專利名稱：單核細(xì)胞分離管的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實用新型屬于醫(yī)療分析或醫(yī)學(xué)研究器具技術(shù)范圍，具體的講是涉及一種單核細(xì)
胞分離管。
技術(shù)背景
免疫細(xì)胞是指參與免疫應(yīng)答或與免疫應(yīng)答有關(guān)的細(xì)胞，主要包括淋巴細(xì)胞、單核_巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、各種粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞等。根據(jù)各類免疫細(xì)胞獨特的表面標(biāo)志及其特殊功能，用體外或體內(nèi)方法，對各類免疫細(xì)胞進(jìn)行數(shù)量和功能測定，是觀察機(jī)體免疫狀態(tài)的一種重要手段。外周血單核細(xì)胞(peripheral bloodmono皿clear cell, PBMC)主要是指淋巴細(xì)胞，是免疫學(xué)實驗最常用的細(xì)胞群。目前主要使用的是體外方法，用體外方法檢測某種細(xì)胞數(shù)量和功能的前提是從血液成分中有效分離出該細(xì)胞。傳統(tǒng)的分離方法是使用聚蔗糖_泛影葡胺等分離液法分離，該法需預(yù)先制備肝素抗凝的全血并稀釋到一定濃度，再將稀釋后的血液輕輕疊加在分離液上進(jìn)行離心分離，而傳統(tǒng)方法使用的是普通試管，在進(jìn)行每一步操作時，需要手工進(jìn)行試劑的滴入等操作，繁瑣費時，不易質(zhì)控，對操作人員的熟練程度要求比較高。
發(fā)明內(nèi)容 鑒于以上現(xiàn)狀，本實用新型提供一種用于單核細(xì)胞的分離管，解決了上述傳統(tǒng)分離方法中存在的問題。 —種用于血液中單核細(xì)胞分離管，包括管體，其特征在于所述管體內(nèi)設(shè)置有分離
液層和分離膠層，分離液層位于分離膠層下方；所述分離膠層為膠狀，與管體內(nèi)壁粘連，分
離液層和分離膠層與管體呈一體式結(jié)構(gòu)。 所述分離膠上方為細(xì)胞保養(yǎng)液層。 所述管體的管口處有膠塞。 所述膠塞外有防濺帽。 本實用新型優(yōu)點與傳統(tǒng)的單核細(xì)胞分離過程中需要把不同的組分依次加入試管相比，使用本實用新型一體式管體結(jié)構(gòu)，可以簡化分離時的操作步驟，使用本分離管在分離單核細(xì)胞過程中，不再需要添加其他試劑，避免了頻繁的進(jìn)行添加步驟而帶來的麻煩，易于質(zhì)量控制。 說明書附圖


圖1為本實用新型結(jié)構(gòu)示意圖；[0011] 圖2為防濺帽與膠塞剖視圖； 圖中1、管體2、分離液層3、分離膠層、4、細(xì)胞保養(yǎng)液層5、膠塞6、防濺帽具體實施方式
—種用于分離血液中單個核細(xì)胞(主要是淋巴細(xì)胞)的分離管，包括管體，其特征在于管體內(nèi)預(yù)置有分離液層和分離膠層，分離液層位于分離膠層下方；分離膠層為膠狀，與
管體內(nèi)壁粘連，分離液層和分離膠層與管體呈一體式結(jié)構(gòu)，分離膠上方為細(xì)胞保養(yǎng)液層；管
體的管口處有膠塞；膠塞外有防濺帽。 分離液層成份為葡萄糖與泛影葡胺等； 分離膠層和分離液層靠其特定的密度從血液中分離出單個核細(xì)胞； 細(xì)胞保養(yǎng)液層為ACD保養(yǎng)液、CPD保養(yǎng)液或CPDA保養(yǎng)液，三種均可維持細(xì)胞的形
態(tài)與活性。 通過真空采血技術(shù)，將一定量全血采入單核細(xì)胞分離管后，使血液與細(xì)胞保養(yǎng)液層混勻。然后將單核細(xì)胞分離管放入離心機(jī)中以相對離心力RCF 1000g，離心IO分鐘，由于單個核細(xì)胞的密度(本文所述密度均為相對密度，把純水在一定溫度下的密度視為l，另一種物質(zhì)在相同條件下的密度與它相除而得，下同)與血液中的其他成分以及試劑的密度不同，紅細(xì)胞層密度為1.092，分離膠密度層為1.08，分離液層密度為1.077，單核細(xì)胞層密度與這些密度不同，為1.07，因此，根據(jù)密度梯度原理，形成不同層次的區(qū)帶，且單核細(xì)胞呈白膜狀，可用吸管吸出此細(xì)胞層，可獲得純度達(dá)95%以上的單核細(xì)胞。在整個分離過程中，不需要外加任何試劑，簡化了分離的步驟。 其中管口處的膠塞起到氣密作用，主要采用丁基橡膠塞，可使試管內(nèi)預(yù)置真空，直接配合一次性真空采血針進(jìn)行真空采血。 而防濺帽主要是為了防止拔蓋時血液接觸到人體，使之符合生物安全要求，并保護(hù)醫(yī)務(wù)人員安全。 本文出現(xiàn)的"單核細(xì)胞"為"單個核細(xì)胞"的簡稱。
權(quán)利要求一種單核細(xì)胞分離管，包括管體(1)，其特征在于所述管體(1)內(nèi)設(shè)置有分離液層(2)和分離膠層(3)，分離液層(2)位于分離膠層(3)下方；所述分離膠層(3)為膠狀，與管體(1)內(nèi)壁粘連，分離液層(2)和分離膠層(3)與管體(1)呈一體式結(jié)構(gòu)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的單核細(xì)胞分離管，其特征在于所述分離膠層(3)上方為細(xì)胞保養(yǎng)液層(4)。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的單核細(xì)胞分離管，其特征在于所述管體(1)的管口處有膠塞(5)。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的單核細(xì)胞分離管，其特征在于所述膠塞(5)外有防濺帽(6)。
專利摘要本實用新型屬于醫(yī)療分析或醫(yī)學(xué)研究器具技術(shù)范圍，具體的講是涉及一種單核細(xì)胞分離管，本實用新型包括管體，其特征在于所述管體內(nèi)設(shè)置有分離液層和分離膠層，分離液層位于分離膠層下方；所述分離膠層為膠狀，與管體內(nèi)壁粘連，分離液層和分離膠層與管體呈一體式結(jié)構(gòu)。與傳統(tǒng)的單個核細(xì)胞分離過程中需要把不同的組分依次加入試管相比，使用本實用新型一體式管體結(jié)構(gòu)，可以簡化分離時的操作步驟，使用本分離管在分離單個核細(xì)胞過程中，不再需要添加其他試劑，避免了頻繁的試劑添加步驟而帶來的污染，使實驗結(jié)果易于質(zhì)量控制。
文檔編號C12N5/0786GK201495221SQ2009201771
公開日2010年6月2日 申請日期2009年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月28日
發(fā)明者王軍 申請人:成都瑞琦科技實業(yè)有限責(zé)任公司