專利名稱：牙鲆配合飼料添加劑的配制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于海水魚類養(yǎng)殖配合飼料的配制技術(shù)，是一種牙鲆配合飼料添加劑的配制方法。
本發(fā)明是按以下操作技術(shù)完成的其技術(shù)方案主要是牙鲆配合飼料的添加劑種類、配伍組合和最佳用量，以及添加該添加劑牙鲆配合飼料的配制方法。
牙鲆配合飼料添加劑，它是由酶制劑、益生素、免疫增強(qiáng)劑配制而成，其配料用量是酶制劑為3g/kg；益生素0.1g/kg-0.2g/kg；免疫增強(qiáng)劑維生素VE為300mg/kg，魚油為60g/kg，同時添加甲殼胺，用量為0.5g/kg。
酶制劑是蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶及纖維素酶的復(fù)合酶。
益生素是采用芽孢桿菌制劑。
免疫增強(qiáng)劑為維生素VE與不飽和脂肪酸(魚油)組合，同時添加甲殼胺。
添加該添加劑的牙鲆配合飼料配制方法是由飼料基料和添加劑配合而成。飼料基料為魚粉40％、豆粕30％、酵母5％、次粉20％、膽堿0.5％、卵磷脂0.5％、磷酸氫鈣2％、維生素1％(不含維生素VE)、礦物質(zhì)1％。其飼料基料中的魚粉為優(yōu)質(zhì)魚粉，魚油為無酸敗、氧化氣味，其它原料也無發(fā)霉、變質(zhì)、結(jié)塊、蟲害等，飼料原料95％通過0.25mm孔試驗(yàn)篩。按飼料基料用量充分混勻后，加入3g/kg復(fù)合酶制劑、0.1-0.2g/kg的益生素芽孢桿菌制劑及VE300mg/kg，0.5g/kg甲殼胺，使其充分混勻，變異系數(shù)≤10％，再加入60g/kg的魚油，充分混勻，以2％的褐藻酸鈉作粘合劑，制粒后飼喂牙鲆。
下面通過實(shí)施例詳細(xì)敘述本發(fā)明的配制技術(shù)。
最佳實(shí)施配方的篩選過程飼料添加劑的效果與飼料配比及飼料基料的質(zhì)量密切相關(guān)，應(yīng)注意牙鲆的飼料基料應(yīng)滿足牙鲆的營養(yǎng)需求。飼料基料中魚粉為優(yōu)質(zhì)魚粉，魚油為無酸敗、氧化氣味，其它原料也無發(fā)霉、變質(zhì)、結(jié)塊、蟲害等，飼料原料95％通過0.25mm孔試驗(yàn)篩。在飼料配制過程中，基料配方是魚粉40％、豆粕30％、酵母5％、次粉20％、膽堿0.5％、卵磷脂0.5％、磷酸氫鈣2％、維生素1％(不含維生素VE)、礦物質(zhì)1％，按飼料基料用量充分混勻后，加入3g/kg復(fù)合酶制劑、0.1-0.2g/kg的益生素及VE300mg/kg，0.5g/kg甲殼胺充分混勻，變異系數(shù)≤10％，再加入60g/kg的魚油，充分混勻，以2％的褐藻酸鈉作粘合劑，制粒后飼喂牙鲆。
完成上述配制首先要對不同的酶制劑、益生素及免疫增強(qiáng)劑進(jìn)行篩選，掌握適當(dāng)?shù)募夹g(shù)參數(shù)。包括酶制劑的種類、適宜添加量；益生素的種類、適宜添加量，免疫增強(qiáng)劑配伍及用量。
1.酶制劑的篩選與適宜添加量分別用蛋白酶A、脂肪酶B、復(fù)合酶制劑C(是由蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纖維素酶組合而成)，采用上述配方制成配合飼料和對照組(不添加酶制劑)，飼養(yǎng)牙鲆45天，觀察其生長效果，各組牙鲆的成活率、增重率、飼料系數(shù)等與對照組比較如表1；酶的適宜添加量如表2。
表1不同酶制劑對牙鲆的養(yǎng)殖效果開始結(jié)束酶制劑種類及用量 均重均重成活率(％)增重率(％)飼料系數(shù)(g) (g)對照 9.2016.28 98 77.17 1.16A 1g/kg 6.3313.04 98 105.841.32B 1g/kg 8.6718.90 98 117.821.11C 1g/kg 8.8320.47 100 137.800.96表2牙鲆酶制劑C(復(fù)合酶制劑)的最佳用量開始結(jié)束酶制劑種類及用量 均重均重 成活率(％)增重率(％)飼料系數(shù)(g) (g)1g/kg4.2512.93 100 204.35 1.353g/kg4.8016.82 100 250.32 0.975g/kg4.5014.92 100 231.46 1.21實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，牙鲆飼料中添加酶制劑可促進(jìn)海水魚牙鲆的生長，提高其增重率和飼料轉(zhuǎn)化率，降低飼料系數(shù)。從上表可見添加蛋白酶A、脂肪酶B、復(fù)合酶C均可不同程度的提高飼養(yǎng)動物的增重率，添加酶制劑C的在這三種添加量中達(dá)到最大生長，其最佳用量為3g/kg，最低的飼料系數(shù)。
