軟腐??；田世平等O004)研究，在甜櫻桃采前噴灑1 X IO8個(gè)/mL的絲孢酵母 ijrichosporon /w/WWaas)，羅倫隱球酵母 ifryptococcus IaurentiΓ)和粘紅酵母 (Mhodotorula glutinis)，分別在25°C ,0°C以及氣調(diào)貯藏下，絲孢酵母在果實(shí)上繁殖數(shù)量最高，抑菌效果最好；張紅印等000 研究了不同溫度下，羅倫隱球酵母對(duì)灰霉病的防治效果，結(jié)果表明，25°C下，梨灰霉病的發(fā)病率為16. 7%，結(jié)合CaCl2使用效果更顯著。從國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)中可知當(dāng)前以有效微生物取代化學(xué)殺菌劑用于水果采后病害的防治已顯示出巨大的應(yīng)用前景，水果采后病害的生物防治成為一個(gè)新的研究熱點(diǎn)。但到目前為止，已實(shí)際應(yīng)用于生產(chǎn)的拮抗菌種類不多，只有Biosave和Aspire等少數(shù)幾種產(chǎn)品上市，而我國(guó)目前尚沒(méi)有拮抗菌應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)。主要原因在于商業(yè)生產(chǎn)條件下，目前已報(bào)道的拮抗微生物的防治效果往往不如化學(xué)殺菌劑的效果，從而達(dá)不到保鮮要求。這些因素影響了拮抗菌作為果蔬保鮮劑在生產(chǎn)中的使用。膠紅酵母是我們課題組從鎮(zhèn)江江心洲無(wú)公害果園的土壤中篩選分離到的一株拮抗酵母。我們的大量研究表明膠紅酵母對(duì)草莓、桃等水果的采后病害具有顯著的抑制作用。然而，我們的試驗(yàn)結(jié)果也表明膠紅酵母對(duì)果實(shí)病害的防治效力與化學(xué)殺菌劑相比仍有較大的差距。因此進(jìn)一步提高膠紅酵母的拮抗效力，是提高其對(duì)水果采后病害控制水平，并將其應(yīng)用于水果貯藏保鮮的重要策略之一。植酸是以玉米、米糠或小麥為原料制備的。作為一種可生物降解的天然物質(zhì)，植酸不僅資源豐富，而且價(jià)格低廉、無(wú)毒安全。因其具有眾多獨(dú)特的生物學(xué)特性，在食品和水果采后保鮮等領(lǐng)域都有著廣泛的研究和應(yīng)用。在水果采后保鮮領(lǐng)域，植酸被作為理想的水果涂層，用來(lái)延緩果實(shí)中維生素C的降解，保持果實(shí)中的可溶性固形物和含酸量。研究表明植酸對(duì)多種病原菌引起的腐爛的抑制效果較弱，因此植酸作為保鮮劑應(yīng)用時(shí)，必須與其它防腐劑配合使用。近年來(lái)，如何將植酸與其它安全的非殺菌劑方法有效整合，以獲得對(duì)水果采后真菌病害更高水平的控制，已成為國(guó)際上非常受關(guān)注的一個(gè)研究熱點(diǎn)。但國(guó)內(nèi)外對(duì)植酸培養(yǎng)能否影響采后拮抗酵母生物防治效力尚無(wú)相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供了一種增強(qiáng)膠紅酵母生物防治效力的方法。膠紅酵母經(jīng)植酸溶液稀釋，制備成菌懸液。將菌懸液應(yīng)用到水果上，可以顯著地抑制水果病原菌，防止水果采后腐爛。本發(fā)明具有安全、高效、成本低等優(yōu)點(diǎn)，可以廣泛地用于水果采后病害的生物防治過(guò)程中，減少水果采后病害造成的損失。本發(fā)明同時(shí)提供了一種利用植酸增強(qiáng)膠紅酵母對(duì)水果采后病害防治效力，從而將其應(yīng)用于水果貯藏保鮮的方法。按照下述步驟進(jìn)行將膠紅酵母(Μ— mucilaginosa)活化，接種到NYDB培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，離心得到菌體；將菌體用無(wú)菌水及植酸溶液稀釋制備成IX IO8個(gè)/mL的菌懸液；將水果放入菌懸液中，浸泡30秒后馬上取出，自然風(fēng)干；放在塑料筐中，用保鮮膜密封后，放在室溫或冷藏條件下存放。
