適用于棉花中11種脫葉劑殘留的檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種適用于棉花中11種脫葉劑殘留的檢測方法，其特征在于包括以下步驟：1)制備待測樣品溶液：稱取待測棉花，利用加速溶劑萃取裝置進行提取；以甲醇作為提取劑，按設(shè)定的提取程序運行；提取完成后減壓濃縮，定容后離心；得上層清液；2)制備標準溶液：配制成0.01～0.30μg/mL的11種脫葉劑農(nóng)藥的梯度標準工作溶液；3)將梯度標準溶液注入超高壓液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀，正、負離子多反應(yīng)監(jiān)測模式測定，制作標準曲線方程；4)取步驟1)所得的上層清液按步驟3)方法測定，最終得到待測樣品中各脫葉劑農(nóng)藥含量。
【專利說明】適用于棉花中11種脫葉劑殘留的檢測方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種適用于棉花中11種脫葉劑殘留的檢測方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 棉花是目前世界用量最大的單纖維品種，總量達到纖維消耗的40%以上，在天然 纖維中達3/4,是紡織工業(yè)最重要的纖維產(chǎn)品。近年來，隨著綠色環(huán)保和穿著天然化要求的 提高，棉花在紡織制品尤其是在服裝和家紡產(chǎn)品的比例又有所上升。然而，棉花是農(nóng)藥消耗 量最大的農(nóng)副產(chǎn)品之一，世界上大約60%的農(nóng)化制劑被用于棉花生產(chǎn)，超過了任何其他農(nóng) 作物。在棉花收獲前還使用了大量的脫葉劑，促使棉株的葉片盡快脫落，以提高機械采收的 作業(yè)效率并降低籽棉的含雜率。日常棉花上使用的脫葉劑從作用機制上可分為兩類：第一 類為觸殺型的化合物，如脫葉膦、噻節(jié)因、唑草酯、敵草隆、草甘膦、百草枯、氯酸鎂等；第二 類是促進內(nèi)源乙烯生成的化合物，能夠誘導(dǎo)棉鈴的開裂和葉柄離層形成，如乙烯利和噻苯 隆等。但是，這些農(nóng)藥都有一定毒性，對人類和生態(tài)系統(tǒng)有著直接和間接的潛在危害。國際 生態(tài)紡織品研究和檢驗協(xié)會頒布的〇ek〇-Tex StandardlOO標準中，規(guī)定禁用和限用的與棉 花生產(chǎn)直接有關(guān)的農(nóng)藥就達54種，包含殺蟲劑、除草劑和脫葉劑等。近年來，我國檢驗檢疫 監(jiān)管人員曾隨機抽取了 6個國家的棉花樣品共21個，經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)13個樣品含有農(nóng)藥殘留， 占總樣品數(shù)的61. 9%，表明棉花中的農(nóng)藥殘留問題不容忽視。當前，進口棉花檢測一般都是 重量鑒定和極其普通的長度測試等物理指標，基本不涉及生態(tài)指標。然而，在國際技術(shù)壁壘 設(shè)置越來越苛刻的情況下，對棉花生態(tài)方面的限量規(guī)定是必然趨勢。目前，鮮見關(guān)于棉花中 脫葉劑農(nóng)藥多殘留檢測方法的報道，因此，開展棉花中脫葉劑多殘留檢測方法研究有著重 大的現(xiàn)實意義。
[0003] 目前現(xiàn)有的脫葉劑殘留的檢測方法為：吳剛等采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測 定了棉花中殘留的8種脫葉劑（色譜，2013, 31 (7) :697-702);李榮霞等采用紫外分光光度 法測定棉花脫葉劑噻苯隆（現(xiàn)代紡織技術(shù)，2013, 3 :48-51);曾蓉等用高效液相色譜法法測 定了棉花中的脫葉劑噻苯隆（標準科學(xué)，2010, 5 :22-25)。這些方法一般只能檢測棉花中的 一種脫葉劑，最多也僅8種，檢測靈敏度也不盡相同。隨著國外貿(mào)易技術(shù)壁壘的不斷更新， 亟需高通量的一次能檢測多種脫葉劑的方法。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種法靈敏度高、操作簡便、準確可靠的適用于 棉花中11種脫葉劑殘留的檢測方法。
[0005] 為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種適用于棉花中11種脫葉劑殘留的檢測 方法，包括以下步驟：
