一種對生肌膏中原料藥進(jìn)行鑒別的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥技術(shù)領(lǐng)域，更具體地說涉及一種對生肌膏中原料藥進(jìn)行鑒別的方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] 中藥治療疾病已經(jīng)有幾千年的歷史了，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，中藥也面臨著現(xiàn)代 化，要走上世界市場，這就要求必須做好中藥質(zhì)量的控制，中藥的成分含量的質(zhì)量控制則是 最關(guān)鍵的，尤其是對于復(fù)方的中藥制劑，要想全面的控制中藥的質(zhì)量，必須做好各成分的含 量的精確測定。
[0003] 生肌膏出自張山雷《瘍科綱要》，是中醫(yī)外科常用藥，由象皮、爐甘石、龜甲、血余、 當(dāng)歸、生地等藥材經(jīng)麻油高溫熬制而成，具有生肌、斂瘡功效，用于治療創(chuàng)傷合并感染、壓迫 性潰瘍、糖尿病、下肢靜脈潰瘍、燒燙傷等所致慢性創(chuàng)面療效顯著。由于劑型原因，該制劑質(zhì) 量控制一直缺乏有效的標(biāo)準(zhǔn)，確定該標(biāo)準(zhǔn)則需要在測定各成分含量時，必須能除去干擾因 素，精確的測定含量，做到效的控制藥物質(zhì)量，保證藥物的安全。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明克服了現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供了一種對生肌膏中原料藥進(jìn)行鑒別的方 法。
[0005] 本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案予以實現(xiàn)。
[0006] -種對生肌膏中原料藥進(jìn)行鑒別的方法，生肌膏包含下列重量組份的原料藥:象 皮15-20份，當(dāng)歸10-15份，血余10-15份，生地20-30份，龜甲20-30份，麻油400-500份，爐甘 石28-32份，生石膏25-30份以及蜂蠟80-100份，按照下述方法進(jìn)行測定：
[0007] 1.象皮的測定：
[0008] 步驟1，象皮供試品溶液的制備:取生肌膏水浴加熱使其熔化，向容器內(nèi)加入熱水， 充分?jǐn)嚢?，置于冰箱放置，待上層凝固后，取下層混懸液，過濾，殘渣加甲醇，超聲處理，過 濾，濾液濃縮后得到象皮供試品溶液；
[0009] 步驟2,象皮對照藥材溶液的制備:取象皮對照藥材用滑石粉燙至發(fā)泡后粉碎成細(xì) 粉，即得象皮粉，向象皮粉內(nèi)加入甲醇，超聲處理，過濾，取濾液，將濾液蒸干后得到殘渣，向 殘渣內(nèi)加入甲醇使殘渣溶解，即得象皮對照藥材溶液；
[0010] 步驟3，不含象皮陰性樣品溶液的制備:按照當(dāng)歸10-15份，血余10-15份，生地SOSO份 ，龜甲 20-30份 ，麻油 400-500 份， 爐甘石28-32份， 生石膏 25-30份以 及蜂蠟 80-100份 ，將 爐甘石、石膏粉碎成細(xì)粉，過篩備用，當(dāng)歸、龜甲、血余、生地與麻油同置鍋內(nèi)炸枯，去渣，過 濾，將蜂蠟完全熔化后濾入熱油內(nèi)，離火降溫，加入爐甘石粉以及石膏粉，不斷攪拌至冷卻 成膏，即得不含象皮陰性樣品，取不含象皮陰性樣品水浴加熱使其熔化，向容器內(nèi)加入熱 水，充分?jǐn)嚢?，置于冰箱放置，待上層凝固后，取下層混懸液，過濾，殘渣加甲醇，超聲處理， 過濾，濾液濃縮后得到不含象皮陰性樣品溶液；
[0011]步驟4，測定過程:第一向展開，取象皮供試品溶液點于硅膠G薄層板X軸原點處，以 環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯為展開劑，沿X軸展開后，取出晾干，第二向展開，取象皮對照藥材溶 液，點于X軸距原點約6-8cm處，以環(huán)己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸為展開劑，沿y軸方向展開 后，取出晾干，置于紫外光燈365nm下觀察；
