一種基于表面等離子體共振成像生物傳感器芯片的蛋白質(zhì)固定方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種基于表面等離子共振成像生物傳感器芯片的蛋白質(zhì)固定方法，該方法通過建立用于蛋白質(zhì)固定的模型，根據(jù)模型來優(yōu)化芯片表面的化學(xué)修飾，控制活性位點(diǎn)之間的距離，從而能夠在表面等離子共振成像生物傳感器芯片上固定蛋白質(zhì)。通過本發(fā)明的方法保證了蛋白質(zhì)的單點(diǎn)固定，從而避免了因蛋白質(zhì)被多點(diǎn)固定而導(dǎo)致的失活，并且通過表面等離子共振成像技術(shù)確認(rèn)了通過此方法固定蛋白質(zhì)能夠獲得優(yōu)化的檢測信號(hào)。
【專利說明】-種基于表面等離子體共振成像生物傳感器巧片的蛋白質(zhì) 固定方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于蛋白質(zhì)巧片陣列領(lǐng)域，設(shè)及一種基于表面等離子體共振成像生物傳感 器巧片的蛋白質(zhì)固定方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 在免疫檢測領(lǐng)域，包被抗體（一抗）的定向排列引起了廣泛的興趣和關(guān)注。在傳 統(tǒng)檢測中，包被抗體被動(dòng)地吸附在基底（通常是熱塑性聚合物，例如聚苯己締）表面，使得 僅僅20?30%的包被抗體獲得了理想的取向而擁有檢測活性。在典型的免疫檢測中，對(duì)包 被抗體的非有效固定問題一直少有關(guān)注。通常包被抗體被過量地固定在固相表面，W保證 有足夠多的抗體吸附在表面時(shí)具有合適的取向，用W產(chǎn)生可靠的檢測信號(hào)。然而，當(dāng)擴(kuò)展到 微米或納米層面的應(yīng)用時(shí)，固定在表面的抗體需要將一定濃度的化端暴露在外面來保證 獲得足夠的檢測信號(hào)，此時(shí)包被抗體錯(cuò)誤的取向固定會(huì)產(chǎn)生更大的問題。直接取向固定包 被抗體是提升檢測性能的有效手段，據(jù)Wilson DS和Knock S報(bào)道，通過直接取向固定包被 抗體使信號(hào)提高可達(dá)10倍，該在微納米層面的應(yīng)用中體現(xiàn)更為突出。將抗體固定在基底表 面有多種方法，包括吸附固定、共價(jià)固定和親和固定，對(duì)于取向固定抗體也有一些相應(yīng)的技 術(shù)。目前，大多數(shù)直接固定抗體的工作主要集中在抗體化端的化學(xué)修飾W及其他化學(xué)修飾 方法，該些方法都可W提高固定抗體的有效活性。然而，特定基團(tuán)固定的策略，尤其是由于 固定使抗體變性，或當(dāng)抗體的Fab段由于固定的取向被埋藏，可能導(dǎo)致抗體生物活性的喪 失。
[0003] 對(duì)于商業(yè)化治療性抗體的質(zhì)量控制來說，最好有一種無標(biāo)記或者對(duì)抗體沒有預(yù)先 化學(xué)修飾的技術(shù)進(jìn)行檢測。在該類案例當(dāng)中，過去報(bào)道過的取向固定方法由于必須在固定 抗體之前進(jìn)行化學(xué)改性，帶來一些不便。另一方面，隨機(jī)共價(jià)固定的方式對(duì)某些商業(yè)化的治 療性抗體有時(shí)也可能無效，原因是被固定的基團(tuán)很有可能在抗體的結(jié)合位點(diǎn)附近，而且該 些抗體更有可能在表面上被多點(diǎn)固定，從而導(dǎo)致抗體失活。
[0004] 因此，在本領(lǐng)域需要開發(fā)一種能夠單點(diǎn)固定蛋白質(zhì)并獲得較優(yōu)化的檢測信號(hào)的蛋 白質(zhì)固定方法。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，本發(fā)明的目的在于提供一種基于表面等離子體共振成像生 物傳感器巧片的蛋白質(zhì)固定方法。
