精漿復(fù)合質(zhì)控品及其制備方法、試劑盒的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種精漿復(fù)合質(zhì)控品，是由質(zhì)控品保存液和精漿原液混合后制成的凍干粉；所述質(zhì)控品保存液為含糖類0.47～0.67%、鹽類0.07～0.17%和酶穩(wěn)定劑0.63～0.83%的水溶液；所述精漿原液為已完全液化的人新鮮精液直接離心后獲取的精漿；所述質(zhì)控品保存液與精漿原液的混合體積比為1：100～100：1。本發(fā)明采用特有的質(zhì)控品保存液，與精漿以適宜的體積比進(jìn)行混合后進(jìn)行凍干處理，這樣可使精漿內(nèi)的各項(xiàng)生化指標(biāo)更加穩(wěn)定，從而有效回避了精液中物質(zhì)在體外很不穩(wěn)定和難以保存的缺點(diǎn)，制備出來的精漿復(fù)合質(zhì)控品性能穩(wěn)定、使用簡便，可用于精漿生化檢測項(xiàng)目的質(zhì)控。
【專利說明】精漿復(fù)合質(zhì)控品及其制備方法、試劑盒
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于體外檢測試劑類，特別涉及精漿復(fù)合質(zhì)控品及其制備方法、試劑盒。
【背景技術(shù)】
[0002]精液的生化指標(biāo)檢測一直缺乏實(shí)驗(yàn)質(zhì)控品，使得精液生化分析的標(biāo)準(zhǔn)化工作停滯不前。精液中的眾多物質(zhì)在體外很不穩(wěn)定，難以保存，更是增加了制備精漿質(zhì)控品的技術(shù)難度。
[0003]現(xiàn)有技術(shù)的精漿各項(xiàng)目檢測試劑盒所使用的質(zhì)控品均只是針對各自的檢測項(xiàng)目的專有質(zhì)控品，而且并不是由精漿制備而成，目前還未有利用精漿制備而成的質(zhì)控品應(yīng)用在精漿各項(xiàng)目檢測試劑盒上。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種以精漿為基質(zhì)、性能穩(wěn)定和使用簡便的用于精漿生化免疫檢測實(shí)驗(yàn)質(zhì)控的精漿復(fù)合質(zhì)控品，本發(fā)明還提供了所述精漿復(fù)合質(zhì)控品的制備方法以及利用精漿復(fù)合質(zhì)控品對精漿生化檢測項(xiàng)目進(jìn)行質(zhì)控的方法。
[0005]本發(fā)明提供了一種精漿復(fù)合質(zhì)控品，是由質(zhì)控品保存液和精漿原液混合后制成的凍干粉；所述質(zhì)控品保存液為含糖類0.47?0.67%、鹽類0.07?0.17%和酶穩(wěn)定劑0.63?0.83%的水溶液；所述精漿原液為已完全液化的人新鮮精液直接離心后獲取的精漿；所述質(zhì)控品保存液與精漿原液的混合體積比為1:100?100:1。
[0006]所述糖類為蔗糖，所述鹽類為氯化鈉，所述酶穩(wěn)定劑為氨基乙酸。
[0007]所述質(zhì)控品保存液為含蔗糖0.57%、氯化鈉0.12%、氨基乙酸0.73%的水溶液；所述質(zhì)控品保存液與精漿原液的混合體積比為1:1。
[0008]本發(fā)明還提供了所述的精漿復(fù)合質(zhì)控品的制備方法，包括如下步驟:制備質(zhì)控品保存液:稱取糖類、鹽類和酶穩(wěn)定劑，加純化水至充分溶解，制備得到含有上述各組分百分比的質(zhì)控品保存液；獲取精漿原液；取若干份已完全液化且HCV、HIVl+2、HBSAg和梅毒檢測均為陰性的人新鮮精液，離心獲取精漿原液，將所取精漿原液混勻；混合凍干得到精漿復(fù)合質(zhì)控品:取精漿原液，與上述質(zhì)控品保存液以上述體積比混合均勻，然后在真空冷凍干燥機(jī)上制成凍干粉，即為精漿復(fù)合質(zhì)控品。
