專利名稱：一種提取凈化土壤中八氯二丙醚的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于農(nóng)藥殘留分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種提取凈化土壤中八氯二丙醚的 方法。
背景技術(shù)：
八氯二丙醚(簡稱S421)，化學(xué)名稱為雙_(2，3，3，3-四氯丙基)醚，分子式 C6H60C18。常溫下為淡黃色液態(tài)，不溶于水，可溶于乙醇、丙酮、甲苯等有機(jī)溶劑。八氯二丙醚 是一種農(nóng)藥增效劑，對(duì)多種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥有活化增效作用，多用于農(nóng)藥噴霧劑等。八氯 二丙醚是一種環(huán)境行為與滴滴涕類似的有機(jī)氯化合物，其性能穩(wěn)定，在環(huán)境中滯留時(shí)間長， 而且在生物鏈中會(huì)發(fā)生生物富集作用，導(dǎo)致在人和其他生物體中的殘留，屬于持久性有機(jī) 污染物。根據(jù)八氯二丙醚在動(dòng)物學(xué)上的毒理學(xué)研究結(jié)果，八氯二丙醚可能具有致畸、致癌、 致突變作用。2005年底，中國對(duì)德國出口的多種脫水蔬菜(蘑菇、青椒、洋蔥、生姜、綠菜花等)出 現(xiàn)了八氯二丙醚殘留問題，最高值超出歐盟標(biāo)準(zhǔn)5倍。此外，我國出口的茶葉亦被歐盟、日 本檢測(cè)出含有八氯二丙醚而遭退貨。歐盟和日本均將茶葉中八氯二丙醚的最高限量標(biāo)準(zhǔn)定 為0. 01mg/kg。據(jù)我國海關(guān)總署報(bào)道，近幾年歐盟、日本相繼提高農(nóng)殘檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，我國出口茶 葉將面臨更加嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。由于八氯二丙醚在我國長時(shí)間的大量應(yīng)用，其在環(huán)境中具有一 定的的累積性，因此八氯二丙醚殘留問題將直接影響到我國農(nóng)副產(chǎn)品安全及其出口。農(nóng)產(chǎn) 品中八氯二丙醚含量超標(biāo)的主要原因還是因?yàn)橥寥朗艿桨寺榷训奈廴?，具體表現(xiàn)在使 用含有八氯二丙醚的農(nóng)藥和肥料上。一旦八氯二丙醚在土壤中形成一定的積累，就不容易 消除，農(nóng)作物的根系從土壤中吸收水分和養(yǎng)料的同時(shí)就將八氯二丙醚吸收，就會(huì)導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn) 品中含有八氯二丙醚。為此，土壤中八氯二丙醚的提取、測(cè)定方法顯得十分迫切。目前國內(nèi)外提取土壤中 八氯二丙醚的文獻(xiàn)很少，且現(xiàn)有的方法都沒有經(jīng)過柱析層分離，會(huì)導(dǎo)致樣品雜質(zhì)過多，影響 儀器分析及結(jié)果的準(zhǔn)確性。有的方法中采用浸提或振動(dòng)提取，效率偏低，有的提取液組成復(fù) 雜、有的磺化步驟不合理，都會(huì)影響到最終結(jié)果的準(zhǔn)確性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的上述不足，提供一種操作簡單、且能有效去除 干擾物質(zhì)的土壤中八氯二丙醚的提取凈化方法。本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)上述目的
一種提取凈化土壤中八氯二丙醚的方法，是在土壤樣品加入正己烷_丙酮混合液，提 取、離心，上清液濃縮，過層析柱，用正己烷洗脫，收集洗脫液，濃縮，得到八氯二丙醚的提取 液；所述層析柱由上至下依次填充3 4cm的無水硫酸鈉，iTllcm的硅膠-濃硫酸混合物、 3^4cm的無水硫酸鈉、脫脂棉。現(xiàn)有的提取方法中，采用振蕩提取土壤、茶葉和蔬菜樣品中八氯二丙醚，但提取效率相對(duì)較低。本發(fā)明采用超聲提取土壤樣品中八氯二丙醚，消耗時(shí)間短，提取效率高，操作 簡單?，F(xiàn)有的凈化方法中，有用玻璃層析柱進(jìn)行過柱分離的，所用玻璃層析柱中依次加 入2cm無水硫酸鈉、lg酸性娃藻土，2cm無水硫酸鈉。娃藻土結(jié)構(gòu)較松散,過濾效果好，所以 硅藻土常用作層析柱吸附劑。但酸性硅藻土很難填充至玻璃層析柱，操作不方便。硅膠具 備多孔性、低密度、比表面積大、化學(xué)穩(wěn)定性高、良好的澄清度及脫色度、吸附力強(qiáng)等特點(diǎn)， 被廣泛用作層析柱吸附劑。且硅膠對(duì)茶葉中八氯二丙醚的凈化效果與硅藻土相當(dāng)。本發(fā)明 使用硅膠與濃硫酸的混合物作為吸附劑，克服了上述缺陷，能夠最大限度地吸附土壤樣品 中的八氯二丙醚，使后期的檢測(cè)結(jié)果更為準(zhǔn)確。上述方法中，優(yōu)選硅膠-濃硫酸混合物的配制為每5g硅膠加2mL濃硫酸。上述提取土壤中八氯二丙醚的方法，所述土壤樣品優(yōu)選為已經(jīng)去除砂礫和植物殘 體，經(jīng)過自然風(fēng)干、磨碎、過18目以上篩的土壤。