[0006] 為達(dá)到此發(fā)明目的，本發(fā)明采用W下技術(shù)方案：
[0007] 本發(fā)明提供一種基于表面等離子共振成像生物傳感器巧片的蛋白質(zhì)固定方法，所 述方法包括W下步驟：
[000引 （1)建立用于蛋白質(zhì)固定的模型；
[0009] (2)根據(jù)所述模型優(yōu)化巧片表面的化學(xué)修飾；
[0010] (3)在巧片上固定蛋白質(zhì)；
[0011] (4)利用表面等離子共振成像來檢測固定的蛋白質(zhì)的信號(hào)。
[0012] 本發(fā)明所述基于表面等離子共振成像生物傳感器巧片的蛋白質(zhì)固定方法中步驟 (1) 所述用于蛋白質(zhì)固定的模型為：
[001 引 r 二！奪乎7^' ,
[0014] 其中1為硫醇直徑，r為活性末端之間的平均距離，町為活性末端硫醇溶液被同濃 度非活性末端硫醇溶液稀釋的倍數(shù)；
[0015] 所述用于蛋白質(zhì)固定的模型的推導(dǎo)過程如下：
[0016] A = a*Dp (I)
[0017] 考慮a > I2并且代入式（I)得到：
[001 引 A = 12 蝴 F (II)
[0019] 考慮活性末端硫醇在有效區(qū)域的中屯、，有效區(qū)域假設(shè)為正方形，所Wr可W如下 計(jì)算：
[0020] r ? VI (阻）
[0021] 將式（II)代入式（III)得出所述模型，
[0022] 其中a為硫醇面積，A為平均一個(gè)活性末端硫醇分子所占的有效面積。
[0023] 本發(fā)明所述基于表面等離子共振成像生物傳感器巧片的蛋白質(zhì)固定方法中步驟 (2) 所述優(yōu)化巧片表面的化學(xué)修飾包括W下步驟：
[0024] (A)根據(jù)所述模型確定活性末端硫醇溶液被同濃度非活性末端硫醇溶液稀釋的倍 數(shù)町，
[002引做清洗巧片，氮?dú)獯蹈?，放入等離子體清洗儀中清洗3分鐘；
[0026] (C)配制混合硫醇溶液；將活性末端硫醇溶液用同濃度非活性末端硫醇溶液稀釋 町倍，制成混合硫醇溶液；
[0027] 做將巧片浸入配制好的混合硫醇溶液中，4°C恒溫解育過夜，取出巧片，清洗巧片 表面，氮?dú)獯蹈?，備用?br> [002引本發(fā)明所述活性末端硫醇為一端帶有活性基團(tuán)的有機(jī)硫醇化合物，活性末端可W 是駿基、醒基、酷基、環(huán)氧基、氯基、面代姪基、醋基等便于進(jìn)行化學(xué)修飾的基團(tuán)。在本發(fā)明中 所述活性末端硫醇與非活性末端硫醇是一對(duì)相互對(duì)應(yīng)的概念，其中所述活性與非活性是相 對(duì)于硫醇末端進(jìn)行化學(xué)修飾時(shí)要連接的物質(zhì)而言的，例如，如果待連接的物質(zhì)是蛋白質(zhì)，貝U 硫醇末端可與蛋白質(zhì)的氨基反應(yīng)的定義為活性末端硫醇，硫醇末端不能與蛋白質(zhì)的氨基反 應(yīng)的定義為非活性末端硫醇，例如此時(shí)可將駿基末端硫醇稱為活性末端硫醇，而將燒氧基 末端硫醇稱為非活性末端硫醇；再如，對(duì)于復(fù)雜的巧片表面=維修飾，要在二維修飾基礎(chǔ)上 再次進(jìn)行修飾，此時(shí)所利用的例如硫醇引發(fā)劑末端可能帶有面代姪基引發(fā)端，此時(shí)將面代 姪基末端硫醇稱為活性末端硫醇，而可利用不與修飾物基團(tuán)反應(yīng)的哲基末端硫醇為非活性 末端硫醇，但是如果待連接的物質(zhì)是可W與哲基反應(yīng)達(dá)到化學(xué)修飾目的時(shí)，哲基末端硫醇 則被稱為活性末端硫醇。
