一種中華鵝膏菌培養(yǎng)基及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】一種中華鵝膏菌培養(yǎng)基及其制備方法與應(yīng)用，涉及食用菌。所述培養(yǎng)基為馬鈴薯100g/L、玉米粒20～30g/L、葡萄糖20g/L、瓊脂15～20g/L、馬尾松松針汁液150～300mL/L。將新鮮馬尾松松針加水，加熱煮沸后繼續(xù)煮沸，冷卻，過(guò)濾棄馬尾松松針，得馬尾松松針汁液；將玉米粒加水，加熱煮沸后繼續(xù)煮沸，即加入去皮馬鈴薯小塊，繼續(xù)煮沸，過(guò)濾得玉米馬鈴薯汁液；將馬尾松松針汁液與玉米馬鈴薯汁液混合加熱，加入瓊脂繼續(xù)加熱，待瓊脂溶解后加入葡萄糖，溶解后冷卻并補(bǔ)足水分，分裝試管，滅菌后取出試管擺斜面或者搖勻，冷卻后即得中華鵝膏菌培養(yǎng)基，可用于誘導(dǎo)中華鵝膏菌母種。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種中華鵝膏菌培養(yǎng)基及其制備方法與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及食用菌，尤其是涉及一種中華鵝膏菌培養(yǎng)基及其制備方法與應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]中華鵝膏菌也稱(chēng)中華鵝膏(Amanita sinensis Zhu L.Yang),隸屬于擔(dān)子菌門(mén)(Basidiomycota),傘菌目(Agaricales),鵝膏科(Amanitaceae),鵝膏菌屬(Amanita)。鵝膏菌屬包含大約600個(gè)傘菌物種，包含一些世界有名的最毒菇類(lèi)，也有很多可食用菇類(lèi)。中華鵝膏菌是中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所楊祝良研究員于1997年首次在我國(guó)西南地方發(fā)現(xiàn)并命名的，為擔(dān)子菌門(mén)傘菌目鵝膏科鵝膏屬的大型真菌，它與殼斗科和松屬植物形成外生菌根(Ectomycorrhizal,ECM)。分布于四川，湖南,廣東,廣西,貴州，云南,福建省分布于中部、西部和北部山區(qū)。該菌菌蓋直徑7~12cm，最大可達(dá)25cm，灰白色至淺灰色，中部深灰色，有菌幕；菌肉較厚，白色菌褶離生至近離生，白色，較密，不等長(zhǎng)；菌柄10~15cmXl~ 2.5cm，污白色至淺灰色；菌環(huán)頂生至近頂生；孢子無(wú)色，寬橢圓至橢圓形。
[0003]中華鵝膏菌可食用，味道鮮美，營(yíng)養(yǎng)豐富，產(chǎn)量高，是山區(qū)百姓十分喜愛(ài)的食用菌類(lèi)，戴玉成等人在2010年第I期《菌物學(xué)報(bào)》發(fā)表的《中國(guó)食用菌名錄》中，也明確將中華鵝膏菌列為食用菌。在福建省尤溪縣的百姓食用歷史就十分悠久，當(dāng)?shù)厝朔Q(chēng)為灰烏菌。每年
6、7月和9、10月是子實(shí)體采收季節(jié)，市場(chǎng)上每公斤鮮品的銷(xiāo)售價(jià)格在40元以上，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于香菇等常規(guī)食用菌的價(jià)格，由于它的產(chǎn)量很高，單個(gè)鮮品的重量可以達(dá)到250g以上，又是天然健康森林食品，具有極高開(kāi)發(fā)利用價(jià)值。
[0004]以前的研究結(jié)果表明，中華鵝膏菌作為食用菌已為人們長(zhǎng)期食用，但目前該菌僅從野外采集，無(wú)法人工栽培。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種中華鵝膏菌培養(yǎng)基及其制備方法與應(yīng)用。
