本實(shí)用新型涉及檢測(cè)卡領(lǐng)域，尤其涉及一種快速檢測(cè)鹿布氏桿菌病毒抗體的檢測(cè)卡，用于對(duì)鹿血樣品中布氏桿菌病毒抗體的檢測(cè)。

背景技術(shù)：

近年來我國(guó)鹿養(yǎng)殖業(yè)得到了迅速的發(fā)展，給我國(guó)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)收入。但目前我國(guó)梅花鹿嚴(yán)重的疫病流行影響著鹿養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。布氏桿菌（Brucellosis)就是其中重要的傳染疫病之一，作為常見的人畜共患病，該病廣泛流行于我國(guó)畜間，不僅帶來了極大的經(jīng)濟(jì)損失，還不斷威脅著人類和社會(huì)的安全。

監(jiān)測(cè)抗體是有效淘汰感染鹿的重要手段。采集鹿血清，并檢測(cè)血清中鹿布氏桿菌抗體的效價(jià)是監(jiān)控此病的主要方法。

目前，血清學(xué)檢測(cè)方法是鹿布氏桿菌病常用的診斷方法之一。血清學(xué)檢測(cè)常用的方法有試管凝集試驗(yàn)和虎紅平板試驗(yàn)。試管凝集試驗(yàn)和虎紅平板試驗(yàn)的結(jié)果判定主觀性較強(qiáng)、不易量化。 膠體金檢測(cè)試紙條具有方便快捷、特異敏感、穩(wěn)定性強(qiáng)、不需要特殊設(shè)備和儀器，結(jié)果判定直觀等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于多種疾病的快速診斷。

本發(fā)明應(yīng)用膠體金免疫層析制備鹿布氏桿菌抗體檢測(cè)卡，用于鹿布氏桿菌病抗體的檢測(cè)，其靈敏度高，且在短時(shí)間內(nèi)能夠判斷結(jié)果，操作簡(jiǎn)便，不需要特殊的實(shí)驗(yàn)儀器，不需要專業(yè)的操作人員，可以用于鹿布氏桿菌病抗體的快速檢測(cè)，尤其適用于基層畜牧獸醫(yī)站對(duì)本病的初篩。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本實(shí)用新型的目的是提供一種操作簡(jiǎn)單，靈敏度高的鹿布氏桿菌病抗體檢測(cè)卡。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本實(shí)用新型提供一種鹿布氏桿菌病抗體檢測(cè)卡，包括卡殼和卡殼內(nèi)的試紙條，卡殼上設(shè)有加樣孔和視窗孔，所述試紙條包括底板，所述底板上依次銜接有樣品墊、兔抗鹿IgG膠體金復(fù)合物金標(biāo)墊、硝酸纖維素膜和吸水紙；所述硝酸纖維素膜上設(shè)有包被有鹿布氏桿菌脂多糖LPS抗原的檢測(cè)線和包被有羊抗兔IgG的質(zhì)控線，所述的檢測(cè)線和質(zhì)控線平行排列。

進(jìn)一步的，上述的一種鹿布氏桿菌病抗體檢測(cè)卡，所述硝酸纖維素膜兩端分別與兔抗鹿IgG膠體金復(fù)合物金標(biāo)墊和吸水紙相互交疊連接，所述樣品墊壓貼在兔抗鹿IgG膠體金復(fù)合物金標(biāo)墊上。

進(jìn)一步的，上述的一種鹿布氏桿菌病抗體檢測(cè)卡，所述樣品墊為用于檢測(cè)血清、血漿及全血的樣品墊。

進(jìn)一步的，上述的一種鹿布氏桿菌病抗體檢測(cè)卡，所述底板為PVC板。

進(jìn)一步的，上述的一種鹿布氏桿菌病抗體檢測(cè)卡，所述的樣品墊與卡殼上的加樣孔相對(duì)應(yīng)，所述的硝酸纖維素膜上的檢測(cè)線與視窗孔相對(duì)應(yīng)。

