專利名稱：一種白蟻巢上炭角菌屬種的分離培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種菌種的分離培養(yǎng)方法，特別是白蟻巢上炭角菌屬種的分離培養(yǎng)方法。
背景技術(shù)：
炭角菌屬有黑柄炭角菌Xylaria nigripes (Klotzsch) &icc.、痂狀炭角菌 Xylaria escharoidea (Berk. ) Sacc.等，黑柄炭角菌中文別名烏靈參、雞茯苓、地炭棍，菌核生長在廢棄的白蟻窩上。經(jīng)濟用途藥用菌核，其性溫，味微苦。民間藥用，能除濕、鎮(zhèn)驚、 止心悸，催乳、補腎、安眠的作用。治產(chǎn)后失血，跌打損傷，可與肉燉食，作為補藥。由于炭角菌生長環(huán)境的特殊性，其菌種的自然繁殖遠遠不能滿足人們對該藥源植物的需求，為了解決供需矛盾，人們多采用人工栽培的方法擴大藥源，但在人工栽培中，如果以常規(guī)方法育種，菌種產(chǎn)量產(chǎn)值均較低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的即在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點，提供一種白蟻巢上炭角菌屬種的分離培養(yǎng)方法，它能大大提高白蟻巢上炭角菌屬種產(chǎn)量，杜絕了菌種的病毒危害，保障了菌種的
產(chǎn)量和產(chǎn)值。本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)一種白蟻巢上炭角菌屬種的分離培養(yǎng)方法，它包括以下步驟
(1)白蟻巢的獲取方法
從生長蟻巢傘地方挖開土壤，從中取出白蟻巢，將白蟻巢裝入塑料袋內(nèi)，密封保藏；
(2)炭角菌培養(yǎng)方法
將獲得的白蟻巢取100 300克，裝入250ml 300 ml的三角瓶內(nèi)，瓶口用塑料薄膜密封；或者將白蟻巢裝入塑料袋內(nèi)，密封袋口 ；在室內(nèi)25 30°C下培養(yǎng)，培養(yǎng)至形成黑色棒狀子實體為止；
(3)菌種分離方法
A、培養(yǎng)基a配制培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂 20g，按以上比例稱取，然后加入水IOOOmL ；培養(yǎng)基b配制培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制酵母粉5g、葡萄糖20g、瓊脂20g，按以上比例稱取，然后加入水IOOOmL ；
B、分離方法
將培養(yǎng)出的炭角菌子實體取出，用70% 75%的酒精棉球擦洗子實體表面，然后在無菌環(huán)境下將子實體折斷，手術(shù)刀在酒精燈火焰上灼燒殺菌并冷卻后，切取子實體內(nèi)部組織，放在培養(yǎng)基a或培養(yǎng)基b上；
(4)菌種培養(yǎng)方法
將放入子實體組織塊的培養(yǎng)基，在22°C 25°C下培養(yǎng)，培養(yǎng)至形成黑色子實體為止， 將形成黑色子實體的菌種，確定為炭角菌屬菌種，選擇無細菌和霉菌感染的菌種使用；(5)菌種保藏
將菌種用紙包裹，在室內(nèi)20°C 30°C下保藏，間隔2 3個月轉(zhuǎn)接培養(yǎng)一次。通過上面的敘述可以看出，本發(fā)明具有以下優(yōu)點利用本發(fā)明的分離培養(yǎng)方法，菌種具有不受地區(qū)、季節(jié)與氣候限制，便于工廠化生產(chǎn)等優(yōu)勢，大大提高了白蟻巢上炭角菌屬種產(chǎn)量，保障了菌種的產(chǎn)值。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施方式
對本發(fā)明做進一步的描述
實施例1 一種白蟻巢上炭角菌屬種的分離培養(yǎng)方法，它包括以下步驟
(1)白蟻巢的獲取方法
從生長蟻巢傘地方挖開土壤，從中取出白蟻巢，將白蟻巢裝入塑料袋內(nèi)，密封保藏；
(2)炭角菌培養(yǎng)方法
將獲得的白蟻巢取100克，裝入250ml的三角瓶內(nèi)，瓶口用塑料薄膜密封；或者將白蟻巢裝入塑料袋內(nèi)，密封袋口 ；在室內(nèi)25°C下培養(yǎng)，培養(yǎng)至形成黑色棒狀子實體為止；