[0009]所述真空冷凍干燥機(jī)的凍干步驟為:啟動真空冷凍干燥機(jī)，設(shè)置凍干曲線為:-40°C維持2h后，抽2h后啟動真空調(diào)溫至-40°C維持16h，升溫至(TC維持3h，升溫至30°C維持5h，最后放氣取出，封蓋，得到干粉狀的精漿復(fù)合質(zhì)控品。
[0010]本發(fā)明還提供了一種包含有上述精漿復(fù)合質(zhì)控品的精漿檢測試劑盒，包括:精漿復(fù)合質(zhì)控品；精漿生化指標(biāo)檢測的試劑:以及一份包含有對應(yīng)上述精漿生化指標(biāo)的定值范圍的試劑盒說明書；所述對應(yīng)上述精漿生化指標(biāo)的定值范圍可通過以下方法獲取:將上述精漿原液與上述質(zhì)控品保存液混合均勻分裝成2ml每瓶，在真空冷凍干燥機(jī)上制成凍干粉狀的精漿復(fù)合質(zhì)控品，取24瓶精漿復(fù)合質(zhì)控品，每瓶加2ml純化水充分復(fù)溶，分三次檢測，每次8瓶，利用精漿生化指標(biāo)檢測的試劑對其進(jìn)行檢測，統(tǒng)計(jì)分析每一項(xiàng)精漿生化指標(biāo)的平均值X及標(biāo)準(zhǔn)差S，平均值加、減兩倍標(biāo)準(zhǔn)差，即為試劑盒該項(xiàng)目的定值范圍X±2S。
[0011]所述精漿生化指標(biāo)檢測的試劑為精漿彈性蛋白酶定量測定試劑盒、精漿鋅定量測定試劑盒、精漿檸檬酸定量測定試劑盒、精漿中性α -葡萄糖糖苷酶定量測定試劑盒、精液乳酸脫氫酶同工酶X定量測定試劑盒、精漿酸性磷酸酶定量測定試劑盒、精漿果糖定量測定試劑盒或精子頂體酶活性定量試劑盒中的一種或多種。
[0012]利用上述包含有精漿復(fù)合質(zhì)控品的精漿檢測試劑盒對其中的精漿生化檢測項(xiàng)目進(jìn)行質(zhì)控的方法，步驟如下:
[0013]步驟一:溶解精漿復(fù)合質(zhì)控品
[0014]取I瓶精漿復(fù)合質(zhì)控品，以純化水或生理鹽水或其他溶解液2ml溶解精漿復(fù)合質(zhì)控品，靜置或37°C孵育或震蕩孵育或恒溫震蕩以充分溶解；
[0015]步驟二:獲取測定值
[0016]利用精漿生化指標(biāo)檢測的試劑檢測精漿復(fù)合質(zhì)控品，得到測定值；
[0017]步驟三:比較測定值與定值范圍
[0018]將測定值與精漿復(fù)合質(zhì)控品內(nèi)的精漿生化指標(biāo)的定值范圍進(jìn)行比較，如果測定值在定值范圍X±2S內(nèi)，則本次檢測的結(jié)果可信；如果測定值超出定值范圍X±2S，則說明本次檢測的測定值不可信，需要查找原因，重新檢測。
[0019]本發(fā)明采用特有的質(zhì)控品保存液，與精漿以適宜的體積比進(jìn)行混合后進(jìn)行凍干處理，這樣可使精漿內(nèi)的各項(xiàng)生化指標(biāo)更加穩(wěn)定，從而有效回避了精液中物質(zhì)在體外很不穩(wěn)定和難以保存的缺點(diǎn)，制備出來的精漿復(fù)合質(zhì)控品性能穩(wěn)定、使用簡便，可用于精漿生化檢測項(xiàng)目的質(zhì)控。
【具體實(shí)施方式】
[0020]本發(fā)明提供一種精漿復(fù)合質(zhì)控品，包括質(zhì)控品保存液和精漿原液，所述質(zhì)控品保存液為含糖類0.47?0.67%、鹽類0.07?0.17%、酶穩(wěn)定劑0.63?0.83%的水溶液(其中百分比為m/v,單位為g/ml)。
[0021 ] 所述質(zhì)控品保存液與精漿原液的混合體積比為1: 100?100:1。這里的精漿原液為已完全液化的人新鮮精液直接離心后獲取的精漿。
[0022]所述糖類為蔗糖、果糖、麥芽糖或葡萄糖；所述鹽類為氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸鈣、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鉀或磷酸二氫鉀；所述酶穩(wěn)定劑為氨基乙酸、甘油、聚乙烯胺、甘露醇或甲苯。
