專(zhuān)利名稱(chēng)：從茶中純化化合物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從茶中純化化合物的方法。更具體地，本發(fā)明涉及茶汁作為用于 獲得如生物活性化合物和/或芳香化合物等有價(jià)值的茶化合物的原料的用途。
背景技術(shù)：
茶是傳統(tǒng)上通過(guò)在沸水中浸泡茶樹(shù)(Camellia sinensis)的干燥葉而制成的飲 料。茶(除水之外)可能是世界上最受歡迎的飲料，并在世界某些地區(qū)傳統(tǒng)上被認(rèn)為具有 促進(jìn)健康的潛力。最近，廣泛的實(shí)驗(yàn)室研究和流行病學(xué)研究證明，茶中存在的許多化合物顯 示生物活性，且可以用于例如治療多種疾病和/或產(chǎn)生增強(qiáng)的身體或精神表現(xiàn)。多酚類(lèi)化合物(如兒茶素類(lèi)和茶黃素類(lèi))已證明是特別有價(jià)值的。茶多酚類(lèi)的一 些益處可能與其抗氧化性質(zhì)直接相關(guān)。聲稱(chēng)的益處包括降低血脂含量(如膽固醇)、抗炎效 應(yīng)和抗腫瘤效應(yīng)。已證明具有生物活性的另一種茶化合物是氨基酸茶氨酸。例如，據(jù)報(bào)道，茶氨酸刺 激哺乳動(dòng)物腦中的a -波，并使個(gè)體具有放松但警覺(jué)的精神狀態(tài)。除了生物活性化合物外，茶也含有對(duì)于其感覺(jué)性質(zhì)有價(jià)值的化合物。特別是，茶具 有獨(dú)特的香氣，且富含芳香化合物。盡管在低至每天數(shù)杯的消費(fèi)頻率下，茶化合物的一些益處也可能是明顯的，但許 多人長(zhǎng)期來(lái)看甚至達(dá)不到這種較低的消費(fèi)頻率。此外，由于茶葉相對(duì)緩慢的沖泡速度和茶 粉緩慢的溶解速度，制備茶飲料不如由非茶基飲料前體(如速溶咖啡)制備飲料方便。而 且，消費(fèi)者越來(lái)越希望有提供新的感覺(jué)體驗(yàn)但仍是天然來(lái)源的產(chǎn)品。因此，以前已經(jīng)有許多嘗試來(lái)提供具有含量提高的源自茶的化合物的產(chǎn)品。在 許多情況下，以前的嘗試采用使用溶劑(如水)從茶葉中提取茶化合物的方法。例如， W02006/037511 (Unilever)公開(kāi)了一種包括短時(shí)冷水提取的從茶植物材料中優(yōu)先提取茶氨 酸的方法。這些已知方法的一個(gè)缺點(diǎn)是除去徹底提取所需的大量溶劑是耗時(shí)費(fèi)力的。因此，我們認(rèn)識(shí)到需要提供一種不需要使用大量溶劑而從茶葉獲得茶化合物的方 法。我們發(fā)現(xiàn)，使用從新鮮茶葉榨出的汁液作為純化茶化合物的原料可以滿(mǎn)足這種需要。定義茶對(duì)于本發(fā)明而言，“茶”是指來(lái)自中國(guó)茶(Camellia sinensis var. sinensis)禾口 / 或普再茶(Camellia sinensis var. assamica)的材料。對(duì)于本發(fā)明而言，“葉茶”是指包含未沖泡形式的茶葉和/或梗的茶產(chǎn)品，其已 經(jīng)干燥至水分含量小于30重量％，且通常具有1重量％至10重量％的含水量(即，“成 茶” ("made tea"))?！熬G茶”指基本上未發(fā)酵的茶?！凹t茶”指充分發(fā)酵的茶?！盀觚埐琛敝覆糠职l(fā)酵的