[0029] 在本發(fā)明中所述活性末端硫醇可W為但不限于駿基末端硫醇、醒基末端硫醇、酷 基末端硫醇、環(huán)氧基末端硫醇、面代姪基末端硫醇、氯基末端硫醇和醋基末端硫醇中的任意 一種；本發(fā)明所述非活性末端硫醇可w為但不限于燒基末端硫醇、燒氧基末端硫醇和哲基 末端硫醇中的任意一種。
[0030] 在本發(fā)明方法的步驟（2)所述優(yōu)化巧片表面的化學(xué)修飾的步驟做和步驟做中 在氮?dú)獯蹈汕八銮逑辞善?dú)立地為用己醇和去離子水交替清洗。
[0031] 本發(fā)明方法的步驟（2)所述優(yōu)化巧片表面的化學(xué)修飾包括優(yōu)化巧片表面的二維 化學(xué)修飾和/或=維化學(xué)修飾。巧片表面的二維化學(xué)修飾是指在巧片表面用直鏈化學(xué)修飾 物進(jìn)行修飾，從而在巧片表面形成二維化學(xué)結(jié)構(gòu)；所述=維化學(xué)修飾是指利用支化或超支 化化學(xué)修飾物（如支化或超支化聚合物）來修飾巧片表面，或者在巧片表面形成二維化學(xué) 結(jié)構(gòu)之后，利用二維化學(xué)結(jié)構(gòu)的活性末端再與支化或超支化化學(xué)修飾物反應(yīng)，使表面形成 支化或超支化的=維化學(xué)結(jié)構(gòu)。
[0032] 本發(fā)明所述基于表面等離子共振成像生物傳感器巧片的蛋白質(zhì)固定方法中步驟 (3) 所述在巧片上固定蛋白質(zhì)包括W下步驟：
[0033] (a)將表面化學(xué)修飾優(yōu)化的巧片浸入巧片表面上活性末端的活化試劑的溶液中活 化；
[0034] 化）用去離子水清洗巧片，氮?dú)獯蹈?，將目?biāo)蛋白質(zhì)溶液在巧片表面打印形成蛋白 質(zhì)陣列；
[003引 （C)用2%的牛血清白蛋白炬SA)的PBS溶液在室溫下封閉20分鐘，完成巧片上 蛋白質(zhì)的固定。
[0036] 本發(fā)明所述在巧片上固定蛋白質(zhì)的步驟（a)中所述巧片表面上活性末端的活化 試劑是指能夠使經(jīng)修飾的巧片表面的活性末端活化的試劑，在本發(fā)明中該活化試劑可W根 據(jù)活性末端基團(tuán)的不同選擇1- (3-二甲氨基丙基）-3-己基碳二亞胺鹽酸鹽巧DC) /N-哲基 班巧酷亞胺（N服H0. 4M/0. 1M)混合溶液或者N，N' -班巧酷亞胺基碳酸醋值SC)和4-二甲 氨基化晚值MAP)的二甲基甲酷胺值M巧溶液。
[0037] 在本發(fā)明所述在巧片上固定蛋白質(zhì)的步驟化）中所述將目標(biāo)蛋白質(zhì)溶液在巧片 表面打印為手動(dòng)點(diǎn)樣或利用蛋白質(zhì)打印機(jī)進(jìn)行。
[003引本發(fā)明所述在巧片上固定蛋白質(zhì)不局限于在巧片上固定一種蛋白質(zhì)，還可W在第 一種蛋白質(zhì)固定之后，通過蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間的相互作用將第二種或兩種W上的其他蛋 白質(zhì)固定在巧片上，例如，可W先將鏈霉親和素固定在巧片上，而后通過鏈霉親和素與生物 素標(biāo)記蛋白之間的特異結(jié)合將生物素標(biāo)記蛋白固定在巧片上。
[0039] 本發(fā)明所述基于表面等離子共振成像生物傳感器巧片的蛋白質(zhì)固定方法中步驟 (4) 所述利用表面等離子體共振成像（SPRi)來檢測固定蛋白質(zhì)的信號(hào)包括W下步驟：清洗 表面打印有蛋白質(zhì)陣列的巧片，吹干后裝入表面等離子體共振成像儀，向系統(tǒng)中加入緩沖 溶液，調(diào)整光學(xué)位置W選定點(diǎn)樣點(diǎn)，待基線穩(wěn)定之后，用重生液將巧片表面重生5次，通入 待檢測溶液，重生，依次通入校正液1和校正液2,檢測蛋白質(zhì)的信號(hào)。