[0006] 1)、制備待測樣品溶液：
[0007] (1)、稱取lg待測棉花，精確至0. Olg，利用加速溶劑萃取裝置進行提??；以甲醇作 為提取劑；
[0008] 備注說明，一般為：裝入加速溶劑萃取池，置于加速溶劑萃取儀的樣品管卡口處；
[0009] (2)、按設(shè)定的提取程序運行：溫度80?150°C (較佳為100°C )，壓強1000? 2000psi (較佳為1500psi)，預(yù)熱1?5min (較佳為2min)，加熱1?lOmin (較佳為5min)， 用甲醇靜態(tài)萃取1?l〇min(較佳為5min)，10?60% (較佳為60% )萃取池體積甲醇快 速沖洗樣品，30?60s氮氣吹掃收集全部提取液，靜態(tài)萃取運行1?3個周期（指加速溶劑 萃取運行的萃取周期，較佳為2個周期）；
[0010] 所述待測樣品與甲醇（提取劑）的料液比為：lg/15?60mL(較佳為lg/30mL);
[0011] 備注說明：上述料液比對應(yīng)的是每個周期；
[0012] (3)、提取完成后，將提取液收集于平底燒瓶中，30?50°C (較佳為40°C )水浴中 減壓濃縮至近干，準確加入乙腈與水的混合液作為溶劑定容，所述乙腈在溶劑中的體積濃 度為5%?90% (較佳為10% );
[0013] (4)、取上述提取混合液離心，所得的上層清液置于進樣瓶中密封，目的是供 UPLC-MS/MS進行定性、定量分析；
[0014] 上述離心一般為高速離心，例如為6000?10000轉(zhuǎn)/分鐘；
[0015] 2)、制備標準溶液：
[0016] (1)用乙腈分別將表1中的11種脫葉劑農(nóng)藥標準物質(zhì)溶解，配制成濃度為100? 1000 μ g/mL的標準儲備溶液；
[0017] 所述11種脫葉劑農(nóng)藥為：
[0018] 乙烯利（Ethephon)、噻苯?。═hidiazuron)、脫葉憐（Butiphos)、甲基苯噻隆 (Methabenzthiazuron)、脫落酸（Abscisic acid，ΑΒΑ)、噻節(jié)因（Dimethipin)、氟酮唑草 酯（Carfentrazone-ethyl)、敵草隆（Diuron)、草甘勝（Glyphosate)、百草枯（Paraquat methosulfate)、啼草硫醚（Pyrithiobac-sodium);具體如下表 1 所不；
[0019] ⑵用乙腈將11種脫葉劑農(nóng)藥的標準儲備溶液溶解，配制成1?100 μ g/mL (較佳 為10 μ g/mL)的混合標準工作溶液；
[0020] 備注說明：上述濃度是指每種脫葉劑農(nóng)藥的濃度；且，上述每種脫葉劑農(nóng)藥在混 合標準工作溶液中的濃度是一致的；
[0021] 表1. 11種脫葉劑農(nóng)藥化學(xué)信息表
[0022]

【權(quán)利要求】
1. 適用于棉花中11種脫葉劑殘留的檢測方法，其特征在于包括以下步驟： 1) 、制備待測樣品溶液： (1) 、稱取lg待測棉花，精確至0. oig，利用加速溶劑萃取裝置進行提取；以甲醇作為提 取劑； (2) 、按設(shè)定的提取程序運行：溫度80?150°C，壓強1000?2000psi，預(yù)熱1?5min， 加熱1?l〇min，用甲醇靜態(tài)萃取1?lOmin，10?60 %萃取池體積甲醇快速沖洗樣品，30? 60s氮氣吹掃收集全部提取液，靜態(tài)萃取運行1?3個周期； 所述待測樣品與甲醇的料液比為：lg/15?60mL ; (3) 、提取完成后，將提取液收集于平底燒瓶中，30?50°C水浴中減壓濃縮至近干，力口 入乙腈與水的混合液作為溶劑定容，所述乙腈在溶劑中的體積濃度為5%?90% ; (4) 、取上述所得的提取混合液離心，所得的上層清液置于進樣瓶中密封； 所述離心為6000?10000轉(zhuǎn)/分鐘的高速離心； 2) 、制備標準溶液： (1) 用乙腈分別將11種脫葉劑農(nóng)藥標準物質(zhì)溶解，配制成濃度均為100?1000 μ g/mL 的11種標準儲備溶液； 所述11種脫葉劑農(nóng)藥為： 乙烯利、噻苯隆、脫葉磷、甲基苯噻隆、脫落酸、噻節(jié)因、氟酮唑草酯、敵草隆、草甘膦、百 草枯、嘧草硫醚； (2) 用乙腈將11種脫葉劑農(nóng)藥的標準儲備溶液溶解，配制成1?100 μ g/mL的混合標 準工作溶液； (3) 以乙腈與水的混合液作為溶劑，所述乙腈在溶劑中的體積濃度為10%?90% ; 用上述溶劑將11種脫葉劑農(nóng)藥的標準儲備溶液溶解，配制成〇. 01?