專利名稱：一種視網(wǎng)膜靜脈人工血管旁路術(shù)的活體動(dòng)物眼模型的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種為實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)中用于手術(shù)治療視網(wǎng)膜靜脈阻塞性疾病的研究的活 體動(dòng)物眼模型制作方法，具體是視網(wǎng)膜靜脈人工血管旁路術(shù)的活體動(dòng)物眼模型的制作方法。
背景技術(shù)：
視網(wǎng)膜分支靜脈阻塞(Branch Retinal Vein Occlusion, BRVO)是繼糖尿病性視 網(wǎng)膜病變后第二種常見(jiàn)的引起視力損害的視網(wǎng)膜血管性疾病，嚴(yán)重者可導(dǎo)致失明，一直是 眼底病領(lǐng)域的研究重點(diǎn)。一般認(rèn)為，該病是由于視網(wǎng)膜靜脈內(nèi)血栓形成引起視網(wǎng)膜靜脈回 流所致，但具體原因和病理機(jī)制尚不完全清楚。目前臨床上常用的視網(wǎng)膜激光光凝和玻璃 體切除手術(shù)治療僅著眼于分支靜脈阻塞后的缺血缺氧并發(fā)癥，非對(duì)因治療。而近年中出現(xiàn) 的一些新治療方法如激光血管脈絡(luò)膜吻合術(shù)、靜脈穿刺溶栓術(shù)等其實(shí)際療效仍有待進(jìn)一步 證實(shí)。視網(wǎng)膜中央血管系統(tǒng)與心臟冠狀血管系統(tǒng)有相似之處，缺乏吻合支，一旦阻塞后 循環(huán)障礙很難改善。臨床上可通過(guò)冠脈血管搭橋手術(shù)治療心肌缺血，那么理論上也可通過(guò) 視網(wǎng)膜靜脈人工血管旁路術(shù)來(lái)治療視網(wǎng)膜分支靜脈阻塞。人工血管旁路術(shù)在臨床上已應(yīng)用 多年，主要治療肢體大血管阻塞和心臟血管阻塞、畸形。由于視網(wǎng)膜纖細(xì)的血管管徑(視網(wǎng) 膜動(dòng)脈管徑小于0. 1mm，視網(wǎng)膜靜脈管徑小于0. 2mm)，人工血管的材料和眼球內(nèi)狹小的操 作空間(約直徑25mm的球形空間)等原因，極大地限制了眼內(nèi)視網(wǎng)膜血管超顯微手術(shù)的研 究和發(fā)展。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于為用于研究視網(wǎng)膜靜脈人工血管旁路術(shù)治療視網(wǎng)膜分支靜脈 阻塞的時(shí)機(jī)、效果、安全性及用于研究視網(wǎng)膜血管缺血再灌注損傷的機(jī)制和轉(zhuǎn)歸而提供一 種視網(wǎng)膜靜脈人工血管旁路術(shù)的活體動(dòng)物眼模型的制作方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明公開了一種視網(wǎng)膜靜脈人工血管旁路術(shù)的活體動(dòng)物眼模 型的制作方法，其特征在于包括以下步驟1)選取眼球直徑約20mm-28mm的哺乳動(dòng)物作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物；2)通過(guò)人工方法阻斷視網(wǎng)膜主干靜脈第一分支處血管以造成視網(wǎng)膜分支靜脈阻 塞；3)進(jìn)行常規(guī)的眼科經(jīng)鞏膜三通道玻璃體切除術(shù)；4)分別在阻塞處遠(yuǎn)離視盤端的一條分支靜脈上和靠近視乳頭端的主干靜脈上各 設(shè)定一點(diǎn)作為血管旁路的起點(diǎn)和止點(diǎn)，所述起點(diǎn)和止點(diǎn)之間的距離為5mm-7mm ；5)制作人工血管采用內(nèi)徑為50um-60um，管壁厚度為5um_10um的高分子材料的 纖細(xì)導(dǎo)管，依據(jù)主干和分支靜脈的成角設(shè)定弧度，以大于起點(diǎn)和止點(diǎn)兩點(diǎn)間距離3mm設(shè)定為長(zhǎng)度，兩端剪成銳利斜面后置于肝素鈉液體浸泡； 6)將人工血管經(jīng)鞏膜通道切口導(dǎo)入眼內(nèi)，將人工血管的銳利的兩端穿刺起點(diǎn)和止 點(diǎn)的血管壁，插入血管內(nèi)達(dá)1. 