[0040] 在本發(fā)明所述利用表面等離子體共振成像來檢測固定的蛋白質(zhì)的信號(hào)中所述 清洗為用PBS緩沖液和去離子水依次清洗；優(yōu)選地，所述緩沖溶液為含0. 05 %吐溫20的 IxPBS，抑=7. 4 ;優(yōu)選地，所述重生液為溶質(zhì)磯酸與溶劑水的體積比為1:400的磯酸溶液； 優(yōu)選地，所述待檢測溶液為能夠與所述巧片上固定的蛋白質(zhì)發(fā)生相互作用而產(chǎn)生可檢測信 號(hào)的蛋白質(zhì)溶液，例如當(dāng)巧片上固定的蛋白質(zhì)為抗體hR3或生物素標(biāo)記蛋白時(shí)，檢測溶液 可W是EGFR溶液，當(dāng)巧片上固定的蛋白質(zhì)為Hi s標(biāo)簽的抗體，檢測溶液可W是細(xì)胞裂解液 (全蛋白濃度）；優(yōu)選地，所述校正液1為IxPBS，校正液2為2xPBS。
[0041] 本發(fā)明所述PBS是指磯酸鹽緩沖溶液，所述IxPBS的1L配方為；氯化鋼（化Cl) 8g， 氯化鐘化C1)0. 2g，磯酸氨二鋼（化2冊〇4)1.44肖，磯酸二氨鐘（皿2口〇4)〇. 24g;所述2xPBS的 溶質(zhì)濃度為IxPBS中溶質(zhì)濃度的2倍。
[0042] 在本發(fā)明所述基于表面等離子體共振成像生物傳感器巧片的蛋白質(zhì)固定方法中 所述巧片W金或銀為基底。
[0043] 本發(fā)明提供了一種固定蛋白質(zhì)的方法，簡單地說，可W通過控制活性位點(diǎn)之間的 距離，來控制抗體或者其他蛋白質(zhì)被單點(diǎn)固定在表面，從而避免蛋白質(zhì)被多點(diǎn)固定而導(dǎo)致 的失活，同時(shí)使得活性位點(diǎn)暴露在溶液中，即使被固定的基團(tuán)在活性位點(diǎn)周圍，也能夠保證 獲得抗原與抗體相互作用的檢測信號(hào)。本發(fā)明在金或銀表面上實(shí)現(xiàn)了治療性抗體陣列的制 備，并利用表面等離子體共振成像技術(shù)對(duì)抗體進(jìn)行了確認(rèn)。
[0044] 本發(fā)明具有W下有益效果；本發(fā)明通過建立模型來優(yōu)化巧片表面的化學(xué)修飾，從 而達(dá)到控制活性位點(diǎn)之間的距離，使得能夠在表面等離子體共振成像傳感器巧片上固定蛋 白質(zhì)，保證了蛋白質(zhì)的單點(diǎn)固定，從而避免了因蛋白質(zhì)被多點(diǎn)固定而導(dǎo)致的失活，并且通過 表面等離子體共振成像技術(shù)確認(rèn)了通過此方法固定蛋白質(zhì)能夠獲得優(yōu)化的檢測信號(hào)，因此 本發(fā)明方法在保證蛋白質(zhì)被固定在表面的同時(shí)使得活性位點(diǎn)暴露在溶液中，即使被固定的 基團(tuán)在活性位點(diǎn)周圍，也能夠保證獲得抗原與抗體相互作用的較高檢測信號(hào)。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0045] 圖1是本發(fā)明中用于蛋白質(zhì)固定模型的建立過程圖。
[0046] 圖2是hR3抗體化端的賴氨酸（粗線標(biāo)出）。
[0047] 圖3是利用表面等離子體成像檢測巧片上蛋白質(zhì)得到的在不同硫醇稀釋倍數(shù)下 的信號(hào)強(qiáng)度隨時(shí)間的變化圖。
[0048] 圖4是利用表面等離子體成像檢測巧片上蛋白質(zhì)得到的不同硫醇稀釋倍數(shù)下信 噪比的圖。

【具體實(shí)施方式】
[0049] 下面通過【具體實(shí)施方式】來進(jìn)一步說明本發(fā)明的技術(shù)方案。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該明 了，所述實(shí)施例僅僅是幫助理解本發(fā)明，不應(yīng)視為對(duì)本發(fā)明的具體限制。
[00加]律立用于帝白質(zhì)固定的橫巧并對(duì)橫巧講行輪證 [0化1] 模型的建立；
