專利名稱：一種用于治療寒性黃水病藥物的檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于治療寒性黃水病藥物的檢測方法，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
在藏醫(yī)藥領(lǐng)域認為黃水是人機體的重要組成物質(zhì)之一；人體飲食入胃，經(jīng)過消化與吸收后，其精華化生為血，血之糟柏歸于膽腑成為膽汁，膽汁之精華則又化為黃水；黃水存在于全身各處，在肌膚及關(guān)節(jié)處較多，其在生理方面起著調(diào)節(jié)人體水液、潤滑關(guān)節(jié)的重要作用。雖然黃水對于人體具有健康機能有著重要的作用，但是黃水出現(xiàn)偏盛也是一種病態(tài)，黃水偏盛和偏衰都會導(dǎo)致黃水病。藏醫(yī)藥理論認為，黃水之本性既不屬熱，也不屬寒，病變后為寒熱兩性俱全，所以發(fā)生血和希拉所轉(zhuǎn)化者與熱相結(jié)合，成為熱性黃水病，亦稱黑黃水?。粸榘瓦_干和赫依所轉(zhuǎn)化者與寒相結(jié)合，成為寒性黃水病，亦稱白黃水病。在臨床上熱性黃水病多見于青年人、希拉型體質(zhì)者和對血、希拉之某些條件尚不適應(yīng)者；寒性黃水病則多見于兒童與老年人、巴達干、赫依型體質(zhì)者和對巴達干與赫依之某些條件尚不適應(yīng)者。此外，病變之黃水亦能以合并、聚積等類型進而引起各種疾病、如白癜風、牛皮癬、 蟲病、疥癬、痹病、白喉、炭疽、丹毒、疤疹、浮腫、水腫等。黃水病變后，雖然散布于全身，顯示其特有癥狀，但主要竄行皮肌間、腹腔、關(guān)節(jié)等部位。黃水病發(fā)于皮膚易導(dǎo)致蕁麻疹；發(fā)于關(guān)節(jié)則可引起關(guān)節(jié)炎。黃水病不同于一般的皮膚濕疹、疥瘡、疔癤等病變的滲出物，究其病因相當于中醫(yī)所說的是由于濕或者濕熱。針對其發(fā)病機理，藏族民間醫(yī)生根據(jù)《藏醫(yī)醫(yī)決補遺釋難》、《四部醫(yī)典》兩書中的記載，并結(jié)合實踐經(jīng)驗研制出了治療寒性黃水病的經(jīng)典藏醫(yī)藥驗方一五根散(藏藥名稱為雜哇阿巴)，該驗方被收載于《衛(wèi)生部頒藥品標準》95年版藏藥第一冊280頁，其處方為西藏棱子芹100g、喜馬拉雅紫茉莉100g、蒺藜100g、黃精100g、天冬 IOOgo多年來，由于五根散對于寒性黃水病的治療療效受到了一致認同，所以一直以來都沿用上述處方，都沒有對其進行任何進一步的改進研究。對于上述五根散的制備方法,一直都米用傳統(tǒng)藏藥五根散的制備工藝，即首先對所有原料藥材進行粗粉碎，之后過篩，混勻制成散劑；上述制備工藝簡單，只是對原料藥材進行簡單的粗粉碎。在上述傳統(tǒng)的制備工藝中并沒有了解到對于原料藥粒徑與藥物療效之間的關(guān)系(即原料藥粒徑不能太大也不能太小)，所以其制備得到的五根散的藥物的粒徑受到了一定的限制，從而導(dǎo)致傳統(tǒng)五根散的藥物溶出度低、藥物滲透能力差、生物利用度低，無法充分發(fā)揮藥物的作用，影響了療效。