一種氨基吡啶異構(gòu)體的檢測方法
【專利摘要】一種氨基吡啶異構(gòu)體的檢測方法。該方法是采用高效液相色譜法進行的，包括下述步驟：（1）配制起始原料樣品溶液；和（2）將步驟（1）所得樣品溶液注高效液相色譜儀，采用流動相進行等度洗脫，并記錄色譜圖；其中，所述高效液相色譜法的色譜柱固定相用直鏈淀粉?三(3,5?二甲苯基氨基甲酸酯)為填充劑；流動相正庚烷?異丙醇?二乙胺（90∶10∶0.05）為流動相。本發(fā)明的檢測方法在同一液相條件下測定起始原料異構(gòu)體測定方法專屬性強、檢測結(jié)果準確可信。
【專利說明】
一種氨基吡啶異構(gòu)體的檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及藥物檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種氨基吡啶異構(gòu)體的檢測方法?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]利格列汀(Linagliptin Tablets)，利格列汀是一種二肽基肽酶_4(DPP_4)抑制劑，可在飲食控制和體育鍛煉的基礎(chǔ)上改善2型糖尿病(T2DM)成年患者的血糖控制水平。期制備原料中常用到S-(R)_3-叔丁氧羰基氨基哌啶，但是其具有多種異構(gòu)體，當前還沒有很好的檢測方法。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種氨基吡啶異構(gòu)體的檢測方法。
[0004]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案:一種氨基吡啶異構(gòu)體的檢測方法，該方法是采用高效液相色譜法進行的，其包括下述步驟:(1)配制利格列汀起始原料樣品溶液，所述利格列汀起始原料樣品溶液包括供試品溶液;和對照品溶液；(2)將步驟(1)所得樣品溶液注入高效液相色譜儀，采用流動相作為流動相進行梯度洗脫，并記錄色譜圖；其中，所述供試品溶液的制備方法包括下述步驟:精密稱取利格列汀起始原料，加稀釋液溶解并稀釋至利格列汀的濃度為l〇mg/ml，得到供試品溶液；所述高效液相色譜法的色譜柱固定相用直鏈淀粉-三(3,5_二甲苯基氨基甲酸酯)為填充劑；流動相:正庚烷-異丙醇-二乙胺(90:10:0.05)。
[0005]優(yōu)選的，所述流動相的配制為正庚烷的體積:異丙醇:二乙胺溶液的體積=90:10: 0.05〇
[0006]優(yōu)選的，所述高效液相色譜法的梯度洗脫順序如下:0-20分鐘時流動相為:100體積％。
[0007]優(yōu)選的，所述流動相的流速為1.0ml/min。
[0008]優(yōu)選的，所述高效液相色譜法的色譜柱柱溫為25?40°C，檢測波長為225nm。 [〇〇〇9]優(yōu)選的，所述利格列汀起始原料樣品溶液還包括對照品溶液；取利格列汀約50mg 與S-叔丁氧羰基氨基哌啶對照品約5mg，加流動相5ml溶解，即得對照品溶液;所述對照品溶液的濃度為1 〇mg/m 1。[0〇1〇]優(yōu)選的，所述利格列汀起始原料供試品溶液中起始原料的濃度為10mg/ml。[〇〇11]優(yōu)選的，在步驟(2)中，首先將樣品對照溶液注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測器靈敏度， 使主成分色譜峰的峰高為記錄儀滿量程的80% ;再將供試品溶液和對照品溶液分別注入液相色譜儀，采用流動相進行等度洗脫，并記錄色譜圖；優(yōu)選地，注入液相色譜儀中樣品溶液的量均為i〇yl。
[0012]優(yōu)選的，所述高效液相色譜法的色譜柱柱溫為30°C。
[0013]本發(fā)明檢測方法在同一液相條件下測定起始原料異構(gòu)體測定方法專屬性強、檢測結(jié)果準確可信。
[0014]實施方式采用高效液相色譜法進行的，步驟包括:(1)配制利格列汀起始原料樣品溶液，所述利格列汀起始原料樣品溶液包括供試品溶液;和對照品溶液；(2)將步驟(1)所得樣品溶液注入高效液相色譜儀，采用流動相作為流動相進行梯度洗脫，并記錄色譜圖；其中，所述供試品溶液的制備方法包括下述步驟:精密稱取利格列汀起始原料，加稀釋液溶解并稀釋至利格列汀的濃度為l〇mg/ml，得到供試品溶液；所述高效液相色譜法的色譜柱固定相用直鏈淀粉-三(3,5_二甲苯基氨基甲酸酯)為填充劑；流動相:正庚烷-異丙醇-二乙胺(90:10:0.05)。