2.益生素的種類、適宜添加量水產(chǎn)養(yǎng)殖上，大量實(shí)驗(yàn)證明益生素具有改善機(jī)體代謝、提高飼料轉(zhuǎn)化率、增強(qiáng)動物免疫機(jī)能、提高苗體成活率和親體繁殖等效果。本試驗(yàn)選用三種有代表性益生素用芽孢桿菌制劑(A)、雙歧桿菌(B)、益菌多(C)，采用上述配方制成配合飼料飼喂牙鲆50天，結(jié)果如表3，4。
表3益生素對牙鲆生長的影響開始結(jié)束益生素種類 均重均重 成活率(％)增重率(％)比增重率(g) (g)對照組 46 56.7 98 23.2 1000.1g/kg(A) 48.584.0 10073.2 3160.1g/kg(B) 42.570.7 98 66.4 2871g/kg(C)45.66210035.9 155表4益生素最佳用量對牙鲆生長的影響開始結(jié)束益生素用量 均重均重 成活率(％)增重率(％)比增重率(g) (g)對照組 57 78.7 98 38.1 1000.1g/kg(B) 55.694.3 10069.6 1830.2g/kg(B) 59 102.1 99 73.1 1920.5g/kg(B) 63.689.0 10039.9 105從上表看出0.1g/kg-0.2g/kg B雙歧桿菌的效果最好。
3.免疫增強(qiáng)劑免疫增強(qiáng)劑是近些年被國際養(yǎng)殖界普遍重視的一類能提高養(yǎng)殖魚類抗病力的物質(zhì)，能提高魚體的非特異性免疫力，對特異性免疫沒有應(yīng)答反應(yīng)。魚類服用免疫增強(qiáng)劑可短時提高魚體的免疫力，不會使魚類產(chǎn)生免疫記憶。本試驗(yàn)采用5種免疫增強(qiáng)劑，所用飼料基料相同，進(jìn)行了2個月的喂養(yǎng)試驗(yàn)，每隔30天對牙鲆的非特異性免疫指標(biāo)進(jìn)行了測定，結(jié)果如下1)免疫增強(qiáng)劑對牙鲆血清溶菌酶活性的影響測定結(jié)果如表5
表5免疫增強(qiáng)劑對牙鲆血清溶菌酶活性的影響血清溶菌酶活性(ug/mL)清溶菌酶活性(ug/mL)組別試驗(yàn)30天 試驗(yàn)60天VE80mg/kg，魚油60g/kg1.40 1.50VE300mg/kg，魚油60g/kg 1.50 1.75VE80mg/kg，花生油60g/kg 1.35 1.42VE300mg/k，花生油60g/kg 1.40 1.63甲殼胺0.5g/kg 1.65 1.80對照 1.15 1.25從表5可看出牙鲆飼料中添加免疫增強(qiáng)劑與對照組(未添加免疫增強(qiáng)劑)相比血清溶菌酶活性均有提高；在前2個月內(nèi)隨著時間的推移添加免疫增強(qiáng)劑組的血清溶菌酶活性有增加的趨勢。
2)免疫增強(qiáng)劑對牙鲆血液白細(xì)胞總數(shù)的影響結(jié)果如表6。
表6飼料中添加免疫增強(qiáng)劑對牙鲆血液白細(xì)胞總數(shù)的影響WBC計數(shù) WBC計數(shù)組別 (個/ml) (個/ml)試驗(yàn)30天試驗(yàn)60天VE80mg/kg，魚油60g/kg4.7×1076.0×107VE300mg/kg，魚油60g/kg 5.3×1076.6×107VE80mg/kg，花生油60g/kg 3.9×1075.5×107VE300mg/kg，花生油60g/kg 5.6×1076.2×107甲殼胺0.5g/kg 5.1×1076.8×107對照 5.2×1075.5×107從表6可看出牙鲆飼料中添加免疫增強(qiáng)劑與對照組(未添加免疫增強(qiáng)劑)相比血液白細(xì)胞總數(shù)均有提高，而且隨著時間的推移自細(xì)胞總數(shù)有增加的趨勢。