上述提取土壤中八氯二丙醚的方法，所述正己烷-丙酮混合液中正己烷與丙酮的 體積比最佳為22:3。上述提取土壤中八氯二丙醚的方法，提取可以選用浸泡過夜提取或超聲提取等方 法，經(jīng)過多次試驗(yàn)摸索，發(fā)現(xiàn)以下步驟最為簡便快速超聲提取lOmin，離心為4000r/min離 心5min，提取和離心的步驟重復(fù)兩次。上述提取土壤中八氯二丙醚的方法，過層析柱前最好先用正己烷預(yù)淋洗層析柱， 濃縮液過層析柱后，先用正己烷潤洗盛裝濃縮液的容器，然后再用潤洗液洗脫層析柱。增加 潤洗步驟以使最終測(cè)定結(jié)果的誤差最小。洗脫液濃縮后用正己烷潤洗容器2 3次，連同潤 洗液一起轉(zhuǎn)移到棕色瓶中，在氮吹儀下用氮?dú)獯蹈?，正己烷定容。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果
本發(fā)明采用超聲提取、酸性硅膠層析柱分離，具有提取時(shí)間短、效率高、層析柱易填充、 凈化效果好、提取效率高等特點(diǎn)。
具體實(shí)施例方式以下通過具體實(shí)施方式
進(jìn)一步解釋本發(fā)明，實(shí)施例中如無特殊說明均為本領(lǐng)域常 規(guī)實(shí)驗(yàn)手段。實(shí)施例1蔬菜基地土壤中八氯二丙醚的提取測(cè)定 1. 土壤樣品制備
在華南農(nóng)業(yè)大學(xué)蔬菜基地中采集種植小白菜、生菜、上海青的土壤樣品，去除土樣中的 砂礫和植物殘?bào)w，自然風(fēng)干，然后磨碎，過18目篩，備用。2.超聲、離心提取
稱取約10. OOg 土樣于三角瓶中，加入20mL正己烷-丙酮提取液(體積比約22:3)，超聲 提取lOmin，轉(zhuǎn)移提取液于100mL離心管中，于4000r/min離心5min，轉(zhuǎn)移上清液于圓底燒 瓶中，上清液重復(fù)超聲提取、離心兩遍，將上清液在真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至5mL。3.柱層析凈化
玻璃層析柱直徑1cm，長30cm，層析柱最下端填充脫脂棉、兩端為3_4cm的無水硫酸鈉， 中間為10cm左右的硅膠-硫酸混合物(5g硅膠2 mL濃硫酸)裝柱。先用正己烷預(yù)淋洗層析柱，再將步驟2中的濃縮液轉(zhuǎn)移至層析柱，然后用正己烷潤洗燒瓶，每次五滴管(約6mL)， 潤洗液過層析柱，重復(fù)洗五次。收集洗脫液。4.濃縮定容
將步驟3中的洗脫液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至近干，用正己烷潤洗濃縮液2-3次，轉(zhuǎn)移到 棕色樣品瓶(2. OmL)，在氮吹儀下用高純氮?dú)獯蹈桑谜和槎ㄈ葜羖mL，待測(cè)定。5.氣相色譜_質(zhì)譜儀器進(jìn)行定量分析 具體的氣相色譜_質(zhì)譜儀器分析條件如下
安捷倫 7890GC-5975C MSD
色譜柱HP-5 30mX0. 25mmi. dXO. 25 u m 流速1. OmL/min 不分流進(jìn)樣 進(jìn)樣量luL
柱溫150°C (3min), 5°C /min 至 210。。(2min)
檢測(cè)器280°C 進(jìn)樣口 250°C
選擇離子監(jiān)測(cè)m/z 79、130、181、211 離子源溫度150°C 6.標(biāo)準(zhǔn)曲線
采用八氯二丙醚儲(chǔ)備液稀釋配制了標(biāo)準(zhǔn)曲線，濃度為0. 1,0. 5,1. 0,2. 0,5. Oug/mL, 經(jīng)氣相色譜_質(zhì)譜儀器聯(lián)機(jī)檢測(cè)，以其色譜圖上的響應(yīng)值與濃度作標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為 Y=237891X - 40724，相關(guān)系數(shù)(#)為 0. 9983。7.檢測(cè)結(jié)果
種植小白菜、生菜、上海青的土壤樣品中八氯二丙醚平均含量分別為0.053 mg/kg、 0. 039 mg/kg、0. 041mg/kg。另外，采用該方法分析檢測(cè)了在某蔬菜生產(chǎn)基地采集的小白菜、菜心、茄子中八氯 二丙醚，其中小白菜中未檢出八氯二丙醚，菜心和茄子中八氯二丙醚平均含量分別為0. 113 mg/kg和 0. 077mg/kg。實(shí)施例2不同方法中八氯二丙醚回收率的比較 設(shè)置以下實(shí)驗(yàn)組
第一組溶劑空白，溶劑為正己烷-丙酮混合液(體積比22:3);
第二組土壤空白，取不含八氯二丙醚的土壤作為空白對(duì)照；
第三組溶劑加標(biāo)，在正己烷_丙酮混合液中加入八氯二丙醚，濃度為5. 0 u g/mL ； 第四組土壤加標(biāo)，在不含八氯二丙醚的土壤中加入八氯二丙醚，濃度為10ii g/g ； 以上各組按照實(shí)施例1中步驟2飛進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)結(jié)果為第一、二組均未檢測(cè)到八氯 二丙醚，第三組八氯二丙醚的加標(biāo)回收率為92. 4%，第四組的回收率為90. 4%。.
