專利名稱:咖啡飲料組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種即使長期飲用也能夠抑制在體內(nèi)的過氧化氫的產(chǎn)生的咖啡飲料組合物。
背景技術(shù):
據(jù)報(bào)道,活性氧之一的的過氧化氫不僅與變異原性、癌原性等密切相關(guān),此外還與動(dòng)脈硬化、缺血性心臟病等循環(huán)系統(tǒng)疾病,消化器官疾病、變應(yīng)性疾病、眼部疾病等多種疾病密切相關(guān)(非專利文獻(xiàn)1)。另一方面,咖啡中含有由于焙煎而自然產(chǎn)生的過氧化氫(非專利文獻(xiàn)2),并且,已經(jīng)報(bào)道有通過添加過氧化氫酶、過氧化物酶、抗氧化劑來除去咖啡中的過氧化氫的技術(shù)(專利文獻(xiàn)1~4)。
非專利文獻(xiàn)1營養(yǎng)-評(píng)價(jià)和治療19,3(2002)非專利文獻(xiàn)2Mutat.Res.16,308(2)(1994)專利文獻(xiàn)1特公平4-29326號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)2特開平3-127950號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)3特開平11-266842號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)4特開2003-81824號(hào)公報(bào)發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供一種羥基氫醌含量為0~0.00005質(zhì)量%的咖啡飲料組合物及其制造方法。
此外,本發(fā)明還提供一種羥基氫醌含量為0~0.001質(zhì)量%的可溶性咖啡組合物及其制造方法。
進(jìn)一步,本發(fā)明還提供填充了羥基氫醌含量為0~0.00005質(zhì)量%的咖啡飲料組合物的容器裝飲料。
此外,本發(fā)明提供咖啡飲料組合物以及填充它的容器裝飲料,其特征在于,在高效液相色譜分析中,當(dāng)以五倍子酸(沒食子酸)作為標(biāo)準(zhǔn)物時(shí),相對(duì)于五倍子酸的相對(duì)保留時(shí)間為0.54~0.61的時(shí)間區(qū)域內(nèi),實(shí)質(zhì)上沒有峰。
〔圖1〕焙煎咖啡對(duì)體內(nèi)過氧化氫的影響(人)的示意圖。
〔圖2〕除去過氧化氫的咖啡對(duì)體內(nèi)過氧化氫量的影響的示意圖。
〔圖3〕表示在體內(nèi)生成過氧化氫的咖啡中的成分的圖。
〔圖4〕表示羥基氫醌對(duì)體內(nèi)過氧化氫的生成所波及的作用的圖。
〔圖5〕表示咖啡Q的HPLC圖(檢測波長為258nm)。
〔圖6〕表示咖啡Q的HPLC圖(檢測波長為288nm)。
〔圖7〕表示活性炭處理的咖啡對(duì)大鼠體內(nèi)過氧化氫的量的影響的圖。**相對(duì)于蒸餾水組的顯著水平在1%以下,具有顯著誤差;〔圖8〕活性炭處理的咖啡對(duì)人體內(nèi)過氧化氫的量的影響的示意圖。*相對(duì)于活性碳處理的咖啡的飲用組的顯著水平在5%以下,具有顯著誤差;**相對(duì)于活性碳處理的咖啡的飲用組的顯著水平在1%以下,具有顯著誤差。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明者們明確了以下事實(shí)將除去了過氧化氫的咖啡給大鼠引用時(shí),在體內(nèi)生成過氧化氫,尿中過氧化氫的濃度上升。即,根據(jù)現(xiàn)有的除去咖啡飲料中的過氧化氫的技術(shù),不能抑制飲用咖啡后在體內(nèi)的過氧化氫的生成。
因此,本發(fā)明提供一種飲用后在體內(nèi)不會(huì)生成過氧化氫的咖啡飲料組合物。
因此,本發(fā)明人基于是不是咖啡中的某種成分在生物體內(nèi)生成過氧化氫的假設(shè),進(jìn)行了各種研究,其結(jié)果發(fā)現(xiàn)了以下事實(shí)咖啡中所含的羥基氫醌在生物體內(nèi)具有生成過氧化氫作用;以及,如果將羥基氫醌的含量控制為遠(yuǎn)小于通常的含量0~0.00005質(zhì)量%,就能得到在生物體內(nèi)不增加氧化氫的生成的咖啡飲料組合物。
