高分辨四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜儀質(zhì)量軸用校正液及其使用方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種高分辨四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜儀質(zhì)量軸用校正液，將羥基苯甲酸、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、木犀草苷、綠原酸、甘草次酸、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷和三七皂苷R1溶解在溶劑中制備得到；溶劑選自水、甲醇、甲酸、乙腈中的至少一種；校正液中，各溶質(zhì)的質(zhì)量份數(shù)如下:對(duì)羥基苯甲酸1～3份；對(duì)羥基苯甲酸乙酯1～3份；木犀草苷1～3份；綠原酸1～3份；甘草次酸1～3份；芍藥苷1～3份；苯甲酰芍藥苷1～3份；三七皂苷R1 1～3份；校正液中各溶質(zhì)的質(zhì)量體積濃度為0.1～10μg/ml。本發(fā)明公開(kāi)的校正液的配方簡(jiǎn)單、成本低，溶液狀態(tài)下穩(wěn)定性高，且一級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜的校正誤差均小于5ppm。
【專利說(shuō)明】
高分辨四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜儀質(zhì)量軸用校正液及其使用方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及質(zhì)譜分析的技術(shù)領(lǐng)域，尤其設(shè)及一種高分辨四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜儀質(zhì) 量軸用校正液及其使用方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 高分辨四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜儀(QT0F)是一類能獲取精確分子量的質(zhì)譜儀，能推斷 出化學(xué)結(jié)構(gòu)式，比低分辨質(zhì)譜的定性能力更加強(qiáng)，已廣泛應(yīng)用于有機(jī)小分子結(jié)構(gòu)分析、天然 藥物成分鑒定、藥物代謝物鑒定和多膚蛋白質(zhì)質(zhì)量分析等科學(xué)領(lǐng)域。
[0003] 質(zhì)譜儀飛行管質(zhì)量軸下簡(jiǎn)稱"質(zhì)量軸"）準(zhǔn)確度對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性至關(guān)重要， 而其準(zhǔn)確度會(huì)隨時(shí)間推移發(fā)生偏移，因而要求實(shí)驗(yàn)前和實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行校正，影響質(zhì)量軸偏移 的因素有很多，主要包括電源、環(huán)境溫度、濕度、真空度和儀器污染等。
[0004] 為了保證質(zhì)量軸的準(zhǔn)確性，現(xiàn)有技術(shù)(例如SCIEX公司四級(jí)桿串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜儀 設(shè)備)采用試驗(yàn)前校正、試驗(yàn)中不校準(zhǔn)的策略，該法可W避免校正液的離子抑制效應(yīng)，其缺 點(diǎn)是隨著校正間隔的延長(zhǎng)，準(zhǔn)確度就難W保證。為此，現(xiàn)有技術(shù)建議每2小時(shí)或者每5個(gè)樣品 校正一次，W保證質(zhì)量軸的準(zhǔn)確性，但頻繁校正會(huì)帶來(lái)校正液消耗量較大的問(wèn)題。
[0005] 根據(jù)W往經(jīng)驗(yàn)，一次實(shí)驗(yàn)需消耗校正液10~20ml，校正液的市售價(jià)格約為1700元/ 100ml，因此高分辨質(zhì)譜儀的單次運(yùn)行成本是非常高的。在代謝組學(xué)、過(guò)程控制等系列實(shí)驗(yàn) 中，校正液消耗量更加巨大，運(yùn)行費(fèi)用占比更高已經(jīng)成為共識(shí)。
[0006] 而現(xiàn)有市售校準(zhǔn)液有二個(gè)缺陷：
