治療糖尿病的中藥復(fù)方制劑消渴丸hplc指紋圖譜的建立方法及其hplc指紋圖譜的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種治療糖尿病中藥復(fù)方制劑消渴丸HPLC指紋圖譜的建立方法及其HPLC指紋圖譜，所述建立方法包括以下步驟：(1)對照品溶液的制備；(2)供試樣品的制備；(3)高效液相色譜法測定條件的建立及測定。上述消渴丸HPLC指紋譜圖的建立方法專屬性強(qiáng)、操作簡便、具有優(yōu)異的穩(wěn)定性、精密度和重現(xiàn)性，可較全面地檢測消渴丸中多種主要有效成分，從而構(gòu)建科學(xué)合理的消渴丸HPLC指紋圖譜，完整準(zhǔn)確地評價消渴丸的安全性、有效性、穩(wěn)定性和質(zhì)量均一性。
【專利說明】治療糖尿病的中藥復(fù)方制劑消渴丸HPLC指紋圖譜的建立 方法及其HPLC指紋圖譜

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種治療糖尿病的中藥復(fù)方制劑消渴丸的質(zhì)量檢測方法，特別是涉及 消渴丸HPLC指紋圖譜的建立及其HPLC指紋圖譜。

【背景技術(shù)】
[0002] 治療糖尿病的中藥復(fù)方制劑消渴丸為中藥黃芪、地黃、葛根、山藥、玉米須、南五味 子、天花粉與西藥格列本脲組成的中西藥復(fù)方制劑，具有滋腎養(yǎng)陰、益氣生津的功效，臨床 上多用于治療氣陰兩虛所致的消渴?。?型糖尿病)，現(xiàn)收載于2010年版《中華人民共和國 藥典》。作為中西藥復(fù)合的降糖藥物消渴丸，既發(fā)揮了中醫(yī)藥的整體調(diào)理，防治并發(fā)癥的優(yōu) 點(diǎn)，又克服了化學(xué)藥長期服用易產(chǎn)生耐藥性及副作用的缺點(diǎn)。截至目前統(tǒng)計，消渴丸銷售額 已累計超過50億元，在治療糖尿病藥品中位居第三，僅排在拜糖平和達(dá)美康之后。
[0003] 消渴丸的中藥組方來源于元代名醫(yī)朱丹溪的消渴方和清代名醫(yī)葉天士的玉泉散， 其所含七味中藥的化學(xué)成分復(fù)雜，其中黃芪的主要成分是黃酮和皂苷類化合物(溫燕梅，中 成藥，2006, 28 (6) :879-893);地黃的主要成分為環(huán)烯醚萜苷（曾艷等，中成藥，2006, 28(4): 609-611);葛根的主要成分包括異黃酮、三萜及其皂苷類化合物（尹麗紅等，黑龍江醫(yī)藥， 2010,23(3) :371-372);山藥中主要成分有多糖、脂肪酸等(趙宏等，今日藥學(xué)，2009,19(3): 49-52);玉米須含有黃酮及苷類、揮發(fā)性成分、糖類等(朱旭等，長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2009， 25(2) :183-184);南五味子中以木脂素和揮發(fā)油為主要成分（孫龔龔等，陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué) 報，2007, 30 (4) :74-75);天花粉中則含有三萜及其皂苷以及多糖等成分(李振紅等，國外醫(yī) 藥植物藥分冊，2003,18(1) :1-4)。但目前對其整方化學(xué)成分未進(jìn)行研究?！端幍洹分袑ο?丸的質(zhì)量控制包括黃芪、南五味子、山藥的顯微鑒別；薄層色譜法對葛根素、黃芪甲苷、五味 子甲素的定性鑒定；高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography, HPLC) 對葛根素和格列本脲的含量測定。由于這些方法不能系統(tǒng)、完整地反映消渴丸的內(nèi)在質(zhì)量， 因此在消渴丸的質(zhì)量控制上具有一定的局限性。