[0012] 4.血余的測定：
[0013] 步驟1，血余供試品溶液的制備:取生肌膏水浴加熱使其熔化，向容器中加入甲醇， 超聲處理，過濾，濾液濃縮，即得血余供試品溶液；
[0014] 步驟2，血余對照藥材溶液的制備:取血余對照藥材，用250°C麻油炸制一段時間后 去渣，過濾，取濾液，向濾液中加入甲醇，超聲處理，過濾，濾液濃縮，即得血余對照藥材溶 液；
[0015] 步驟3，不含血余陰性樣品溶液的制備：按照象皮15-20份，當(dāng)歸1 ο-15份，生地so-so份 ，龜甲 20-30份 ，麻油 400-500 份， 爐甘石28-32份， 生石膏 25-30份以 及蜂蠟 80-100份 ，將 爐甘石、石膏粉碎成細(xì)粉，象皮用滑石粉燙至發(fā)泡后粉碎成細(xì)粉，即得象皮粉，過篩備用，當(dāng) 歸、龜甲、生地與麻油同置鍋內(nèi)炸枯，去渣，過濾，將蜂蠟完全熔化后濾入熱油內(nèi)，離火降溫， 加入爐甘石粉、石膏粉及象皮粉，不斷攪拌至冷卻成膏，即得不含血余陰性樣品，取不含血 余陰性樣品水浴加熱使其熔化，向容器中加入甲醇，超聲處理，過濾，濾液濃縮后，得到不含 血余陰性樣品溶液；
[0016] 步驟4,測定過程:取血余供試品溶液、不含血余陰性樣品溶液和血余對照藥材溶 液，分別點于同一硅膠G的薄層板上，以石油醚(60_90°C)_乙酸乙酯-甲酸為展開劑，展開 10-12cm后，取出晾干，再用上述展開劑分別展開兩次后，取出晾干，置于紫外光燈365nm下 觀察；
[0017] 5.生地的測定：
[0018] 步驟1，生地供試品溶液的制備:取生肌膏水浴加熱使其熔化，向容器中加入甲醇， 超聲處理，過濾，濾液濃縮得到生地供試品溶液；
[0019] 步驟2,生地對照藥材溶液的制備:取生地對照藥材，用200°C麻油炸透，過濾，取濾 液，向濾液中加入甲醇，超聲處理，過濾，濾液濃縮后，即得生地對照藥材溶液；
[0020] 步驟3，不含生地陰性樣品溶液的制備：按照象皮15-20份，當(dāng)歸1 ο-15份，血余1 Οι 5份 ，龜甲 20-30份 ，麻油 400-500 份， 爐甘石28-32份， 生石膏 25-30份以 及蜂蠟 80-100份 ，將 爐甘石、石膏粉碎成細(xì)粉，象皮用滑石粉燙至發(fā)泡后粉碎成細(xì)粉，即得象皮粉，過篩備用，當(dāng) 歸、龜甲、血余與麻油同置鍋內(nèi)炸枯，去渣，濾過，將蜂蠟完全熔化后濾入熱油內(nèi)，離火降溫， 加入爐甘石粉、石膏粉及象皮粉，不斷攪拌至冷卻成膏，即得不含生地陰性樣品，取不含生 地陰性樣品水浴加熱使其熔化，向容器中加入甲醇，超聲處理，過濾，濾液濃縮得到不含生 地陰性樣品溶液；
[0021] 步驟4,測定過程:取生地供試品溶液、不含生地陰性樣品溶液和生地對照藥材溶 液，分別點于同一硅膠G的薄層板上，第一次展開以環(huán)己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸為展開劑， 展開15-17cm后，取出晾干，第二次展開以石油醚(60-90°C)_乙酸乙酯-甲酸為展開劑，展開 13-15cm后，取出晾干，第三次展開以環(huán)己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸為展開劑，展開13-15cm 后，取出晾干，置于紫外光燈365nm下觀察；
[0022] 4.當(dāng)歸的測定：
[0023] 步驟1，當(dāng)歸供試品溶液的制備:取生肌膏，向其中加入甲醇，超聲處理，過濾，濾液 濃縮后，即得當(dāng)歸供試品溶液；
[0024] 步驟2，當(dāng)歸對照藥材溶液的制備：取對照藥材當(dāng)歸，向當(dāng)歸中加入甲醇，超聲處 理，過濾，取濾液即得當(dāng)歸對照藥材溶液；
[0025]步驟3，不含當(dāng)歸陰性樣品溶液的制備：按照象皮15-20份，血余10-15份，生地SOSO份 ，龜甲 20-30份 ，麻油 400-500 份， 爐甘石28-32份， 生石膏 25-30份以 及蜂蠟 80-100份 ，將 爐甘石、石膏、象皮粉碎成極細(xì)粉，過篩備用，龜甲、血余、生地與麻油同置鍋內(nèi)炸枯，去渣， 濾過，將蜂蠟完全熔化后濾入熱油內(nèi)離火降溫，加入爐甘石粉、石膏粉及象皮粉，不斷攪拌 至冷卻成膏，即得不含當(dāng)歸陰性樣品，取不含當(dāng)歸陰性樣品，向其中加入甲醇，超聲處理，過 濾，濾液濃縮后，即得不含當(dāng)歸陰性樣品溶液；