進(jìn)一步的，上述的一種鹿布氏桿菌病抗體檢測(cè)卡，所述的樣品墊為濾血膜。

進(jìn)一步的，上述的一種鹿布氏桿菌病抗體檢測(cè)卡，所述的樣品墊為加入有抗鹿紅細(xì)胞表面蛋白抗體的樣品墊。

進(jìn)一步的，上述的一種鹿布氏桿菌病抗體檢測(cè)卡，所述兔抗鹿IgG膠體金復(fù)合物金標(biāo)墊是在玻璃纖維上噴涂兔抗鹿IgG膠體金標(biāo)記物。

有益效果

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實(shí)用新型提供的鹿布氏桿菌病抗體檢測(cè)卡，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，易于操作，用于鹿布氏桿菌病抗體的檢測(cè)時(shí)，其靈敏度高，且在短時(shí)間內(nèi)能夠判斷結(jié)果，不需要特殊的實(shí)驗(yàn)儀器，不需要專業(yè)的操作人員，可以用于鹿布氏桿菌病抗體的快速檢測(cè)，尤其適用于基層畜牧獸醫(yī)站對(duì)本病的初篩。

通過以下的描述并結(jié)合附圖，本實(shí)用新型將變得更加清晰，這些附圖用于解釋本實(shí)用新型的實(shí)施例。

附圖說明

為了更清楚地說明本實(shí)用新型實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本實(shí)用新型的一些實(shí)施例，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。

圖1為鹿布氏桿菌病抗體檢測(cè)卡的結(jié)構(gòu)布置圖；

圖中，樣品墊1；硝酸纖維素膜2；底板3；兔抗鹿IgG膠體金復(fù)合物金標(biāo)墊4；檢測(cè)線5；質(zhì)控線6；吸水紙7；卡殼8；加樣孔81；視窗孔82。

具體實(shí)施方式

現(xiàn)在參考附圖描述本實(shí)用新型的實(shí)施例。

實(shí)施例

本實(shí)用新型是一種鹿布氏桿菌病抗體檢測(cè)卡，如圖1所示，包括卡殼8和卡殼8內(nèi)的試紙條，卡殼8上設(shè)有加樣孔81和視窗孔82，所述試紙條包括底板3，所述底板3為PVC板，所述底板3上依次銜接有用于檢測(cè)血清、血漿及全血的樣品墊1，為檢測(cè)結(jié)果更為精確，在檢測(cè)全血時(shí)，其樣品墊1優(yōu)先選用濾血膜，或者加入有抗鹿紅細(xì)胞表面蛋白抗體的樣品墊。兔抗鹿IgG膠體金復(fù)合物金標(biāo)墊4、硝酸纖維素膜2和吸水紙7，具體的說，所述硝酸纖維素膜2兩端分別與兔抗鹿IgG膠體金復(fù)合物金標(biāo)墊4和吸水紙7相互交疊連接，所述樣品墊1壓貼在兔抗鹿IgG膠體金復(fù)合物金標(biāo)墊4上，所述兔抗鹿IgG膠體金復(fù)合物金標(biāo)墊4上設(shè)有膠體金標(biāo)記的兔抗鹿IgG抗體。所述硝酸纖維素膜2上設(shè)有包被有鹿布氏桿菌脂多糖LPS抗原的檢測(cè)線5和包被有羊抗兔IgG的質(zhì)控線6，所述的檢測(cè)線5和質(zhì)控線6平行排列。

為了方便加樣和觀察檢測(cè)結(jié)果，所述的樣品墊1與卡殼8上的加樣孔81相對(duì)應(yīng)，所述的硝酸纖維素膜上的檢測(cè)線5與視窗孔82相對(duì)應(yīng)。