其中所述的NYDB培養(yǎng)基中酵母膏5g，牛肉浸膏8g，葡萄糖10g，純化水1000ml，自然pH。其中所述的菌懸液中植酸的質(zhì)量濃度為0. 05—0. 5%。其中所述的膠紅酵母、Rhodo torula mucilaginosa)，保藏菌株編號(hào)為CGMCC No.3617。其中所述的水果優(yōu)選蘋果、桃或草莓。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明使用植酸增強(qiáng)膠紅酵母防治水果采后病害的效力，使用簡(jiǎn)單，操作方便，效果好，成本低。增強(qiáng)后的膠紅酵母可以代替化學(xué)殺菌劑防治水果采后病害， 避免使用化學(xué)殺菌劑對(duì)人體的危害，具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。


其中圖1為不同濃度植酸與膠紅酵母結(jié)合對(duì)草莓灰霉病的抑制效果；注CK:對(duì)照； 0: NYDB； 0. 1%-0. 5%為經(jīng)0. 1%-0. 5%植酸溶液稀釋后的菌懸液。發(fā)病率是20°C放置3天后測(cè)定的結(jié)果。不同字母代表差異顯著性(P=O. 05)。圖2為不同濃度植酸與膠紅酵母結(jié)合對(duì)草莓根霉病的抑制效果；注:CK對(duì)照； 0: NYDB； 0. 1%-0. 5%:經(jīng)0. 1%-0. 5%植酸溶液稀釋后的菌懸液。發(fā)病率是20°C放置3天后測(cè)定的結(jié)果。不同字母代表差異顯著性(P=O. 05)。圖3為不同濃度植酸與膠紅酵母結(jié)合對(duì)桃青霉病的抑制效果；注CK:對(duì)照；0: NYDB； 0.0. 5%-0. 25%:經(jīng)0.05%-0. 25%植酸溶液稀釋后的菌懸液。發(fā)病率是20°C放置6 天后測(cè)定的結(jié)果。不同字母代表差異顯著性(P=O. 05)。圖4為不同濃度植酸與膠紅酵母結(jié)合對(duì)桃灰霉病的抑制效果；注CK:對(duì)照；0: NYDB； 0.0. 5%-0. 25%:經(jīng)0.05%-0. 25%植酸溶液稀釋后的菌懸液。發(fā)病率是20°C放置6 天后測(cè)定的結(jié)果。不同字母代表差異顯著性(P=O. 05)。圖5為不同濃度植酸與膠紅酵母結(jié)合對(duì)桃根霉病的抑制效果；注CK:對(duì)照；0: NYDB； 0.0. 5%-0. 25%:經(jīng)0.05%-0. 25%植酸溶液稀釋后的菌懸液。發(fā)病率是20°C放置4 天后測(cè)定的結(jié)果。不同字母代表差異顯著性(P=O. 05)。圖6為不同濃度植酸與膠紅酵母結(jié)合對(duì)蘋果青霉病的抑制效果；注CK:對(duì)照； 0: NYDB； 0. 1%-0. 5%:經(jīng)0. 1%-0. 5%植酸溶液稀釋后的菌懸液。發(fā)病率是20°C放置8天后測(cè)定的結(jié)果。不同字母代表差異顯著性(P=O. 05)。圖7為不同濃度植酸與膠紅酵母結(jié)合對(duì)蘋果灰霉病的抑制效果注CK:對(duì)照；0: NYDB ； 0. 1%-0. 5%:經(jīng)0. 1%-0. 5%植酸溶液稀釋后的菌懸液。發(fā)病率是20°C放置10天后測(cè)定的結(jié)果。不同字母代表差異顯著性(P=O. 05)。
具體實(shí)施例方式通過(guò)借助以下實(shí)施實(shí)例將更加詳細(xì)的說(shuō)明本發(fā)明。以下實(shí)施例僅是說(shuō)明性的，本發(fā)明并不受這些實(shí)施實(shí)例的限制。膠紅酵母系本實(shí)驗(yàn)室篩選分離得到，現(xiàn)保存于位于中國(guó)北京的北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)的中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心中心(CGMCC)，保藏菌株編號(hào)為CGMCC No. 3617，于NYDA (NYDB培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加洲的瓊脂)培養(yǎng)基4°C低溫保存。