[0化2] 目的在于建立一個(gè)基于駿基/氨基偶聯(lián)共價(jià)固定蛋白的模型，該模型可W反映出 二維巧片表面駿基密度（距離）與兩種硫醇溶液混合比例的關(guān)系。在巧片表面，利用兩種 末端基團(tuán)（駿基、燒氧基）的硫醇在金表面形成自組裝單分子層，其一，可W保護(hù)巧片表面， 起到抗非特異性吸附的作用；其二，可W提供末端基團(tuán)（主要利用駿基），與抗體殘留氨基 反應(yīng)，共價(jià)偶聯(lián)，將抗體固定在巧片表面。利用該模型，就可W相對(duì)精確地控制表面駿基的 密度（距離），避免因駿基過多導(dǎo)致的抗體被多點(diǎn)固定而失活的現(xiàn)象，又可W避免駿基過少 引起的抗體固定量不足，導(dǎo)致信號(hào)下降的現(xiàn)象。
[0053] 建立的模型（圖1)如下：
[0054] r 二 I *、而，
[0化5] 其中1為硫醇直徑，r為駿基末端之間的平均距離，町為駿基末端硫醇溶液被同濃 度燒氧基末端硫醇溶液稀釋的倍數(shù)；
[0056] 所述用于蛋白質(zhì)固定的模型的推導(dǎo)過程如下；
[0化7] A = a*〇F (I)
[005引考慮a > I2并且代入式（I)得到：
[0059] A = 12 蝴 F (II)
[0060] 考慮駿基末端硫醇（活性末端硫醇）在有效區(qū)域的中屯、，有效區(qū)域假設(shè)為正方形 (如圖1所示），所Wr可W如下計(jì)算：
[00川 r : (III)
[006引將式（n)代入式（III)得出r二7 *
[0063] 其中a為硫醇面積，A為平均一個(gè)駿基末端硫醇分子所占的有效面積。
[0064] 對(duì)于需要提供動(dòng)力學(xué)信息的研究來說，由于實(shí)驗(yàn)過程中需要對(duì)樣品進(jìn)行多次重 生，所W共價(jià)固定是最理想的一種方法。單克隆抗體的平均長度是15nm左右。對(duì)于精確固 定來說，當(dāng)活性位點(diǎn)（即硫醇的活性末端）的間距r在15nmW上才能發(fā)揮固定抗體的活性。 r的值與硫醇稀釋倍數(shù)D湘關(guān)，由所建立的模型計(jì)算得出稀釋倍數(shù)D P與活性位點(diǎn)間距離r 的關(guān)系，如表1所不：
[0065] 表1稀釋倍數(shù)町與活性位點(diǎn)間距離r的關(guān)系
[0066]

【權(quán)利要求】
1. 一種基于表面等離子共振成像生物傳感器芯片的蛋白質(zhì)固定方法，其特征在于，所 述方法包括以下步驟： (1) 建立用于蛋白質(zhì)固定的模型； (2) 根據(jù)所述模型優(yōu)化芯片表面的化學(xué)修飾； (3) 在芯片上固定蛋白質(zhì)； (4) 利用表面等離子共振成像來檢測固定的蛋白質(zhì)的信號(hào)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1)所述用于蛋白質(zhì)固定的模型為：
其中1為硫醇直徑，r為活性末端之間的平均距離，DF為活性末端硫醇溶液被同濃度非 活性末端硫醇溶液稀釋的倍數(shù)； 所述用于蛋白質(zhì)固定的模型的推導(dǎo)過程如下： A=a*DF (I) 考慮a~I2并且代入式⑴得到： A= 12*Df (II) 考慮活性末端硫醇在有效區(qū)域的中心，有效區(qū)域假設(shè)為正方形，所以r可以如下計(jì)算：