[0007] 第一，質(zhì)荷比為m/zl44和m/z403的化合物在溶液中的穩(wěn)定性差；
[000引第二，Wm/z403為母離子的二級(jí)校正存在不足，低質(zhì)量段（100~600)二級(jí)質(zhì)譜離 子的質(zhì)量誤差符合要求(5ppmW內(nèi)），高質(zhì)量段(600W上）的質(zhì)量誤差偏大，且隨著分子量變 大，誤差逐漸變大。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明公開(kāi)了一種高分辨四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜儀質(zhì)量軸用校正液，該校正液的配 方簡(jiǎn)單、成本低，溶液狀態(tài)下穩(wěn)定性高，在負(fù)離子模式下校正一級(jí)質(zhì)譜質(zhì)量軸的誤差小于 5ppm，校正二級(jí)質(zhì)譜質(zhì)量軸時(shí)，校正范圍有大幅提升，滿足現(xiàn)下高分辨四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜 儀進(jìn)行質(zhì)量軸校正的需求。
[0010] -種高分辨四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜儀質(zhì)量軸用校正液，將徑基苯甲酸、對(duì)徑基苯甲 酸乙醋、木犀草巧、綠原酸、甘草次酸、巧藥巧、苯甲酯巧藥巧和Ξ屯皂巧Ri溶解在溶劑中制 備得到；
[0011] 所述的溶劑選自水、甲醇、甲酸、乙臘中的至少一種；
[0012] 所述校正液中，各溶質(zhì)的質(zhì)量份數(shù)如下： 對(duì)搔基苯甲酸 1~3份； 對(duì)經(jīng)基苯甲酸芭釀 1~3份； 木犀草巧 I~3份； 綠原酸 1~3份；
[0013] 甘草次酸 1~3份； 巧藥昔 1~3份； 苯甲酯巧藥昔 1~3份； 立屯皂昔民1 1~3份；
[0014] 所述校正液中各溶質(zhì)的質(zhì)量體積濃度為0.1~10μg/ml。
[0015] 本發(fā)明通過(guò)配制濃度合適的校正液用于一級(jí)質(zhì)譜質(zhì)量軸的校正，并使用質(zhì)荷比較 大的離子為母離子，用其子離子校正二級(jí)質(zhì)譜質(zhì)量軸。該校正液不僅能夠很好的校正一級(jí) 質(zhì)譜質(zhì)量軸，還將二級(jí)質(zhì)譜質(zhì)量軸的校正范圍擴(kuò)大一倍W上，并且運(yùn)種校正液配方簡(jiǎn)單，質(zhì) 量穩(wěn)定，易于實(shí)施，適用于批量生產(chǎn)。
[0016] 作為優(yōu)選，所述的溶劑包括乙臘-水混合溶劑、甲酸-甲醇-水混合溶劑、甲酸-乙 臘-水混合溶劑。
[0017]作為優(yōu)選，所述乙臘-7jc混合溶劑中，乙臘與水的體積比為4:1;
[001引所述甲酸-甲醇-水混合溶劑中，甲酸、甲醇與水的體積比為0.002:1:1;
[0019] 所述甲酸-乙臘-水混合溶劑中，甲酸、乙臘與水的體積比為0.005:4:1。
[0020] 作為優(yōu)選，將等質(zhì)量的徑基苯甲酸、對(duì)徑基苯甲酸乙醋、木犀草巧、綠原酸、甘草次 酸、巧藥巧、苯甲酯巧藥巧和Ξ屯皂巧Ri溶解在乙臘-水混合溶劑，乙臘與水的體積比為4: 1;
[0021] 所述校正液的總質(zhì)量體積濃度為80μg/ml。
[0022] 作為優(yōu)選，所述校正液中，徑基苯甲酸、對(duì)徑基苯甲酸乙醋、木犀草巧、綠原酸、甘 草次酸、巧藥巧、苯甲酯巧藥巧和Ξ屯皂巧Ri的質(zhì)量比為1:3:1:3:1:3:1:3;
[0023] 溶劑為甲酸-甲醇-水混合溶劑，甲酸、甲醇與水的體積比為0.002:1:1;
[0024] 所述校正液中，徑基苯甲酸、木犀草巧、甘草次酸和苯甲酯巧藥巧的質(zhì)量體積濃度 均為 〇.83：3μg/ml。
[0025] 對(duì)徑基苯甲酸乙醋、綠原酸、巧藥巧和Ξ屯皂巧化的質(zhì)量體積濃度均為2.扣g/ml。 [00%]作為優(yōu)選，將等質(zhì)量的徑基苯甲酸、對(duì)徑基苯甲酸乙醋、木犀草巧、綠原酸、甘草次 酸、巧藥巧、苯甲酯巧藥巧和Ξ屯皂巧Ri溶解在甲酸-乙臘-水混合溶劑中，甲酸、乙臘與水 的體積比為0.005:4:1;
[0027] 所述校正液的總質(zhì)量體積濃度為祉g/ml。