即使飲用本發(fā)明的咖啡飲料組合物也不會(huì)在體內(nèi)生成過氧化氫。因此,本發(fā)明的咖啡飲料組合物作為安全性高的飲料是有用的。
本發(fā)明的咖啡飲料組合物的特征在于,羥基氫醌的含量被調(diào)整到0~0.00005質(zhì)量%;本發(fā)明的可溶性咖啡組合物的特征在于,羥基氫醌的含量被調(diào)整到0~0.001質(zhì)量%。羥基氫醌含量處于上述范圍內(nèi)的情況下,飲用這些組合物時(shí),在生物體內(nèi)過氧化氫的產(chǎn)生得到抑制??Х蕊嬃辖M合物中的羥基氫醌的含量優(yōu)選為0~0.00003質(zhì)量%,更優(yōu)選0~0.00001質(zhì)量%??扇苄钥Х冉M合物中的羥基氫醌含量優(yōu)選為0~0.0003質(zhì)量%,更優(yōu)選0~0.0001質(zhì)量%。
該羥基氫醌的含量可以通過高效液相色譜(HPLC)來測定。關(guān)于HPLC的檢測手段,通常采用UV檢測,但是,通過CL(化學(xué)發(fā)光)檢測、EC(電化學(xué))檢測、LC-Mass檢測等,可以進(jìn)行靈敏度更高的檢測。而且,通過HPLC進(jìn)行的羥基氫醌含量的測定,還可以在濃縮咖啡飲料之后進(jìn)行。
此外,盡管羥基氫醌的含量通過HPLC直接測定,但是,也可以從咖啡飲料組合物或可溶性咖啡飲料組合物通過各種色譜濃縮羥基氫醌,然后通過測定該濃縮組分來進(jìn)行定量。而且,在進(jìn)行羥基氫醌量的測定時(shí),在容器裝飲料的情況下,優(yōu)選開封之后立即加入例如0.1N(規(guī)定)的鹽酸將其調(diào)整為pH3以下的酸性溶液之后進(jìn)行測定。
人如果飲用普通市售的速溶咖啡2杯(280g),尿中的過氧化氫量將顯著增加(圖1)。另一方面,攝取普通的咖啡和除去過氧化氫的咖啡的大鼠的尿中的過氧化氫的增加程度相同(圖2)。由此可知以下事實(shí)不是由于咖啡中含有的過氧化氫而增加了飲用后尿中的過氧化氫的量,而是咖啡中含有的某種成分在生物體內(nèi)生成過氧化氫。
因此,本發(fā)明人對(duì)咖啡中含有的各種成分在體內(nèi)生成過氧化氫的能力進(jìn)行了研究。其結(jié)果,明確了如下事實(shí)盡管在普通的市售咖啡中含羥基氫醌0.2~3mg/190g,但是,即使攝取極少量的羥基氫醌,它也具有在體內(nèi)增加過氧化氫的生成的作用(圖3、4),而在攝取羥基氫醌的含量調(diào)整為0.00005質(zhì)量%以下的咖啡的情況下,則在體內(nèi)抑制過氧化氫的生成(圖7)。
本發(fā)明的咖啡飲料組合物和可溶性咖啡飲料組合物,除了減少羥基氫醌的含量之外,優(yōu)選含有相同程度的通常的咖啡成分。
以100g咖啡飲料組合物作為基準(zhǔn)的情況下,本發(fā)明的咖啡飲料組合物優(yōu)選含有鉀30~300mg/100g、更優(yōu)選40~250mg/100g、特別優(yōu)選50~200mg/100g。而且,考慮到咖啡本來的風(fēng)味,以1g可溶性咖啡組合物作為基準(zhǔn)的情況下,本發(fā)明的可溶性咖啡組合物中優(yōu)選含有鉀20~200mg/1g、更優(yōu)選30~180mg/1g,特別優(yōu)選40~150mg/1g。鉀濃度的測定,例如可以使用原子吸光光度法來測定。為了使鉀的含量處于上述范圍內(nèi),優(yōu)選在咖啡飲料組合物的制造過程中不進(jìn)行積極地除去鉀的操作。
此外,考慮到咖啡本來的風(fēng)味,以100g咖啡飲料組合物作為基準(zhǔn)的情況下,本發(fā)明的咖啡飲料組合物的灰分的量優(yōu)選為280mg以下,更優(yōu)選250mg以下,進(jìn)一步更優(yōu)選220mg以下,特別優(yōu)選200mg以下。灰分的測定是按照日本食品標(biāo)準(zhǔn)成分表第四次修訂(昭和57年發(fā)行,科學(xué)技術(shù)廳資源調(diào)查委員會(huì)編集,28頁)記載的方法,采用在550℃下加熱直到?jīng)]有殘余的碳成為恒量為止的灰化方法來測定。為了使灰分的量處于上述范圍內(nèi),在咖啡飲料組合物的制造過程中,優(yōu)選不進(jìn)行用強(qiáng)堿處理之后用酸等使其回到中性區(qū)域等的,使灰分的量增多的操作。
