本發(fā)明涉及一種應(yīng)用于運輸試管苗時覆蓋培養(yǎng)基的方法。

背景技術(shù)：

利用植物組織培養(yǎng)的方法可對植物進(jìn)行快速繁殖，這種快速繁殖技術(shù)已廣泛用于多種(類)植物的大批量生產(chǎn)。試管苗在運輸過程中其培養(yǎng)基易損壞，污染損毀試管苗。原因是起到固定作用的一般培養(yǎng)基瓊脂的濃度在10g/L～25g/L之間，在這個范圍內(nèi)可以滿足凝固要求，對微生物生長沒有太大影響，但其瓊脂濃度高，培養(yǎng)基會比較硬，不易接苗。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明是要解決現(xiàn)有的試管苗在運輸過程中其培養(yǎng)基易損壞，污染損毀試管苗的技術(shù)問題，而提供一種應(yīng)用于運輸試管苗時覆蓋培養(yǎng)基的方法。

本發(fā)明的一種應(yīng)用于運輸試管苗時覆蓋培養(yǎng)基的方法是按以下步驟進(jìn)行的：

將MS培養(yǎng)基、蔗糖和焦磷酸鹽放入蒸餾水中混合，加熱至完全溶解，用10mol/L的NaOH溶液調(diào)節(jié)至pH值為6.0～8.0，得到混合液；將瓊脂放入混合液中，然后放入滅菌鍋內(nèi)在溫度為121℃的條件下滅菌20min，取出后置于室溫自然降溫至45℃，得到液態(tài)的凝固劑，然后在超凈工作臺上將液態(tài)的凝固劑用玻璃漏斗注入溫度為8℃且裝有試管苗和固體培養(yǎng)基的三角瓶中至液態(tài)的凝固劑覆蓋在固體培養(yǎng)基的上方且厚度為1cm為止，注入液態(tài)的凝固劑時要貼著三角瓶的內(nèi)壁注入避免接觸到試管苗的莖和葉，在室溫下凝固后即可運輸試管苗；所述的三角瓶的容量為150mL；

所述的混合液中MS培養(yǎng)基的濃度為4.74g/L，蔗糖的濃度為30g/L，焦磷酸鹽的濃度為3g/L；所述的瓊脂的質(zhì)量與混合液的體積比為(20g～25g):1L。

本發(fā)明的凝固劑需放置在三角瓶中配合試管苗的培養(yǎng)基使用，當(dāng)凝固劑凝固后，在運輸?shù)倪^程中倒置放置三角瓶時，由于三角瓶的開口處尺寸越來越小，所以凝固劑會卡在瓶中使得試管苗會保持在原處。

本發(fā)明的凝固劑具有無毒、低殘留、無污染、無抗藥性、高選擇性、材料來源廣泛、與試管苗的原培養(yǎng)基無不利反應(yīng)；

本發(fā)明的方法工藝簡單，成本低，與其它凝固劑相比，增加了瓊脂的濃度和pH值并沒有改變培養(yǎng)基的成分，不會造成原培養(yǎng)基失水和營養(yǎng)成分的流失。

具體實施方式

具體實施方式一：本實施方式為一種應(yīng)用于運輸試管苗時覆蓋培養(yǎng)基的方法，具體是按以下步驟進(jìn)行的：

將MS培養(yǎng)基、蔗糖和焦磷酸鹽放入蒸餾水中混合，加熱至完全溶解，用10mol/L的NaOH溶液調(diào)節(jié)至pH值為6.0～8.0，得到混合液；將瓊脂放入混合液中，然后放入滅菌鍋內(nèi)在溫度為121℃的條件下滅菌20min，取出后置于室溫自然降溫至45℃，得到液態(tài)的凝固劑，然后在超凈工作臺上將液態(tài)的凝固劑用玻璃漏斗注入溫度為8℃且裝有試管苗和固體培養(yǎng)基的三角瓶中至液態(tài)的凝固劑覆蓋在固體培養(yǎng)基的上方且厚度為1cm為止，注入液態(tài)的凝固劑時要貼著三角瓶的內(nèi)壁注入避免接觸到試管苗的莖和葉，在室溫下凝固后即可運輸試管苗；所述的三角瓶的容量為150mL；

所述的混合液中MS培養(yǎng)基的濃度為4.74g/L，蔗糖的濃度為30g/L，焦磷酸鹽的濃度為3g/L；所述的瓊脂的質(zhì)量與混合液的體積比為(20g～25g):1L。

具體實施方式二：本實施方式與具體實施方式一不同的是：所述的焦磷酸鹽為焦磷酸鈉或酸式焦磷酸鈉。其他與具體實施方一相同。

具體實施方式三：本實施方式與具體實施方式一不同的是：所述的溫度為8℃且裝有試管苗的三角瓶放置在冰箱中。其它與具體實施方式一相同。

具體實施方式四：本實施方式與具體實施方式一不同的是：所述的瓊脂的質(zhì)量與混合液的體積比為20g:1L。其它與具體實施方式一相同。

具體實施方式五：本實施方式與具體實施方式一不同的是：所述的瓊脂的質(zhì)量與混合液的體積比為25g:1L。其它與具體實施方式一相同。

具體實施方式一中的MS培養(yǎng)基的配方如下：

通過以下試驗驗證發(fā)明效果：

試驗一：本試驗為一種應(yīng)用于運輸試管苗時覆蓋培養(yǎng)基的方法，具體是按以下步驟進(jìn)行的：

將MS培養(yǎng)基、蔗糖和焦磷酸鹽放入蒸餾水中混合，加熱至完全溶解，用10mol/L的NaOH溶液調(diào)節(jié)至pH值為7.0，得到混合液；將瓊脂放入混合液中，然后放入滅菌鍋內(nèi)在溫度為121℃的條件下滅菌20min，取出后置于室溫自然降溫至45℃，得到液態(tài)的凝固劑，然后在超凈工作臺上將液態(tài)的凝固劑用玻璃漏斗注入溫度為8℃且裝有試管苗和固體培養(yǎng)基的三角瓶中至液態(tài)的凝固劑覆蓋在固體培養(yǎng)基的上方且厚度為1cm為止，注入液態(tài)的凝固劑時要貼著三角瓶的內(nèi)壁注入避免接觸到試管苗的莖和葉，在室溫下凝固后即可運輸試管苗；所述的三角瓶的容量為150mL；

所述的混合液中MS培養(yǎng)基的濃度為4.74g/L，蔗糖的濃度為30g/L，焦磷酸鹽的濃度為3g/L；

所述的焦磷酸鹽為焦磷酸鈉或酸式焦磷酸鈉；

所述的溫度為8℃且裝有試管苗的三角瓶放置在冰箱中；

所述的瓊脂的質(zhì)量與混合液的體積比為20g:1L。

本試驗的凝固劑需放置在三角瓶中配合試管苗的培養(yǎng)基使用，當(dāng)凝固劑凝固后，在運輸?shù)倪^程中倒置放置三角瓶時，由于三角瓶的開口處尺寸越來越小，所以凝固劑會卡在瓶中使得試管苗會保持在原處。