一種簡化的甘蔗試管苗生根及育苗方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種植物試管苗的異養(yǎng)+光合自養(yǎng)生根方法,具體涉及一種簡化的甘 蔗試管苗生根及育苗方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 植物組織培養(yǎng)一般要經(jīng)過四個(gè)階段,即初代培養(yǎng)(或建立無菌培養(yǎng)體系)、繼代增 殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)和煉苗移栽。目前,已在生產(chǎn)上大規(guī)模應(yīng)用的甘蔗試管苗快速繁育技術(shù)也 包括了以上四個(gè)階段。然而這種傳統(tǒng)的甘蔗試管苗生產(chǎn)過程復(fù)雜,且對培養(yǎng)環(huán)境條件高,致 使甘蔗組織培養(yǎng)工廠化生產(chǎn)試管苗的成本居高不下,已經(jīng)不能為市場所接受,限制了甘蔗 健康種苗的種植和推廣。因而,簡化甘蔗試管苗生產(chǎn)程序,降低生產(chǎn)成本,是解決制約甘蔗 健康種苗大規(guī)模生產(chǎn)推廣這一難題的最有效途徑。
[0003] 研宄表明,在植物組織培養(yǎng)過程中,試管苗的生根成本占整個(gè)試管苗生產(chǎn)成本的 35%~75%,因此簡化試管苗生根技術(shù)可使植物試管苗生產(chǎn)成本大幅度下降。試管苗瓶外 生根技術(shù)是近年研宄成功的一項(xiàng)先進(jìn)的組培生根技術(shù),是植物試管苗簡化生產(chǎn)技術(shù)的重要 組成部分。試管苗瓶外生根技術(shù)是將無根試管苗直接栽培于溫室苗圃中進(jìn)行生根,將傳統(tǒng) 的生根和馴化兩個(gè)階段結(jié)合起來,省去了無根試管苗的試管內(nèi)生根的傳統(tǒng)程序,用自養(yǎng)生 根代替?zhèn)鹘y(tǒng)的異養(yǎng)生根,縮短育苗周期,節(jié)約生產(chǎn)成本。同時(shí),植物組織培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展非 常迅速,國內(nèi)外對滿天星、羅漢果、牡丹、甘蔗、草莓等一大批植物試管苗瓶外生根技術(shù)進(jìn)行 了研宄,并獲得了成功。
[0004] 一般的甘蔗試管苗生根需要15天以上,且試管苗素質(zhì)差,生產(chǎn)成本高,嚴(yán)重制約 了生產(chǎn)效率和降低了生產(chǎn)效益。研宄一種科學(xué)合理的甘蔗試管苗生根及育苗方法,縮短試 管苗生根時(shí)間和育苗周期,對提高甘蔗試管苗的生產(chǎn)能力和應(yīng)用范圍,具有十分重要的意 義。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 本發(fā)明的目的是克服傳統(tǒng)甘蔗試管苗生根培養(yǎng)基及育苗方法的不足,提供一種簡 化的甘蔗試管苗生根及育苗方法。
[0006] 本發(fā)明是通過如下方式實(shí)現(xiàn)的:
[0007] -種簡化的甘蔗試管苗生根及育苗方法,其特征在于,包括以下步驟:
[0008] (1)配制生根培養(yǎng)基:按照如下配方配制生根培養(yǎng)基:1/2MS大量元素+MS微量元 素+MS鐵鹽+MS有機(jī)物+萘乙酸5~20mg/L+蔗糖50g/L。MS培養(yǎng)基各成分及含量如表1 所示。
[0009] 表1 MS培養(yǎng)基成分及含量 [0010]
[0011] (2)生根培養(yǎng)基滅菌:將生根培養(yǎng)基在121 °C下高溫高壓滅菌5~lOmin。本發(fā)明 的生根培養(yǎng)時(shí)間由原來的14-15天縮短為1-4天,因此將傳統(tǒng)滅菌時(shí)間15min適當(dāng)縮短不 會引起培養(yǎng)基污染,也不會影響試管苗的生長。
[0012] (3)無菌轉(zhuǎn)管:在無菌室或超凈工作臺中將完成增殖培養(yǎng)周期的甘蔗試管苗轉(zhuǎn)移 到冷卻的生根培養(yǎng)基中。本發(fā)明的生根培養(yǎng)時(shí)間由原來的14-15天縮短為1-4天,甘蔗試 管苗不易受污染,無菌操作標(biāo)準(zhǔn)可適當(dāng)降低,如減少擦洗超凈工作臺次數(shù)。