茶 o“發(fā)酵”是指當(dāng)某些內(nèi)源性酶和底物接觸時(shí)，例如通過(guò)葉解析(maceration)對(duì)細(xì)胞 的機(jī)械破壞，茶經(jīng)歷的氧化和水解過(guò)程。在此過(guò)程中，葉中的無(wú)色兒茶素類(lèi)轉(zhuǎn)化為黃色和橙色至暗褐色多酚類(lèi)物質(zhì)的復(fù)雜混合物?！靶迈r茶葉”是指從未被干燥至小于30重量％的水含量且通常具有60至90%的 含水量的茶葉和/或梗。“茶化合物”是指除水之外的任何源自茶材料的化合物。因此，茶化合物包括所有 茶固體和茶揮發(fā)物。M±如本文使用的術(shù)語(yǔ)“榨汁”是指不同于使用溶劑提取茶固體，用物理力從新鮮茶葉 中榨出汁液。因此，術(shù)語(yǔ)“壓榨”包括例如以下方式壓榨(squeezing)、擠壓(pressing), 扭絞(wringing)、旋轉(zhuǎn)(spinning)和擠出(extruding) 0在壓榨步驟中，可以向新鮮葉加 入少量溶劑(如水)。然而，為了防止溶劑顯著地提取茶固體，壓榨過(guò)程中葉的水分含量是 上文定義的新鮮茶葉的水分含量。換句話(huà)說(shuō)，在壓榨步驟中，茶葉的水分含量為30重量％ 至90重量％，更優(yōu)選60重量％至90重量％。由于與非水溶劑(如醇類(lèi))相關(guān)的環(huán)境和經(jīng) 濟(jì)問(wèn)題，也優(yōu)選地在壓榨之前或壓榨過(guò)程中新鮮葉不與這些溶劑接觸。^^如本文所用的術(shù)語(yǔ)“多酚”是指包含連接到一個(gè)或多個(gè)芳香基團(tuán)上的多個(gè) 羥基的一類(lèi)化合物中的一種或多種。典型的茶多酚包括兒茶素、茶黃素和茶玉紅精 (thearubigin)0如本文使用的術(shù)語(yǔ)“兒茶素”用作兒茶素、沒(méi)食子兒茶素、兒茶素沒(méi)食子酸酯、沒(méi)食 子兒茶素沒(méi)食子酸酯、表兒茶素、表沒(méi)食子兒茶素、表兒茶素沒(méi)食子酸酯、表沒(méi)食子兒茶素 沒(méi)食子酸酯及其混合物的通稱(chēng)。如本文所用的術(shù)語(yǔ)“茶黃素”用作茶黃素、異茶黃素、新茶黃素、茶黃素-3-沒(méi) 食子酸酯、茶黃素-3' _沒(méi)食子酸酯、茶黃素_3，3' _ 二沒(méi)食子酸酯、表茶黃酸、表茶黃 酸3'-沒(méi)食子酸酯、茶黃酸、茶黃酸-3'-沒(méi)食子酸酯及其混合物的通稱(chēng)。這些化合 物的結(jié)構(gòu)是公知的(參見(jiàn)，例如，“Tea-Cultivation to consumption〃，K. C. Willson 和 M. N. Clifford(編)，1992，Chapman & Hall, London，第 555-601 頁(yè)的第 17 章中的結(jié) 構(gòu)xi-xx)。術(shù)語(yǔ)茶黃素類(lèi)包括這些化合物的鹽的形式。優(yōu)選的茶黃素類(lèi)是茶黃素、茶黃 素-3-沒(méi)食子酸酯、茶黃素-3' _沒(méi)食子酸酯、茶黃素_3，3' _ 二沒(méi)食子酸酯及其混合物， 因?yàn)檫@些茶黃素在茶中是最豐富的。體如本文使用的術(shù)語(yǔ)“飲料”是指適于人消費(fèi)的基本上水性的可飲用的組合物。葉的大小和等級(jí)對(duì)于本發(fā)明而言，使用以下慣例以篩目大小表示葉的顆粒大小 在全文中使用Tyler篩目大小。 篩目前的“ + ”表示顆粒被該篩截留。 篩目前的“_”表示顆粒通過(guò)該篩。例如，如果顆粒大小被描述為-5+20目，那么顆粒將通過(guò)5目篩(顆粒小于 4. 0mm)，而被20目篩截留(顆粒大于841 u m)。葉的顆粒大小可以另外地或可選擇地使用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)IS06078-1982中列出的等級(jí) 來(lái)表示。在我們的歐洲專(zhuān)利說(shuō)明書(shū)EP1365657B1 (特別是第W041]段和表2)中詳細(xì)討論了這些等級(jí)，本文將其引入作為參考。富集和純化如果給定的組合物被稱(chēng)為“富含”茶化合物，則意味著該組合物中茶化合物混合物 中的該茶化合物的重量分?jǐn)?shù)至少為壓榨后立即獲得的茶汁中茶化合物混合物中的該茶化 合物的重量分?jǐn)?shù)的一倍半。