[0026] 步驟4,測定過程:取上述當(dāng)歸供試品溶液、不含當(dāng)歸陰性樣品溶液和當(dāng)歸對照藥 材溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸為展開劑，進(jìn)行展 開，展開后取出晾干，置于紫外光燈365nm下觀察；
[0027] 7.麻油的測定：
[0028]步驟1，麻油供試品溶液的制備:取生肌膏，向其中加入甲醇，超聲處理，過濾，濾液 濃縮后，即得麻油供試品溶液；
[0029] 步驟2,芝麻素對照品溶液的制備:取芝麻素對照品，向芝麻素對照品中加入甲醇， 制成每lml含lmg的溶液，即為芝麻素對照品溶液；
[0030] 步驟3，不含麻油陰性樣品溶液的制備:按照象皮15-20份，當(dāng)歸1 ο-15份，血余1 Οι 5份 ，生地20-30份 ，龜甲 20-30份， 爐甘石28-32份， 生石膏 25-30 份以 及蜂蠟80-100份 ，將爐 甘石、石膏粉碎成細(xì)粉，象皮用滑石粉燙至發(fā)泡后粉碎成細(xì)粉，即得象皮粉，過篩備用，將上 述原料混合，即得不含麻油陰性樣品，取不含麻油陰性樣品，向其中加入甲醇，超聲處理，過 濾，濾液濃縮后，即得不含麻油陰性樣品溶液；
[0031] 步驟4,測定過程:取上述麻油供試品溶液、不含麻油陰性樣品溶液和芝麻素對照 品溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙醚-乙酸乙酯為展開劑，展開后取出晾 干，向晾干后的硅膠G薄層板噴上10%硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰；
[0032] 8.阿魏酸的測定：
[0033] 步驟1，阿魏酸供試品溶液的制備:取生肌膏，水浴加熱使其熔化，向其中加入1 % 碳酸氫鈉溶液，超聲處理，過濾，所得濾液用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2~3，用乙醚振搖提取，合并 提取液，將乙醚揮發(fā)，所得殘渣加入甲醇使其溶解，即得阿魏酸供試品溶液；
[0034] 步驟2，阿魏酸對照品溶液的制備：取阿魏酸對照品，向阿魏酸對照品中加入甲醇 制成每lml含lmg的溶液，即得阿魏酸對照品溶液；
[0035] 步驟3,不含阿魏酸陰性樣品溶液的制備：按照象皮15-20份，血余10-15份，生地 20-30份，龜甲20-30份，麻油400-500份，爐甘石28-32份，生石膏25-30份以及蜂蠟80-100 份，將爐甘石、石膏粉碎成細(xì)粉，象皮用滑石粉燙至發(fā)泡后粉碎成細(xì)粉，即得象皮粉，過篩備 用，龜甲、血余、生地與麻油同置鍋內(nèi)炸枯，去渣，濾過，將蜂蠟完全熔化后濾入熱油內(nèi)離火 降溫，加入爐甘石粉、石膏粉及象皮粉，不斷攪拌至冷卻成膏，即得不含阿魏酸陰性樣品，取 不含阿魏酸陰性樣品，水浴加熱使其熔化，向其中加入1%碳酸氫鈉溶液，超聲處理，過濾， 所得濾液用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2~3,用乙醚振搖提取，合并提取液，將乙醚揮發(fā)，所得殘渣 加入甲醇使其溶解，即得不含阿魏酸陰性樣品溶液；
[0036] 步驟4,測定過程:取上述阿魏酸供試品溶液、阿魏酸對照品溶液及不含阿魏酸陰 性樣品溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸為展開劑， 進(jìn)行展開，展開后取出晾干，再用上述展開劑二次展開，展開后取出晾干，置于紫外光燈 365nm下觀察。
[0037]在象皮測定中：
[0038]在所述步驟1中，取生肌膏90-100g水浴加熱使其熔化，向容器內(nèi)加入熱水90-100mL，充分?jǐn)嚢?，置于冰箱放?-4h，待上層凝固后，取下層混懸液，過濾，殘渣加甲醇20-30mL，超聲處理20-40min，過濾，濾液濃縮至0.3-1. OmL后得到象皮供試品溶液。