[0023]上述精漿復(fù)合質(zhì)控品的制備方法為:
[0024]制備質(zhì)控品保存液:稱取上述一定重量的糖類、鹽類和酶穩(wěn)定劑，混合然后加純化水至100ml，充分溶解，得到含上述各組分百分比的質(zhì)控品保存液。
[0025]獲取精漿原液:取若干份已完全液化的人新鮮精液，在其中選取HCV、HIV1+2、HBSAg和梅毒檢測均為陰性的作為原料，離心獲取精漿(也可以以凍存的精液或精漿原液為原料，同樣需要檢測HCV、HIV1+2、HBSAg和梅毒)，將所取精漿原液以物理方法混勻，得到精漿原液。
[0026]混合凍干得到精漿復(fù)合質(zhì)控品:取IOOml精漿原液，與上述質(zhì)控品保存液混合均勻，混合的體積比為1:100~100:1，然后分裝成2ml每瓶，在真空冷凍干燥機(jī)上制成凍干粉，凍干步驟為:啟動真空冷凍干燥機(jī)，設(shè)置凍干曲線為:-40°C維持2h后，抽2h后啟動真空調(diào)溫至-40°C維持16h，升溫至0°C維持3h，升溫至30°C維持5h，最后放氣取出，封蓋，得到干粉狀的精漿復(fù)合質(zhì)控品。
[0027] 利用上述精漿復(fù)合質(zhì)控品可對精漿生化指標(biāo)取定值范圍，所述精漿生化檢測指標(biāo)優(yōu)選為精漿果糖、精漿中性a-葡糖苷酶、精漿鋅、精漿酸性磷酸酶、精漿檸檬酸、精漿彈性蛋白酶、精漿乳酸脫氫酶X同工酶和精子頂體酶活性的一種或多種。
[0028]本發(fā)明還提供利用上述精漿復(fù)合質(zhì)控品對精漿生化指標(biāo)進(jìn)行定量測定的質(zhì)控方法，包括如下步驟:
[0029]步驟一:溶解精漿復(fù)合質(zhì)控品
[0030]以純化水或生理鹽水或其他溶解液溶解精漿復(fù)合質(zhì)控品，靜置或37 °C孵育或震蕩孵育或恒溫震蕩以充分溶解。
[0031]步驟二:獲取測定值
[0032]利用上述精漿生化指標(biāo)檢測的試劑以檢測普通精漿標(biāo)本的方法檢測精漿復(fù)合質(zhì)控品，得到測定值。
[0033]步驟三:比較測定值與定值范圍
[0034]將測定值與精漿復(fù)合質(zhì)控品的定值范圍進(jìn)行比較，如果在定值范圍內(nèi)，則說明本次檢測的測定值可信；如果超出定值范圍，則說明本次檢測的測定值不可信，需要查找原因，重新檢測。
[0035]此外，還可以對幾次檢測的值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，如果連續(xù)幾次的值都往同一個方向偏離定值，即時它們都在定值范圍內(nèi)，也說明檢測結(jié)果不可信，出現(xiàn)了系統(tǒng)偏差。
[0036]實(shí)施例1
[0037]本實(shí)施例提供了一種精漿復(fù)合質(zhì)控品，包括:質(zhì)控品保存液和精漿原液；所述質(zhì)控品保存液為含有氨基乙酸、氯化鈉和蔗糖的水溶液；其中，所述質(zhì)控品保存液和精漿原液以體積比1:1混合后經(jīng)冷凍干燥后呈干粉狀。
[0038]本實(shí)施例還提供了上述精漿復(fù)合質(zhì)控品的制備方法，其步驟如下:
[0039]步驟一:制備質(zhì)控品保存液
[0040]稱取氨基乙酸0.7302g、氯化鈉0.1205g和蔗糖0.5713g，然后加純化水至100ml，
充分溶解，得到質(zhì)控品保存液。
[0041]步驟_.:獲取精衆(zhòng)原液
[0042]取若干份已完全液化的人新鮮精液，在其中選取HCV、HIV1+2、HBSAg和梅毒檢測均為陰性的作為原料，在3000g下離心20min獲取精漿(也可以以凍存的精液或精漿為原料，同樣需要檢測HCV、HIV1+2、HBSAg和梅毒)，將所取精漿原液以物理方法混勻，得到精漿原液。
[0043]步驟三:混合凍干得到精漿復(fù)合質(zhì)控品
