專利名稱：Abo血型系統(tǒng)單克隆抗體分型試劑及其應(yīng)用液的配制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種鑒定人類血型，特別涉及一種代替人血清，鑒定人類血型的單克隆抗體分型試劑及其應(yīng)用液的配制方法。
自1900年發(fā)現(xiàn)人類的ABO血型以來(lái)，對(duì)人類血型進(jìn)行鑒定的試劑主要用人血清配制。這需要對(duì)大量的獻(xiàn)血員進(jìn)行篩選，不僅耗費(fèi)大量寶貴的人血，篩選工作頗費(fèi)工時(shí)，成本較高，而且由于獻(xiàn)血員的個(gè)體差異，難以實(shí)現(xiàn)質(zhì)量控制和標(biāo)準(zhǔn)化。不少學(xué)者曾先后對(duì)魚(yú)類、蝸牛、扁豆等動(dòng)、植物的組織漿液進(jìn)行研究，但由于種種技術(shù)原因未能付諸于實(shí)際應(yīng)用。
本發(fā)明的目的就是要克服上述缺陷，設(shè)計(jì)一種新型試劑以代替人血清用于血型鑒定。
本發(fā)明的技術(shù)方案用血型系統(tǒng)的A型、B型血液中的紅細(xì)胞膜分別免疫BALB/C小鼠，與骨髓瘤SP2/O細(xì)胞融合，篩選出雜交瘤細(xì)胞，用有限稀釋法進(jìn)行克隆化后，注入同系小鼠腹腔誘生腹水，即得ABO血型系統(tǒng)單克隆抗體分型試劑。
其應(yīng)用液的配制方法將小鼠腹水投入容器中進(jìn)行稀釋，稀釋液配比0.1MPH7.4的PBS、5%小牛血清、20%右旋糖苷。
本發(fā)明的效果在于配制出優(yōu)質(zhì)的ABO分型試劑，其單克隆抗體分型試劑的效價(jià)、親合力均優(yōu)于人血清分型試劑，而且成本低，其成本僅為人血清分型試劑的一半，原材料取之不盡、用之不竭，能夠進(jìn)行大批量工業(yè)化生產(chǎn)，能夠?qū)崿F(xiàn)質(zhì)量控制和標(biāo)準(zhǔn)化，可以節(jié)省大量寶貴的人血，具有良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
本發(fā)明的效果和優(yōu)點(diǎn)將在下面的說(shuō)明中得到進(jìn)一步闡述。
實(shí)施例首先，選擇抗原性強(qiáng)的A型獻(xiàn)血員和B型獻(xiàn)血員的血液中的紅細(xì)胞膜，然后分別免疫BALB/C小鼠，產(chǎn)生抗A、抗B抗體的小鼠脾細(xì)胞，采用淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)，將小鼠脾細(xì)胞與小鼠骨髓瘤SP2/O細(xì)胞進(jìn)行融合，篩選出雜交瘤細(xì)胞，采用有限稀釋法對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化，獲得抗A的49H和抗B的5D雜交瘤細(xì)胞系，然后將其保存在-8℃的液氮中。當(dāng)需要使用時(shí)，將雜交瘤細(xì)胞從液氮中取出，注入到同系小鼠腹腔中誘生腹水，其腹水中含有所需的高效價(jià)抗A、抗B抗體。這樣，就可以進(jìn)行大批量工業(yè)化生產(chǎn)，勿需大量的人血液。
在常溫常壓下，抗A、抗B的腹水用稀釋液稀釋，稀釋液為0.1MPH7.4的PBS、5%小牛血清、20%右旋糖苷。1ml的腹水稀釋1000倍，相當(dāng)于2000ml人血液，可見(jiàn)其成本很低。將稀釋后的應(yīng)用液一滴與待鑒定的人血樣一滴混合后進(jìn)行反應(yīng)，如與抗A抗體出現(xiàn)凝集，則血樣為A型;如與抗B抗體出現(xiàn)凝集，則血樣為B型;如與抗A、抗B抗體均出現(xiàn)凝集，則血樣為AB型;如與抗A、抗B抗體均不凝集，則血樣為O型。其鑒定方法與用人血清的方法相同。
配制抗A、抗B分型試劑應(yīng)用液500ml，鑒定血型1億人次，準(zhǔn)確率達(dá)100%，可節(jié)省人血1000萬(wàn)ml。
權(quán)利要求
1.ABO血型系統(tǒng)單克隆抗體分型試劑，其特征在于A型、B型血液中的紅細(xì)胞膜分別免疫BALB/C小鼠，產(chǎn)生抗A、抗B抗體的小鼠脾細(xì)胞，將此雜交瘤細(xì)胞，用有限稀釋法進(jìn)行克隆化后，注入同系小鼠腹腔，誘生腹水，即得ABO血型系統(tǒng)單克隆抗體分型試劑。
2.ABO血型系統(tǒng)單克隆抗體分型試劑的應(yīng)用液的配制方法，其特征在于(1)將含ABO血型系統(tǒng)單克隆抗體分型試劑的小鼠腹水投入容器中;(2)進(jìn)行稀釋，稀釋液配比0.1MPH7.4的PBS、5%小牛血清、20%右旋糖苷。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種鑒定人類血型，特別涉及一種代替人血清來(lái)鑒定人類血型的試劑及其應(yīng)用液的配制方法。本發(fā)明采用雜交瘤技術(shù)，以血型系統(tǒng)的A抗原、B抗原，經(jīng)過(guò)融合、篩選、克隆化，獲得抗A、抗B抗體應(yīng)用液。采用本發(fā)明之應(yīng)用液一滴與血樣一滴，即可迅速鑒定人血的血型，準(zhǔn)確率達(dá)100％，其檢測(cè)方法與人血清試劑相同。本發(fā)明可以通過(guò)大批量、工業(yè)化生產(chǎn)，免去從大量獻(xiàn)血員所獻(xiàn)血中分離人血清的方法，節(jié)約了大量寶貴的人血，具有良好的社會(huì)效果，而且本發(fā)明的試劑與人血清試劑相比，成本便宜一半，本發(fā)明之試劑生產(chǎn)的質(zhì)控、標(biāo)準(zhǔn)化易于掌握、控制。
文檔編號(hào)G01N33/53GK1092173SQ9311071
公開(kāi)日1994年9月14日 申請(qǐng)日期1993年3月11日 優(yōu)先權(quán)日1993年3月11日
發(fā)明者唐家琪 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍南京軍區(qū)后勤部軍事醫(yī)學(xué)研究所