[0006]所述中華鵝膏菌培養(yǎng)基的組成為:馬鈴薯100g/L、玉米粒20~30g/L、葡萄糖20g/L、瓊脂15~20g/L、馬尾松松針汁液150~300mL/L，自然pH值。
[0007]所述中華鵝膏菌培養(yǎng)基的制備方法如下:
[0008]I)將新鮮馬尾松松針25~75g加水250~500mL，加熱煮沸后繼續(xù)煮沸30min，冷卻，過(guò)濾棄馬尾松松針，得馬尾松松針汁液；
[0009]2)將玉米粒20~30g加水1000mL,加熱煮沸后繼續(xù)煮沸30min，即加入去皮馬鈴薯小塊100g,繼續(xù)煮沸30min,過(guò)濾,得玉米馬鈴薯汁液；
[0010]3)將馬尾松松針汁液與玉米馬鈴薯汁液混合，加熱，再加入瓊脂15~20g，繼續(xù)加熱，待瓊脂溶解后，加入葡萄糖20g，溶解后冷卻并補(bǔ)足水分至1L，均勻混合，分裝試管，加塞，包扎，滅菌后取出試管擺斜面或者搖勻，冷卻后即得中華鵝膏菌培養(yǎng)基。
[0011]在步驟I)中，所述加熱煮沸的時(shí)間可為20~40min ;所述過(guò)濾可采用8層紗布過(guò)濾。[0012]在步驟2)中，所述加熱煮沸的時(shí)間可為20~40min ;所述過(guò)濾可采用8層紗布過(guò)濾。
[0013]在步驟3)中，所述滅菌的條件可為121°C下滅菌20min。
[0014]所述中華鵝膏菌培養(yǎng)基可用于誘導(dǎo)中華鵝膏菌母種。
[0015]所述中華鵝膏菌母種的誘導(dǎo)方法如下:
[0016]切取野生采摘的子實(shí)體小組織塊，再嵌入試管斜面中華鵝膏菌培養(yǎng)基表面，在溫度為20~26°C下暗培養(yǎng)7~15天，組織培養(yǎng)塊上長(zhǎng)出白色絨毛狀菌絲，即為中華鵝膏菌母種。
[0017]所述切取野生采摘的子實(shí)體小組織塊的方法可為:野外采摘生長(zhǎng)健壯、無(wú)蟲(chóng)害、未完全開(kāi)傘、菌柄較粗壯、菌蓋較肥厚的成熟子實(shí)體；將子實(shí)體帶回實(shí)驗(yàn)室，于超凈臺(tái)上用酒精棉球，輕擦菌蓋表面及菌柄部分，用解剖刀去除菌蓋中部表皮，從菌蓋中部取十字，將子實(shí)體一分為四，取菌柄與菌蓋交接處的內(nèi)部無(wú)菌組織塊，切成0.25~0.5cm2的小塊。
[0018]所述中華鵝膏菌母種提純與轉(zhuǎn)管培養(yǎng)的方法如下:
[0019]I)中華鵝膏菌母種提純的方法:在菌絲萌發(fā)后，挑選色澤純、健壯、長(zhǎng)勢(shì)正常和無(wú)間斷的菌線(xiàn)，在無(wú)菌室超凈工作臺(tái)上連同中華鵝膏菌培養(yǎng)基鉤取菌絲，接入另備的中華鵝膏菌培養(yǎng)基上，在20~26°C的恒溫條件下，培養(yǎng)7~15天，待菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)試管后，再?gòu)闹袚駜?yōu)取用，即為“母代” 母種；
[0020]2)中華鵝膏菌母種轉(zhuǎn)管培養(yǎng)的方法:將一支長(zhǎng)滿(mǎn)菌絲的試管在無(wú)菌操作下，分別轉(zhuǎn)接到多只試管中培養(yǎng)，一般每支母種可擴(kuò)接20~50支，也可以再次轉(zhuǎn)管擴(kuò)接，但轉(zhuǎn)管次數(shù)不得超過(guò)4次，這些轉(zhuǎn)管擴(kuò)接后，即為供生產(chǎn)上使用的子代母種。
[0021]本發(fā)明的創(chuàng)新點(diǎn)在于利用馬尾松松針的水煮液配備中華鵝膏菌培養(yǎng)基，中華鵝膏菌是與馬尾松形成共生的外生菌根真菌，大量的組織培養(yǎng)試驗(yàn)都表明鵝膏菌真菌難以純培養(yǎng)，本發(fā)明在常用的PDA培養(yǎng)基基礎(chǔ)上增加馬尾松松針?biāo)笠海芎玫亟鉀Q了中華鵝膏菌的組織培養(yǎng)難題。