此外,考慮到咖啡本來的風(fēng)味,本發(fā)明的咖啡飲料組合物的H2O2(過氧化氫)的含量優(yōu)選為1ppm以下,更優(yōu)選為0.1ppm以下,特別優(yōu)選為0.01ppm以下。過氧化氫的測定可以用通用的過氧化氫計(jì)來進(jìn)行,例如,可以使用CENTRAL KAGAKU公司制的高靈敏度過氧化氫計(jì)SUPER ORITECTOR MODEL 5。
在本發(fā)明的咖啡飲料組合物中使用的咖啡豆的種類沒有特別的限定,可以舉出例如巴西、哥倫比亞、坦桑尼亞、穆哈等產(chǎn)的咖啡豆。作為咖啡的種類,有阿拉比卡種、羅布斯塔種??Х榷箍梢允褂?種,也可以混合多種使用。對(duì)于焙煎咖啡豆的焙煎方法沒有特別限制,對(duì)于焙煎溫度、焙煎環(huán)境也沒有任何限制,可以采用通常的方法。并且,對(duì)于從該豆的提取方法也沒有任何限制,例如可以舉出對(duì)焙煎咖啡豆及其粉碎物使用冷水~熱水(0~100℃)提取10秒~30分鐘的方法。提取方法可以舉出沸騰式、蒸餾式、虹吸式、滴落式(紙、法蘭絨等)等。
本發(fā)明的咖啡飲料組合物,是指其每100g使用了換算成生豆時(shí)的1g以上的咖啡豆的組合物。優(yōu)選使用2.5g以上的咖啡豆。更優(yōu)選使用5g以上的咖啡豆。將本發(fā)明的咖啡飲料組合物作為容器裝飲料時(shí),優(yōu)選為單份濃度(single strength)。此處,所謂“單份濃度”,是指將容器裝飲料開封后,作為常態(tài)無需稀釋而直接能夠飲用的濃度。
本發(fā)明的咖啡飲料組合物或可溶性咖啡組合物,是通過用吸附劑處理焙煎咖啡豆提取物,使羥基氫醌的含量降低而得到的。關(guān)于吸附劑,可以舉出活性炭、反相載體等。更具體地說,在焙煎咖啡豆提取液或焙煎咖啡豆提取液的干燥品的水溶液中加入吸附劑,在0~100℃攪拌10分鐘~5小時(shí)后,除去吸附劑即可。此處,吸附劑的使用量為,相對(duì)于焙煎咖啡豆的重量,活性碳的情況下優(yōu)選為0.02~1.0倍,反相載體的情況下優(yōu)選為2~100倍。此處,作為活性碳,可以舉出通過氯化鋅法或者水蒸氣活化法使之活化的活性炭,優(yōu)選通過水蒸氣活化法使之活化的活性炭。關(guān)于活性碳的種類,優(yōu)選椰子殼活性碳、更優(yōu)選水蒸氣活化的椰子殼活性碳。作為活性碳的市售品,可以使用白鷺WH2c(Japan EnviroChemicals)、太閣CW(二村化學(xué))、Kurary CoalGW(Kurary Chemical)。作為反相載體,可以舉出YMC·ODS-A(YMC)、C18(GL Siences Inc.)。
這些吸附劑處理法中,從不降低綠原酸類的量的情況下能夠選擇性地減少羥基氫醌的含量、工業(yè)上有利、并且不會(huì)降低鉀含量(以質(zhì)量比計(jì)為1/5以上,特別是保持1/2以上)的觀點(diǎn)出發(fā),優(yōu)選使用活性碳的吸附劑處理法。
此外,本發(fā)明的咖啡飲料組合物或可溶性咖啡組合物中的羥基氫醌的量,可以在高效液相色譜分析中,以五倍子酸作為標(biāo)準(zhǔn)物的情況下,能夠在相對(duì)于五倍子酸的相對(duì)保留時(shí)間為0.54~0.61的時(shí)間區(qū)域內(nèi)檢出峰。因此,本發(fā)明的咖啡飲料組合物可以被規(guī)定為,其特征在于在高效液相色譜分析中,當(dāng)以五倍子酸作為標(biāo)準(zhǔn)物時(shí),在相對(duì)于五倍子酸的相對(duì)保留時(shí)間為0.54~0.61的時(shí)間區(qū)域內(nèi),實(shí)質(zhì)上沒有峰。并且,本發(fā)明的可溶性咖啡組合物可以被規(guī)定為,其特征在于在高效液相色譜分析中,當(dāng)以五倍子酸作為標(biāo)準(zhǔn)物時(shí),在相對(duì)于五倍子酸的相對(duì)保留時(shí)間為0.54~0.61的時(shí)間區(qū)域內(nèi),實(shí)質(zhì)上沒有峰。并且,該規(guī)定相關(guān)的高效液相色譜的分析條件為后述的分析條件B。