[0039] 在所述步驟2中，取象皮對照藥材用滑石粉燙至發(fā)泡后粉碎成細(xì)粉，即得象皮粉， 取象皮粉〇. 5-1.5g，向象皮粉內(nèi)加入甲醇5-15mL，超聲處理10-30min，過濾，取濾液，將濾液 蒸干后得到殘渣，向殘渣內(nèi)加入甲醇0.5-1.5mL使殘渣溶解，即得象皮對照藥材溶液。
[0040] 在所述步驟3中，按照當(dāng)歸10-15份，血余10-15份，生地20-30份，龜甲20-30份，麻 油400-500份，爐甘石28-32份，生石膏25-30份以及蜂蠟80-100份，將爐甘石、石膏粉碎成細(xì) 粉，過篩備用，當(dāng)歸、龜甲、血余、生地與麻油同置鍋內(nèi)炸枯，去渣，過濾，將蜂蠟完全熔化后 濾入熱油內(nèi)，離火降溫，加入爐甘石粉以及石膏粉，不斷攪拌至冷卻成膏，即得不含象皮陰 性樣品，取不含象皮陰性樣品90-100g水浴加熱使其熔化，向容器內(nèi)加入熱水90-100mL，充 分?jǐn)嚢?，置于冰箱放?_4h，待上層凝固后，取下層混懸液，過濾，殘渣加甲醇20-30mL，超聲 處理20-40min，過濾，濾液濃縮至0.3-1. OmL后得到不含象皮陰性樣品溶液。
[0041] 在所述步驟4中，測定過程:第一向展開，取象皮供試品溶液20ul點于10cmX 10cm 的硅膠G薄層板x軸原點處，以環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯為展開劑，其中環(huán)己烷:丙酮：乙酸乙 酯的配比為(4-6) :(1-3) :(0.5-2)，沿X軸展開7.5cm后，取出晾干，第二向展開，取象皮對照 藥材溶液l〇ul，點于X軸距原點約7cm處，以環(huán)己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸為展開劑，其中環(huán) 己烷：甲苯：乙酸乙酯：甲酸的配比為(4-6) :(4-6) :(0.1-1 ):(0.05-0.2)，沿y軸方向展開 后，取出晾干，置于紫外光燈365nm下觀察。
[0042] 在血余的測定中：
[0043]在所述步驟1中，取生肌膏180-220g水浴加熱使其熔化，向容器中加入甲醇80-120mL，超聲處理20-40min，過濾，濾液濃縮至0.5-1.5mL，即得血余供試品溶液。
[0044] 在所述步驟2中，取血余對照藥材4-6g，用250°C麻油180-220g炸制5-15min后去 渣，過濾，取濾液15-25mL，向濾液中加入甲醇8-12mL，超聲處理10-30min，過濾，濾液濃縮至 0.5-1.5mL，即得血余對照藥材溶液。
[0045] 在所述步驟3中，按照象皮15-20份，當(dāng)歸10-15份，生地20-30份，龜甲20-30份，麻 油400-500份，爐甘石28-32份，生石膏25-30份以及蜂蠟80-100份，將爐甘石、石膏粉碎成細(xì) 粉，象皮用滑石粉燙至發(fā)泡后粉碎成細(xì)粉，即得象皮粉，過篩備用，當(dāng)歸、龜甲、生地與麻油 同置鍋內(nèi)炸枯，去渣，過濾，將蜂蠟完全熔化后濾入熱油內(nèi)，離火降溫，加入爐甘石粉、石膏 粉及象皮粉，不斷攪拌至冷卻成膏，即得不含血余陰性樣品，取不含血余陰性樣品180_220g 水浴加熱使其熔化，向容器中加入甲醇80-120mL，超聲處理20-40min，過濾，濾液濃縮至 0.5-1.5mL，得到不含血余陰性樣品溶液。
[0046] 在所述步驟4中，測定過程:取血余供試品溶液及不含血余陰性樣品溶液各20ul、 血余對照藥材溶液l〇ul，分別點于同一硅膠G的薄層板上，以石油醚(60-90°C)_乙酸乙酯-甲酸為展開劑，其中石油醚（60-90°C):乙酸乙酯：甲酸的配比為（13-15) :(3-5) :(0. ΙΟ. 8) ， 展開 11cm 后 ，取出瞭干 ，再用上述展開劑分別展開 12.5cm、 14cm 兩次后 ，取出瞭干 ，置 于紫外光燈365nm下觀察。
[0047] 在生地的測定中：
[0048]在所述步驟1中，取生肌膏180-220g水浴加熱使其熔化，向容器中加入甲醇80-120mL，超聲處理20-40min，過濾，濾液濃縮至0.5-1.5mL后得到生地供試品溶液。