一種中藥藥代動力學的曲線模擬與預測方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種中藥藥代動力學的曲線模擬與預測方法及其系統(tǒng)，具體而言，涉 及模擬單味藥和復方中的一種成分的AUC(時間曲線下面積）-時間曲線，并預測另一種成 分在單味藥和復方中的AUC-時間曲線。
【背景技術】
[0002] 中藥是復雜的化學體系，存在復雜的藥物-藥物相互作用，口服單體成分與口服 中藥復方制劑，即使其口服劑量完全一樣，兩者之間會存在很大的差別。然而，ADME相關的 性質預測均是來源于高通量的單體化合物，用它們建模用來預測單體化合物的ADME性質。 但是，因為中藥復方存在復雜的藥物-藥物相互作用，所以這些預測模型對于中藥復雜體 系不適用，需要新的研宄思路，建立新的預測模型和方法。
[0003] 公開于該【背景技術】部分的信息僅僅旨在加深對本發(fā)明的一般【背景技術】的理解，而 不應當被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已為本領域技術人員所公知的現(xiàn)有技術。

【發(fā)明內容】

[0004] 在本發(fā)明中，提出一種新的預測策略和預測模型，主要如下：把中藥復方化合物， 根據(jù)化學結構相似性打分，分為不同的類別，同一類的化合物，被認為結構類似?；衔锝Y 構類似的化合物，可能作用于相同的靶標，表現(xiàn)相似的理化性質、藥代動力學性質和藥理活 性，為此，提出一個假說，即：口服中藥復方制劑，其中，結構類似的化合物，可能相似的代 謝風險，所以，對于中藥復方制劑，可以通過獲得一個或者少數(shù)幾個化合物在體內的血藥濃 度-時間曲線，從而預測其他化合物在體內的血藥濃度-時間曲線，從而獲得相關藥代動力 學參數(shù)，為中藥復方藥代動力學提供新思路。
[0005] 為此，本發(fā)明提供了一種中藥藥代動力學的曲線模擬與預測方法，可用于單味藥 或者中藥復方的結構類似化合物的藥代動力學的預測，其通過一些步驟，發(fā)現(xiàn)和證實化學 結構相似的成分在口服中藥方劑的復雜體系后具有相似的藥代動力學變化，即相似的r+ 值；然后，在已知成分A在各時刻的r+值，預測其他結構類似成分的auc-時間曲線，從而 建立藥代動力學預測新思路和方法。
[0006] 具體地，該方法包括：
[0007] 步驟1.對成分A分別獲得其在單味藥和復方藥中的血藥濃度-時間曲線；
[0008] 步驟2.計算成分A在單味藥和復方藥中各測量時刻的血藥濃度-時間曲線下的 面積AUC，進而獲得其AUC-時間變化曲線；
[0009] 步驟3.計算成分A在單味藥和復方藥中各時刻的AUC之和與平均值的比值r+， 其計算公式如下：
[0011] 其中，xjtihyjti)分別為成分A在復方藥及單味藥中第i個時刻的AUC;
[0012] 步驟4.對成份B做基于化學結構相似性的聚類分析；
[0013] 步驟5.根據(jù)聚類分析結果若成分B與成分A同屬一類，則可在已知成分A在各時 刻的r+值，成分B在單味藥（或復方藥）中的AUC值及其在復方藥（或單味藥）中第3小 時（即t7時刻）的AUC值的情況下，預測成分B在復方藥（或單味藥）中第4小時（即18 時刻）及以后的AUC-時間曲線，亦即
[0017]其中，xB(ti)、yB(ti)分別為成分B在復方藥及單味藥中第i個時刻的AUC。
[0018] 在所述步驟1中，通過高效液相色譜質譜/質譜聯(lián)用來獲得單味藥和復方中成分 A的血藥濃度-時間曲線。
[0019] 在測試血藥濃度時，選擇甲酸水-甲醇作為流動相，并且采用電噴霧離子化源 ESI，正離子模式檢測，以及多反應檢測MRM模式對藥物離子濃度進行測定。
[0020] 在測試血藥濃度時，于樣品前處理采用沉淀蛋白方法。
[0021] 所述步驟2中通過梯形法來計算單味藥和復方中成分A在各個時間點的血藥濃 度-時間曲線下面積，所述梯形法計算公式如下：
[0023] 其中，A(ti)為復方和單味藥中成分A在第i時刻的AUC值，C(ti)為復方和單味 藥中成分A在第i時刻的血藥濃度，并且、=0，々(0) =0，C(0) =0。
[0024] 本發(fā)明的方法和裝置具有其它特征和優(yōu)點，這些其它特征和優(yōu)點將從結合于此的 附圖和以下【具體實施方式】中顯而易見，或在附圖和【具體實施方式】中詳細陳述，附圖和具體 實施方式共同用于解釋本發(fā)明的某些原理。
【附圖說明】
[0025] 本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點將通過下面的參考附圖進行的描述而得以顯現(xiàn)，在所述 附圖中：
[0026] 圖1A、圖1B和圖1C分別顯示紫堇堿（I)、a-別隱品堿（II)、延胡索乙素（III)、 四氫小檗堿（IV)、歐前胡素（V)、異歐前胡素（VI)、白當歸素（VII)、華法林鈉（麗，IS) 和鹽酸異丙嗪（IX，IS)的空白血漿樣品色譜圖、空白血漿標準添加LL0Q色譜圖以及給藥2 小時后的血漿樣品色譜圖；
[0027] 圖2為SD大鼠口服不同提取物后a-別隱品堿的平均血藥濃度-時間曲線圖（n =6)；
