一種頭孢地尼反應(yīng)終點(diǎn)的液相檢測方法
【專利摘要】一種頭孢地尼反應(yīng)終點(diǎn)的液相檢測方法，包括以下步驟：1)稀釋反應(yīng)液，過濾；2)流動相配置，A流動相：1000mL水相中含26mL10％四丁基氫氧化銨水溶液、磷酸調(diào)節(jié)pH等于5.0，B流動相：乙腈；3)流動相體積比A：B＝525～600：475～400，流速1mL/min，C18填料，柱溫25度，檢測波長210～300nm，進(jìn)樣體積10μL；4)以7-AVCA在液相色譜中的峰面積小于0.5％為反應(yīng)終點(diǎn)。本發(fā)明的有益效果在于：在不改變其他色譜條件下，調(diào)整混合流動相各組分的比例，使7-AVCA與相鄰共存物之間的分離度大于1.5，達(dá)到完全的基線分離，準(zhǔn)確的判斷反應(yīng)終點(diǎn)，方法簡便，可操作性強(qiáng)。
【專利說明】一種頭孢地尼反應(yīng)終點(diǎn)的液相檢測方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種分析檢測方法，尤其涉及一種頭孢地尼反應(yīng)終點(diǎn)的液相檢測方法。

【背景技術(shù)】
[0002]頭孢地尼合成步驟包括:縮合，脫保護(hù)和精制三步。在縮合反應(yīng)一步中，由中間體7-AVCA和活性酯反應(yīng)生成頭孢地尼。HPLC檢測反應(yīng)液，7-AVCA〈0.5%時，即判定為反應(yīng)終點(diǎn)。當(dāng)活性酯來源不同廠家時，帶入反應(yīng)液的雜質(zhì)也不同，當(dāng)7-AVCA與相鄰兩雜質(zhì)形成三連峰，無法準(zhǔn)確積分得到7-AVCA的含量，即7-AVCA —直大于0.5 %，無法準(zhǔn)確判斷反應(yīng)是否達(dá)到終點(diǎn)，直接影響產(chǎn)物的純度和質(zhì)量。方便快捷的調(diào)整液相檢測方法，判斷反應(yīng)終點(diǎn)對整個工藝流程尤為重要。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是提供一種頭孢地尼反應(yīng)終點(diǎn)的液相檢測方法，用于實(shí)現(xiàn)對頭孢地尼合成過程中反應(yīng)終點(diǎn)的快速、準(zhǔn)確的判斷。
[0004]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的包括以下步驟:
[0005]I)取ImL頭孢地尼反應(yīng)液,加入1mL乙腈稀釋,0.45 μ m有機(jī)針式過濾頭過濾；
[0006]2)流動相配置，A流動相:1000mL水相中含26mL 10%四丁基氫氧化銨水溶液、磷酸調(diào)節(jié)pH等于5.0, B流動相:乙腈；
[0007]3)以步驟2)中的流動相體積比A:B = 525?600:475?400，流速lmL/min，色譜柱:250mmX 4.6mm不銹鋼柱、C18填料、填料粒徑5 μ m，柱溫25度，檢測波長210?300nm，進(jìn)樣體積1yL;
[0008]4)以頭孢地尼反應(yīng)液中原料7-AVCA在液相色譜中的峰面積小于0.5%為反應(yīng)終點(diǎn)。
[0009]進(jìn)一步，所述流動相體積比A:B = 600:400時，分離度大于1.5，完全分離。
[0010]進(jìn)一步，所述頭孢地尼反應(yīng)液中原料7-AVCA在液相色譜中的保留時間為
11.3min。
[0011]本發(fā)明的有益效果在于:在不改變其他色譜條件下，調(diào)整混合流動相各組分的比例，使7-AVCA與相鄰共存物之間的分離度大于1.5，達(dá)到完全的基線分離，能更加準(zhǔn)確的判斷反應(yīng)終點(diǎn)，方法簡便，可操作性強(qiáng)。

【具體實(shí)施方式】
[0012]本發(fā)明的包括以下步驟:、