實(shí)施例3配制污染土壤中八氯二丙醚的提取測(cè)定
分別稱取5kg的菜園土、赤紅壤和水稻土，再加入不同量的八氯二丙醚，配成含八氯二 丙醚濃度為10mg/kg的污染土壤，種植菜心。在蔬菜收獲期分別采集土壤樣品，按實(shí)施例1 中的步驟進(jìn)行提取與檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)菜園土、赤紅壤、水稻土中八氯二丙醚的平均含量分別為3. 76 mg/kg>3. 46 mg/kg、1. 86mg/kg。各不同土壤上收獲的菜心經(jīng)過提取與檢測(cè)后，結(jié)果 發(fā)現(xiàn)菜心中均含有八氯二丙醚，表明土壤中的污染物已經(jīng)部分轉(zhuǎn)移到農(nóng)作物中。
權(quán)利要求
1.一種提取凈化土壤中八氯二丙醚的方法，其特征在于土壤樣品加入正己烷-丙酮混合液，超聲提取、離心，取上清濃縮，濃縮液過層析柱，用正己烷洗脫，收集洗脫液，濃縮，得到八氯二丙醚的提取液； 所述層析柱由上至下依次填充3 4cm的無水硫酸鈉，iTllcm的硅膠-濃硫酸混合物、3^4cm的無水硫酸鈉、脫脂棉。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述提取凈化土壤中八氯二丙醚的方法，其特征在于硅膠-濃硫酸混合物的配制為每5g娃膠加2mL濃硫酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述提取凈化土壤中八氯二丙醚的方法，其特征在于所述土壤樣品為已經(jīng)去除砂礫和植物殘?bào)w，經(jīng)過自然風(fēng)干、磨碎、過18目以上篩的土壤。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述提取凈化土壤中八氯二丙醚的方法，其特征在于正己烷-丙酮混合液中正己烷與丙酮的體積比為22:3。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述提取凈化土壤中八氯二丙醚的方法，其特征在于提取是用超聲提取IOmin,離心為4000r/min離心5min,提取和離心的步驟重復(fù)兩次。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述提取凈化土壤中八氯二丙醚的方法，其特征在于過層析柱前先用正己烷預(yù)淋洗層析柱，濃縮液過層析柱后，先用正己烷潤洗盛裝濃縮液的容器，然后再用潤洗液洗脫層析柱。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述提取凈化土壤中八氯二丙醚的方法，其特征在于洗脫液濃縮后用正己烷潤洗容器2 3次，連同潤洗液一起轉(zhuǎn)移到棕色瓶中，在氮吹儀下用氮?dú)獯蹈?，正己烷定容?br> 8.權(quán)利要求I所述提取凈化土壤中八氯二丙醚的方法在提取凈化蔬菜、茶葉中八氯二丙醚的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種提取凈化土壤中八氯二丙醚的方法，屬于農(nóng)藥殘留分析技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明的提取凈化方法是在土壤樣品中加入正己烷-丙酮混合液，提取、離心，取上清濃縮，濃縮液過層析柱，用正己烷洗脫，收集洗脫液，濃縮，得到八氯二丙醚的提取液；所述層析柱由上至下依次填充3~4cm的無水硫酸鈉，9~11cm的硅膠-濃硫酸混合物、3~4cm的無水硫酸鈉、脫脂棉。本發(fā)明的提取方法步驟簡單易操作，且提取液中的八氯二丙醚量最接近土樣中的原始含量，為后續(xù)檢測(cè)的準(zhǔn)確性奠定了基礎(chǔ)。
文檔編號(hào)G01N30/12GK102662021SQ201210136110
公開日2012年9月12日 申請(qǐng)日期2012年5月4日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月4日
發(fā)明者冼雪暉, 呂輝雄, 曾巧云, 王慧, 田軍建, 蔡全英, 譚建華 申請(qǐng)人:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)