這可以表示為方程(1)R = (Ctc/C 總)/ (mTC/m 總)彡 1 5(1)其中，R是給定的組合物中特定茶化合物的富集系數(shù)，CTe是給定的組合物中特定 茶化合物的質(zhì)量，是給定的組合物中的茶化合物的總質(zhì)量，mTC是茶汁中的特定茶化合物 的質(zhì)量，是在茶汁中的茶化合物的總質(zhì)量。類(lèi)似地，“純化”是指增加組合物中的茶化合物的重量分?jǐn)?shù)。發(fā)明_既述我們驚奇地發(fā)現(xiàn)，從茶葉榨出的汁液包含高含量的有價(jià)值的茶化合物，而具有比 傳統(tǒng)的茶的水提取物所特有的水含量更低的水含量。此外，我們發(fā)現(xiàn)，汁液可以容易地分級(jí) 分離，以產(chǎn)生富含有價(jià)值的茶化合物的組合物。因此，本發(fā)明提供了一種包括以下步驟的方法a)從新鮮茶葉榨汁從而產(chǎn)生包含茶化合物的混合物的汁液和葉渣；b)分級(jí)分離所述混合物；和c)回收至少一個(gè)富含至少一種茶化合物的級(jí)分。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，至少一種茶化合物是茶氨酸和/或芳香化合物。發(fā)明詳述汁液的壓榨本發(fā)明方法的步驟(a)包括從新鮮茶葉榨汁。如果榨出的汁液的量過(guò)低，則難以從葉渣中分離汁液，和/或?qū)е碌托У倪^(guò)程。因 此，榨出的汁液的量?jī)?yōu)選為每千克新鮮茶葉至少10ml，更優(yōu)選至少25ml，更優(yōu)選至少50ml， 最優(yōu)選75至600ml。當(dāng)提及每單位質(zhì)量的茶葉榨出的汁液的體積時(shí)，應(yīng)該指出，茶葉的質(zhì)量 以“原態(tài)”為基礎(chǔ)而不是以干重為基礎(chǔ)表示。因此，質(zhì)量包括葉中的任何水分?？梢砸匀魏畏奖愕姆绞綄?shí)現(xiàn)壓榨步驟，只要它允許從葉渣中分離茶汁，并產(chǎn)生需 要的汁液量。例如，用于榨汁的機(jī)器可以包括液壓壓榨機(jī)、氣動(dòng)壓榨機(jī)、螺旋壓榨機(jī)、壓帶 機(jī)、擠出機(jī)或其組合。可以通過(guò)一次壓榨或多次壓榨新鮮葉從新鮮葉獲得汁液。優(yōu)選地通過(guò)一次壓榨獲 得汁液，因?yàn)檫@提供簡(jiǎn)單而快速的過(guò)程。為了使有價(jià)值的茶化合物的降解最小化，壓榨步驟優(yōu)選地在環(huán)境溫度下進(jìn)行。例 如，葉的溫度可以是5-40°C，更優(yōu)選10-30°C。壓榨步驟中采用的時(shí)間和壓力可以變化，以產(chǎn)生需要的汁液量。但是，通常榨汁施 加的壓力是0. 5MPa(73psi)至lOMPa(1450psi)。施加壓力的時(shí)間通常是1秒至1小時(shí)，更 優(yōu)選10秒至20分鐘，最優(yōu)選30秒至5分鐘。在壓榨前，新鮮茶葉可以經(jīng)受預(yù)處理，包括，例如，選自用于滅活發(fā)酵酶的熱處理、 解析、萎凋(withering)、發(fā)酵或其組合的單元過(guò)程。如果茶汁和/或葉渣用于獲得綠茶化合物(例如，兒茶素)，優(yōu)選地在壓榨前對(duì)新鮮葉進(jìn)行熱處理以滅活發(fā)酵酶。合適的熱處理包括蒸青和/或炒干。如果茶汁和/或葉渣用于獲得紅茶化合物或?yàn)觚埐杌衔?例如，茶黃素和/或 茶玉紅精)，優(yōu)選地在壓榨前不對(duì)新鮮葉進(jìn)行滅活發(fā)酵酶的熱處理。在壓榨前，新鮮葉可以 發(fā)酵或者可以不發(fā)酵。如果葉在壓榨前發(fā)酵，則特別優(yōu)選在發(fā)酵前進(jìn)行解析。無(wú)論新鮮葉是否發(fā)酵，在壓榨前解析可能有助于減少壓榨需要量的汁液所需的時(shí) 間和/或壓力。分級(jí)分離本發(fā)明方法的步驟(b)包括分級(jí)分離茶化合物的混合物，步驟(c)包括回收至少 一個(gè)富含至少一種茶化合物的級(jí)分。該方法可以用于純化任何茶化合物。但是，優(yōu)選的茶化合物是那些顯示生物活性 和/或貢獻(xiàn)香味的茶化合物。