本實用新型涉及生物技術(shù)應(yīng)用領(lǐng)域,尤其應(yīng)用于化學(xué)物質(zhì)對于線蟲趨利及趨避的檢測。
背景技術(shù):
模式生物秀麗隱桿線蟲是適合研究高等動物神經(jīng)系統(tǒng)的最簡單模型,具有易于飼養(yǎng)、生長周期短、遺傳操作簡單、基因背景及細胞譜系清楚等優(yōu)點。線蟲的神經(jīng)系統(tǒng)雖然相對簡單,但卻對機械感覺、化學(xué)物質(zhì)、溫度等外界刺激具有靈敏的感知及反應(yīng)能力,其神經(jīng)系統(tǒng)含有高等動物腦的大多數(shù)分子成分,包括多巴胺、5-羥色胺、腎上腺素等。線蟲具有靈敏的嗅覺,用測定趨避指數(shù)和趨向指數(shù)的方法發(fā)現(xiàn),線蟲可以被一些香精香料如安息香醛所趨化。因此可以推測線蟲對煙草的反應(yīng)并不只是局限于對尼古丁,還包括對煙草中的香精香料。線蟲對香精香料的趨向/趨避指數(shù)可以用來反應(yīng)這些香精香料化學(xué)成分對線蟲嗅覺系統(tǒng)的刺激強度。
現(xiàn)有的測定線蟲趨利、趨避指數(shù)一般通過平板分區(qū)的方法進行,即在平板上劃分不同區(qū)域,然后將待測物質(zhì)放置于不同區(qū)域,一定時間后觀察區(qū)域內(nèi)的線蟲數(shù)量。該方法存在一定的局限性,首先如果待測物質(zhì)是液體,則會在線蟲培養(yǎng)基上緩慢擴散,此外由于線蟲會在平板上會進行不規(guī)則的運動,這兩者都會給趨利趨避帶來不準確性。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
針對上述技術(shù)現(xiàn)狀,本實用新型通過構(gòu)建一個趨利、趨避的定向檢測系統(tǒng),線蟲只能定向運動,且有專門的加樣孔,從而避免待測物質(zhì)的擴散,從而增加試驗的準確性。
本實用新型第一方面設(shè)計了一種線蟲定向趨利、趨避檢測裝置,其包括培養(yǎng)皿1,所述培養(yǎng)皿1包括:
線蟲滴加孔4,位于所述培養(yǎng)皿1的中部;
多個線蟲運動凹槽2,在培養(yǎng)皿1中成放射狀分布,其一端與所述線蟲滴加孔4連通;
對照樣加樣孔3,與所述多個線蟲運動凹槽2的其中一個的另一端連通;
待測樣品加樣孔5,與剩余的所述多個線蟲運動凹槽2的另一端連通。
本實用新型第二方面涉及線蟲定向趨利、趨避檢測方法,其使用根據(jù)上述的測定裝置來實施,并包括以下步驟:首先將線蟲培養(yǎng)基加在線蟲運動凹槽2上;然后將對照樣品加入對照樣加樣孔3,將待測樣品加入待測樣品加樣孔5,在線蟲滴加孔4上滴加線蟲;最后,在顯微鏡下觀察線蟲的趨利趨避狀態(tài),計數(shù)對照樣加樣孔3和待測樣品加樣孔5的線蟲數(shù)目。
本實用新型的有益效果:
本實用新型的線蟲定向趨利、趨避檢測裝置克服了平板區(qū)域方法計數(shù)線蟲所局限的線蟲不規(guī)則運動狀態(tài),且能實時觀察線蟲的遷移狀態(tài)并進行記錄;對照和待測樣品間不會相互擴散,增加實驗的準確性;可以同時檢測多個待測樣品,提高實驗效率。
附圖說明
圖1為本實用新型的線蟲定向趨利、趨避檢測裝置。
附圖標(biāo)記為:1-培養(yǎng)皿;2-線蟲運動凹槽;3-對照樣加樣孔;4-線蟲滴加孔;5-待測樣品加樣孔。
具體實施方式
利用本實用新型的線蟲定向趨利、趨避檢測裝置,對線蟲定向趨利、趨避進行檢測,首先將線蟲培養(yǎng)基加在線蟲運動凹槽2上;然后將對照樣品加入對照樣加樣孔3,將待測樣品加入待測樣品加樣孔5,在線蟲滴加孔4上滴加線蟲;最后,在顯微鏡下觀察線蟲的趨利趨避狀態(tài),計數(shù)對照樣加樣孔3和待測樣品加樣孔5的線蟲數(shù)目。