[0022]本發(fā)明以野生采摘的子實(shí)體上組織塊為材料，在試管培養(yǎng)基上直接誘導(dǎo)分化菌絲體。
[0023]類(lèi)似的研究結(jié)果有武覲文于1975年在《微生物學(xué)報(bào)》第I期發(fā)表的《氧化松針煮汁培養(yǎng)基一一種選擇性真菌培養(yǎng)基》，該文指出氧化松針煮汁培養(yǎng)基可用于土壤真菌、植物病原真菌、昆蟲(chóng)寄生真菌的分離、計(jì)數(shù)和培養(yǎng)，常見(jiàn)的真菌有毛霉、根霉、酵母、青霉、曲霉、交鏈抱霉、牙枝霉、鍵刀霉、木霉、輪枝霉、匍甸霉、3；點(diǎn)霉以及束梗霉等。本發(fā)明與武觀文研究的不同之處在于:一是本發(fā)明解決中華鵝膏菌的菌絲體培養(yǎng)問(wèn)題，而氧化松針煮汁培養(yǎng)基無(wú)法解決這一問(wèn)題；二是氧化松針煮汁培養(yǎng)基與本發(fā)明的中華鵝膏菌培養(yǎng)基組成成分不同；三是本發(fā)明的馬尾松松針?biāo)笠簾o(wú)需氧化，過(guò)程更簡(jiǎn)潔。
[0024]本發(fā)明在菌絲誘導(dǎo)培養(yǎng)過(guò)程中，經(jīng)多次的試驗(yàn)，篩選出最優(yōu)的組織培養(yǎng)基和組織培養(yǎng)條件，解決了中華鵝膏菌的母種培養(yǎng)技術(shù)難題，這為今后中華鵝膏菌的人工培養(yǎng)奠定了重要基礎(chǔ)。
[0025]本發(fā)明的有益效果是:
[0026]I)高效性:本發(fā)明可獲得中華鵝膏菌的大量可繁殖菌絲體，能滿(mǎn)足大量生產(chǎn)的需要，而現(xiàn)有其它技術(shù)均無(wú)法獲得可繁殖菌絲體；[0027]2)易實(shí)現(xiàn):本發(fā)明的特點(diǎn)在于，應(yīng)用野生的中華鵝膏菌小組織塊通過(guò)適宜的培養(yǎng)基質(zhì)就可萌發(fā)出菌絲，操作容易；
[0028]3)生產(chǎn)成本低:本發(fā)明的試驗(yàn)培養(yǎng)基成分取自天然的馬尾松松針、馬鈴薯、玉米粒等，培養(yǎng)基質(zhì)容易獲取，設(shè)備簡(jiǎn)單，成本低廉。
【具體實(shí)施方式】
[0029]以下實(shí)施例將對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明，并以實(shí)施例2、3、4為對(duì)照說(shuō)明本發(fā)明的效果。
[0030]實(shí)施例1:
[0031] 野外采摘野外采摘生長(zhǎng)健壯、無(wú)蟲(chóng)害、未完全開(kāi)傘、菌柄較粗壯、菌蓋較肥厚的成熟子實(shí)體；將子實(shí)體帶回實(shí)驗(yàn)室，于超凈臺(tái)上用超凈臺(tái)上用酒精棉球，輕擦菌蓋表面及菌柄部分，用解剖刀輕輕去除菌蓋中部表皮，從菌蓋中部取十字，將子實(shí)體一分為四，取菌柄與菌蓋交接處的內(nèi)部無(wú)菌組織塊，切成0.25~0.5cm2大小不等的小塊；
[0032]將切取的小組織塊，輕輕嵌入ISmmX 180mm的試管斜面誘導(dǎo)培養(yǎng)基表面，所述培養(yǎng)基成分為:馬鈴薯100g/L、玉米粒25g/L、葡萄糖20g/L、瓊脂15~20g/L、自來(lái)水和馬尾松松針汁液1L、自然pH值；所述培養(yǎng)基制備方法為:采集馬尾松新鮮松針50g加水約500mL加熱沸水后煮30min，過(guò)濾棄馬尾松松針，得松針汁液約250mL，冷卻，備用；洗凈玉米粒25g加水lOOOmL，加熱煮沸后繼續(xù)煮沸30min，即可加入新鮮洗凈去皮馬鈴薯小塊100g，繼續(xù)煮沸30min，過(guò)濾，得玉米馬鈴薯水煮液，約450mL ;馬尾松松針汁液與玉米馬鈴薯汁液混合，加熱，再加入瓊脂15~20g，繼續(xù)加熱，待瓊脂溶解后，加入葡萄糖20g，溶解后冷卻并補(bǔ)足水分至1L，分裝試管，加塞、包扎，121°C滅菌20min左右后取出試管擺斜面或者搖勻，冷卻后存?zhèn)溆茫?br> [0033]將接種小組織塊的試管共100支，放置在溫度為20~26°C下暗培養(yǎng)7天，100支試管組織培養(yǎng)塊上均長(zhǎng)出白色絨毛狀菌絲，長(zhǎng)度為2~10mm，即為母種；