培養(yǎng)程序?yàn)?1)固體活化將膠紅酵母接種于NYDA培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)48h; (2)液體培養(yǎng)在250ml的三角瓶中裝入50 ml的NYDB種子培養(yǎng)基，用接種環(huán)接入兩環(huán)活化好的膠紅酵母，在200 rpm (轉(zhuǎn)/分鐘)，條件下培養(yǎng)20h ； (3)增強(qiáng)將上述培養(yǎng)混合物7000Xg條件下離心lOmin，無(wú)菌生理鹽水洗滌兩次，以去除培養(yǎng)介質(zhì)，并用無(wú)菌生理鹽水重新懸浮酵母細(xì)胞，血球記數(shù)板調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度為5 X IO8個(gè)/mL。 在250ml的三角瓶中分別裝入50ml NYDB培養(yǎng)基，并加入上述濃度的酵母酵母培養(yǎng)液1ml， 然后在200 rpm 條件下培養(yǎng)Mh ； (4)離心分離再懸浮上述不同處理酵母培養(yǎng)混合物在7000 Xg條件下，離心lOmin，并用無(wú)菌生理鹽水洗滌2次，以去除培養(yǎng)介質(zhì)，再用無(wú)菌生理鹽水及植酸溶液稀釋到所需濃度。其中使用的植酸購(gòu)自上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司。實(shí)施例1 植酸增強(qiáng)膠紅酵母對(duì)水果病害的抑制效果
一、試驗(yàn)方案
水果處理后，用消過(guò)毒的打孔器在每個(gè)果實(shí)表面赤道部位形成統(tǒng)一大小和深度的傷口。其中草莓的表面?zhèn)跒?mm (直徑)X 3mm (深)，桃果的表面?zhèn)跒?mm (直徑)X 3mm (深)，蘋果的表面?zhèn)跒?mm(直徑)X3mm(深)。每個(gè)傷口處等量加入30 μ 1 (1)1 X IO8個(gè)/ ml經(jīng)無(wú)菌生理鹽水稀釋的酵母懸浮液；(2)1 X IO8個(gè)/ml經(jīng)植酸稀釋的酵母懸浮液(含植酸質(zhì)量濃度為0. 1%_0.5%);(3)無(wú)菌水(作為對(duì)照)。池后，在每個(gè)傷口處分別加入等量30 μ 1 的病原菌孢子懸浮液。其中草莓分別加入IX IO5個(gè)/ml的灰葡萄孢(徹iiriis cinerea) 孢子懸浮液和IX IO4個(gè)/ml的葡枝根霉OWi^wAs StoAwi沢r)孢子懸浮液；桃果分別加入1 X IO5個(gè)/ml的灰葡萄孢(Motrytis cinerea)孢子懸浮液、1 X IO4個(gè)/ml的葡枝根霉 (.Rhizopus SioAwi沢r)孢子懸浮液和 5 X IO4 個(gè)/ml 的擴(kuò)展青霉(/^fliciBiws expansum) 孢子懸浮液；蘋果分別加入1 X IO5個(gè)/ml的灰葡萄孢(徹iiriis孢子懸浮液和
5X IO4個(gè)/ml的擴(kuò)展青霉權(quán)/？浙仰 )孢子懸浮液。自然晾干后，將果實(shí)放入塑料筐并用保鮮膜密封，恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(水分活度95%)，草莓置于20°C，桃果及蘋果置于 25 0C ο每處理重復(fù)3次，每個(gè)重復(fù)18個(gè)果實(shí)。整個(gè)試驗(yàn)重復(fù)2次。經(jīng)過(guò)若干天的培養(yǎng)， 計(jì)算發(fā)病率，以此評(píng)價(jià)膠紅酵母菌種(/SoWorWa mucilaginosa)的抑菌效果。發(fā)病率的計(jì)算公式如下
發(fā)病率(%)=發(fā)病的果實(shí)數(shù)/接種病原菌的果實(shí)總數(shù)X100%
二、試驗(yàn)結(jié)果
按照上述步驟試驗(yàn)，后統(tǒng)計(jì)水果的腐爛率結(jié)果如下 1.1對(duì)草莓灰霉病及根霉病的抑制效果