〇. 30 μ g/mL梯度 的標準工作溶液； 3) 、將梯度標準溶液注入超高壓液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀，正、負離子多反應(yīng)監(jiān)測模式測 定，確定各脫葉劑農(nóng)藥的出峰位置，記錄定量離子對的峰面積，以濃度為橫坐標，峰面積為 縱坐標，制作標準曲線方程； 4) 、取步驟1)所得的上層清液按步驟3)方法測定上清液中各脫葉劑農(nóng)藥及其峰面積， 按照步驟3)所得的標準曲線方程計算，得到上層清液中的各脫葉劑農(nóng)藥含量，最終得到待 測樣品中各脫葉劑農(nóng)藥含量。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的適用于棉花中11種脫葉劑殘留的檢測方法，其特征在于： 所述步驟3)中， 超高壓液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測用的液相色譜條件為：流速：〇. 2?0. 8mL/min ;柱溫： 20?45°C ;進樣體積：1?10 μ L ;流動相A :甲醇；流動相B :0. 01?0. 5%甲酸；梯度洗脫 程序：〇 ?2min，5% A ?10% A ;2 ?5min，10% A ?80% A ;5 ?7min，80% A ?80% A ; 7 ?7. lmin，80% A ?5% A ;流速：0· 3mL/min ； 超高壓液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測用的質(zhì)譜條件為：離子源為電噴霧離子源（ESI);檢測 方式為正、負離子多反應(yīng)監(jiān)測模式；毛細管電壓為2?4kV ;離子源溫度為80?150°C ;脫 溶劑氣溫度為150?380°C;脫溶劑氣流速為200?800L/h ;錐孔反吹氣流速為10?60L/ h ;離子駐留時間均為0. 03?0. 2s ;錐孔電壓為10?70V ;碰撞電壓5?31V ;11種脫葉劑 農(nóng)藥的定性與定量離子對如下： 百草枯的定量離子對為185. 1>169. 8,定性離子對為185. 1>143. 9 ; 草甘膦的定量離子對為169. 9>88. 1，定性離子對為169. 9>60. 4 ; 乙烯利的定量離子對為144. 9>81. 2,定性離子對為144. 9>109. 1 ; 噻節(jié)因的定量離子對為209. 0>91. 2,定性離子對為209. 0>161. 1 ; 噻苯隆的定量離子對為221. 02>102. 1，定性離子對為221. 02>128. 0 ; 脫落酸的定量離子對為264. 9>182. 8,定性離子對為264. 9>223. 6 ; 甲基苯噻隆的定量離子對為222. 02>165. 0,定性離子對為222. 02>150. 0 ; 唑草酯的定量離子對為410. 1>369. 8,定性離子對為410. 1>303. 9 ; 敵草隆的定量離子對為233>72. 3,定性離子對為233>159. 9 ; 嘧草硫醚的定量離子對為327. 2>308. 9,定性離子對為327. 2>139. 1 ; 脫葉膦的定量離子對為315. 1>168. 9,定性離子對為315. 1>57. 5。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的適用于棉花中11種脫葉劑殘留的檢測方法，其特征在于： 所述超高壓液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測用的色譜柱為：ACQUITY UPLCS. BEH C18,1. 7 μ m， 2. 1 X 50mm。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1?3任一所述的適用于棉花中11種脫葉劑殘留的檢測方法，其特征 在于：所述步驟1)的步驟（3)中，每lg待測樣品用5mL溶劑定容。
【文檔編號】G01N30/06GK104090058SQ201410337337
【公開日】2014年10月8日 申請日期:2014年7月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月16日
【發(fā)明者】吳剛, 董鎖拽, 趙珊紅, 王力君, 張明譽 申請人:浙江出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心