小柴胡顆粒復(fù)方制劑的指紋圖譜檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種中藥復(fù)方制劑檢測技術(shù)領(lǐng)域，且特別設(shè)及一種小柴胡顆粒復(fù)方制 劑的指紋圖譜檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 小柴胡顆粒復(fù)方制劑是由柴胡、黃琴、姜半夏、黨參、生姜、甘草和大要經(jīng)提取精制 而成，具有解表散熱，疏肝和胃的功效。用于外感病，邪犯少陽證，癥見寒熱往來，胸脅苦滿， 食欲不振，屯、煩喜嘔，口苦咽干。
[0003] 小柴胡顆粒復(fù)方制劑目前《中國藥典》現(xiàn)行的質(zhì)量控制鑒別項(xiàng)僅通過黃琴巧、甘草 對照藥材和柴胡對照藥材進(jìn)行薄層鑒別，含量測定選擇測定其中一種成分黃琴巧；另外現(xiàn) 行的許多文獻(xiàn)報(bào)道也僅僅是選擇其中兩Ξ種藥材進(jìn)行指紋鑒別或者薄層鑒別，含量測定則 選擇黃琴和柴胡，仍缺乏對產(chǎn)品質(zhì)量的全面控制。如果只通過控制柴胡或者黃琴藥材品質(zhì) 來說明整個(gè)復(fù)方制劑的內(nèi)在質(zhì)量，是非常片面的。所W現(xiàn)有的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和其他現(xiàn)有技術(shù)中 尚無較好較完整的質(zhì)量控制方法來全面準(zhǔn)確的控制產(chǎn)品質(zhì)量，不能較好的保證其臨床療 效。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種小柴胡顆粒復(fù)方制劑的指紋圖譜檢測方法，W建立完 整的指紋圖譜對小柴胡顆粒復(fù)方制劑進(jìn)行了全面的檢測，有利于更為全面有效地控制小柴 胡顆粒復(fù)方制劑的質(zhì)量。
[000引本發(fā)明解決其技術(shù)問題是采用W下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的。
[0006] -種小柴胡顆粒復(fù)方制劑的指紋圖譜檢測方法，其中包括柴胡、黃琴、黨參、生姜、 甘草，首先，取黃琴素、黃琴巧、黨參烘巧、柴胡皂巧C、漢黃琴素、6-姜辣素、甘草酸錠、柴胡 皂巧A和柴胡皂巧B2配置成對照品混合溶液。其次，取待測試小柴胡顆粒復(fù)方制劑提取制成 供試品溶液。再次，吸取對照品混合溶液注入高效液相色譜儀，記錄對照色譜圖。接著，吸取 供試品溶液，注入高效液相色譜儀，記錄供試品色譜圖。然后，比較供試品色譜圖與對照色 譜圖。
[0007] 進(jìn)一步地，上述所述的指紋圖譜檢測方法，所述黃琴素、所述黃琴巧、所述黨參烘 巧、所述柴胡皂巧C、所述漢黃琴素、所述6-姜辣素、所述甘草酸錠、所述柴胡皂巧A和所述柴 胡皂巧B2通過加入甲醇進(jìn)行溶解并定容配置成所述對照品混合溶液。
[0008] 小柴胡顆粒復(fù)方制劑進(jìn)一步地，上述所述的指紋圖譜檢測方法，配置所述供試品 溶液包括:將所述待測試小柴胡顆粒研成細(xì)粉，再加入甲醇，進(jìn)行超聲提取，放冷后過濾，將 過濾后的濾液濃縮至干，殘?jiān)眉状级ㄈ萑芙?，搖勻后離屯、，取上清液為所述供試品溶液。
[0009] 進(jìn)一步地，上述所述的指紋圖譜檢測方法，利用所述高效液相色譜儀記錄所述對 照色譜圖和所述供試品色譜圖，W乙臘為流動相A，W甲醇為流動相B，W低濃度酸水為流動 相C，進(jìn)行梯度洗脫。
[0010] 進(jìn)一步地，上述所述的指紋圖譜檢測方法，吸取所述供試品溶液，注入高效液相色 譜儀，記錄所述供試品色譜圖包括:取多個(gè)批次的所述供試品溶液依次進(jìn)樣，得到多個(gè)供試 品色譜圖；