因此，優(yōu)選地，至少一種茶化合物是多酚、氨基酸或芳香化合 物。最優(yōu)選地，至少一種茶化合物是茶氨酸和/或芳香化合物。如果至少一種茶化合物是多酚，那么它可能是，例如，兒茶素、茶黃素、茶玉紅精或 其混合物。如果至少一種茶化合物是氨基酸，那么它優(yōu)選地是茶氨酸。如果至少一種茶化合物是芳香化合物，那么它通常是揮發(fā)性的。揮發(fā)性的意思是 它在25°C具有至少lPa的蒸氣壓。優(yōu)選地，芳香化合物是甲醇、乙醛、甲硫醚、2-甲基丙 醛、2-甲基丁醛、3-甲基丁醛、1-戊烯-3-酮、己醛、1-戊烯-3-醇、E-2-己烯醛、Z-3-己 烯基乙酸酯、1-2-戊烯-1-醇、己-1-醇、Z-3-己烯醇、E-2-己烯醇、順式氧化芳樟醇 (cis-linalooloxide)、1_辛烯_3_醇、反式氧化芳樟醇、芳樟醇、a -萜品醇(terpinol)、 苯乙醛、水楊酸甲酯、香葉醇、苯甲醇、2-苯乙醇或其混合物。可以使用任何合適的能夠分離茶化合物的方法實(shí)現(xiàn)步驟(b)的分級(jí)分離。這些方 法的例子包括膜過(guò)濾、制備色譜法、溶劑萃取、沉淀、蒸餾及其組合的單元過(guò)程。膜過(guò)濾可以包括微量過(guò)濾、超濾、納米過(guò)濾、反滲透或其組合。優(yōu)選的過(guò)濾操作包 括超濾、納米過(guò)濾或其組合，因?yàn)檫@些操作在純化如多酚和/或氨基酸的生物活性化合物 時(shí)特別有效。通常，過(guò)濾包括將茶化合物的混合物分級(jí)分離為至少一個(gè)滲透級(jí)分和至少一 個(gè)保留級(jí)分。如本文使用的術(shù)語(yǔ)“制備色譜法”是指包括將茶化合物的混合物接觸色譜分離介 質(zhì)的步驟的制備方法。色譜分離介質(zhì)是一種對(duì)于混合物中的至少2種茶化合物具有不同的 親和力的物質(zhì)，例子包括吸附材料。通常，混合物通過(guò)制備色譜法分級(jí)分離為在其與色譜分 離介質(zhì)相互作用的程度上不同的至少兩個(gè)級(jí)分。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，制備色譜法是 柱色譜法。如果色譜法是柱色譜法，混合物通常從柱上洗脫，且在不同洗脫時(shí)間收集級(jí)分。溶劑萃取優(yōu)選地包括使茶化合物的混合物接觸溶劑，從而產(chǎn)生至少一個(gè)可溶的級(jí) 分和至少一個(gè)不溶的級(jí)分。沉淀通常包括使混合物經(jīng)受物理和/或化學(xué)變化，使得可溶物質(zhì)從溶液中沉淀出 來(lái)，和/或懸浮物質(zhì)沉積或凝成乳脂狀?；瘜W(xué)變化的例子包括PH值、溶劑組成、濃度的變化 或其組合。物理變化的例子包括加熱或冷卻、離心或其組合。蒸餾通常包括加熱混合物以蒸發(fā)至少一些揮發(fā)性茶化合物。當(dāng)至少一種茶化合物 是芳香化合物時(shí)，尤其優(yōu)選步驟(b)包括蒸餾。
在步驟(c)中回收的至少一個(gè)富含至少一種茶化合物的級(jí)分優(yōu)選地富含茶化合 物，使得富集系數(shù)R至少為1. 7，更優(yōu)選至少2，最優(yōu)選3至1000。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，濃縮和/或干燥至少一個(gè)級(jí)分。這允許穩(wěn)定長(zhǎng)期地存 儲(chǔ)級(jí)分。通常，干燥級(jí)分至小于20重量％的水分，更優(yōu)選小于10%，最佳為至7%的水 分。優(yōu)選地，茶汁的茶化合物在分級(jí)分離混合物之前不用另外的茶化合物(例如，來(lái) 自茶提取物)稀釋?zhuān)驗(yàn)檫@將進(jìn)一步復(fù)雜化分級(jí)分離過(guò)程。茶氨酸的純化發(fā)現(xiàn)與常規(guī)茶提取物相比，茶汁特別富含茶氨酸。