[0015]色譜條件:色譜柱:Chiralpak AD-H 5um，25cmX4.6mm 流速:l.〇ml/min檢測波長:225nm進樣量:10ul柱溫:30°C流動相:正庚烷-異丙醇-二乙胺(90:10:0.05)樣品配制:供試品:取本品適量，用流動相溶解并定量稀釋制成每lml含10mg的樣品。[0〇16 ] 對照品:取本品約5 Omg，與S-叔丁基羰基氨基哌啶對照品月5mg，加流動相5m 1溶解。[0〇17]測定法:取對照品l〇ul注入液相色譜儀，S異構(gòu)體峰與主峰的分離度應(yīng)符合要求。取供試品溶液 l〇ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，僅對S異構(gòu)體峰與主峰進行積分。供試品溶液色譜圖中， 按面積歸一化法計算，S異構(gòu)體不得過0.2%。
【主權(quán)項】
1.一種氨基吡啶異構(gòu)體的檢測方法，所述起始原料異構(gòu)體包括S-(R)-3-叔丁氧羰基氨 基哌啶，該方法是采用高效液相色譜法進行的，其特征在于，包括下述步驟:(1)配制利格列汀起始原料樣品溶液，所述利格列汀起始原料樣品溶液包括供試品溶 液;和對照品溶液；(2)將步驟(1)所得樣品溶液注入高效液相色譜儀，采用流動相作為流動相進行梯度洗 脫，并記錄色譜圖；其中，所述供試品溶液的制備方法包括下述步驟:精密稱取利格列汀起始原料，加稀釋 液溶解并稀釋至利格列汀的濃度為l〇mg/ml，得到供試品溶液；所述高效液相色譜法的色譜柱固定相用直鏈淀粉-三(3,5_二甲苯基氨基甲酸酯)為填 充劑；流動相:正庚烷-異丙醇-二乙胺(90:10:0.05)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述流動相的配制為正庚烷的體積:異丙 醇:二乙胺溶液的體積=90:10:0.05。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的梯度洗脫順序如下:0-20分鐘時流動相為:100體積％。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述流動相的流速為1.0ml/min。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的色譜柱柱溫為25 ?40°C，檢測波長為225nm。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述利格列汀起始原料樣品溶液還包括對 照品溶液;取利格列汀約50mg與S-叔丁氧羰基氨基哌啶對照品約5mg，加流動相5ml溶解，即 得對照品溶液;所述對照品溶液的濃度為1 〇mg/ml。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述利格列汀起始原料供試品溶液中起始 原料的濃度為l〇mg/ml。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟(2)中，首先將樣品對照溶液注入液 相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測器靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為記錄儀滿量程的80% ;再將供試品 溶液和對照品溶液分別注入液相色譜儀，采用流動相進行等度洗脫，并記錄色譜圖；優(yōu)選 地，注入液相色譜儀中樣品溶液的量均為l〇yl。9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的色譜柱柱溫為30r。
【文檔編號】G01N30/02GK105974036SQ201610612294
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年7月31日
【發(fā)明人】岳娟, 丁青竹, 劉斐
【申請人】合肥遠志醫(yī)藥科技開發(fā)有限公司