[0004] 隨著高效液相色譜技術(shù)優(yōu)點(diǎn)的日益凸現(xiàn)，HPLC指紋圖譜方法，特別是多指標(biāo)成分 HPLC指紋圖譜技術(shù)開始廣泛應(yīng)用于中藥質(zhì)量控制領(lǐng)域。該技術(shù)結(jié)合提取分離技術(shù)、波譜 學(xué)方法以及高效液相色譜技術(shù)明確中藥的主要有效成分，確定指紋圖譜重點(diǎn)監(jiān)控的指標(biāo)成 分，既從宏觀上表現(xiàn)中藥的整體特征，又從微觀上監(jiān)控其多個指標(biāo)成分，使中藥制劑的質(zhì)量 標(biāo)準(zhǔn)更加完善。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 基于此，有必要提供一種可以全面反映消渴丸內(nèi)在質(zhì)量的治療糖尿病中藥復(fù)方制 劑消渴丸HPLC指紋圖譜的建立方法及其HPLC指紋圖譜。
[0006] -種治療糖尿病中藥復(fù)方制劑消渴丸HPLC指紋圖譜的建立方法，包括以下步驟：
[0007] (1 )、對照品溶液的制備
[0008] 精密稱取3'-羥基葛根素、葛根素、3'-甲氧基葛根素、大豆苷元-8-C-芹糖 (1 - 6)葡萄糖、大豆苷、大豆素、五味子酯甲、五味子甲素，分別加入甲醇溶解各稀釋成濃 度為0· 01?0· lmg/mL的溶液，濾過，即得；
[0009] (2)、供試樣品的制備
[0010] 精確稱取消渴丸細(xì)粉，加入85-95%乙醇，加熱回流，冷至室溫，過濾，濃縮，然后用 40-60%甲醇溶解并定容，搖勻，濾過，即得；
[0011] (3)、高效液相色譜法測定
[0012] 將步驟⑵的供試樣品進(jìn)行高效液相色譜法測定，色譜條件為：
[0013] 色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱；
[0014] 柱溫：20-50 ? ;
[0015] 流動相：流動相A為甲醇，流動相B為甲酸體積百分比為0. 01%-0. 1%的甲酸-水 溶液，梯度洗脫；
[0016] 檢測波長：235_28〇nm。
[0017] 在其中一個實(shí)施例中，步驟（3)中所述的梯度洗脫方法為：洗脫程序以如下體積 濃度配置進(jìn)行：
[0018] 0分鐘時，流動相A的體積百分比為2%、流動相B體積百分比為98% ;
[0019] 10分鐘時，流動相A的體積百分比為5%、流動相B的體積百分比為95% ;
[0020] 20分鐘時，流動相A的體積百分比為22%、流動相B的體積百分比為78% ;
[0021] 25分鐘時，流動相A的體積百分比為25%、流動相B的體積百分比為75% ;
[0022] 35分鐘時，流動相A的體積百分比為30%、流動相B的體積百分比為70% ;
[0023] 60分鐘時，流動相A的體積百分比為50%、流動相B的體積百分比為50% ;
[0024] 65分鐘時，流動相A的體積百分比為65%、流動相B的體積百分比為35% ;
[0025] 70分鐘時，流動相A的體積百分比為95%、流動相B的體積百分比為5% ;
[0026] 80分鐘時，流動相A的體積百分比為95%、流動相B的體積百分比為5%。
[0027] 在其中一個實(shí)施例中，步驟（3)中的色譜條件還包括：
[0028] 流速：0· 8-1. 2mL/min ；
[0029] 進(jìn)樣量：2-20 μ L。
[0030] 在其中一個實(shí)施例中，步驟（3)中所述流速為lmL/min,所述進(jìn)樣量為10 μ L。
[0031] 在其中一個實(shí)施例中，步驟（3)中所述色譜柱為Welch Materials 乂8_(：18柱，規(guī)格 為4.6父26〇111111，5 4 111，或八區(qū);[161^201?1^父313-八1柱，規(guī)格為4.6\250111111，5 4 111。。
[0032] 在其中一個實(shí)施例中，步驟（3)中所述柱溫為30°C。
[0033] 在其中一個實(shí)施例中，步驟（3)中所述流動相B為甲酸體積百分比為0.02%甲 酸-水溶液。
[0034] 上述消渴丸HPLC指紋圖譜建立方法得到的HPLC指紋譜圖中有12個特征共有峰， 其中10號峰為大豆素參照峰，最強(qiáng)峰為4號峰，圖譜總長度為78分鐘，具體如下：
[0035] 1號峰，保留時間為13. 837分鐘，相對保留時間為0. 2184 ;峰面積為581. 0910,相 對峰面積為0. 2566 ;
[0036] 2號峰，保留時間為17. 823分鐘，相對保留時間為0. 2813 ;峰面積為444. 5910,相 對峰面積為0. 2000 ;