為了確認(rèn)以下事實(shí),即,本發(fā)明的咖啡組合物在高效液相色譜分析中,當(dāng)以五倍子酸作為標(biāo)準(zhǔn)物時(shí),在相對(duì)于五倍子酸的相對(duì)保留時(shí)間為0.54~0.61的時(shí)間區(qū)域內(nèi),實(shí)質(zhì)上沒有峰,可以使用一般的HPLC,例如,作為洗提液使用0.05M醋酸水溶液和0.05M醋酸100%乙腈溶液的梯度,使用ODS柱,通過紫外線吸光光度計(jì)檢測來以確認(rèn)。
在本發(fā)明中,所謂“在相對(duì)于五倍子酸的相對(duì)保留時(shí)間為0.54~0.61的時(shí)間區(qū)域內(nèi),實(shí)質(zhì)上沒有峰”意味著,將分析五倍子酸的1ppm溶液時(shí)的面積值計(jì)為S1,在相同條件下分析咖啡飲料組合物時(shí)的來自前述特定區(qū)域內(nèi)溶出成分的峰面積的總和計(jì)為S2時(shí),有S2/S1<0.01。
本發(fā)明的咖啡飲料組合物中可以根據(jù)需要而添加蔗糖、葡萄糖、果糖、木糖、果糖葡萄糖液、糖醇等糖分、乳成分、抗氧化劑、pH調(diào)節(jié)劑、乳化劑、香料等。關(guān)于乳成分,可以舉出生鮮奶、牛奶、全脂奶粉、脫脂奶粉、鮮奶油、濃縮奶、脫脂奶、部分脫脂奶、煉奶等。關(guān)于本發(fā)明的咖啡飲料組合物的pH,考慮到飲料的穩(wěn)定性,優(yōu)選為3~7.5、更優(yōu)選4~7、特別優(yōu)選5~7。
所述可溶性咖啡組合物為粉體狀速溶咖啡粉體等粉體食品。速溶咖啡粉體可通過常規(guī)方法來制備。例如,可以通過以下方法來得到干燥粉體從噴嘴將咖啡提取液噴出,使其在約210~310℃的熱風(fēng)中落下,從而使其成為多孔質(zhì)的水溶性咖啡粉末的噴霧干燥(spray-dry)方法或者,將咖啡提取物在液氮或冰箱等中冷凍、粉碎、篩分之后,在真空條件下使水分升華,使水分達(dá)到3%以下的冷凍干燥(freeze-dry)方法。
本發(fā)明的咖啡飲料組合物或可溶性咖啡可以裝入PET瓶、罐(鋁、鋼)、紙、殺菌袋、瓶(玻璃)等容器中。該情況下,本發(fā)明的咖啡飲料組合物可直接作為50~2500mL的容器裝飲料。容器裝飲料的pH優(yōu)選為5~7.5,特別優(yōu)選5.4~7。從防止咖啡中的成分的變化的觀點(diǎn)出發(fā),容器優(yōu)選為非氧透過性的容器,例如,使用鋁或鋼等制的罐、玻璃制的瓶等。罐或瓶的情況,還包括能夠重蓋(recap)的類型和重封(reseal)型。此處,“氧非透過性”指的是在20℃、相對(duì)濕度為50%的環(huán)境下測定的氧透過率(cc·mm/m2·day·atm)為5以下的情況,更優(yōu)選為3以下,特別優(yōu)選在1以下。
此外,本發(fā)明的可溶性咖啡,可以將其每1g溶解在25~500mL的冷水或熱水中后飲用。
在制造容器裝飲料的情況下,通常進(jìn)行殺菌處理。在填充在金屬罐等容器中后能夠進(jìn)行加熱殺菌的情況下,在食品衛(wèi)生法中規(guī)定的殺菌條件下進(jìn)行殺菌處理。而對(duì)于PET瓶、紙容器等不能進(jìn)行蒸餾殺菌的情況,則采用以下方法即,在與食品衛(wèi)生法中規(guī)定的條件相同的殺菌條件下——例如通過板式熱交換器在高溫下進(jìn)行短時(shí)間的殺菌之后,冷卻至一定溫度,再向容器內(nèi)填充。此外,也可以進(jìn)行如下操作在無菌條件下加熱殺菌后,在無菌條件下使pH回復(fù)到中性;或在中性狀態(tài)下加熱殺菌后,在無菌條件下使pH回復(fù)到酸性等。
實(shí)施例實(shí)施例1(焙煎咖啡對(duì)體內(nèi)過氧化氫量的影響)(a)焙煎咖啡的調(diào)制將速溶咖啡(無咖啡因雀巢咖啡(Nescafe caffeine less))4g溶解于礦泉水280mL。此時(shí),280mL咖啡中的綠原酸量為210mg、HHQ量為2.6mg。