[0013] (4)生根培養(yǎng):將生根培養(yǎng)基中的甘蔗試管苗移入培養(yǎng)室,控制培養(yǎng)室環(huán)境為溫 度25~30°C,濕度65~80%,光照強(qiáng)度1000~20001ux,培育24-96小時(shí)。甘蔗試管苗不 定根發(fā)生理論上要經(jīng)過4個(gè)階段,即脫分化階段(生根處理后0-24小時(shí))、誘導(dǎo)階段(24-96 小時(shí))和分化階段(96小時(shí)后),在分化階段根原基伸長,并突破表皮,形成可見根。傳統(tǒng)的 甘蔗試管苗生根培養(yǎng)周期要14-15天,即不定根完成上述三個(gè)生長發(fā)育階段,且80%的試 管苗都出現(xiàn)可見根時(shí),即完成生根培養(yǎng)后方可移栽苗圃。本發(fā)明利用了甘蔗試管苗不定根 發(fā)生發(fā)育在脫分化階段后其生根進(jìn)程不可逆轉(zhuǎn)的原理,將生根培養(yǎng)1-4天的無根試管苗直 接移栽于苗圃中進(jìn)行自養(yǎng)生根。
[0014] (5)分割試管苗:生根培養(yǎng)完成后,從瓶中取出試管苗,高度大于Icm的試管苗單 株分割,高度小于Icm的試管苗按2~3株連體分割,用清水洗凈培養(yǎng)基,清除老葉。
[0015] (6)消毒:分割清潔后的試管苗用0. 2~0. 3%的高錳酸鉀溶液浸泡消毒3~6分 鐘。
[0016] (7)種植:將消毒后的試管苗分成單株或小叢種植于放有栽培基質(zhì)的種植盆中, 澆足定根水。
[0017] (8)培育管理:將帶有試管苗的種植盆移入自動調(diào)節(jié)溫度濕度的育苗溫室,蓋 上遮陽網(wǎng),調(diào)節(jié)育苗溫室環(huán)境:種植后的10天內(nèi),溫室濕度控制在80%以上,光照強(qiáng)度 2000~lOOOOlux ;種植10天后,溫室濕度控制在70 %以上,光照強(qiáng)度2000~lOOOOlux ; 當(dāng)90%的甘蔗試管苗長出新葉后,即揭開遮陽網(wǎng),溫室濕度控制為70%,每隔30分鐘淋水 30秒,直到試管苗出圃;試管苗長出新葉后,開始施液體肥和除草,苗圃管理與常規(guī)甘蔗試 管苗育苗方法相同。
[0018] 優(yōu)選的,所述增殖培養(yǎng)其培養(yǎng)基為MS+6-芐氨基腺嘌呤lmg/L+萘乙酸0. 01mg/L+ 鹿糖20g/L。
[0019] 優(yōu)選的,所述栽培基質(zhì)為體積比1:1的育苗蛭石與有機(jī)營養(yǎng)土混合物,或風(fēng)化的 田園土,或體積比1:1的黃泥與河沙混合物。
[0020] 優(yōu)選的,所述有機(jī)營養(yǎng)土的成分包括:有機(jī)質(zhì)多30%,腐植酸多5%, Ν+Ρ205+Κ20 多 3%〇
[0021] 本發(fā)明的有益效果是:
[0022] 1.本發(fā)明的甘蔗試管苗生根時(shí)間從傳統(tǒng)的15天縮短至1-4天,試管苗存活率最高 達(dá)90%以上,試管苗素質(zhì)好,青綠,無黃葉,存活率達(dá)到有根試管苗圃移栽存活率水平,顯著 提高了甘蔗試管苗的生產(chǎn)效率和經(jīng)濟(jì)效益。
[0023] 2.本發(fā)明的生根培養(yǎng)基高溫高壓滅菌時(shí)間從15分鐘縮短為5至10分鐘,節(jié)省了 高壓時(shí)間、人力、電力。
[0024] 3.本發(fā)明的無菌轉(zhuǎn)管操作簡便,利于節(jié)約人力、物力,降低了生產(chǎn)成本。
[0025] 4.本發(fā)明用無根試管苗代替?zhèn)鹘y(tǒng)的有根試管苗進(jìn)行移植,以異養(yǎng)+自養(yǎng)生根方法 代替?zhèn)鹘y(tǒng)的異養(yǎng)生根,節(jié)省培養(yǎng)室占用空間、提高培養(yǎng)室利用周轉(zhuǎn)率、提高產(chǎn)量、節(jié)省勞動 力和能源投入,顯著地提高了生產(chǎn)效率。
[0026] 5.本發(fā)明的試管苗生根栽培基質(zhì)為價(jià)格較為低廉且營養(yǎng)較豐富的育苗蛭石與有 機(jī)營養(yǎng)土混合物,或風(fēng)化的田園土,或黃泥與河沙混合物,代替昂貴的MS生根培養(yǎng)基,利于 降低成本。