[0028] 本發(fā)明還公開(kāi)了利用上述的校正液對(duì)高分辨四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜儀質(zhì)量軸進(jìn)行 校正的方法，負(fù)離子模式下進(jìn)行一級(jí)質(zhì)譜校正，Wm/zl37.02442(對(duì)徑基苯甲酸）、m/ zl65.05572(對(duì)徑基苯甲酸乙醋）、m/z285.04046(木犀草素）、m/z353.08782(綠原酸）、m/ z469.33233(甘草次酸）、m/z525.16136(巧藥巧+甲酸）、m/z629.18758(苯甲酯巧藥巧+甲 酸）、πι/ζ931.52719(Ξ屯皂巧Ri)作為參比離子，校正一級(jí)質(zhì)譜飛行管質(zhì)量軸。
[0029] 負(fù)離子模式下，進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜校正，Wm/z931.52710為母離子，加上60V的碎裂能 量，Wm/zl61.04555、m/z475.37928、m/z637.43211 和m/z931.52719作為參比離子，校正二 級(jí)質(zhì)譜飛行管質(zhì)量軸。
[0030] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)：
[0031 ] 1、配方成分易得，配置簡(jiǎn)單，成本低；
[0032] 2、負(fù)離子模式下，使用該校正溶液校正一級(jí)質(zhì)譜質(zhì)量軸，誤差小于5ppm，與市售產(chǎn) 品的效果一致;校正二級(jí)質(zhì)譜質(zhì)量軸時(shí)，m/z( 100~1200)范圍內(nèi)的誤差小于5ppm，市售產(chǎn)品 僅在m/z( 100~600)范圍內(nèi)的誤差小于5ppm，校正范圍有大幅提升。
【附圖說(shuō)明】
[0033] 圖1為實(shí)施例3中一級(jí)負(fù)離子質(zhì)量軸校正質(zhì)譜圖；
[0034] 圖2為實(shí)施例3中二級(jí)負(fù)離子質(zhì)量軸校正質(zhì)譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0035] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步說(shuō)明。
[0036] 實(shí)施例1
[0037] 稱取對(duì)徑基苯甲酸、對(duì)徑基苯甲酸乙醋、木犀草素、綠原酸、甘草次酸、巧藥巧、苯 甲酯巧藥巧和Ξ屯皂巧化各30mg，溶解于化乙臘-水溶液（乙臘、水體積比為4:1)中，配制成 總濃度為80μg/ml的校正液，使用CDS將校正液累入離子源(流速0.05ml/min)，霧化電離后， 進(jìn)入質(zhì)譜。負(fù)離子模式下，做一級(jí)校正時(shí)，分別用m/zl37.02442、m/zl65.05572、m/ z285.04046、m/z353.08782、m/z469.33233、m/z5化.16136、m/z629.18758、m/z931.52719作 為參比離子，進(jìn)行一級(jí)質(zhì)量軸校正。m/z931.52710為母離子，加上60V的碎裂能量，Wm/ zl61.04555、m/z475.37928、m/z637.43211、m/z931.52719 為參比離子校正二級(jí)質(zhì)量軸。
[0038] 校正后采集數(shù)據(jù)的條件如下：色譜柱為安捷倫Eclipse Plus-Ci8(100mmX4.6mm i . d.，1.祉m); WO. 1 %甲酸溶液為流動(dòng)相A，WO. 1 %甲酸乙臘為流動(dòng)相B，線性梯度洗脫，流 速為0.7ml/min;柱溫為30°C ;檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm; lOmg/ml人參提取物進(jìn)樣化1，質(zhì)譜條件 Triple T0F 5600+飛行時(shí)間液質(zhì)聯(lián)用儀:負(fù)離子掃描模式;掃描范圍:m/z 100-2000;霧化 氣（GSl):50psi;霧化氣（GS2):50psi;氣簾氣（CUR):30psi;離子源溫度（TEM):550°C (負(fù)）； 離子源電壓（IS) :-4500V(負(fù)）；一級(jí)掃描：去簇電壓：100V;聚焦電壓：10V;二級(jí)掃描:采用 IDA模式，CID能量為30、50和70V。
[0039] 測(cè)得數(shù)據(jù)經(jīng)peakview軟件分析，幾個(gè)典型化合物的質(zhì)量誤差見(jiàn)表1，由表1可知，一 級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜的質(zhì)量誤差均小于5ppm，符合高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)的質(zhì)量要求。