為了更清楚的說明本實(shí)用新型提供的技術(shù)方案，所述的鹿布氏桿菌脂多糖LPS抗原購(gòu)自杭州億米偌生物技術(shù)有限公司，所述的兔抗鹿IgG和羊抗兔IgG購(gòu)自洛陽(yáng)佰奧通實(shí)驗(yàn)材料中心。

所述的兔抗鹿IgG膠體金復(fù)合物金標(biāo)墊4通過下述步驟依次制得：

所述的兔抗鹿IgG膠體金復(fù)合物金標(biāo)墊4是將兔抗鹿IgG膠體金標(biāo)記物噴涂在玻璃纖維材質(zhì)，所述的兔抗鹿IgG膠體金標(biāo)記物是膠體金顆粒溶液和兔抗鹿IgG通過物理吸附連接而成，其具體步驟如下：

（1）用0.2mol/L的碳酸鉀溶液將膠體金顆粒溶液的PH調(diào)至9.0；

（2）按照10μg/ml濃度計(jì)算所需的兔抗鹿IgG，將兔抗鹿IgG用去離子水稀釋至1mg/ml，攪拌下緩慢滴入上述膠體金顆粒溶液；

（3）攪拌下同樣將10%的牛血清白蛋白（BSA）加入上述混合溶液中；

（4）在離心速度10000rpm，時(shí)長(zhǎng)30min后，將上述混合液中的上清除去，剩余的沉淀物用0.01mol/ml的PH7.0磷酸鹽緩沖液復(fù)溶至原體積的1/10，得兔抗鹿IgG膠體金標(biāo)記物。

（5）將上述兔抗鹿IgG膠體金標(biāo)記物噴涂在玻璃纖維上，待干燥后制備成兔抗鹿IgG膠體金復(fù)合物金墊。

為了精確檢測(cè)結(jié)果，所述膠體金顆粒溶液中含有的膠體金顆粒大小為25nm，所述膠體金顆粒溶液中所含有的膠體金顆粒大小的變異度小于2%，其采用下述步驟依次制得：

（1）將0.01%氯金酸水溶液100ml加熱至沸騰，同時(shí)勻速攪拌；

（2）攪動(dòng)下準(zhǔn)確加入1%檸檬酸三鈉水溶液0.7ml，金黃色的氯金酸水溶液在2分鐘內(nèi)變?yōu)樽霞t色，繼續(xù)煮沸15分鐘，冷卻后以蒸餾水恢復(fù)到原體積。

具體使用時(shí)，上述鹿布氏桿菌病抗體檢測(cè)卡是利用鹿血液樣品中鹿布氏桿菌抗體、兔抗鹿IgG膠體金標(biāo)記物和硝酸纖維素膜上的鹿布氏桿菌脂多糖LPS抗原通過間接法來檢測(cè)鹿血液樣本中的鹿布氏桿菌抗體。

為快速層析檢測(cè)卡，在添加鹿血液樣本后，樣本中的鹿布氏桿菌抗體沿層析膜移動(dòng)，與檢測(cè)線5上的布氏桿菌脂多糖LPS抗原結(jié)合顯色，通過檢測(cè)線5的顯色深淺來判定鹿血液中布氏桿菌抗體含量的高低。

具體使用時(shí)，將待檢鹿血液樣本70μl加入到加樣孔81后，與兔抗鹿IgG膠體金復(fù)合物金標(biāo)墊4上的兔抗鹿IgG結(jié)合沿層析膜移動(dòng)。若待檢樣本中含有鹿布氏桿菌抗體，將與檢測(cè)線5處的布氏桿菌脂多糖LPS抗原結(jié)合，形成抗原抗體復(fù)合物，在檢測(cè)線5處出現(xiàn)紅色的條帶，結(jié)合物越多，條帶的紅色就越深。

以上所述僅為說明本實(shí)用新型，并不用于限制本實(shí)用新型，凡在本實(shí)用新型的的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本實(shí)用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。