[0034]母種進(jìn)一步提純與轉(zhuǎn)管培養(yǎng)的方法:在菌絲萌發(fā)后，挑選色澤純、健壯、長(zhǎng)勢(shì)正常和無(wú)間斷的菌線(xiàn)，在無(wú)菌室超凈工作臺(tái)上連同培養(yǎng)基鉤取菌絲，接入另備的試管培養(yǎng)基上。在20~25°C的恒溫條件下，培養(yǎng)7~10天，待菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)試管后，再?gòu)闹袚駜?yōu)取用，即為“母代”母種；母種的轉(zhuǎn)管培養(yǎng)將一支長(zhǎng)滿(mǎn)菌絲的試管在無(wú)菌操作下，分別轉(zhuǎn)接到多只試管中培養(yǎng)，一般每支母種可擴(kuò)接20~50支，也可以再次轉(zhuǎn)管擴(kuò)接，但轉(zhuǎn)管次數(shù)不得超過(guò)4次，這些轉(zhuǎn)管擴(kuò)接后，即為供生產(chǎn)上使用的子代母種。
[0035]實(shí)施例2:
[0036]野外采摘野外采摘生長(zhǎng)健壯、無(wú)蟲(chóng)害、未完全開(kāi)傘、菌柄較粗壯、菌蓋較肥厚的成熟子實(shí)體；將子實(shí)體帶回實(shí)驗(yàn)室，于超凈臺(tái)上用超凈臺(tái)上用酒精棉球，輕擦菌蓋表面及菌柄部分，用解剖刀輕輕去除菌蓋中部表皮，從菌蓋中部取十字，將子實(shí)體一分為四，取菌柄與菌蓋交接處的內(nèi)部無(wú)菌組織塊，切成0.25~0.5cm2大小不等的小塊；
[0037]將切取的小組織塊，輕輕嵌入ISmmX 180mm的試管斜面誘導(dǎo)培養(yǎng)基表面，所述培養(yǎng)基成分為:馬鈴薯200g/L、葡萄糖20g/L、瓊脂15~20g/L、自來(lái)水1L、自然pH值；所述培養(yǎng)基制備方法為:新鮮馬鈴薯洗凈去皮，稱(chēng)取200g切成小塊，加水煮爛(煮沸20~30min，能被玻璃棒戳破即可)，用八層紗布過(guò)濾，加熱，再據(jù)實(shí)際需要加15~20g瓊脂，繼續(xù)加熱攪拌混勻，待瓊脂溶解完后，加入葡萄糖20g，攪拌均勻，冷卻；后補(bǔ)足水分至1L，分裝試管，加塞、包扎，121°C滅菌20min左右后取出試管擺斜面或者搖勻，冷卻后貯存?zhèn)溆茫?br> [0038]將接種小組織塊的試管100支，放置在溫度為20~25°C下暗培養(yǎng)100天，組織培養(yǎng)塊上無(wú)長(zhǎng)出白色絨毛狀菌絲，全部轉(zhuǎn)變?yōu)楹诤稚?br> [0039]實(shí)施例3:
[0040]野外采摘野外采摘生長(zhǎng)健壯、無(wú)蟲(chóng)害、未完全開(kāi)傘、菌柄較粗壯、菌蓋較肥厚的成熟子實(shí)體；將子實(shí)體帶回實(shí)驗(yàn)室，于超凈臺(tái)上用超凈臺(tái)上用酒精棉球，輕擦菌蓋表面及菌柄部分，用解剖刀輕輕去除菌蓋中部表皮，從菌蓋中部取十字，將子實(shí)體一分為四，取菌柄與菌蓋交接處的內(nèi)部無(wú)菌組織塊，切成0.25~0.5cm2大小不等的小塊；