因此，在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案 中，該方法是一種從茶純化茶氨酸的方法，該方法包括以下步驟a)從新鮮茶葉榨汁，從而產(chǎn)生包含含有茶氨酸的茶化合物的混合物的汁液和葉 渣；b)分級(jí)分離所述混合物；和c)回收至少一個(gè)富含茶氨酸的級(jí)分。通常，在步驟(b)中可以采用與那些已知用于從茶提取物純化茶氨酸的方法類(lèi)似 的方法。具體來(lái)說(shuō)，這些方法包括納米過(guò)濾(參見(jiàn)，例如，W02006/037503)和/或離子排斥 色譜法(參見(jiàn)，例如，共同未決的國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)PCT/EP2008/054817)。優(yōu)選地，至少一個(gè)富含茶氨酸的級(jí)分包含基于干重的含量為至少5%，更優(yōu)選至少 8%，最優(yōu)選10%至100%的茶氨酸。芳香化合物的純化茶汁是芳香化合物的豐富來(lái)源。因此，在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，該方法是一種從 茶中回收芳香化合物的方法，該方法包括以下步驟a)從新鮮茶葉榨汁，從而產(chǎn)生包含含有芳香化合物的茶化合物的混合物的汁液和 葉渣；b)分級(jí)分離所述混合物；和c)回收至少一個(gè)富含芳香化合物的級(jí)分。優(yōu)選地，步驟(b)包括蒸餾步驟，步驟(c)包括回收富含芳香化合物的蒸餾物。通 常，在步驟(b)中可以采用與那些已知用于從茶提取物中蒸餾芳香化合物的方法類(lèi)似的方 法。具體而言，這些方法包括閃蒸(參見(jiàn)，例如，W02003/101215)和/或載氣蒸餾(參見(jiàn)， 例如，US4, 880,656)。至少一個(gè)富含芳香化合物的級(jí)分優(yōu)選地具有至少25mg/l，更優(yōu)選至少50mg/l，更 優(yōu)選至少100mg/l的芳香化合物含量，最優(yōu)選1000mg/l至作為純芳香油(例如900g/l)的 濃縮物的芳香化合物含量。芳香化合物的含量(或總有機(jī)碳-T0C)可以通過(guò)W02007/079900 公開(kāi)的方法測(cè)定。加工葉漁為了使本方法的效率最大化，優(yōu)選地不丟棄葉渣，而是進(jìn)一步加工，以產(chǎn)生具有商 業(yè)利益的產(chǎn)品。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，本方法包括另外的步驟(d)，其中，加工葉渣 以產(chǎn)生葉茶。我們驚奇地發(fā)現(xiàn)，如果榨出的汁液的量低于300ml/千克新鮮茶葉，盡管壓榨后的
7葉渣具有較低的茶化合物(如多酚和氨基酸)整體含量，但仍可以加工葉渣以制造至少具 有常規(guī)質(zhì)量的葉茶。通常，榨出的汁液越少，最終葉茶的質(zhì)量(例如，在沖泡表現(xiàn)方面)越 好。因此，步驟(a)中榨出的汁液的量?jī)?yōu)選地小于每千克茶葉300ml，更優(yōu)選地小于275ml， 更優(yōu)選地小于250ml，最優(yōu)選地小于225ml?？梢约庸と~渣以產(chǎn)生綠茶葉茶、紅茶葉茶或?yàn)觚埐枞~茶。在烏龍茶葉茶和紅茶葉 茶的情況下，步驟⑷包括發(fā)酵葉渣。綠茶葉茶、紅茶葉茶和烏龍茶葉茶的生產(chǎn)方法是公知的，并且在例如“Tea: Cultivation to Consumption，，，K. C. Willson和M. N. Clifford(編)，第一版，1992，Chapman & Hall (London)，第13章和第14章中描述了合適的方法。生產(chǎn)所有葉茶的一個(gè)共同的步驟是干燥步驟。在烏龍茶和紅茶葉茶的情況下，干 燥步驟通常也用于滅活發(fā)酵酶。有效的干燥需要高溫，所以本方法的步驟(d)優(yōu)選地包括 在至少75°C、更優(yōu)選至少90°C的溫度下干燥葉渣。步驟(d)優(yōu)選地包括分選葉茶，優(yōu)選地在干燥后，以達(dá)到至少35目的顆粒大小。 更優(yōu)選地分選葉茶以達(dá)到30目至3目的顆粒大小?？蛇x擇地或另外地，可以分選葉茶以 達(dá)到白毫片茶(Pekoe Farmings) (PF)等級(jí)或更高等級(jí)的葉茶等級(jí)，更優(yōu)選橙片茶(Orange Farmings) (OF)或更高等級(jí)，最優(yōu)選碎橙白毫片茶(Broken Orange Pekoe Farmings) (B0PF)或更高等級(jí)。