(b)將所得280mL咖啡給6名健康男性飲用,在隨后的1~5小時(shí)后測定尿中的過氧化氫的量。并且,尿中的過氧化氫的量是通過FOX法(氧化鐵-二甲酚橙法,ferrous ion oxidation-xylenol orange assay)來測定的。
其結(jié)果,如圖1所示,由于飲用焙煎咖啡,人尿中的過氧化氫的量增加了。
實(shí)施例2(除去過氧化氫的咖啡對(duì)體內(nèi)過氧化氫量的影響)(a)焙煎咖啡將速溶咖啡(無咖啡因雀巢咖啡)10g溶解在26mL的蒸餾水中。
(b)除去過氧化氫的咖啡將速溶咖啡(無咖啡因雀巢咖啡)10g溶解在23mL的蒸餾水中,添加3mL的過氧化氫酶溶液(CENTRAL KAGAKU)。
(c)將上述(a)以及(b)中得到的咖啡強(qiáng)制經(jīng)口給藥(10mL/kg)給6周齡的SD系雄性大鼠(n=4)。給藥后第3小時(shí)采集尿,測定尿中的過氧化氫的量。并且,尿中的過氧化氫的量是通過FOX法(氧化鐵-二甲酚橙法,ferrous ion oxidation-xylenol orange assay)來測定的。
其結(jié)果,如圖2所示,由于攝取焙煎咖啡,尿中的過氧化氫的量增加了。但是,即使除去了焙煎咖啡的過氧化氫,其增加率基本也沒有發(fā)生變化。由此可知,由于攝取焙煎咖啡,在體內(nèi)生成了新的過氧化氫。
實(shí)施例3(在體內(nèi)生成過氧化氫的成分)(a)焙煎咖啡將速溶咖啡(無咖啡因雀巢咖啡)溶解在下述洗提液A中,制作了20mg/mL的咖啡溶液。
對(duì)該焙煎咖啡中的羥基氫醌的量進(jìn)行了定量分析,其結(jié)果為0.0013質(zhì)量%。在這里,對(duì)焙煎咖啡中的羥基氫醌的分析方法如下。將以下分析條件作為分析條件A。分析儀器使用HPLC(島津制作所(株))。裝置的結(jié)構(gòu)單元的型號(hào)如下。檢測器SPD-M10A、烘箱CTO-10AC、泵LC-10AD、自動(dòng)進(jìn)樣器SIL-10AD、柱Inertsil ODS-2內(nèi)徑4.6mm×長度250mm。
分析條件如下。樣品注入量10μL、流量1.0mL/min、紫外線吸光光度計(jì)檢測波長290nm、洗提液A0.05M醋酸3%乙腈溶液、洗提液B0.05M醋酸100%乙腈溶液濃度梯度條件時(shí)間 洗提液A洗提液B0分 100% 0%20分 80% 20%35分 80% 20%45分 0%100%60分 0%100%70分 100% 0%120分100% 0%羥基氫醌的保留時(shí)間5.5分鐘。由此,將羥基氫醌作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),從求得的面積來求出質(zhì)量%。
此外,咖啡組合物中的羥基氫醌還可以根據(jù)以下的分析法進(jìn)行測定。將以下的分析條件作為分析條件B。分析儀器使用HPLC(日立制作所(株))。裝置的結(jié)構(gòu)單元的型號(hào)如下。檢測器L-7455、烘箱L-7300、泵L-7100、自動(dòng)進(jìn)樣器L-7200、柱Inertsil ODS-2內(nèi)徑4.6mm×長度250mm。
分析條件如下。樣品注入量10μL、流量1.0mL/min、紫外線吸光光度計(jì)檢測波長258或288nm、洗提液A0.05M醋酸水溶液、洗提液B0.05M醋酸100%乙腈溶液濃度梯度條件時(shí)間 洗提液A洗提液B0分 100% 0%15分 100% 0%15.1分 0%100%25分 0%100%25.1分 100% 0%30分 100% 0%羥基氫醌的保留時(shí)間6.8分鐘。由此,將羥基氫醌作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),從求得的面積來求出質(zhì)量%。同樣的條件下測定的五倍子酸的保留時(shí)間為11.5分鐘。
(b)將速溶咖啡(無咖啡因雀巢咖啡)2.4g/kg(以羥基氫醌計(jì)為1.6mg/kg)、羥基氫醌1.6mg/kg強(qiáng)制經(jīng)口給藥給7周齡的SD系雄性大鼠(n=4)。在給藥前和給藥后的第3小時(shí)、第6小時(shí)采集尿,與實(shí)施例2同樣地測定尿中的過氧化氫的量。