3)免疫增強(qiáng)劑對大菱鲆白細(xì)胞吞噬率的影響如表7表7免疫增強(qiáng)劑對牙鲆白細(xì)胞吞噬率的影響吞噬率 吞噬率組別試驗(yàn)30天 試驗(yàn)60天VE80mg/kg，魚油60g/kg 65％ 71％VE300mg/kg，魚油60g/kg68％ 78％VE80mg/kg，花生油60g/kg 64％ 73％VE300mg/kg，花生油60g/kg 67％ 75％甲殼胺0.5g/kg 52％ 66％對照 42％ 43％
從表7可看出牙鲆飼料中添加免疫增強(qiáng)劑與對照組(未添加免疫增強(qiáng)劑)相比血液白細(xì)胞總數(shù)均有提高，而且隨著時間的推移白細(xì)胞總數(shù)有增加的趨勢。
4)免疫增強(qiáng)劑對牙鲆血清補(bǔ)體活性的影響如表8表8免疫增強(qiáng)劑對牙鲆血清補(bǔ)體活性的影響補(bǔ)體活性U/mL 補(bǔ)體活性U/mL組別試驗(yàn)30天 試驗(yàn)60天VE80mg/kg，魚油60g/kg 5.48 6.89VE300mg/kg，魚油60g/kg 6.45 8.35VE80mg/kg，花生油60g/kg 5.34 6.00VE300mg/kg，花生油60g/kg6.87 7.14甲殼胺0.5g/kg7.49 9.18對照 4.37 5.16從表8可看出試驗(yàn)期間牙鲆飼料中添加免疫增強(qiáng)劑其血清補(bǔ)體活性比對照組(未添加免疫增強(qiáng)劑)均有提高；在前2個月內(nèi)隨著時間的推移添加免疫增強(qiáng)劑組血清補(bǔ)體活性明顯有增加的趨勢。
5)免疫增強(qiáng)劑對牙鲆增重率和成活率的影響試驗(yàn)期間牙鲆增重率和成活率如表9、表10所示，實(shí)驗(yàn)組增重率明顯優(yōu)于對照組，說明所用免疫增強(qiáng)劑對牙鲆增重同樣有促進(jìn)作用。試驗(yàn)后期增重率降低可能是溫度降低所致。試驗(yàn)期間牙鲆的成活率較高，基本實(shí)驗(yàn)所用免疫增強(qiáng)劑對牙鲆成活率無不良影響。
表9免疫增強(qiáng)劑對牙鲆增重率的影響增重率 增重率組別試驗(yàn)30天試驗(yàn)60天VE80mg/kg，魚油60g/kg 40.53％ 35.15％VE300mg/kg，魚油60g/kg 59.14％ 40.54％VE80mg/kg，花生油60g/kg35.21％ 25.65％VE300mg/kg，花生油60g/kg 29.20％ 21.54％甲殼胺0.5g/kg 43.61％ 37.78％對照34.15％ 25.32％
表10免疫增強(qiáng)劑對牙鲆成活率的影響成活率 成活率組別試驗(yàn)30天 試驗(yàn)60天VE80mg/kg，魚油60g/kg 100％ 100％VE300mg/kg，魚油60g/kg 100％ 100％VE80mg/kg，花生油60g/kg畫 100％ 100％VE300mg/kg，花生油60g/kg 100％ 98％甲殼胺0.5g/kg 100％ 98％對照100％ 98％在上述試驗(yàn)中營養(yǎng)型免疫增強(qiáng)劑VE300mg/kg，魚油60g/kg的效果最好，多糖類甲殼胺對牙鲆的免疫也有一定的作用，故采用VE300mg/kg，魚油60g/kg與0.5g/kg甲殼胺同時使用，飼喂牙鲆60天的效果如表11表11.VE300mg/kg，魚油6％與0.5g/kg甲殼胺協(xié)同作用效果溶菌酶活性補(bǔ)體活性吞噬率增重率成活率組別(ug/mL) U/mL(％) (％) (％)VE300mg/kg，魚油60g/kg， 1.85 11.0 8352.5 100對照 1.2 5.20 4226.25100實(shí)驗(yàn)表明VE300mg/kg，魚油60g/kg與0.5g/kg甲殼胺同時使用，牙鲆的非特異性免疫指標(biāo)及增重率明顯優(yōu)于對照組和單獨(dú)使用時的結(jié)果，試驗(yàn)期間牙鲆的成活率較高，即本實(shí)驗(yàn)所用免疫增強(qiáng)劑對牙鲆成活率無不良影響。
本發(fā)明與已有技術(shù)的對比，具有以下特點(diǎn)在目前水產(chǎn)飼料中使用的大多是喹乙醇、激素類及藥物類添加劑，減少疾病發(fā)病率通常是在飼料中添加抗生素。本發(fā)明的無污染無殘留添加劑，首先對牙鲆無毒害作用，其次是在牙鲆體內(nèi)無殘留，對人類健康無危害作用，再則其排泄物對環(huán)境無污染。