5mm長(zhǎng)度，然后電凝穿刺處血管促進(jìn)血管收縮致穿刺口閉合7)縫合手術(shù)切口，完成視網(wǎng)膜靜脈人工血管旁路術(shù)的活體動(dòng)物眼模型制作。通過(guò)本發(fā)明的方法可以建立一種視網(wǎng)膜靜脈人工血管旁路術(shù)的活體動(dòng)物眼模型， 用于研究視網(wǎng)膜靜脈人工血管旁路術(shù)治療視網(wǎng)膜分支靜脈阻塞的時(shí)機(jī)及效果；用于研究視 網(wǎng)膜靜脈人工血管旁路術(shù)的安全性；用于研究視網(wǎng)膜血管缺血再灌注損傷的機(jī)制和轉(zhuǎn)歸； 為開展視網(wǎng)膜分支靜脈阻塞的一種新的臨床手術(shù)方法奠定了研究基礎(chǔ)。下面將結(jié)合附圖與具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。


圖1是動(dòng)物眼視網(wǎng)膜分支靜脈阻塞后的視網(wǎng)膜靜脈血管分布局部解剖示意圖；圖2是動(dòng)物眼視網(wǎng)膜靜脈人工血管旁路術(shù)示意圖。圖中所示1視網(wǎng)膜分支靜脈阻塞點(diǎn)位置；2血管旁路的起點(diǎn)位置(視網(wǎng)膜分支靜 脈上)；3血管旁路的止點(diǎn)位置(視網(wǎng)膜主干靜脈上)；4人工血管。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明中視網(wǎng)膜靜脈人工血管旁路術(shù)的活體動(dòng)物眼模型的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可以是選自 豬、犬、羊、猴等哺乳動(dòng)物，下面以實(shí)驗(yàn)用小型豬為例介紹本發(fā)明活體動(dòng)物眼模型的具體制 作方法首先選2個(gè)月月齡的實(shí)驗(yàn)用小型豬，術(shù)前連續(xù)五天給予抗凝血藥物拜阿司匹林腸 溶緩釋片300mg/每日，華法林鈉片500mg/每日。在術(shù)前5_7天，以1ml注射器前房穿刺抽取 0. lml房水，于顳上象限角膜緣后2. 5mm，通過(guò)30G針頭向玻璃體腔內(nèi)注入0. 5U/0. 05ml纖 溶酶和50U/0. 05ml透明質(zhì)酸酶，誘導(dǎo)完全的玻璃體后脫離，便于術(shù)中完全的切除玻璃體。 接著預(yù)先用光動(dòng)力學(xué)方法造成視網(wǎng)膜分支靜脈阻塞，具體是將孟加拉玫紅(Rose Bengal) (美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品)用生理鹽水配制成20g/L，經(jīng)0. 22um濾過(guò)膜過(guò)濾，4°C避光保存。于 鼻上方睫狀扁平部做鞏膜穿刺，插入玻璃體切割機(jī)眼內(nèi)照明的光導(dǎo)纖維(輸出功率10mW)。 耳緣靜脈推注盂加拉玫紅液(20mg/kg)。lmin后用光導(dǎo)纖維直接照射視網(wǎng)膜主干靜脈第一 分支處血管，避開伴行動(dòng)脈.照射10-15分鐘，直到靜脈局部白色血栓逐漸形成構(gòu)成視網(wǎng)膜 分支靜脈阻塞點(diǎn)1，血流被阻斷，靜脈遠(yuǎn)端紆曲，如圖1所示。然后進(jìn)行玻璃體切除術(shù)首先 對(duì)動(dòng)物進(jìn)行麻醉手術(shù)前禁食24小時(shí)，禁飲2小時(shí)，麻醉前30min肌注阿托品0. 5mg,肌注 速眠新II 0.3ml/kg成功進(jìn)行麻醉誘導(dǎo)后，腹腔內(nèi)注射3ml/kg 10%水合氯醛麻醉劑進(jìn)行 全身麻醉，隨后在高放大率、雙手操作系統(tǒng)眼科手術(shù)顯微鏡下進(jìn)行常規(guī)的眼科經(jīng)鞏膜三通 道玻璃體切除術(shù)。再分別在阻塞點(diǎn)1處遠(yuǎn)離視盤端的一條分支靜脈上各設(shè)定一點(diǎn)作為血管 旁路的起點(diǎn)2，在靠近視乳頭端的主干靜脈上設(shè)定一點(diǎn)作為血管旁路的止點(diǎn)3，起點(diǎn)2和止 點(diǎn)3之間的距離為6mm。下一步是人工血管的準(zhǔn)備選用聚酰亞胺材料的微導(dǎo)管(內(nèi)徑為 50. 8um,管壁為7. 