將式（II)代入式（III)得出所述模型， 其中a為硫醇面積，A為平均一個(gè)活性末端硫醇分子所占的有效面積。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，步驟（2)所述優(yōu)化芯片表面的化學(xué)修 飾包括以下步驟： (A) 根據(jù)所述模型確定活性末端硫醇溶液被同濃度非活性末端硫醇溶液稀釋的倍數(shù) Df; (B) 清洗芯片，氮?dú)獯蹈桑湃氲入x子體清洗儀中清洗3分鐘； (C) 配制混合硫醇溶液：將活性末端硫醇溶液用同濃度非活性末端硫醇溶液稀釋Df 倍，制成混合硫醇溶液； (D) 將芯片浸入配制好的混合硫醇溶液中，4°C恒溫孵育過夜，取出芯片，清洗芯片表 面，氮?dú)獯蹈?，備用?br> 4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述活性末端硫醇為羧基末端硫醇、醛基 末端硫醇、?；┒肆虼肌h(huán)氧基末端硫醇、齒代烴基末端硫醇、氰基末端硫醇或酯基末端 硫醇中的任意一種； 優(yōu)選地，所述非活性末端硫醇為燒基末端硫醇、燒氧基末端硫醇和輕基末端硫醇中的 任意一種； 優(yōu)選地，步驟（B)和步驟（D)中在氮?dú)獯蹈汕八銮逑葱酒怯靡掖己腿ルx子水交替 清洗。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，步驟（2)所述優(yōu)化芯片表面的 化學(xué)修飾包括優(yōu)化芯片表面的二維化學(xué)修飾和/或三維化學(xué)修飾。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，步驟（3)所述在芯片上固定蛋 白質(zhì)包括以下步驟： (a) 將表面化學(xué)修飾優(yōu)化的芯片浸入芯片表面上活性末端的活化試劑的溶液中進(jìn)行活 化； (b) 用去離子水清洗芯片，氮?dú)獯蹈?，將目?biāo)蛋白質(zhì)溶液在芯片表面打印形成蛋白質(zhì)陣 列； (c) 用2%的牛血清白蛋白的PBS溶液在室溫下封閉20分鐘，完成芯片上蛋白質(zhì)的固 定。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，步驟（b)所述將目標(biāo)蛋白質(zhì)溶液在芯片表 面打印為手動(dòng)點(diǎn)樣或利用蛋白質(zhì)打印機(jī)進(jìn)行打印。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，步驟（4)所述利用表面等離子 體共振成像來檢測固定的蛋白質(zhì)的信號(hào)包括以下步驟： 清洗表面打印有蛋白質(zhì)陣列的芯片，吹干后裝入表面等離子共振成像儀，向系統(tǒng)中加 入緩沖溶液，調(diào)整光學(xué)位置以選定點(diǎn)樣點(diǎn)，待基線穩(wěn)定之后，用重生液將芯片表面重生5 次，通入待檢測溶液，重生，依次通入校正液1和校正液2,檢測蛋白質(zhì)的信號(hào)。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述清洗為用PBS緩沖液和去離子水依次 清洗； 優(yōu)選地，所述緩沖溶液為含0. 05 %吐溫20的lxPBS，pH= 7. 4 ; 優(yōu)選地，所述重生液為溶質(zhì)磷酸與溶劑水的體積比為1:400的磷酸溶液； 優(yōu)選地，所述待檢測溶液為能夠與所述芯片上固定的蛋白質(zhì)發(fā)生相互作用而產(chǎn)生可檢 測信號(hào)的蛋白質(zhì)溶液； 優(yōu)選地，所述校正液1為lxPBS，所述校正液2為2xPBS。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述芯片以金或銀為基底。
【文檔編號(hào)】G01N21/55GK104502311SQ201410778164
【公開日】2015年4月8日 申請(qǐng)日期:2014年12月15日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月15日
【發(fā)明者】朱勁松, 巴蒂斯塔· 佩雷斯 哈維爾·, 楊墨, 迪彭德拉·特亞吉, 埃內(nèi)斯托·莫雷諾, 洛尼·卡爾沃, 程志強(qiáng), 李少鵬, 周文菲 申請(qǐng)人:國家納米科學(xué)中心