此外，在醫(yī)藥領(lǐng)域中，為了避免藥物的仿制生產(chǎn)，要嚴格考察藥物的穩(wěn)定性，就上述五根散的穩(wěn)定性測試，現(xiàn)有技術(shù)中采用的是顯微鏡觀察測試方式；對于采用顯微鏡觀察測試方式而言，五根散的標準形態(tài)為木薄壁細胞紡綞形，壁稍厚，木化，壁孔明顯，直徑 12 19 μ m ;淀粉粒眾多，單粒圓形或橢圓形，臍點明顯，呈點狀或飛鳥狀，直徑4 10 μ m， 復(fù)粒由2 8分粒組成；內(nèi)果皮纖維成束，淡黃色，上下數(shù)層縱橫交錯排列，直徑4 27 μ m, 壁較厚，木化，紋孔稀少，孔溝不明顯；大型粘液細胞中含草酸鈣針晶束，針晶長40 99 μ m ;石細胞極多，澄黃色，長方形或長條形，直徑32 88 μ m,壁厚10 37 μ m,紋孔細密，孔溝細而短。通過上述顯微鏡觀察的手段實現(xiàn)了對五根散藥物穩(wěn)定性的檢測，該檢測方式只能實現(xiàn)在宏觀上的觀察，而事實上是否藥物的本質(zhì)發(fā)生變化，這種檢測方式是無從得知的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的首要技術(shù)問題是治療黃水病的藏藥經(jīng)典驗方五根散一直都局限于原配方中的原料藥的重量份，進而對原五根散的配方進行進一步發(fā)展，得到具有改進后重量份的原料藥的用于治療寒性黃水病的藥物。本發(fā)明所要解決的第二個技術(shù)問題是現(xiàn)有技術(shù)中五根散的制備工藝中只是對原料藥材進行粗粉碎，從而導(dǎo)致藥物的有效溶出度低、滲透能力差、生物利用度低，無法充分發(fā)揮藥物作用的問題，進而提供一種可以提高藥物的滲透能力和生物利用度的用于治療寒性黃水病的藥物的制備方法，并制備得到具有較高溶出度、滲透能力和生物利用度的治療寒性黃水病的藥物。本發(fā)明所要解決的第三個技術(shù)問題是現(xiàn)有技術(shù)中對五根散的穩(wěn)定性質(zhì)量檢測方法只能停留在對藥物進行宏觀觀測的層次上，并不能測試藥物的本質(zhì)是否穩(wěn)定，進而提供一種可以快速、穩(wěn)定測定治療寒性黃水病的藥物整體穩(wěn)定性以及其原料藥的專屬性鑒別的質(zhì)量檢測方法。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種治療寒性黃水病的藥物，包括如下重量份的原料藥西藏棱子芹50-150份、喜馬拉雅紫茉莉50-150份、蒺藜50-150份、黃精50-150 份、天冬50-150份；所述藥物的粒徑為O. I 100 μ m。其中，優(yōu)選所述原料藥的重量份為西藏棱子芹100份、喜馬拉雅紫茉莉100份、蒺藜100份、黃精100份、天冬100份。所述藥物的粒徑為O. 1-60 μ m。最優(yōu)選所述藥物的粒徑為1-40 μ m。本發(fā)明還進一步公開了上述治療寒性黃水病的藥物的制備方法，其包括如下步驟(I)精選西藏棱子芹、喜馬拉雅紫茉莉、蒺藜、黃精、天冬五味原料藥，除雜后，分別晾干或烘干；(2)將上述五味原料藥分別粉碎成粒徑為O. 1-100 μ m的超微細粉；(3)按照上述原料藥的配比將上述原料藥進行充分混合；(4)對步驟(3)混合后的原料藥進行包裝或向上述原料藥中再加入常規(guī)輔料制備成任一口服制劑。其中，所述輔料為甘露醇、羥丙甲基纖維素、蛋白糖、香橙粉、谷氨酸鈉和羧甲基淀粉鈉。
所述輔料還可以為微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、淀粉、可變性淀粉中的一種或多種。添加上述輔料后需要首先進行制粒，再加入滑石粉進行壓片。本發(fā)明在公開了所述用于治療寒性黃水病的藥物以及該藥物制備方法的基礎(chǔ)上， 又進一步公開了所述的治療寒性黃水病藥物的質(zhì)量檢測方法，其包括如下步驟(I)取待測用于治療寒性黃水病的藥物樣品20g，加氯仿50ml，加熱回流4小時， 脫去脂溶性成分和部分游離皂甙元并進行過濾，將濾液棄去后得到藥渣；向所述藥渣中加入濃度為2mol/L的鹽酸50ml水解2小時，棄去酸水液；將藥渣用水洗至中性后烘干得到殘渣；向所述殘渣中加入氯仿50ml，之后加熱回流4小時，提出水解甙元并進行過濾，收集濾液，自然揮至O. 