從圖1可以看出，經(jīng)膠紅酵母處理后，草莓灰霉病的發(fā)病率都顯著地低于對(duì)照草莓的發(fā)病率。膠紅酵母與0. 1%、0. 2%及0. 3%濃度的植酸結(jié)合使用，其對(duì)灰葡萄孢在草莓傷口處的侵染抑制作用顯著增強(qiáng)。尤其當(dāng)植酸濃度為0.洲時(shí)，酵母菌懸液處理草莓后其灰霉病的發(fā)病率僅為對(duì)照的28. 3%，為酵母菌單獨(dú)使用(未與植酸結(jié)合)處理后草莓發(fā)病率的51. 5%。 從圖2可以看出膠紅酵母對(duì)葡枝根霉在草莓傷口處的侵染抑制作用試驗(yàn)也出現(xiàn)了類似的結(jié)果。1. 2對(duì)桃果青霉病、灰霉病及根霉病的抑制效果
如圖3所示，膠紅酵母與0. 15%植酸結(jié)合使用，其對(duì)桃果傷口青霉病侵染的抑制效力顯著增強(qiáng)。主要表現(xiàn)在整個(gè)試驗(yàn)階段，經(jīng)膠紅酵母與0. 15%植酸結(jié)合處理的桃果，其青霉病發(fā)生率顯著低于對(duì)照及經(jīng)膠紅酵母單獨(dú)處理的桃果。在對(duì)桃果傷口灰霉病及根霉病的抑制作用上也出現(xiàn)了類似的結(jié)果(如圖4和圖5所示)。對(duì)蘋果青霉病及灰霉病的抑制效果
如圖6和圖7所示，試驗(yàn)結(jié)果表明濃度為0. 2%的植酸能顯著提高膠紅酵母對(duì)蘋果青霉病、灰霉病的控制效力，僅為對(duì)照的41%，35%。以上結(jié)果表明，植酸能夠增強(qiáng)膠紅酵母對(duì)灰葡萄孢(徹iiriis ci/^rea)、葡枝根霉(Mhizopus stoloniger)、賓毒iPenicillium spp.)引起的灰霉病、青霉病和根霉病的防治效果。實(shí)施例2 植酸增強(qiáng)膠紅酵母對(duì)水果自然腐爛及貯藏品質(zhì)的影響
一、試驗(yàn)方案
試驗(yàn)水果采摘后直接用以下處理浸泡果實(shí)30s (1) NYDB培養(yǎng)基培養(yǎng)的膠紅酵母懸浮液；(2)植酸溶液稀釋的酵母懸浮液；(3)無(wú)菌水(作為對(duì)照)。然后將果實(shí)放在塑料筐內(nèi)， 風(fēng)干后用保鮮膜密封。草莓貯藏于4°C冰柜，20天后轉(zhuǎn)入20°C恒溫箱貯藏，5天后觀察果實(shí)腐爛情況，計(jì)算腐爛率；桃果貯藏于4°C冰柜，30天后轉(zhuǎn)入25°C培養(yǎng)箱貯藏，7天后觀察果實(shí)腐爛情況，計(jì)算腐爛率，并進(jìn)行貯藏品質(zhì)分析；蘋果貯藏于4°C冰柜，30天后轉(zhuǎn)入25V 培養(yǎng)箱貯藏，10天后觀察果實(shí)腐爛情況，計(jì)算腐爛率，并進(jìn)行貯藏品質(zhì)分析。每處理重復(fù)3 次，每次重復(fù)10個(gè)果實(shí)，整個(gè)試驗(yàn)重復(fù)2次。貯藏品質(zhì)分析方法如下
(1)硬度采用TA-XT2i質(zhì)構(gòu)分析儀測(cè)試，探頭直徑為5mm，探頭測(cè)試前、測(cè)試中、測(cè)試后的運(yùn)行速度分別為4.0 mm S^1U-O mm 0 mm s—1，草莓測(cè)試深度為6 mm，桃果及蘋果測(cè)試深度為10 mm，探頭插入水果時(shí)所受的最大阻力(單位為牛頓)就被定義為水果的硬度。 每個(gè)水果繞赤道處每120°測(cè)定3次。(2)總可溶性固形物采用WYT (0-80%)手持糖量計(jì)進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定結(jié)果表示為 g/100g 樣品。(3)維生素C含量的測(cè)定紫外快速測(cè)定法。從6個(gè)水果上取20 g果肉樣品加20 ml 1%鹽酸勻漿，100 ml容量瓶定容至刻度。10000X g，4°C條件下離心10 mim，上清用于測(cè)定。取0. 2 ml提取液，放入盛有0. 4 ml 10% HCl的10 ml刻度試管中，用蒸餾水稀釋至刻度后搖勻。以蒸餾水為空白，在M3 nm處測(cè)定吸光度。另吸取0.2 ml提取液，分別加入 4 ml蒸餾水和0. 6 ml ImolΓ1 NaOH溶液至10 ml至刻度試管，搖勻，靜置15min后。加入 0.6 ml 10%HC1，混勻，加蒸餾水定容至刻度。