[0037] 3號峰為3'-羥基葛根素，保留時間為29. 488分鐘，相對保留時間為0. 4654 ;峰 面積為986. 5500,相對峰面積為0. 4252 ;
[0038] 4號峰為葛根素，保留時間為35. 372分鐘，相對保留時間為0.5583 ;峰面積為 5942. 3160,相對峰面積為2. 5649 ;
[0039] 5號峰為3'-甲氧基葛根素，保留時間為36. 998分鐘，相對保留時間為0.5839; 峰面積為1474. 1900,相對峰面積為0. 6362 ;
[0040] 6號峰為大豆苷元-8-C-芹糖（1 - 6)葡萄糖，保留時間為39. 204分鐘，相對保留 時間為0. 6187 ;峰面積為842. 2190,相對峰面積為0. 3641 ;
[0041] 7號峰為大豆苷，保留時間為40. 906分鐘，相對保留時間為0. 6456 ;峰面積為 1090. 1780,相對峰面積為0. 4715 ;
[0042] 8號峰，保留時間為54. 680分鐘，相對保留時間為0. 8630 ;峰面積為301. 5630,相 對峰面積為0. 1309 ;
[0043] 9號峰，保留時間為57. 767分鐘，相對保留時間為0. 9117 ;峰面積為1085. 8930， 相對峰面積為0. 4613 ;
[0044] 10號峰為大豆素，保留時間為63. 362分鐘，相對保留時間為1.0000;峰面積為 2340. 8880,相對峰面積為1. 0000 ;
[0045] 11號峰為五味子酯甲，保留時間為73. 174分鐘，相對保留時間為1. 1549 ;峰面積 為273. 2360,相對峰面積為0. 1188 ;
[0046] 12號峰為五味子甲素，保留時間為74. 116分鐘，相對保留時間為1. 1697,峰面積 為161. 8080,相對峰面積為0. 0704。
[0047] 本發(fā)明是在對消渴丸整方進(jìn)行系統(tǒng)化學(xué)成分研究，并通過高效液相色譜法鑒定了 消渴丸主要色譜峰結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，提供了一種可指認(rèn)消渴丸多指標(biāo)成分的HPLC指紋圖譜 的構(gòu)建方法。所述HPLC指紋圖譜建立方法專屬性強(qiáng)、操作簡便、具有優(yōu)異的穩(wěn)定性、精密度 和重現(xiàn)性，可較全面地檢測消渴丸中多種主要有效成分，從而構(gòu)建科學(xué)合理的消渴丸HPLC 指紋圖譜，進(jìn)而更全面準(zhǔn)確地監(jiān)控消渴丸的質(zhì)量，完整、準(zhǔn)確地評價消渴丸的安全性、有效 性、穩(wěn)定性和質(zhì)量均一性。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0048] 圖1為實(shí)施例1中消渴丸主要化學(xué)成分的分離流程圖；
[0049] 圖2為實(shí)施例1的3'-羥基葛根素的ESI-MS圖；
[0050] 圖3為實(shí)施例1的3'-羥基葛根素的核磁共振氫譜圖；
[0051] 圖4為實(shí)施例1的3'-羥基葛根素的DEPT圖與核磁共振碳譜圖；
[0052] 圖5為實(shí)施例1的葛根素的ESI-MS圖；
[0053] 圖6為實(shí)施例1的葛根素的核磁共振氫譜圖；
[0054] 圖7為實(shí)施例1的葛根素的DEPT圖與核磁共振碳譜圖；
[0055] 圖8為實(shí)施例1的3'-甲氧基葛根素的ESI-MS圖；
[0056] 圖9為實(shí)施例1的:V -甲氧基葛根素的核磁共振氫譜圖；
[0057] 圖10為實(shí)施例1的3'-甲氧基葛根素的DEPT圖與核磁共振碳譜圖；
[0058] 圖11為實(shí)施例1的大豆苷元-8-C-芹糖（1 - 6)葡萄糖的ESI-MS圖；
[0059] 圖12為實(shí)施例1的大豆苷元-8-C-芹糖（1 - 6)葡萄糖的核磁共振氫譜圖；
[0060] 圖13為實(shí)施例1的大豆苷元-8-C-芹糖（1 - 6)葡萄糖的DEPT圖與核磁共振碳 譜圖；
[0061] 圖14為實(shí)施例1的大豆苷的ESI-MS圖；
[0062] 圖15為實(shí)施例1的大豆苷的核磁共振氫譜圖；
[0063] 圖16為實(shí)施例1的大豆苷的DEPT圖與核磁共振碳譜圖；