[0011] 比較所述供試品色譜圖與所述對照色譜圖包括：W黃琴素峰為參照峰，計(jì)算所述 對照色譜圖和每個(gè)所述供試品色譜圖中多個(gè)特征峰的相對保留時(shí)間，相對峰面積W及峰面 積比值；W及利用所述相對保留時(shí)間，相對峰面積W及峰面積比值比較所述對照色譜圖與 所述多個(gè)供試品色譜圖的相似度，用W判定所述待測試小柴胡顆粒復(fù)方制劑是否含有所述 活性成分。
[0012] 進(jìn)一步地，上述所述的指紋圖譜檢測方法，所述多個(gè)供試品色譜圖之間對應(yīng)的相 對保留時(shí)間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于等于20%。
[0013] 進(jìn)一步地，上述所述的指紋圖譜檢測方法，所述指紋圖譜檢測方法檢測小柴胡顆 粒復(fù)方制劑相似度應(yīng)為0.8-1.0時(shí)小柴胡顆粒復(fù)方制劑。
[0014] 進(jìn)一步地，上述所述的指紋圖譜檢測方法，還包括系統(tǒng)適應(yīng)性，所述系統(tǒng)適應(yīng)性包 括：
[0015] 取同一所述供試品溶液，連續(xù)多次進(jìn)樣，獲得多個(gè)供試品色譜圖，考察所述多個(gè)供 試品色譜圖的多個(gè)色譜峰的保留時(shí)間、峰面積的一致性；
[0016] 取同一所述供試品溶液，分別在多個(gè)時(shí)間檢測，獲得多個(gè)供試品色譜圖，考察所述 多個(gè)供試品色譜圖的多個(gè)色譜峰的相對保留時(shí)間、峰面積比值的一致性；W及
[0017] 再取同一批號的所述待測試小柴胡顆粒復(fù)方制劑多次配置成的多個(gè)所述供試品 溶液檢測，獲得多個(gè)供試品色譜圖，考察所述多個(gè)供試品色譜圖的多個(gè)色譜峰的相對保留 時(shí)間、峰面積比值的一致性。
[0018] 進(jìn)一步地，上述所述的指紋圖譜檢測方法，所述高效液相色譜的色譜柱的柱溫為 25~45攝氏度，流速為0.9~1. Iml/min，檢測波長為190nm~400nm。
[0019] 本發(fā)明實(shí)施例的提供的小柴胡顆粒復(fù)方制劑的指紋圖譜檢測方法的有益效果是： 選用黨參烘巧、黃琴巧、漢黃琴素、柴胡皂巧C，6-姜辣素、甘草酸錠、柴胡皂巧A和柴胡皂巧C 作為小柴胡顆粒復(fù)方制劑中的柴胡、黃琴、黨參、生姜和甘草五種活性成分的指標(biāo)成分，配 置對照品溶液和供試品溶液來采用高效液相色譜法測試得到對應(yīng)的對照色譜圖和供試品 色譜圖，通過比較對照色譜圖和供試品色譜圖判定供試品溶液是否含有上述九種對照成 分，從而對小柴胡顆粒復(fù)方制劑中的五種配方成分做出定性判斷，測試過程簡單方便，相對 于現(xiàn)有的小柴胡顆粒復(fù)方制劑的質(zhì)量控制鑒別，運(yùn)種檢測方法對小柴胡顆粒復(fù)方制劑的檢 測更為全面、準(zhǔn)確，能夠更為有效地控制小柴胡顆粒復(fù)方制劑的質(zhì)量。
【附圖說明】
[0020] 為了更清楚地說明本發(fā)明實(shí)施例的技術(shù)方案，下面將對實(shí)施例中所需要使用的附 圖作簡單地介紹，應(yīng)當(dāng)理解，W下附圖僅示出了本發(fā)明的某些實(shí)施例，因此不應(yīng)被看作是對 范圍的限定，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可W根據(jù)運(yùn) 些附圖獲得其他相關(guān)的附圖。
[0021] 圖1為本發(fā)明實(shí)施例的對照品混合溶液與五個(gè)批次的供試品溶液的色譜比較圖。