[0027] 6.本發(fā)明將試管苗生根與苗圃馴化進(jìn)行有機(jī)結(jié)合,生產(chǎn)周期比傳統(tǒng)方法縮短 12-15 天。
[0028] 7.本發(fā)明操作簡單、成本低廉、經(jīng)濟(jì)效益好,具有良好的市場前景。
【具體實(shí)施方式】
[0029] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述,但不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍和應(yīng)用 范圍。
[0030] 實(shí)施例1
[0031] 一種簡化的甘蔗試管苗生根及育苗方法,其特征在于,包括以下步驟:
[0032] (1)配制生根培養(yǎng)基:按照如下配方配制生根培養(yǎng)基:1/2MS大量元素+MS微量元 素+MS鐵鹽+MS有機(jī)物+萘乙酸5~20mg/L+蔗糖50g/L ;
[0033] (2)生根培養(yǎng)基滅菌:將生根培養(yǎng)基在121 °C下高溫高壓滅菌5min ;
[0034] (3)無菌轉(zhuǎn)管:在無菌室或超凈工作臺中將完成增殖培養(yǎng)周期的甘蔗試管苗轉(zhuǎn)移 到冷卻的生根培養(yǎng)基中;
[0035] (4)生根培養(yǎng):將生根培養(yǎng)基中的甘蔗試管苗移入培養(yǎng)室,控制培養(yǎng)室環(huán)境為溫 度25°C,濕度80%,光照強(qiáng)度12001UX,培育24小時(shí);
[0036] (5)分割試管苗:生根培養(yǎng)完成后,從瓶中取出試管苗,高度大于Icm的試管苗單 株分割,高度小于Icm的試管苗按2株連體分割,用清水洗凈培養(yǎng)基,清除老葉;
[0037] (6)消毒:分割清潔后的試管苗用0. 3%的高錳酸鉀溶液浸泡消毒3分鐘;
[0038] (7)種植:將消毒后的試管苗分成單株或小叢種植于放有栽培基質(zhì)的種植盆中, 澆足定根水;
[0039] (8)培育管理:將帶有試管苗的種植盆移入自動調(diào)節(jié)溫度濕度的育苗溫室,蓋 上遮陽網(wǎng),調(diào)節(jié)育苗溫室環(huán)境:種植后的10天內(nèi),溫室濕度控制在80 %以上,光照強(qiáng)度 400011?;種植10天后,溫室濕度控制在70%以上,光照強(qiáng)度600011?;當(dāng)90%的甘蔗試管 苗長出新葉后,即揭開遮陽網(wǎng),溫室濕度控制為70%,每隔30分鐘淋水30秒,直到試管苗出 圃;試管苗長出新葉后,開始施液體肥和除草,苗圃管理與常規(guī)甘蔗試管苗育苗方法相同。
[0040] 其中,所述增殖培養(yǎng)其培養(yǎng)基為MS+6-芐氨基腺嘌呤lmg/L+萘乙酸0. 01mg/L+蔗 糖20g/L ;所述栽培基質(zhì)為體積比1:1的育苗蛭石與有機(jī)營養(yǎng)土混合物,所述有機(jī)營養(yǎng)土的 成分包括:有機(jī)質(zhì)彡30%,腐植酸彡5%,Ν+Ρ 205+Κ20彡3%。
[0041] 種植第20天對試管苗進(jìn)行統(tǒng)計(jì),種植50株/叢,存活46株/叢,存活率為92%。
[0042] 實(shí)施例2
[0043] 一種簡化的甘蔗試管苗生根及育苗方法,其特征在于,包括以下步驟:
[0044] (1)配制生根培養(yǎng)基:按照如下配方配制生根培養(yǎng)基:1/2MS大量元素+MS微量元 素+MS鐵鹽+MS有機(jī)物+萘乙酸5~20mg/L+蔗糖50g/L ;
[0045] (2)生根培養(yǎng)基滅菌:將生根培養(yǎng)基在121 °C下高溫高壓滅菌IOmin ;
[0046] (3)無菌轉(zhuǎn)管:在無菌室或超凈工作臺中將完成增殖培養(yǎng)周期的甘蔗試管苗轉(zhuǎn)移 到冷卻的生根培養(yǎng)基中;
[0047] (4)生根培養(yǎng):將生根培養(yǎng)基中的甘蔗試管苗移入培養(yǎng)室,控制培養(yǎng)室環(huán)境為溫 度28°C,濕度70%,光照強(qiáng)度lOOOlux,培育48小時(shí);<