[0064] 圖17為實(shí)施例1的大豆素的ESI-MS圖；
[0065] 圖18為實(shí)施例1的大豆素的核磁共振氫譜圖；
[0066] 圖19為實(shí)施例1的大豆素的DEPT圖與核磁共振碳譜圖；
[0067] 圖20為實(shí)施例1的五味子酯甲的ESI-MS圖；
[0068] 圖21為實(shí)施例1的五味子酯甲的核磁共振氫譜圖；
[0069] 圖22為實(shí)施例1的五味子酯甲的DEPT圖與核磁共振碳譜圖；
[0070] 圖23為實(shí)施例1的五味子甲素的ESI-MS圖；
[0071] 圖24為實(shí)施例1的五味子甲素的核磁共振氫譜圖；
[0072] 圖25為實(shí)施例1的五味子甲素的DEPT圖與核磁共振碳譜圖；
[0073] 圖26為實(shí)施例2的20批消渴丸的HPLC色譜圖；
[0074] 圖27為實(shí)施例2的消渴丸HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜；
[0075] 圖28為實(shí)施例2的對照品與消渴丸供試樣品溶液主要色譜峰對比的色譜圖；
[0076] 圖29為實(shí)施例2的消渴丸HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜中主要色譜峰與其結(jié)構(gòu)的紫外吸收 匹配圖；
[0077] 圖30為實(shí)施例2的可化學(xué)指認(rèn)的消渴丸HPLC指紋圖譜。

【具體實(shí)施方式】
[0078] 以下結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的闡述。
[0079] 供試樣品來源：廣州白云山中一藥業(yè)有限公司；
[0080] 儀器：Bruker AV-400 型核磁共振儀（美國 Bruker 公司）；Finnigan LCQ Advantage MAX型質(zhì)譜儀（Thermo Finnigan公司）；Agilentl200分析型高效液相色譜儀 (美國Agilent公司）；Agilentl260制備型高效液相色譜儀（美國Agilent公司）；
[0081] 色譜測定中所用到的試劑：甲醇為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。
[0082] 實(shí)施例1治療糖尿病的中藥復(fù)方制劑消渴丸主要化學(xué)成分的分離、純化以及結(jié)構(gòu) 鑒定
[0083] 消渴丸制丸前藥粉加質(zhì)量百分比濃度為75%的乙醇，超聲提取兩次，第一次加制 丸前藥粉10倍重量的75%乙醇，第二次加8倍量75%乙醇，每次超聲提取30min，取上清液， 濃縮至密度約為1. l〇g/cm3,得到消渴丸醇提物。將消渴丸醇提物加適量水混懸，用乙酸乙 酯萃取，回收溶劑后得乙酸乙酯萃取物400g。
[0084] 如圖1所示，取消渴丸醇提乙酸乙酯萃取物400g，進(jìn)行硅膠（100-200目）柱層析， 依次用 V(氯仿）：v(甲醇）為 100:0、97:3、95:5、9:1、85:15、8 :2、7:3、6:4、5:5、0:100進(jìn)行 梯度洗脫，經(jīng)薄層色譜檢識合并相同餾分，得到10個部分，標(biāo)記為Fr. A?J。Fr. D析出沉 淀，沉淀經(jīng)反復(fù)重結(jié)晶，得到化合物10。Fr.C進(jìn)行硅膠（100-200目）柱層析，依次用V(石 油醚）：V(乙酸乙酯）為100:0、95:5、9:1、85:15、8 :2、7:3、5:5、0:100進(jìn)行梯度洗脫，經(jīng)薄 層色譜檢識合并相同餾分，得到8個部分，標(biāo)記為Fr. I?VILFr. I?W分別析出沉淀， 沉淀經(jīng)反復(fù)重結(jié)晶，分別得到化合物11?16。其中Fr. V進(jìn)行反相鍵合硅膠柱層析，用甲 醇-水（10%甲醇?90%甲醇)進(jìn)行梯度洗脫，經(jīng)薄層色譜檢識合并相同餾分，得到8個部分， 標(biāo)記為Fr. 1?8。Fr. 1經(jīng)過兩次Sephadex LH20柱層析，及制備型HPLC分離，得到化合物 17。Fr. 2?5放置分別析出沉淀，沉淀經(jīng)反復(fù)重結(jié)晶，得到化合物18?21。