以蒸餾水為空白，在M3 nm處測(cè)定吸光度。由待測(cè)液及堿處理待測(cè)液的A243值之差，查標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣品中維生素C的含量。每處理3 次重復(fù)。(4)褐變度6個(gè)水果稱取20g果肉組織，加入40 ml蒸餾水勻漿，10000Xg，4°C條件下離心10 mim，取上清10 ml加入95%乙醇15ml 10000 X g，4°C條件下離心10 mim，取上清液于420 nm測(cè)定吸光度值，以此表示褐變程度。每處理3次重復(fù)。二、試驗(yàn)結(jié)果
按照上述步驟試驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)草莓、桃果及蘋果的自然腐爛率及貯藏品質(zhì)的影響。結(jié)果如下表1植酸與膠紅酵母結(jié)合對(duì)草莓自然腐爛率及儲(chǔ)藏品質(zhì)的影響
權(quán)利要求
1.一種提高膠紅酵母對(duì)水果采后病害生物防治效力的方法，其特征在于按照下述步驟進(jìn)行將膠紅酵母(Miodotorula mucilaginosa)活化，接種到NYDB培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，離心得到菌體；將菌體用植酸溶液稀釋制備成1 X IO8個(gè)/mL的菌懸液；將水果放入菌懸液中， 浸泡30秒后馬上取出，自然風(fēng)干；放在塑料筐中，用保鮮膜密封后，放在室溫或冷藏條件下存放。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高膠紅酵母對(duì)水果采后病害生物防治效力的方法，其特征在于其中所述的NYDB培養(yǎng)基中酵母膏5g，牛肉浸膏8g，葡萄糖10g，水1000ml，自然 pH。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高膠紅酵母對(duì)水果采后病害生物防治效力的方法，其特征在于其中所述的菌懸液中植酸的質(zhì)量濃度為0. 05—0. 5%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高膠紅酵母對(duì)水果采后病害生物防治效力的方法， 其特征在于其中所述的膠紅酵母(Miodotorula，保藏菌株編號(hào)為CGMCC No.3617。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高膠紅酵母對(duì)水果采后病害生物防治效力的方法，其特征在于其中所述的水果為蘋果、桃或草莓。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種提高膠紅酵母對(duì)水果采后病害生物防治效力的方法，按照下述步驟進(jìn)行將膠紅酵母(Rhodotorulamucilaginosa)活化，接種到NYDB培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，離心得到菌體；將菌體用植酸溶液稀釋制備成1×108個(gè)/ml的菌懸液；將水果放入菌懸液中，浸泡30秒后馬上取出，自然風(fēng)干；放在塑料筐中，用保鮮膜密封后，放在室溫或冷藏條件下存放。本發(fā)明使用植酸增強(qiáng)膠紅酵母防治水果采后病害的效力，使用簡(jiǎn)單，操作方便，效果好，成本低。防治效力增強(qiáng)后的膠紅酵母可以代替化學(xué)殺菌劑防治水果采后病害，避免使用化學(xué)殺菌劑對(duì)人體的危害，具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
文檔編號(hào)C12R1/645GK102283280SQ20111016669
公開(kāi)日2011年12月21日 申請(qǐng)日期2011年6月21日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月21日
發(fā)明者代春華, 任曉鋒, 張曉云, 張紅印, 趙利娜 申請(qǐng)人:江蘇大學(xué)