(3)菌種分離方法
A、培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基a配制培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制馬鈴薯200g、葡萄糖 20g、瓊脂20g，按以上比例稱取，然后加入水IOOOmL ；
B、分離方法
將培養(yǎng)出的炭角菌子實體取出，用70%的酒精棉球擦洗子實體表面，然后在無菌環(huán)境下將子實體折斷，在酒精燈火焰上灼燒殺菌并冷卻后，切取子實體內(nèi)部組織，放在培養(yǎng)基上；
(4)菌種培養(yǎng)方法
將放入子實體組織塊的培養(yǎng)基，在22°C下培養(yǎng)，培養(yǎng)至形成黑色子實體為止，將形成黑色子實體的菌種，確定為炭角菌屬菌種，選擇無細菌和霉菌感染的菌種使用；
(5)菌種保藏
將菌種用紙包裹，在室內(nèi)20°C下保藏，間隔2個月轉(zhuǎn)接培養(yǎng)一次。實施例2 一種白蟻巢上炭角菌屬種的分離培養(yǎng)方法，它包括以下步驟
(1)白蟻巢的獲取方法從生長蟻巢傘地方挖開土壤，從中取出白蟻巢，將白蟻巢裝入塑料袋內(nèi)，密封保藏；
(2)炭角菌培養(yǎng)方法
將獲得的白蟻巢取300克，裝入300 ml的三角瓶內(nèi)，瓶口用塑料薄膜密封；或者將白蟻巢裝入塑料袋內(nèi)，密封袋口 ；在室內(nèi)30°C下培養(yǎng)，培養(yǎng)至形成黑色棒狀子實體為止；
(3)菌種分離方法
A、培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基b配制培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制酵母粉5g、葡萄糖 20g、瓊脂20g，按以上比例稱取，然后加入水IOOOmL ；
B、分離方法
將培養(yǎng)出的炭角菌子實體取出，用75%的酒精棉球擦洗子實體表面，然后在無菌環(huán)境下將子實體折斷，手術(shù)刀在酒精燈火焰上灼燒殺菌并冷卻后，切取子實體內(nèi)部組織，放在培
養(yǎng)基上；(4)菌種培養(yǎng)方法
將放入子實體組織塊的培養(yǎng)基，在25°C下培養(yǎng)，培養(yǎng)至形成黑色子實體為止，將形成黑色子實體的菌種，確定為炭角菌屬菌種，選擇無細菌和霉菌感染的菌種使用；
(5)菌種保藏
將菌種用紙包裹，在室內(nèi)30°C下保藏，間隔3個月轉(zhuǎn)接培養(yǎng)一次。實施例3 一種白蟻巢上炭角菌屬種的分離培養(yǎng)方法，它包括以下步驟
(1)白蟻巢的獲取方法
從生長蟻巢傘地方挖開土壤，從中取出白蟻巢，將白蟻巢裝入塑料袋內(nèi)，密封保藏；
(2)炭角菌培養(yǎng)方法
將獲得的白蟻巢取200克，裝入300 ml的三角瓶內(nèi)，瓶口用塑料薄膜密封；或者將白蟻巢裝入塑料袋內(nèi)，密封袋口 ；在室內(nèi)下培養(yǎng)，培養(yǎng)至形成黑色棒狀子實體為止；
(3)菌種分離方法
A、培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基a配制培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制馬鈴薯200g、葡萄糖 20g、瓊脂20g，按以上比例稱取，然后加入水IOOOmL ；
B、分離方法
將培養(yǎng)出的炭角菌子實體取出，用75%的酒精棉球擦洗子實體表面，然后在無菌環(huán)境下將子實體折斷，在酒精燈火焰上灼燒殺菌并冷卻后，切取子實體內(nèi)部組織，放在培養(yǎng)基上；
(4)菌種培養(yǎng)方法
將放入子實體組織塊的培養(yǎng)基，在23°C下培養(yǎng)，培養(yǎng)至形成黑色子實體為止，將形成黑色子實體的菌種，確定為炭角菌屬菌種，選擇無細菌和霉菌感染的菌種使用
(5)菌種保藏
將菌種用紙包裹，在室內(nèi)下保藏，間隔2. 5個月轉(zhuǎn)接培養(yǎng)一次。實施例4 一種白蟻巢上炭角菌屬種的分離培養(yǎng)方法，它包括以下步驟
(1)白蟻巢的獲取方法