[0085] Fr.G與Fr.H進(jìn)行硅膠（200-300目）柱層析，依次用V(氯仿）：V(甲醇）為100:0、 9:1、85:15、8:2、7:3、5:5、0:100進(jìn)行梯度洗脫，經(jīng)薄層色譜檢識合并相同餾分，得到8個部 分，標(biāo)記為Fr. a?h。Fr. a經(jīng)過兩次Sephadex LH20柱層析，分別得到化合物5和7。Fr. e、 Fr. f放置分別析出沉淀，沉淀經(jīng)反復(fù)重結(jié)晶，分別得到化合物4和3。Fr. g經(jīng)制備型HPLC 分離，得到化合物6和22。
[0086] 所述制備型HPLC的色譜條件如下：
[0087] 色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱；
[0088] 流動相：20?45% (v/v)甲醇水溶液；
[0089] 柱溫：20 ?40°C ;
[0090] 檢測波長：280nm ;
[0091] 流速：5 ?8mL/min ；
[0092] 進(jìn)樣量：0· 01 ?0· 2mL。
[0093] 采用波譜學(xué)的方法鑒定消渴丸中含有的化學(xué)成分分別為3'-羥基葛根素3、葛根 素4、3'-甲氧基葛根素5、大豆苷元-8-C-芹糖（1 - 6)葡萄糖6、大豆苷7、大豆素10、五 味子酯甲11、五味子甲素12、刺芒柄花素、3'-甲氧基大豆素、毛蕊異黃酮、葛根素木糖苷、 黃芪甲苷、黃芪皂苷II、十七烷酸、5-羥基麥芽酚、3, 4-二羥基苯乙酮和咖啡酸甲酯；其中， 指紋圖譜可化學(xué)指認(rèn)化合物的光譜和理化數(shù)據(jù)如下：
[0094] 3'-羥基葛根素3 :白色粉末（甲醇），熔點(diǎn)：216?217°C，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：
[0095]
[0096] 光譜數(shù)據(jù)如下：

【權(quán)利要求】
1. 一種治療糖尿病中藥復(fù)方制劑消渴丸HPLC指紋圖譜的建立方法，所述消渴丸包括 中藥葛根、地黃、玉米須、天花粉、黃芪、南五味子、山藥、化學(xué)藥格列本脲，其特征在于，包括 以下步驟： (1) 、對照品溶液的制備 精密稱取3'-羥基葛根素、葛根素、3'-甲氧基葛根素、大豆苷元-8-C-芹糖（1 - 6) 葡萄糖、大豆苷、大豆素、五味子酯甲、五味子甲素，分別加入甲醇溶解各稀釋成濃度為 0· 01?0· lmg/mL的溶液，濾過，即得； (2) 、供試樣品的制備 精確稱取消渴丸細(xì)粉，加入85-95%乙醇，加熱回流，冷至室溫，過濾，濃縮，然后用 40-60%甲醇溶解并定容，搖勻，濾過，即得； (3) 、高效液相色譜法測定 將步驟（2)的供試樣品進(jìn)行高效液相色譜法測定，色譜條件為： 色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱； 柱溫：20-50°C ; 流動相：流動相A為甲醇，流動相B為甲酸體積百分比為0. 01%-0. 1%的甲酸-水溶液， 梯度洗脫； 檢測波長：235-280nm。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療糖尿病中藥復(fù)方制劑消渴丸HPLC指紋圖譜的建立方法， 其特征在于，步驟（3)中所述的梯度洗脫方法為：洗脫程序以如下體積濃度配置進(jìn)行： 0分鐘時，流動相A的體積百分比為2%、流動相B體積百分比為98% ; 10分鐘時，流動相A的體積百分比為5%、流動相B的體積百分比為95% ; 20分鐘時，流動相A的體積百分比為22%、流動相B的體積百分比為78% ; 25分鐘時，流動相A的體積百分比為25%、流動相B的體積百分比為75% ; 35分鐘時，流動相A的體積百分比為30%、流動相B的體積百分比為70% ; 60分鐘時，流動相A的體積百分比為50%、流動相B的體積百分比為50% ; 65分鐘時，流動相A的體積百分比為65%、流動相B的體積百分比為35% ; 70分鐘時，流動相A的體積百分比為95%、流動相B的體積百分比為5% ; 80分鐘時，流動相A的體積百分比為95%、流動相B的體積百分比為5%。