[0040] 表 1
[0041]
[0042] 實(shí)施例2
[0043] 稱取對(duì)徑基苯甲酸lOmg、對(duì)徑基苯甲酸乙醋30mg、木犀草素1 Omg、綠原酸30mg、甘 草次酸lOmg、巧藥巧30mg、苯甲酯巧藥巧1 Omg和Ξ屯皂巧Ri 30mg，溶解于1化甲酸-甲醇-水 (甲酸、甲醇、水的體積比為0.002:1:1)溶液配制成校正液，使用CDS將溶液累入離子源(流 速0.5ml/min)，霧化電離后，進(jìn)入質(zhì)譜。負(fù)離子模式下，做一級(jí)校正時(shí)，分別用m/ zl37.02442、m/zl65.05572、m/z285.04046、m/z353.08782、m/z469.33233、m/z525.16136、 m/z629.18758、m/z931.52719做為參比離子，進(jìn)行一級(jí)質(zhì)量軸校正。m/z931.52710為母離 子，加上60V的碎裂能量，Wm/zl61.04555、m/z475.37928、m/z637.43211、m/z931.52719為 參比離子校正二級(jí)質(zhì)量軸。
[0044] 分析方法同實(shí)施例1，測(cè)得數(shù)據(jù)經(jīng)peakview軟件分析，幾個(gè)典型化合物的質(zhì)量誤差 見(jiàn)表2,由表2可知，一級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜的質(zhì)量誤差均小于5ppm，符合高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)的質(zhì)量要 求。
[0045] 表 2
[0046]
[0047] 實(shí)施例3
[004引稱取對(duì)徑基苯甲酸lOmg、對(duì)徑基苯甲酸乙醋lOmg、木犀草素1 Omg、綠原酸lOmg、甘 草次酸lOmg、巧藥巧lOmg、苯甲酯巧藥巧10111邑和^屯皂巧Ri lOmg，溶解于10L甲酸-乙臘-水 (甲酸、乙臘、水的體積比為0.005:4:1)溶液配制成校正液，使用CDS將溶液累入離子源(流 速0.5ml/min)，霧化電離后，進(jìn)入質(zhì)譜。負(fù)離子模式下，做一級(jí)校正時(shí)，分別用m/ zl37.02442、m/zl65.05572、m/z285.04046、m/z353.08782、m/z469.33233、m/z525.16136、 m/z629.18758、m/z931.52719作為參比離子，進(jìn)行一級(jí)質(zhì)量軸校正。m/z931.52710為母離 子，加上60V的碎裂能量，Wm/zl61.04555、m/z475.37928、m/z637.43211、m/z931.52719為 參比離子校正二級(jí)質(zhì)量軸。
[0049]分析方法同實(shí)施例1，測(cè)得數(shù)據(jù)經(jīng)peakview軟件分析，幾個(gè)典型化合物的質(zhì)量誤差 見(jiàn)表3,由表3可知，一級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜的質(zhì)量誤差均小于5ppm，符合高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)的質(zhì)量要 求。
[(K)加 ]表S [0化1 ]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種高分辨四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜儀質(zhì)量軸用校正液，其特征在于， 將羥基苯甲酸、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、木犀草苷、綠原酸、甘草次酸、芍藥苷、苯甲酰芍藥 苷和三七皂苷Ri溶解在溶劑中制備得到； 所述的溶劑選自水、甲醇、甲酸、乙腈中的至少一種； 所述校正液中，各溶質(zhì)的質(zhì)量份數(shù)如下： 對(duì)羥基苯甲酸 1~3份； 對(duì)羥基苯甲酸乙酯 1~3份; 木犀草苷 1~3份； 綠原酸 1~3份； 甘草次酸 1~3份； 芍藥苷 ：1~3份·， 苯甲酰芍葯苷 1~3份； 三七皂苷抝 1~3份;： 所述校正液中各溶質(zhì)的質(zhì)量體積濃度為〇. 1~1 〇μg/ml。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的高分辨四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜儀質(zhì)量軸用校正液，其特征在于， 所述的溶劑包括乙腈-水混合溶劑、甲酸-甲醇-水混合溶劑、甲酸-乙腈-水混合溶劑。