從生長蟻巢傘地方挖開土壤，從中取出白蟻巢，將白蟻巢裝入塑料袋內(nèi)，密封保藏；
(2)炭角菌培養(yǎng)方法
將獲得的白蟻巢取250克，裝入300 ml的三角瓶內(nèi)，瓶口用塑料薄膜密封；或者將白蟻巢裝入塑料袋內(nèi)，密封袋口 ；在室內(nèi)27°C下培養(yǎng)，培養(yǎng)至形成黑色棒狀子實體為止；
(3)菌種分離方法
A、培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基b配制培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制酵母粉5g、葡萄糖 20g、瓊脂20g，按以上比例稱取，然后加入水IOOOmL ；
B、分離方法
將培養(yǎng)出的炭角菌子實體取出，用72%的酒精棉球擦洗子實體表面，然后在無菌環(huán)境下將子實體折斷，手術(shù)刀在酒精燈火焰上灼燒殺菌并冷卻后，切取子實體內(nèi)部組織，放在培養(yǎng)基上；
(4)菌種培養(yǎng)方法
將放入子實體組織塊的培養(yǎng)基，在下培養(yǎng)，培養(yǎng)至形成黑色子實體為止，將形成黑色子實體的菌種，確定為炭角菌屬菌種，選擇無細菌和霉菌感染的菌種使用；(5)菌種保藏
將菌種用紙包裹，在室內(nèi)27°C下保藏，間隔2個月轉(zhuǎn)接培養(yǎng)一次。
權(quán)利要求
1. 一種白蟻巢上炭角菌屬種的分離培養(yǎng)方法，其特征在于，它包括以下步驟(1)白蟻巢的獲取方法從生長蟻巢傘地方挖開土壤，從中取出白蟻巢，將白蟻巢裝入塑料袋內(nèi)，密封保藏；(2)炭角菌培養(yǎng)方法將獲得的白蟻巢取100 300克，裝入250mL 300 mL的三角瓶內(nèi)，瓶口用塑料薄膜密封；或者將白蟻巢裝入塑料袋內(nèi)，密封袋口 ；在室內(nèi)25 30°C下培養(yǎng)，培養(yǎng)至形成黑色棒狀子實體為止；(3)菌種分離方法A、培養(yǎng)基a配制培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂 20g，按以上比例稱取，然后加入水IOOOmL ；培養(yǎng)基b配制培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制酵母粉5g、葡萄糖20g、瓊脂20g，按以上比例稱取，然后加入水IOOOmL ；B、分離方法將培養(yǎng)出的炭角菌子實體取出，用70% 75%的酒精棉球擦洗子實體表面，然后在無菌環(huán)境下將子實體折斷，手術(shù)刀在酒精燈火焰上灼燒殺菌并冷卻后，切取子實體內(nèi)部組織，放在培養(yǎng)基a或培養(yǎng)基b上；(4)菌種培養(yǎng)方法將放入子實體組織塊的培養(yǎng)基，在22°C 25°C下培養(yǎng)，培養(yǎng)至形成黑色子實體為止， 將形成黑色子實體的菌種，確定為炭角菌屬菌種，選擇無細菌和霉菌感染的菌種使用；(5)菌種保藏將菌種用紙包裹，在室內(nèi)20°C 30°C下保藏，間隔2 3個月轉(zhuǎn)接培養(yǎng)一次。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種白蟻巢上炭角菌屬種的分離培養(yǎng)方法，它包括以下步驟(1)白蟻巢的獲取方法；(2)炭角菌培養(yǎng)方法；(3)菌種分離方法；(4)菌種培養(yǎng)方法；(5)菌種保藏。利用本發(fā)明的分離培養(yǎng)方法，菌種具有不受地區(qū)、季節(jié)與氣候限制，便于工廠化生產(chǎn)等優(yōu)勢，大大提高了白蟻巢上炭角菌屬種產(chǎn)量，保障了菌種的產(chǎn)量和產(chǎn)值。
文檔編號C05G3/00GK102334419SQ20111021606
公開日2012年2月1日 申請日期2011年7月30日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月30日
發(fā)明者王波, 甘炳成, 鮮靈, 黃忠乾 申請人:四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所