[0044]取100mL精漿原液，與上述質(zhì)控品保存液混合均勻，混合的體積比為1: 1，然后分裝成2ml每瓶，在真空冷凍干燥機(jī)上制成凍干粉，凍干步驟為:啟動真空冷凍干燥機(jī)，設(shè)置凍干曲線為:-40°C維持2h后，抽2h后啟動真空調(diào)溫至_40°C維持16h，升溫至(TC維持3h，升溫至30°C維持5h，最后放氣取出，封蓋，得到干粉狀的精漿復(fù)合質(zhì)控品。[0045]實(shí)施例2
[0046]本實(shí)施例與實(shí)施例1不同的是:
[0047]質(zhì)控品保存液為含有聚乙烯胺、碳酸鈉和葡萄糖的水溶液；其中，所述質(zhì)控品保存液和精漿原液以體積比1:80混合后經(jīng)冷凍干燥后呈干粉狀。
[0048]質(zhì)控品保存液的制備方法為:稱取聚乙烯胺0.8134g、碳酸鈉0.0954g和葡萄糖
0.6543g，然后加純化水至100ml，充分溶解，得到質(zhì)控品保存液。
[0049]實(shí)施例3
[0050]本實(shí)施例與實(shí)施例1不同的是:[0051]質(zhì)控品保存液為含有甲苯、碳酸氫鉀和麥芽糖的水溶液；其中，所述質(zhì)控品保存液和精漿原液以體積比60:1混合后經(jīng)冷凍干燥后呈干粉狀。
[0052]質(zhì)控品保存液的制備方法為:稱取甲苯0.6835g、碳酸氫鉀0.0812g和麥芽糖
0.4832g，然后加純化水至100ml，充分溶解，得到質(zhì)控品保存液。
[0053]實(shí)施例4
[0054]本實(shí)施例提供了一種包含有精漿復(fù)合質(zhì)控品的精漿檢測試劑盒，包括:
[0055]精漿復(fù)合質(zhì)控品；
[0056]精漿生化指標(biāo)檢測的試劑(共8種試劑盒，包括精漿彈性蛋白酶定量測定試劑盒、精漿鋅定量測定試劑盒、精漿檸檬酸定量測定試劑盒、精漿中性α -葡萄糖糖苷酶定量測定試劑盒、精液乳酸脫氫酶同工酶X定量測定試劑盒、精漿酸性磷酸酶定量測定試劑盒、精漿果糖定量測定試劑盒和精子頂體酶活性定量試劑盒);
[0057]以及一份包含有對應(yīng)上述8個試劑盒的各生化檢測項(xiàng)目的定值范圍的試劑盒說明書。
[0058]所述對應(yīng)上述8個試劑盒的各生化檢測項(xiàng)目的定值范圍可通過以下方法獲取(以實(shí)施例1為例):
[0059]取實(shí)施例1制備而成的24瓶精漿復(fù)合質(zhì)控品(凍干粉)，每瓶加2ml純化水充分復(fù)溶，分三次檢測，每次8瓶，每瓶精漿復(fù)合質(zhì)控品凍干粉的檢測項(xiàng)目以及對應(yīng)的檢測試劑如表1所示。
[0060]表1
[0061]
【權(quán)利要求】
1.一種精漿復(fù)合質(zhì)控品，其特征在于，是由質(zhì)控品保存液和精漿原液混合后制成的凍干粉； 所述質(zhì)控品保存液為含糖類0.47~0.67%、鹽類0.07~0.17%和酶穩(wěn)定劑0.63~0.83%的水溶液； 所述精漿原液為已完全液化的人新鮮精液直接離心后獲取的精漿； 所述質(zhì)控品保存液與精漿原液的混合體積比為1:100~100:1。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的精漿復(fù)合質(zhì)控品，其特征在于，所述糖類為蔗糖，所述鹽類為氯化鈉，所述酶穩(wěn)定劑為氨基乙酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的精漿復(fù)合質(zhì)控品，其特征在于，所述質(zhì)控品保存液為含蔗糖0.57%、氯化鈉0.12%、氨基乙酸0.73%的水溶液；所述質(zhì)控品保存液與精漿原液的混合體積比為1:1ο