實(shí)施例通過(guò)參考以下的實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。實(shí)施例1本實(shí)施例證明使用一種稱(chēng)為固相萃取(SPE)的類(lèi)型的制備色譜法分級(jí)分離茶汁。汁液的收集在 100°C蒸青新鮮茶葉(其尚未萎凋)60秒，以滅活內(nèi)源性酶，從而防止發(fā)酵。 使用蔬菜切割機(jī)切割冷卻到室溫的蒸青的葉，以產(chǎn)生大約0.5-lcm2平均大小的切葉。使 用液壓壓榨機(jī)(向直徑160mm的圓筒內(nèi)的500克質(zhì)量的素坯(dhool)施加5噸的力，產(chǎn)生 354psi(2. 44MPa)的向下壓力)壓榨素坯，以榨出綠茶汁。綠茶汁的產(chǎn)率為22ml/100克素 坯，并具有8重量％的總固體含量。立即離心茶汁20分鐘(在;TC，10000g)，然后使用裝配 有0. 2i!m過(guò)濾器的Nalgene 過(guò)濾單元對(duì)上清液進(jìn)行過(guò)濾除菌。離心并過(guò)濾后的茶汁的固 體含量為6重量％。汁液的分級(jí)分離將綠茶汁(lml)加樣到C18SPE 柱(SDB 200mg/3ml,購(gòu)自 J. T. Baker, Bakerbond SPE，批號(hào)0316910033)。在收集洗脫液后，用lml水沖洗柱，然后用lml體積的甲醇-水混 合物(20%、40%、60%、80%和100% v/v的甲醇)先后沖洗。然后對(duì)柱進(jìn)行另外的4ml甲 醇沖洗，以確保吸附到柱上的所有化合物被完全洗掉。分析每個(gè)級(jí)分的兒茶素類(lèi)、咖啡因和 茶氨酸。結(jié)果茶汁和各個(gè)甲醇級(jí)分中的茶氨酸、兒茶素和咖啡因含量總結(jié)于表1中。在第一洗 脫液中發(fā)現(xiàn)來(lái)自茶汁的少量的茶氨酸(7.7%的產(chǎn)率)。所有的咖啡因和兒茶素類(lèi)被SPE柱吸附，因?yàn)樵谧畛醯南疵撘褐袥](méi)有檢測(cè)到這些化合物。水和20%甲醇級(jí)分分別以60%和 27%的收率回收茶氨酸，但在這兩個(gè)級(jí)分中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)咖啡因或兒茶素類(lèi)。隨著流動(dòng)相中甲 醇的增加，兒茶素類(lèi)和咖啡因開(kāi)始洗脫下來(lái)。當(dāng)甲醇的比例提高到80%時(shí)，主要洗脫出咖 啡因，而兒茶素類(lèi)主要從60%至100%甲醇沖洗時(shí)開(kāi)始洗脫下來(lái)。各個(gè)兒茶素類(lèi)之間的洗 脫分布存在一些有趣的差異。60%甲醇的沖洗洗脫73%的EGC，而大部分ECG(61% )需要 80%甲醇才能從柱上洗脫下來(lái)。EC和EGCG主要分布于60%和80%甲醇級(jí)分中。總共1ml 的甲醇足以從柱上完全除去兒茶素類(lèi)。表1 *N. D.=沒(méi)有檢測(cè)到。粉末的產(chǎn)生在一個(gè)單獨(dú)的實(shí)驗(yàn)中，向6個(gè)SPE柱上各加樣1ml茶汁。收集并混合(bulk)來(lái)自每個(gè)柱的洗脫液。然后用lml水沖洗每個(gè)柱，并混合產(chǎn)生的水級(jí)分。然后用lmll00%甲醇 沖洗每個(gè)柱，并混合產(chǎn)生的甲醇級(jí)分。洗脫液、水級(jí)分和甲醇級(jí)分分別冷凍干燥成粉末。此 外，直接冷凍干燥未分級(jí)分離的茶汁。