6um，美國(guó)HV Technologies公司產(chǎn)品)作為人工血管，依據(jù)主干和分支 靜脈的成角設(shè)定弧度，以大于起點(diǎn)2和止點(diǎn)3兩點(diǎn)間距離3mm設(shè)定為長(zhǎng)度，兩端剪成銳利斜 面后至于肝素鈉液體浸泡有利于抗凝血，再將人工血管經(jīng)鞏膜通道切口導(dǎo)入眼內(nèi)，用眼科25-gauge視網(wǎng)膜鑷夾持，先將人工血管的銳利的一端穿刺起點(diǎn)2點(diǎn)的血管壁，插入血管內(nèi) 達(dá)1. 5mm長(zhǎng)度，再將人工血管的另一段穿刺止點(diǎn)3點(diǎn)的血管壁，插入血管內(nèi)達(dá)1. 5mm長(zhǎng)度， 血管壁的自然收縮使穿刺口閉合，如圖2所示，若仍存在少量出血可以電凝穿刺處血管促 進(jìn)血管收縮致穿刺口閉合，縫合手術(shù)切口。為了檢驗(yàn)?zāi)Ｐ偷男Ч?，接著采用術(shù)中即時(shí)眼底血 管熒光造影技術(shù)，即在耳緣靜脈內(nèi)快速推注10%熒光素鈉(15 30mg/kg)，馬上開始在藍(lán) 色光波激發(fā)下用熒光眼底攝像機(jī)攝像，證實(shí)人工血管旁路通暢和穿刺口無(wú)滲漏，即證實(shí)動(dòng) 物眼模型制作成功。
權(quán)利要求
一種視網(wǎng)膜靜脈人工血管旁路術(shù)的活體動(dòng)物眼模型的制作方法，其特征在于包括以下步驟1)選取眼球直徑約20mm-28mm的哺乳動(dòng)物作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物；2)通過(guò)人工方法阻斷視網(wǎng)膜主干靜脈第一分支處血管以造成視網(wǎng)膜分支靜脈阻塞；3)進(jìn)行常規(guī)的眼科經(jīng)鞏膜三通道玻璃體切除術(shù)；4)分別在阻塞處遠(yuǎn)離視盤端的一條分支靜脈上和靠近視乳頭端的主干靜脈上各設(shè)定一點(diǎn)作為血管旁路的起點(diǎn)和止點(diǎn)，所述起點(diǎn)和止點(diǎn)之間的距離為5mm-7mm；5)制作人工血管采用內(nèi)徑為50um-60um，管壁厚度為5um-10um的高分子材料的纖細(xì)導(dǎo)管，依據(jù)主干和分支靜脈的成角設(shè)定弧度，以大于起點(diǎn)和止點(diǎn)兩點(diǎn)間距離3mm設(shè)定為長(zhǎng)度，兩端剪成銳利斜面后置于肝素鈉液體浸泡；6)將人工血管經(jīng)鞏膜通道切口導(dǎo)入眼內(nèi)，將人工血管的銳利的兩端穿刺起點(diǎn)和止點(diǎn)的血管壁，插入血管內(nèi)達(dá)1.5mm長(zhǎng)度，然后電凝穿刺處血管促進(jìn)血管收縮致穿刺口閉合7)縫合手術(shù)切口，完成視網(wǎng)膜靜脈人工血管旁路術(shù)的活體動(dòng)物眼模型制作。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種視網(wǎng)膜靜脈人工血管旁路術(shù)的活體動(dòng)物眼模型的制作方法。選用實(shí)驗(yàn)用豬、犬、羊、猴，預(yù)先人工造成視網(wǎng)膜分支靜脈阻塞后，行玻璃體切除術(shù)。分別在阻塞處兩旁的血管上各設(shè)定一點(diǎn)作為血管旁路的起止點(diǎn)，采用高分子材料的微導(dǎo)管作為人工血管，設(shè)計(jì)彎曲弧度、長(zhǎng)度和銳利的端角。將人工血管導(dǎo)入眼內(nèi)后，先后將銳利的兩端穿刺設(shè)定的起止點(diǎn)位置的血管壁并插入血管。穿刺口自然閉合，必要時(shí)電凝血管促進(jìn)閉合。本發(fā)明通過(guò)建立活體動(dòng)物眼模型，用于研究視網(wǎng)膜靜脈人工血管旁路術(shù)治療視網(wǎng)膜分支靜脈阻塞的時(shí)機(jī)、效果及安全性，為開展一種新的臨床手術(shù)方法奠定了研究基礎(chǔ)。
文檔編號(hào)A61D1/00GK101849860SQ201010145338
公開日2010年10月6日 申請(qǐng)日期2010年4月7日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月7日
發(fā)明者吳煒, 沈麗君, 陳亦棋 申請(qǐng)人:溫州醫(yī)學(xué)院