其結(jié)果,如圖3所示,羥基氫醌和焙煎咖啡攝取組在攝取后的第3小時(shí)的尿中的過氧化氫的量顯著地增加了,并且,所增加的尿中的過氧化氫的量在羥基氫醌和焙煎咖啡攝取組中的程度是相同的。由此可知,咖啡中的在體內(nèi)生成過氧化氫的物質(zhì)為羥基氫醌。
實(shí)施例4將羥基氫醌(0.1、0.3、1和3mg/kg)強(qiáng)制經(jīng)口給藥給7周齡的SD系雄性大鼠(n=3)。在給藥前和給藥后的第3小時(shí)、第6小時(shí)采集尿,與實(shí)施例2同樣地測定尿中的過氧化氫的量。
其結(jié)果,如圖4所示,明確了以下事實(shí)由于攝取0.3mg/kg以上的羥基氫醌,體內(nèi)的過氧化氫的量增加了,且其程度依賴于羥基氫醌的用量。
實(shí)施例5如下所述地制造了本發(fā)明的咖啡飲料組合物。將速溶咖啡(無咖啡因雀巢咖啡)2.5g用于填充有500gODS填充劑(YMC GEL ODS-A細(xì)孔徑6nm、粒徑150μm)的柱中,用0.5%的醋酸水6L將含有羥基氫醌的組分溶出,用甲醇6L將不含有羥基氫醌的組分溶出。不含有羥基氫醌的組分A通過冷凍干燥法完全去除甲醇。從速溶咖啡2.5g得到的組分A為0.933g。對(duì)組分A按照實(shí)施例3所示的方法進(jìn)行了分析,結(jié)果未能檢測出在組分A中的羥基氫醌。通過將組分A0.75g溶解在140mL的水中,制作了本發(fā)明的咖啡飲料組合物。
并且,用高靈敏度過氧化氫計(jì)測定了本發(fā)明的咖啡飲料組合物中的過氧化氫的量,其結(jié)果,過氧化氫的量在檢測限以下,未檢測出過氧化氫。過氧化氫的分析法如下所述。用高靈敏度過氧化氫計(jì)SUPERORITECTOR MODEL5(CENTRAL KAGAKU(株))進(jìn)行了測定。用定量移液管精密地量取試料2mL,注入到該裝置本體的反應(yīng)槽中。密封反應(yīng)槽后,選擇測定范圍,按下測定開關(guān)開始測定。在確認(rèn)告知測定準(zhǔn)備完成的發(fā)信音之后,迅速用微量注射器注入ORITECTOR用過氧化氫酶20μL,讀取輸出值。
裝置的校正用0.1、1和5mg/L的過氧化氫標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行。調(diào)制過氧化氫標(biāo)準(zhǔn)液時(shí),將過氧化氫(30%水溶液,特級(jí),和光純藥工業(yè)(株))用離子交換水稀釋為1000mg/L的液體作為原液使用。用提取用溶液稀釋原液,調(diào)制成5mg/L的過氧化氫標(biāo)準(zhǔn)液。此外,用提取用溶液稀釋5mg/L的過氧化氫標(biāo)準(zhǔn)液,調(diào)制成1mg/L和0.1mg/L。
提取用溶液(含有0.5%溴酸鉀的0.2M磷酸緩沖液,pH7.0),是將磷酸二氫鉀(特級(jí))11.0g、磷酸氫二鈉12水合物(特級(jí))44.8g和溴酸鉀(特級(jí))5.0g用離子交換水溶解后,定容至1L而調(diào)制的。使用時(shí),預(yù)先在冰點(diǎn)以下通氮?dú)?小時(shí)以上。
實(shí)施例6本發(fā)明的可溶性咖啡是通過將在實(shí)施例5中得到的組分A粉碎而制作的。
實(shí)施例7本發(fā)明的咖啡飲料組合物還通過如下方法來制造。
活性炭處理的咖啡的制造將市售速溶咖啡(Nescafe Gold Blend Red Label)20g溶解在1400mL蒸餾水中之后(該咖啡稱作“咖啡P”),加入活性炭白鷺WH2c 28/42(Japan EnviroChemicals)30g,攪拌1小時(shí)后,用薄膜濾器(0.45μm)過濾,得到濾液(該咖啡稱作“咖啡Q”)。將所得濾液冷凍干燥后得到15.8g褐色粉末。將該褐色粉末溶解于蒸餾水中,通過與實(shí)施例1相同的HPLC分析,對(duì)綠原酸和HHQ進(jìn)行定量的結(jié)果,含有綠原酸4.12質(zhì)量%,HHQ在檢測限以下(根據(jù)分析條件B)。此外,根據(jù)ICP發(fā)光分光分析法測定鉀含量的結(jié)果,在原料速溶咖啡和活性炭處理咖啡的兩者中均為約4.2質(zhì)量%。用HPLC分析咖啡P、咖啡Q和五倍子酸得到圖5和圖6所示的圖。關(guān)于咖啡Q,在6.8分鐘的保留時(shí)間附近的峰消失,實(shí)質(zhì)上沒有峰。圖5中示出的a為咖啡P的圖,b為咖啡Q的圖,c為五倍子酸的圖。圖6中示出的b為咖啡P的圖,c為咖啡Q的圖,a為五倍子酸的圖。