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的高分辨四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜儀質(zhì)量軸用校正液，其特征在于， 所述乙腈-水混合溶劑中，乙腈與水的體積比為4:1; 所述甲酸-甲醇-水混合溶劑中，甲酸、甲醇與水的體積比為〇. 002:1:1; 所述甲酸-乙腈-水混合溶劑中，甲酸、乙腈與水的體積比為0.005:4:1。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的高分辨四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜儀質(zhì)量軸用校正液，其特征在于， 將等質(zhì)量的羥基苯甲酸、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、木犀草苷、綠原酸、甘草次酸、芍藥苷、苯甲酰 芍藥苷和三七皂苷心溶解在乙腈-水混合溶劑，乙腈與水的體積比為4:1; 所述校正液的總質(zhì)量體積濃度為SOμg/ml。5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的高分辨四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜儀質(zhì)量軸用校正液，其特征在于， 所述校正液中，羥基苯甲酸、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、木犀草苷、綠原酸、甘草次酸、芍藥苷、苯甲 酰芍藥苷和三七皂苷Ri的質(zhì)量比為1:3:1:3:1:3:1:3; 溶劑為甲酸-甲醇-水混合溶劑，甲酸、甲醇與水的體積比為〇. 002:1:1; 所述校正液中，羥基苯甲酸、木犀草苷、甘草次酸和苯甲酰芍藥苷的質(zhì)量體積濃度均為 0·833μg/ml。 對(duì)羥基苯甲酸乙酯、綠原酸、芍藥苷和三七皂苷的質(zhì)量體積濃度均為2.5μg/ml。6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的高分辨四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜儀質(zhì)量軸用校正液，其特征在于， 將等質(zhì)量的羥基苯甲酸、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、木犀草苷、綠原酸、甘草次酸、芍藥苷、苯甲酰 芍藥苷和三七皂苷心溶解在甲酸-乙腈-水混合溶劑中，甲酸、乙腈與水的體積比為0.005: 4:1； 所述校正液的總質(zhì)量體積濃度為Sμg/ml。7. -種利用權(quán)利要求1~6任一權(quán)利要求所述的校正液對(duì)高分辨四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜 儀質(zhì)量軸進(jìn)行校正的方法，其特征在于，負(fù)離子模式下進(jìn)行一級(jí)質(zhì)譜校正，以m/ zl37.02442、m/zl65.05572、m/z285.04046、m/z353.08782、m/z469.33233、m/z525.16136、 m/z629.18758和m/z931.52719作為參比離子，校正一級(jí)質(zhì)譜飛行管質(zhì)量軸。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的對(duì)高分辨四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜儀質(zhì)量軸進(jìn)行校正的方法，其 特征在于，負(fù)離子模式下，進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜校正，以m/z931.52710為母離子，加上60V的碎裂能 量，以m/zl61 · 04555、m/z475 · 37928、m/z637 · 43211 和m/z931 · 52719作為參比離子，校正二 級(jí)質(zhì)譜飛行管質(zhì)量軸。
【文檔編號(hào)】H01J49/40GK105869984SQ201610238237
【公開(kāi)日】2016年8月17日
【申請(qǐng)日】2016年4月15日
【發(fā)明人】葛志偉, 吳筱丹, 袁京群, 李士敏, 朱亞爾
【申請(qǐng)人】浙江大學(xué)