通過(guò)合適的ISO方法定量化每個(gè)粉末中的茶氨酸、咖啡因和兒茶素類(lèi)。表2總結(jié) 了每個(gè)粉末級(jí)分中的每種成分的含量(mg/g干重)表2 實(shí)施例2本實(shí)施例證明通過(guò)蒸餾從茶汁中回收芳香化合物。汁液的收集通過(guò)與實(shí)施例1所述相同的方法獲得茶汁。汁液的分級(jí)分離將茶汁(220ml)在60°C、部分真空下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)1小時(shí)。這產(chǎn)生132ml富含芳香化 合物(116mg/lT0C)的濃縮物。葉茶的產(chǎn)生手工破壞由上述汁液生產(chǎn)產(chǎn)生的壓榨過(guò)的殘留素坯，然后使用流化床干燥器(在 90°C下10分鐘，接著在120°C下10分鐘)干燥以獲得具有3%水分含量的葉茶。
權(quán)利要求
一種包括以下步驟的方法a)從新鮮茶葉榨汁，從而產(chǎn)生包含茶化合物的混合物的汁液和葉渣；b)分級(jí)分離所述混合物；和c)回收至少一個(gè)富含至少一種茶化合物的級(jí)分。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述步驟(b)包括選自膜過(guò)濾、制備色譜法、溶劑 萃取、沉淀、蒸餾及其組合的單元過(guò)程。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的方法，其中，所述至少一種茶化合物是多酚、氨 基酸或芳香化合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中，所述至少一種茶化合物是茶氨酸。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中，所述至少一種茶化合物是兒茶素、茶黃素、茶玉 紅精或其混合物。
6.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述方法包括另外的步驟d)加工所述葉渣以產(chǎn)生葉茶。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中，所述步驟(b)中榨出的汁液的量為10至300ml/ 千克新鮮茶葉。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的方法，其中，所述步驟(d)包括發(fā)酵所述葉渣。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中，所述葉茶是紅茶葉茶。
10.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的方法，其中，在步驟(a)中從其中榨汁的新鮮 茶葉的水分含量為新鮮茶葉的30 90重量％。
11.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述茶化合物的混合物在步驟 (b)之前或步驟(b)過(guò)程中不用另外的茶化合物稀釋。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中，所述汁液在步驟(b)之前或步驟(b)過(guò)程中不 與茶提取物混合。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種包括以下步驟的方法從新鮮茶葉榨汁從而產(chǎn)生包含茶化合物的混合物的汁液和葉渣；分級(jí)分離所述混合物；和回收至少一個(gè)富含至少一種茶化合物的級(jí)分。
文檔編號(hào)A23F3/08GK101848648SQ200880114541
公開(kāi)日2010年9月29日 申請(qǐng)日期2008年10月30日 優(yōu)先權(quán)日2007年11月5日
發(fā)明者D·G·夏普, S·P·科利弗 申請(qǐng)人:荷蘭聯(lián)合利華有限公司