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定點(diǎn)引入不配對(duì)區(qū)域的高效保真pcr方法技術(shù)資料下載

技術(shù)編號(hào):478315

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專利摘要本發(fā)明提供一種定點(diǎn)引入不配對(duì)區(qū)域的高效保真PCR方法,定點(diǎn)引入不配對(duì)區(qū)域的高效保真的2步PCR方法,分別使用不同性質(zhì)的聚合酶,在各自最優(yōu)化的緩沖體系中進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)先使用保真性低而具備高擴(kuò)增能力的tag酶進(jìn)行PCR反應(yīng),解決引物與模板不配對(duì)的問題,得到具有與原始模板不配對(duì)的區(qū)域(含酶切位點(diǎn)的引物區(qū)域或點(diǎn)突變區(qū)域)的產(chǎn)物;繼而專用高保真Pfu酶以前一步產(chǎn)物為模板,完全匹配地進(jìn)行擴(kuò)增,很好解決了這類具不配對(duì)區(qū)域的PCR反應(yīng)中的擴(kuò)增效率與高保真的問題。專利說明定點(diǎn)引入不配對(duì)區(qū)域的高效保真PCR方法技術(shù)領(lǐng)域[0...
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