【具體實(shí)施方式】
[0022] 為使本發(fā)明實(shí)施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將對本發(fā)明實(shí)施例中 的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。實(shí)施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建 議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可W通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn) 品。
[0023] 中藥指紋圖譜是指某種中藥材或中成藥中所共有的具有特征性的某類或者某數(shù) 類成分的色譜譜圖。在現(xiàn)階段中藥的有效成分絕大多數(shù)沒有明確的情況下，中藥指紋圖譜 對于有效控制中藥材或者中成藥的質(zhì)量具有重要的意義。
[0024] 下面對本發(fā)明實(shí)施例的小柴胡顆粒復(fù)方制劑的指紋圖譜檢測方法進(jìn)行具體說明。
[0025] 本發(fā)明實(shí)施例的小柴胡顆粒復(fù)方制劑活性成分的指紋圖譜檢測方法選用黨參烘 巧、黃琴素、黃琴巧、漢黃琴素、柴胡皂巧C，6-姜辣素、甘草酸錠、柴胡皂巧A和柴胡皂巧B2作 為小柴胡顆粒復(fù)方制劑中的五種配方組成(包括柴胡、黃琴、黨參、生姜和甘草）的指標(biāo)成 分。
[0026] 首先，配置對照品混合溶液：即取黃琴素、黃琴巧、黨參烘巧、柴胡皂巧C、漢黃琴 素、6-姜辣素、甘草酸錠、柴胡皂巧A和柴胡皂巧B2配置成對照品混合溶液。
[0027] 具體地，選取其中上述其中一種成分，置于容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度， 配成該種成分的對照品儲備溶液。參照上述成分對照品儲備溶液的配置方法，分別配置其 他8種成分的對照品儲備溶液。在進(jìn)行指紋圖譜檢測時(shí)，將上述黃琴素、黃琴巧、黨參烘巧、 柴胡皂巧C、漢黃琴素、6-姜辣素、甘草酸錠、柴胡皂巧A和柴胡皂巧B2對照品儲備溶液等量 混合形成對照品混合溶液，采用配置成的對照品混合溶液進(jìn)行后續(xù)操作。
[0028] 在國家標(biāo)準(zhǔn)的小柴胡顆粒復(fù)方制劑中上述九種成分的含量具有一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)值，因 此，上述黃琴素、黃琴巧、黨參烘巧、柴胡皂巧C、漢黃琴素、6-姜辣素、甘草酸錠、柴胡皂巧A 和柴胡皂巧B2對照品溶液的濃度比是按照與國家標(biāo)準(zhǔn)小柴胡顆粒復(fù)方制劑中對應(yīng)的成分 的濃度比的換算值相等來進(jìn)行配置，使得對照品混合溶液與實(shí)際的小柴胡顆粒標(biāo)準(zhǔn)制劑的 條件越接近，最終進(jìn)行測試供試品中是否含有對應(yīng)成分的結(jié)論更加具有可靠性、科學(xué)性。
[0029] 其次，配置供試品溶液:即取待測試小柴胡顆粒復(fù)方制劑提取制成供試品溶液。
[0030] 具體地，將待測試小柴胡顆粒復(fù)方制劑研磨成細(xì)粉，取適量，加入甲醇，進(jìn)行超聲 混合，放置冷卻后，對溶液進(jìn)行過濾，將濾液濃縮至干，濃縮后的殘?jiān)儆眉状既芙獠⒍ㄈ荨?將上述定容溶解后的溶液搖勻，取適量進(jìn)行離屯、操作，取上清液，即得供試品溶液。
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