[0041]將切取的小組織塊，輕輕嵌入18mmX 180mm的試管斜面誘導(dǎo)培養(yǎng)基表面，所述培養(yǎng)基成分為:馬鈴薯200g/L、葡萄糖20g/L、麥芽汁(12波美度)120mL/L、瓊脂15~20g/L、自來(lái)水lL、pH5.0左右；所述培養(yǎng)基制備方法為:新鮮馬鈴薯洗凈去皮，稱(chēng)取200g切成小塊，加水煮爛(煮沸20~30min，能被玻璃棒戳破即可)，用八層紗布過(guò)濾，加熱，再據(jù)實(shí)際需要加15~20g瓊脂，繼續(xù)加熱攪拌混勻，待瓊脂溶解完后，加入葡萄糖20g和麥芽汁(12波美度)120mL，攪拌均勻，冷卻；后補(bǔ)足水分至1L，pH為5.0左右，分裝試管，加塞、包扎，121°C滅菌20min左右后取出試管擺斜面或者搖勻，冷卻后貯存?zhèn)溆茫?br> [0042]將接種小組織塊的試管100支，放置在溫度為20~26°C下暗培養(yǎng)100天，組織培養(yǎng)塊上無(wú)長(zhǎng)出白色絨毛狀菌絲，全部轉(zhuǎn)變?yōu)楹诤稚?[0043]實(shí)施例4:
[0044]野外采摘野外采摘生長(zhǎng)健壯、無(wú)蟲(chóng)害、未完全開(kāi)傘、菌柄較粗壯、菌蓋較肥厚的成熟子實(shí)體；將子實(shí)體帶回實(shí)驗(yàn)室，于超凈臺(tái)上用超凈臺(tái)上用酒精棉球，輕擦菌蓋表面及菌柄部分，用解剖刀輕輕去除菌蓋中部表皮，從菌蓋中部取十字，將子實(shí)體一分為四，取菌柄與菌蓋交接處的內(nèi)部無(wú)菌組織塊，切成0.25~0.5cm2大小不等的小塊；
[0045]將切取的小組織塊，輕輕嵌入18mmX 180mm的試管斜面誘導(dǎo)培養(yǎng)基表面，所述培養(yǎng)基成分為:馬鈴薯 200g/L、葡萄糖 20g/L、MgSO41g/L, CaCl2lg/L、KH2PO40.5g/L、(NH4)2HPO40.5g/L、KNO30.5g/L、麥芽汁(12 波美度)120mL/L、維生素 BJOOug/L、瓊脂 15 ~20g/L、自來(lái)水lL、pH5.0左右；所述培養(yǎng)基制備方法為:新鮮馬鈴薯洗凈去皮，稱(chēng)取200g切成小塊，加水煮爛(煮沸20~30min，能被玻璃棒戳破即可)，用八層紗布過(guò)濾，加熱，再據(jù)實(shí)際需要加15~20g瓊脂，繼續(xù)加熱攪拌混勻，待瓊脂溶解完后，加入葡萄糖20g和麥芽汁(12 波美度)120mL，攪拌均勻，冷卻；加入 MgSO41g、CaCl21g、KH2PO40.5g、(NH4)2HPO40.5g、KNO30.5g、維生素B1IOOug,攪拌均勻，后補(bǔ)足水分至1L，pH為5.0左右，分裝試管，加塞、包扎，121°C滅菌20min左右后取出試管擺斜面或者搖勻，冷卻后貯存?zhèn)溆茫?br> [0046]將接種小組織塊的試管共100支，放置在溫度為20~26°C下暗培養(yǎng)12~15天，其中2支試管組織培養(yǎng)塊上長(zhǎng)出短白色絨毛狀菌絲，長(zhǎng)約0.5mm，繼續(xù)培養(yǎng)至100天，這2支試管組織培養(yǎng)塊上長(zhǎng)出的短白色絨毛狀菌絲不生長(zhǎng)；其它試管組織培養(yǎng)塊不長(zhǎng)出短白色絨毛狀菌絲，組織培養(yǎng)塊轉(zhuǎn)變?yōu)楹诤稚?br> 【權(quán)利要求】
1.一種中華鵝膏菌培養(yǎng)基，其特征在于其組成為:馬鈴薯100g/L、玉米粒20~30g/L、葡萄糖20g/L、瓊脂15~20g/L、馬尾松松針汁液150~300mL/L，自然pH值。
2.如權(quán)利要求1所述一種中華鵝膏菌培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于包括以下步驟: 1)將新鮮馬尾松松針25~75g加水250~500mL，加熱煮沸后繼續(xù)煮沸30min，冷卻，過(guò)濾棄馬尾松松針，得馬尾松松針汁液； 2)將玉米粒20~30g加水1000mL,加熱煮沸后繼續(xù)煮沸30min，即加入去皮馬鈴薯小塊100g，繼續(xù)煮沸30min,過(guò)濾,得玉米馬鈴薯汁液； 3)將馬尾松松針汁液與玉米馬鈴薯汁液混合，加熱，再加入瓊脂15~20g，繼續(xù)加熱，待瓊脂溶解后，加入葡萄糖20g，溶解后冷卻并補(bǔ)足水分至1L，均勻混合，分裝試管，加塞，包扎，滅菌后取出試管擺斜面或者搖勻，冷卻后即得中華鵝膏菌培養(yǎng)基。