此外,也通過以下方法進(jìn)行了本發(fā)明的咖啡飲料組合物中的羥基氫醌(HHQ)的量的測定。
羥基氫醌的測定咖啡飲料組合物的羥基氫醌的分析法如下。分析儀器使用HPLC-電化學(xué)檢測器(庫侖測定型)的庫侖陣列系統(tǒng)(5600A型,開發(fā)制造美國ESA公司,進(jìn)口·銷售MC Medical,Inc.)。裝置的結(jié)構(gòu)單元的名稱·型號(hào)如下。
分析池5010型;庫侖陣列管理器(CoulArray Organizer);庫侖陣列電子組件·軟件(CoulArray Electronics Module·Software)5600A型;溶劑送液組件582型;梯度混合器(Gradient Mixer);自動(dòng)進(jìn)樣器542型;脈沖阻尼器(pulse damper);脫氣裝置Degasys UltimateDU3003;柱溫箱505。柱CAPCELL PAK C18AQ內(nèi)徑4.6mm×長度250mm粒徑5μm(株)資生堂)。
分析條件如下。
樣品注入量10μL、流量1.0mL/min、電化學(xué)檢測器的外加電壓0mV、柱溫箱設(shè)定溫度40℃、洗提液0.1(W/V)%磷酸、0.1mM 1-羥基乙烷-1,1-二膦酸、5(V/V)%甲醇溶液、洗提液B0.1(W/V)%磷酸)、0.1mM 1-羥基乙烷-1,1-二膦酸、50(V/V)%甲醇溶液。
調(diào)制洗提液A和B 時(shí)使用高效液相色譜用蒸餾水(關(guān)東化學(xué)(株))、高效液相色譜用甲醇(關(guān)東化學(xué)(株))、磷酸(特級(jí),和光純藥工業(yè)(株))、1-羥基乙烷-1,1-二膦酸(60%水溶液,東京化成工業(yè)(株))。
濃度梯度條件時(shí)間 洗提液A洗提液B0.0分 100% 0%10.0分 100% 0%10.1分 0%100%20.0分 0%100%20.1分 100% 0%50.0分 100% 0%調(diào)制分析試料時(shí),首先準(zhǔn)確稱量試料2g后,用洗提液A混合為10mL,再通過薄膜濾器(HLC-DISK25溶劑體系,孔徑為0.45μm,高效液相色譜用,關(guān)東化學(xué)(株))進(jìn)行過濾。將所得濾液約2.5mL向固相萃取柱SCX(固相填充量500mg,存儲(chǔ)容量3mL,Gl Sciences(株))通液,將除去約0.5mL的初通過液的通過液立即用于分析。
根據(jù)上述條件進(jìn)行分析時(shí),羥基氫醌的保留時(shí)間為6.38分。以羥基氫醌(和光純藥工業(yè)(株))作為標(biāo)準(zhǔn)物,從所得峰的面積值求得質(zhì)量%。
而且,用高靈敏度過氧化氫計(jì)測定本發(fā)明的發(fā)明的咖啡飲料組合物中的過氧化氫的量的結(jié)果,過氧化氫的量在檢測限以下,沒有檢測出過氧化氫。此外,通過前述測定法測定的結(jié)果,以每100g咖啡飲料的量表示,咖啡P的灰分量為186mg/100g,咖啡Q的灰分量為176mg/100g。
實(shí)施例8焙煎咖啡和實(shí)施例7中制造的活性炭處理咖啡(本發(fā)明的咖啡飲料組合物)對(duì)大鼠體內(nèi)過氧化氫的量的影響(a)焙煎咖啡的調(diào)制將速溶咖啡(無咖啡因雀巢咖啡)8g溶解在12mL的蒸餾水中。
(b)活性炭處理咖啡的調(diào)制將在實(shí)施例7中制造的活性炭處理的咖啡8g溶解在12mL的蒸餾水中。(c)將在上述(a)和(b)中所得的咖啡強(qiáng)制經(jīng)口給藥(10mL/kg)給7周齡的SD系雄性大鼠(n=8)。在給藥前和給藥后第3小時(shí)、第6小時(shí)采集尿,與實(shí)施例2同樣地測定尿中的過氧化氫的量。