[0028] 圖3為SD大鼠口服不同提取物后延胡索乙素的平均血藥濃度-時間曲線圖（n= 6);
[0029] 圖4為SD大鼠口服不同提取物后四氫小檗堿的平均血藥濃度-時間曲線圖（n= 6)；
[0030] 圖5為SD大鼠口服不同提取物后紫堇堿的平均血藥濃度-時間曲線圖（n= 6);
[0031] 圖6為SD大鼠口服不同提取物后白當歸素的平均血藥濃度-時間曲線圖（n= 6)；
[0032] 圖7為SD大鼠口服不同提取物后歐前胡素的平均血藥濃度-時間曲線圖（n= 6)；
[0033] 圖8為SD大鼠口服不同提取物后異歐前胡素的平均血藥濃度-時間曲線圖（n= 6)；
[0034] 圖9顯示基于兩兩之間化學結構相似性打分的元胡止痛方中的7個成分聚類分析 結果；
[0035] 圖10顯示7個成分在單味藥和復方中的AUC-時間變化曲線；
[0036] 圖11顯示基于AUC-時間曲線變化的元胡止痛方中的7個成分聚類分析的結果； [0037] 圖12顯示7個成分的r+值的散點圖。
【具體實施方式】
[0038] 現(xiàn)在將具體參考本發(fā)明的各個實施方案，在附圖中和以下的描述中示出這些實施 方案的實例。雖然本發(fā)明與示例性實施方案相結合進行描述，但應當了解，本說明書并非旨 在將本發(fā)明限制為那些示例性實施方案。相反，本發(fā)明旨在不但覆蓋這些示例性實施方案， 而且覆蓋可以被包括在由所附權利要求所限定的本發(fā)明的精神和范圍之內的各種替換、修 改、等效形式以及其它實施方案。
[0039] 在本發(fā)明的中藥藥代動力學的曲線模擬與預測方法中，首先建立元胡止痛方中7 個主要活性成分體內分析方法。
[0040] 元胡止痛方主要有延胡索和白芷兩味藥組成，延胡索中主要成分為生物堿類化合 物，而白芷中主要成分為香豆素類化合物，對兩藥的藥代動力學研宄方面，國內外文獻大多 集中在對延胡索乙素的含量測定，但是中藥的特點是多成分共同發(fā)揮作用，考察其他成分 在體內的含量也是十分有必要的。為了更好的理解元胡止痛方的藥理作用機理、體內過程， 有必要建立一種靈敏而又準確的分析方法，以測定生物樣品（如血漿、組織勻漿及尿液）中 主要成分的含量。
[0041] 在本發(fā)明中將建立同時測定大鼠血漿樣品中的a-別隱品堿、延胡索乙素、四氫 小檗堿、紫堇堿、白當歸素、歐前胡素、異歐前胡素等7種主要成分的LC-MS-MS方法。
[0042] 本發(fā)明所使用的實驗儀器：
[0043] WatersAcquityUPLCSystem,WatersQuattroPremierXE，沃特世科技有限公 司）；MIKR0 220R型離心機，德國Hettich公司；
[0044] MX-S型渦旋混合器，美國SCIL0GEX公司；
[0045] XS205型分析天平，瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司。
[0046] 本發(fā)明所使用的藥品與試劑：
[0047] 乙腈（色譜純，Merck公司）；
[0048] 甲醇（色譜純，Merck公司）；
[0049]a_別隱品堿（深圳市美荷生物科技有限公司，批號：20100318,純度：98% ); [0050] 延胡索乙素（中國食品藥品檢定研宄院，批號：110726-201011，純度99.9% );
[0051] 紫堇堿（sigma，批號：S449121，純度：98% );
[0052] 四氫小檗堿（上海融禾醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司，批號：100516,純度：98% );
[0053] 白當歸素（成都普思生物科技有限公司，批號：RFS-B-100610-04,純度99. 9% );
[0054] 異歐前胡素（中國食品藥品檢定研宄院，批號：110827-200407,純度：98% );
[0055] 歐前胡素（中國食品藥品檢定研宄院，批號：110826-200712,純度：99. 9% )。
[0056] 本發(fā)明所使用的藥材：
[0057] 白]E(AngelicaDahurica(Fisch.exHoffm. )Benth.etHook.f.)產自河北省；
[0058] 延胡索（CorydalisyanhusuoW.T.Wang)產自杭州，
[0059] 均購于河北省安國中藥材有限公司，由中國中醫(yī)科學院中藥研宄所何希榮藥師鑒 定為藥材正品。
[0060] 本發(fā)明所使用的實驗動物：
[0061] SD大鼠，雄性，體重230±20g，由北京大學醫(yī)學部實驗動物科學部提供，合格證 號：SCXK(京）2009-0017。在溫度20-22°C，相對濕度45% -65%，光照/黑暗12h/12h條 件下飼養(yǎng)，自由飲食、飲水，適應性飼養(yǎng)3天后開始實驗。
[0062] 發(fā)本明所使用的標準品溶液的配制：
[0063] 分別精密稱取a_別隱品堿、延胡索乙素、四氫小檗堿、紫堇堿、白當歸素、歐前胡 素和異歐前胡素溶于甲醇中，配成儲備液濃度分別為lmg/mL，將儲備液用甲醇稀釋成不同 濃度的混合溶液