3.如權(quán)利要求2所述一種中華鵝膏菌培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于在步驟I)和2)中，所述加熱煮沸的時(shí)間為20~40min。
4.如權(quán)利要求2所述一種中華鵝膏菌培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于在步驟I)和2)中，所述過(guò)濾采用8層紗布過(guò)濾。
5.如權(quán)利要求2所述一種中華鵝膏菌培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于在步驟3)中，所述滅菌的條件為121°C下滅菌20min。
6.如權(quán)利要求1所述一種中華鵝膏菌培養(yǎng)基在誘導(dǎo)中華鵝膏菌母種中應(yīng)用。
7.如權(quán)利要求6所述應(yīng)用，其特征在于誘導(dǎo)中華鵝膏菌母種的方法如下: 切取野生采摘的子實(shí)體小組織塊，再嵌入試管斜面中華鵝膏菌培養(yǎng)基表面，在溫度為20~26°C下暗培養(yǎng)7~15天，組織培養(yǎng)塊上長(zhǎng)出白色絨毛狀菌絲，即為中華鵝膏菌母種。
8.如權(quán)利要求7所述應(yīng)用，其特征在于所述切取野生采摘的子實(shí)體小組織塊的方法為:野外采摘生長(zhǎng)健壯、無(wú)蟲(chóng)害、未完全開(kāi)傘、菌柄較粗壯、菌蓋較肥厚的成熟子實(shí)體；將子實(shí)體帶回實(shí)驗(yàn)室，于超凈臺(tái)上用酒精棉球，輕擦菌蓋表面及菌柄部分，用解剖刀去除菌蓋中部表皮，從菌蓋中部取十字，將子實(shí)體一分為四，取菌柄與菌蓋交接處的內(nèi)部無(wú)菌組織塊，切成0.25~0.5cm2的小塊。
9.如權(quán)利要求7所述應(yīng)用，其特征在于所述中華鵝膏菌母種的提純方法如下: 在菌絲萌發(fā)后，挑選色澤純、健壯、長(zhǎng)勢(shì)正常和無(wú)間斷的菌線(xiàn)，在無(wú)菌室超凈工作臺(tái)上連同中華鵝膏菌培養(yǎng)基鉤取菌絲，接入另備的中華鵝膏菌培養(yǎng)基上，在20~26°C的恒溫條件下，培養(yǎng)7~15天，待菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)試管后，再?gòu)闹袚駜?yōu)取用，即為“母代”母種。
10.如權(quán)利要求7所述應(yīng)用，其特征在于所述中華鵝膏菌母種的轉(zhuǎn)管培養(yǎng)的方法如下: 將一支長(zhǎng)滿(mǎn)菌絲的試管在無(wú)菌操作下，分別轉(zhuǎn)接到多只試管中培養(yǎng)，一般每支母種擴(kuò)接20~50支；或再次 轉(zhuǎn)管擴(kuò)接,所述轉(zhuǎn)管擴(kuò)接的次數(shù)不超過(guò)4次,轉(zhuǎn)管擴(kuò)接后，即為供生產(chǎn)上使用的子代母種。
【文檔編號(hào)】A01G1/04GK103980060SQ201410245995
【公開(kāi)日】2014年8月13日 申請(qǐng)日期:2014年6月5日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月5日
【發(fā)明者】陳錫桓, 蔡邦平, 池騰菁, 吳大忠, 林名根, 俞立烜, 陳鴻, 張宏梓, 羅雪妹 申請(qǐng)人:尤溪縣林業(yè)科技推廣中心, 蔡邦平