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的精漿復(fù)合質(zhì)控品的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: 制備質(zhì)控品保存液:稱取糖類、鹽類和酶穩(wěn)定劑，加純化水至充分溶解，制備得到含有上述各組分百分比的質(zhì)控品保存液； 獲取精漿原液；取若干份已完全液化且HCV、HIV1+2、HBSAg和梅毒檢測均為陰性的人新鮮精液，離心獲取精漿原液，將所取精漿原液混勻； 混合凍干得到精漿復(fù)合質(zhì)控品:取精漿原液，與上述質(zhì)控品保存液以上述體積比混合均勻，然后在真空冷凍干燥機(jī)上制成凍干粉，即為精漿復(fù)合質(zhì)控品。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的精漿復(fù)合質(zhì)控品的制備方法，其特征在于，所述真空冷凍干燥機(jī)的凍干步驟為:啟動真空冷凍干燥機(jī)，設(shè)置凍干曲線為:-40°C維持2h后,抽2h后啟動真空調(diào)溫至-40°C維持16h，升溫至0°C維持3h，升溫至30°C維持5h，最后放氣取出，封蓋，得到干粉狀的精漿復(fù)合質(zhì)控品。
6.一種包含有權(quán)利要求1或2或3的精漿復(fù)合質(zhì)控品的精漿檢測試劑盒，其特征在于，包括: 精漿復(fù)合質(zhì)控品； 精漿生化指標(biāo)檢測的試劑: 以及一份包含有對應(yīng)上述精漿生化指標(biāo)的定值范圍的試劑盒說明書； 所述對應(yīng)上述精漿生化指標(biāo)的定值范圍可通過以下方法獲取: 將上述精漿原液與上述質(zhì)控品保存液混合均勻分裝成2ml每瓶，在真空冷凍干燥機(jī)上制成凍干粉狀的精漿復(fù)合質(zhì)控品，取24瓶精漿復(fù)合質(zhì)控品，每瓶加2ml純化水充分復(fù)溶，分三次檢測，每次8瓶，利用精漿生化指標(biāo)檢測的試劑對其進(jìn)行檢測，統(tǒng)計(jì)分析每一項(xiàng)精漿生化指標(biāo)的平均值X及標(biāo)準(zhǔn)差S，平均值加、減兩倍標(biāo)準(zhǔn)差，即為試劑盒該項(xiàng)目的定值范圍X±2S。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的包含有精漿復(fù)合質(zhì)控品的精漿檢測試劑盒，其特征在于，所述精漿生化指標(biāo)檢測的試劑為精漿彈性蛋白酶定量測定試劑盒、精漿鋅定量測定試劑盒、精漿檸檬酸定量測定試劑盒 、精漿中性α -葡萄糖糖苷酶定量測定試劑盒、精液乳酸脫氫酶同工酶X定量測定試劑盒、精漿酸性磷酸酶定量測定試劑盒、精漿果糖定量測定試劑盒或精子頂體酶活性定量試劑盒中的一種或多種。
8.利用權(quán)利要求6中的包含有精漿復(fù)合質(zhì)控品的精漿檢測試劑盒對其中的精漿生化檢測項(xiàng)目進(jìn)行質(zhì)控的方法，步驟如下: 步驟一:溶解精漿復(fù)合質(zhì)控品 取I瓶精漿復(fù)合質(zhì)控品，以純化水或生理鹽水或其他溶解液2ml溶解精漿復(fù)合質(zhì)控品，靜置或37°C孵育或震蕩孵育或恒溫震蕩以充分溶解； 步驟二:獲取測定值 利用精漿生化指標(biāo)檢測的試劑檢測精漿復(fù)合質(zhì)控品，得到測定值； 步驟三:比較測定值與定值范圍 將測定值與精漿復(fù)合質(zhì)控品內(nèi)的精漿生化指標(biāo)的定值范圍進(jìn)行比較，如果測定值在定值范圍X±2S內(nèi)，則本次檢測的 結(jié)果可信；如果測定值超出定值范圍X±2S，則說明本次檢測的測定值不可信，需要查找原因，重新檢測。
【文檔編號】G01N1/28GK103900884SQ201410145716
【公開日】2014年7月2日 申請日期:2014年4月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月11日
【發(fā)明者】陶思恩, 胡家純, 張翔, 何水生, 鄧彩榮, 程芳, 梁藝, 曾雪凡, 戴沐沙 申請人:深圳市博銳德生物科技有限公司