1.在飼料中添加復(fù)合酶制劑，因飼料中的蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物都需要有體內(nèi)分泌的各種酶將其分解成能被動物利用的形式。各種酶參與體內(nèi)發(fā)生各自的生化反應(yīng)，包括激活或抑制。因此飼料中添加復(fù)合酶能補(bǔ)充動物體內(nèi)源性酶的不足或提供動物因降解養(yǎng)分而體內(nèi)不存在的一種消化能力，同時減少未消化的氮、磷及其它營養(yǎng)物質(zhì)的排出量。復(fù)合酶制劑本身不會對飼料有任何安全隱患。
2.在飼料中添加益生素，補(bǔ)充有益菌群，能對許多消化道的病原菌起抑制作用，從而提高機(jī)體的抗病能力。益生素進(jìn)入機(jī)體后，通過種群自生的繁殖和代謝，可以產(chǎn)生多種有益物質(zhì)，可以改善消化道菌群平衡，降解飼料中的某些抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)，從而提高飼料轉(zhuǎn)化率，促進(jìn)動物生長。益生素為有益菌不會對機(jī)體產(chǎn)生有毒有害物質(zhì)殘留。
3.免疫增強(qiáng)劑能提高魚體的非特異性免疫能力，對特異性免疫沒有應(yīng)答反應(yīng)。魚類服用免疫增強(qiáng)劑可短時提高魚體的免疫力，不會使魚類產(chǎn)生免疫記憶。過去一般采用抗生素殺滅有害的微生物，治療魚病，但抗生素在殺滅有害菌的同時，也會殺死有益菌，破壞微生物的生態(tài)平衡，而且長期使用抗生素會產(chǎn)生耐藥性，為克服耐藥性，飼養(yǎng)者不斷啟用新的抗生素和加大抗生素的使用劑量，形成一種惡性循環(huán)，對人類健康造成了日益嚴(yán)重的威脅。為此發(fā)達(dá)國家已逐步禁止抗生素飼料添加劑的使用，我國推廣應(yīng)用綠色飼料添加劑的呼聲也日益高漲，綠色的抗生素替代品的應(yīng)用已成為一種時代的趨勢。
本發(fā)明技術(shù)，利用酶制劑、益生素及免疫增強(qiáng)劑試產(chǎn)無污染、無殘留添加劑1噸，添加于牙鲆飼料中，大規(guī)模生產(chǎn)，可使牙鲆的增重率提高50％，提高存活率30％，飼料轉(zhuǎn)化率提高25％，牙鲆的飼料系數(shù)達(dá)1.13，增強(qiáng)了魚的體質(zhì)，提高了免疫力，明顯減少水產(chǎn)業(yè)生產(chǎn)對周邊環(huán)境造成的污染。同時，由于具有使用方便，無三致作用，無毒副作用，無污染，無殘留，用量小，生產(chǎn)成本低，效果顯著等特點(diǎn)，是一種高效、優(yōu)質(zhì)無公害的新型綠色生物飼料添加劑。將推動綠色養(yǎng)殖業(yè)和綠色添加劑產(chǎn)業(yè)，建立高效、優(yōu)質(zhì)、無公害海水魚生產(chǎn)技術(shù)體系。
權(quán)利要求
1.一種牙鲆配合飼料添加劑的配制方法，其特征在于它是由酶制劑、益生素、免疫增強(qiáng)劑配制而成，其配料用量為酶制劑為3g/kg；益生素0.1g/kg-0.2g/kg；免疫增強(qiáng)劑維生素VE為300mg/kg，魚油為60g/kg，同時添加甲殼胺，用量為0.5g/kg。
2.根椐權(quán)利要求1所述的一種牙鲆配合飼料添加劑的配制方法，其特征在于它的酶制劑是蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶及纖維素酶的復(fù)合酶。
3.根椐權(quán)利要求1所述的一種牙鲆配合飼料添加劑的配制方法，其特征在于它的益生素是采用芽孢桿菌制劑。
4.根椐權(quán)利要求1所述的一種牙鲆配合飼料添加劑的配制方法，其特征在于它的免疫增強(qiáng)劑為維生素VE與不飽和脂肪酸(魚油)組合，同時添加甲殼胺。
全文摘要
一種牙鲆配合飼料添加劑的配制方法，其添加劑是由酶制劑、益生素和免疫增強(qiáng)劑配制而成。酶制劑是蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶及纖維素酶組合的復(fù)合酶，用量為V
文檔編號A23K1/18GK1473488SQ03138750
公開日2004年2月11日 申請日期2003年6月30日 優(yōu)先權(quán)日2003年6月30日
發(fā)明者梁萌青, 常青, 王家林 申請人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所