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療糖尿病中藥復(fù)方制劑消渴丸HPLC指紋圖譜的建立方法， 其特征在于，步驟（3)中的色譜條件還包括： 流速：〇· 8-1. 2mL/min ； 進(jìn)樣量：2-20 μ L。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的治療糖尿病中藥復(fù)方制劑消渴丸HPLC指紋圖譜的建立方法， 其特征在于，步驟（3)中所述流速為lmL/min,所述進(jìn)樣量為10yL。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療糖尿病中藥復(fù)方制劑消渴丸HPLC指紋圖譜的建 立方法，其特征在于，步驟⑶中所述色譜柱為Welch Materials 乂8_(：18柱，規(guī)格為 4.6父26〇111111，5 4 111，或八區(qū);[161^201?1^父313-八1柱，規(guī)格為4.6\25〇111111，5 4 111。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療糖尿病中藥復(fù)方制劑消渴丸HPLC指紋圖譜的建立方法， 其特征在于，步驟（3)中所述柱溫為30°C。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療糖尿病中藥復(fù)方制劑消渴丸HPLC指紋圖譜的建立方法， 其特征在于，步驟（3)中所述流動相B為甲酸體積百分比為0.02%甲酸-水溶液。
8. -種治療糖尿病中藥復(fù)方制劑消渴丸的HPLC指紋圖譜，其特征在于，所述HPLC指紋 圖譜中有12個特征共有峰，其中10號峰為大豆素參照峰，最強(qiáng)峰為4號峰，圖譜總長度為 78分鐘，具體如下： 1號峰，保留時間為13. 837分鐘，相對保留時間為0. 2184 ;峰面積為581. 0910,相對峰 面積為0. 2566 ; 2號峰，保留時間為17. 823分鐘，相對保留時間為0. 2813 ;峰面積為444. 5910,相對峰 面積為0. 2000 ; 3號峰為3'-羥基葛根素，保留時間為29. 488分鐘，相對保留時間為0. 4654 ;峰面積 為986. 5500,相對峰面積為0. 4252 ; 4號峰為葛根素，保留時間為35. 372分鐘，相對保留時間為0. 5583 ;峰面積為 5942. 3160,相對峰面積為2. 5649 ; 5號峰為3'-甲氧基葛根素，保留時間為36. 998分鐘，相對保留時間為0. 5839 ;峰面 積為1474. 1900,相對峰面積為0. 6362 ; 6號峰為大豆苷元-8-C-芹糖（1 - 6)葡萄糖，保留時間為39. 204分鐘，相對保留時間 為0. 6187 ;峰面積為842. 2190,相對峰面積為0. 3641 ; 7號峰為大豆苷，保留時間為40. 906分鐘，相對保留時間為0.6456 ;峰面積為 1090. 1780,相對峰面積為0. 4715 ; 8號峰，保留時間為54. 680分鐘，相對保留時間為0. 8630 ;峰面積為301. 5630,相對峰 面積為0. 1309 ; 9號峰，保留時間為57. 767分鐘，相對保留時間為0. 9117 ;峰面積為1085. 8930,相對 峰面積為0. 4613 ; 10號峰為大豆素，保留時間為63. 362分鐘，相對保留時間為1. 0000 ;峰面積為 2340. 8880,相對峰面積為1. 0000 ; 11號峰為五味子酯甲，保留時間為73. 174分鐘，相對保留時間為1. 1549 ;峰面積為 273. 2360,相對峰面積為0. 1188 ; 12號峰為五味子甲素，保留時間為74. 116分鐘，相對保留時間為1. 1697,峰面積為 161. 8080,相對峰面積為0. 0704。
【文檔編號】G01N30/02GK104155371SQ201310179700
【公開日】2014年11月19日 申請日期:2013年5月15日 優(yōu)先權(quán)日:2013年5月15日
【發(fā)明者】葉文才, 蘇碧茹, 范春林, 鄒琦, 王英, 張冬梅, 周杰, 孫一蕊, 鄧海鳴 申請人:廣州白云山中一藥業(yè)有限公司