其結(jié)果,如圖7所示,可知在攝取后第3小時(shí)的尿中的過氧化氫的量,焙煎咖啡的攝取組相比于蒸餾水?dāng)z取組顯著增加,而活性碳處理咖啡的攝取組與蒸餾水?dāng)z取組相等。
實(shí)施例9焙煎咖啡和活性炭處理咖啡(本發(fā)明的咖啡飲料組合物)對(duì)人體內(nèi)過氧化氫量的影響(a)焙煎咖啡的調(diào)制將速溶咖啡(無咖啡因雀巢咖啡)4.5g溶解在280mL的礦泉水中。
(b)活性炭處理咖啡的調(diào)制將在實(shí)施例7中制造的活性炭處理的咖啡4.5g溶解在280mL的礦泉水中。
(c)使7名健康男性飲用在上述(a)和(b)中所得到的咖啡280mL,之后,在第1~5小時(shí)之后測定尿中的過氧化氫的量。另外,進(jìn)行交叉實(shí)驗(yàn)。與實(shí)施例2同樣地測定尿中的過氧化氫的量。
其結(jié)果,如圖8所示,可知人尿中的過氧化氫的量,雖然飲用焙煎咖啡時(shí)會(huì)增加,但是,引用本發(fā)明咖啡組合物的活性炭處理咖啡時(shí)不增加。
實(shí)施例11將中等程度煎熬的(L=22)·粉碎(中等程度磨碎)的無咖啡因的哥倫比亞咖啡豆400g投入萃取機(jī)中后,加入95℃的熱水得到3200g萃取液。相對(duì)于該萃取液的固形物的量,添加50%(w/w)的活性炭WH2C(Japan EnviroChemicals公司制),攪拌30分鐘后,進(jìn)行離心過濾,除去活性炭,得到脫HHQ的咖啡萃取液。在該脫HHQ的咖啡萃取液中加入離子交換水和碳酸氫鈉使其成為pH6.3,得到調(diào)合液。往金屬罐中填充該混合液190g并進(jìn)行密封后,在118.1℃進(jìn)行蒸餾殺菌10分鐘,得到罐裝咖啡。殺菌后的pH為5.8。
實(shí)施例12將在實(shí)施例7中所得的冷凍干燥品直接作為粉末咖啡。
權(quán)利要求
1.一種咖啡飲料組合物,其特征在于,羥基氫醌的含量為0~0.00005質(zhì)量%。
2.一種咖啡飲料組合物,其特征在于,在高效液相色譜分析中,當(dāng)以五倍子酸作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí),在相對(duì)于五倍子酸的相對(duì)保留時(shí)間為0.54~0.61的時(shí)間區(qū)域內(nèi),實(shí)質(zhì)上沒有峰。
3.一種可溶性咖啡組合物,其特征在于,羥基氫醌含量為0~0.001質(zhì)量%。
4.一種容器裝飲料,其特征在于,在容器中填充有羥基氫醌含量為0~0.00005質(zhì)量%的咖啡飲料組合物。
5.一種容器裝飲料,其特征在于,在容器中填充有咖啡飲料組合物,該咖啡飲料組合物的特征在于,在高效液相色譜分析中,當(dāng)以五倍子酸作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí),在相對(duì)于五倍子酸的相對(duì)保留時(shí)間為0.54~0.61的時(shí)間區(qū)域內(nèi),實(shí)質(zhì)上沒有峰。
6.一種權(quán)利要求1或2所述的咖啡飲料組合物的制造方法,其特征在于,用活性碳處理焙煎咖啡豆提取物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制造方法,其特征在于,所述活性碳是通過氯化鋅法或水蒸氣活化法而被活化的活性碳。
8.一種權(quán)利要求3所述的可溶性咖啡組合物的制造方法,其特征在于,通過用活性碳處理焙煎咖啡豆提取物而得到咖啡飲料組合物,隨后,對(duì)該咖啡飲料組合物進(jìn)行噴霧干燥或冷凍干燥。
全文摘要
本發(fā)明提供一種即使長期飲用也不會(huì)在體內(nèi)生成過氧化氫的咖啡飲料。即,羥基氫醌的含量為0~0.00005質(zhì)量%的咖啡飲料組合物。
文檔編號(hào)A23F5/16GK1913784SQ20058000338
公開日2007年2月14日 申請(qǐng)日期2005年1月27日 優(yōu)先權(quán)日2004年1月30日
發(fā)明者藤井明彥, 山崎良惠, 大南英雄, 落合龍史, 渋谷祐輔 申請(qǐng)人:花王株式會(huì)社