[0013]I)取ImL頭孢地尼反應(yīng)液，加入1mL乙腈稀釋，0.45 μ m有機(jī)針式過濾頭過濾；
[0014]2)流動相配置，A流動相:1000mL水相中含26mL 10%四丁基氫氧化銨水溶液、磷酸調(diào)節(jié)pH等于5.0, B流動相:乙腈；
[0015]3)以步驟2)中的流動相體積比A:B = 525?600:475?400，流速lmL/min，色譜柱:250mmX 4.6mm不銹鋼柱、C18填料、填料粒徑5 μ m，柱溫25度，檢測波長210?300nm，進(jìn)樣體積1yL;
[0016]4)以頭孢地尼反應(yīng)液中原料7-AVCA在液相色譜中的峰面積小于0.5%為反應(yīng)終點(diǎn)。
[0017]進(jìn)一步，所述流動相體積比A:B = 600:400時，分離度大于1.5，完全分離。
[0018]進(jìn)一步，所述頭孢地尼反應(yīng)液中原料7-AVCA在液相色譜中的保留時間為
11.3min。
[0019]實(shí)施例:
[0020]取ImL頭孢地尼反應(yīng)液,加入1mL乙腈稀釋,0.45 μ m有機(jī)針式過濾頭過濾；流動相采用:A流動相:1000mL水相中含26mL 10%四丁基氫氧化銨水溶液、磷酸調(diào)節(jié)pH等于5.0, B 流動相:乙腈,A:B = 600:400 ;流速 lmL/min,色譜柱:250mmX4.6mm 不銹鋼柱、C18填料、填料粒徑5 μ m，柱溫25度，檢測波長210?300nm，進(jìn)樣體積10 μ L ;結(jié)果7-AVCA在液相色譜中的保留時間為11.3min，分離度大于1.5。
[0021]以上對本發(fā)明的一個實(shí)施例進(jìn)行了詳細(xì)說明，但所述內(nèi)容僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，不能被認(rèn)為用于限定本發(fā)明的實(shí)施范圍。凡依本發(fā)明申請范圍所作的均等變化與改進(jìn)等，均應(yīng)仍歸屬于本發(fā)明的專利涵蓋范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種頭孢地尼反應(yīng)終點(diǎn)的液相檢測方法，包括以下步驟: 1)取ImL頭孢地尼反應(yīng)液,加入1mL乙腈稀釋,0.45 μ m有機(jī)針式過濾頭過濾； 2)流動相配置，A流動相:1000mL水相中含26mL10%四丁基氫氧化銨水溶液、磷酸調(diào)節(jié)pH等于5.0, B流動相:乙腈； 3)以步驟2)中的流動相體積比A:B = 525?600:475?400，流速lmL/min，色譜柱:250mmX4.6mm不銹鋼柱、C18填料、填料粒徑5 μ m，柱溫25度，檢測波長210?300nm，進(jìn)樣體積1yL; 4)以頭孢地尼反應(yīng)液中原料7-AVCA在液相色譜中的峰面積小于0.5%為反應(yīng)終點(diǎn)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種頭孢地尼反應(yīng)終點(diǎn)的液相檢測方法，其特征在于:所述流動相體積比A:B = 600:400時，分離度大于1.5，完全分離。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種頭孢地尼反應(yīng)終點(diǎn)的液相檢測方法，其特征在于:所述頭孢地尼反應(yīng)液中原料7-AVCA在液相色譜中的保留時間為11.3min。
【文檔編號】G01N30/34GK104330507SQ201410542200
【公開日】2015年2月4日 申請日期:2014年10月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月14日
【發(fā)明者】孟繁靜, 廖飛, 王凡 申請人:天津醫(yī)藥集團(tuán)津康制藥有限公司