6 Iml作為供試品溶液；另取蒺藜對照藥材2g，加氯仿50ml，加熱回流4小時，脫去脂溶性成分和部分游離皂甙元并進行過濾，將濾液棄去后得到藥渣；向所述藥渣中加入濃度為2mol/L的鹽酸50ml 水解2小時，棄去酸水液；將藥渣用水洗至中性后烘干得到殘渣；向所述殘渣中加入氯仿 50ml,之后加熱回流4小時,提出水解式元并進行過濾,收集濾液，自然揮至O. 6 Iml制成對照藥材溶液；再取缺蒺藜的陰性樣品20g，加氯仿50ml，加熱回流4小時，脫去脂溶性成分和部分游離皂甙元并進行過濾，將濾液棄去后得到藥渣；向所述藥渣中加入濃度為2mol/L的鹽酸50ml水解2小時，棄去酸水液；將藥渣用水洗至中性后烘干得到殘渣；向所述殘渣中加入氯仿50ml，之后加熱回流4小時，提出水解甙元并進行過濾，收集濾液，自然揮至O. 6 Iml制成陰性對照溶液；按照薄層色譜法試驗，取所述供試品溶液、對照藥材溶液和陰性對照溶液各ΙΟμΙ，分別點于同一個以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為 5 : 2.5 : I. 5的環(huán)己烷-醋酸乙酯-氯仿溶液為展開劑，展開、取出并晾干，噴以原料茴香醛、冰醋酸和硫酸的體積比為I : 50 O. 5的茴香醛硫酸溶液，在105°C下加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材相應(yīng)的位置上顯相同的黃色斑點，且陰性對照無干擾；(2)取待測用于治療寒性黃水病的藥物樣品10g，向其中加入乙醇30ml，經(jīng)超聲處理30分鐘后進行過濾；過濾后將濾液和殘渣分離，對濾液進行收集，并揮去乙醇；向所述殘渣中加入甲醇Iml溶解作為供試品溶液；另取西藏棱子芹對照藥材2g，向其中加乙醇10ml，經(jīng)超聲處理30分鐘后進行過濾；過濾后將濾液和殘渣分離，對濾液進行收集，并揮去乙醇；向所述殘渣中加入甲醇Iml 溶解作為對照藥材溶液；再取缺西藏棱子芹的陰性樣品10g，向其中加入乙醇30ml，經(jīng)超聲處理30分鐘后進行過濾；過濾后將濾液和殘渣分離，對濾液進行收集，并揮去乙醇；向所述殘渣中加入甲醇Iml溶解作為陰性對照溶液；按照薄層色譜法試驗，取所述供試品溶液、對照藥材溶液和陰性對照溶液各5μ 1， 分別點于同一個以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為8 1.8 0.2 正己烷-醋酸乙酯-甲醇溶液為展開劑，展開、取出并晾干，噴以質(zhì)量百分含量為10%的磷鑰酸試液，在105°C下加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材相應(yīng)的位置上顯相同的深紫色斑點，且陰性對照無干擾；(3)取待測用于治療寒性黃水病的藥物樣品10g，向其中加入乙醇30ml，經(jīng)超聲處理30分鐘后進行過濾；過濾后將濾液和殘渣分離，收集濾液，揮去乙醇；向所述殘渣中加甲醇Iml溶解作為供試品溶液；另取喜馬拉雅紫茉莉?qū)φ账幉?g,向其中加乙醇10ml，向其中加入乙醇30ml，經(jīng)超聲處理30分鐘后進行過濾；過濾后將濾液和殘渣分離，收集濾液，揮去乙醇；向所述殘渣中加甲醇Iml溶解作為對照藥材溶液；再取缺喜馬拉雅紫茉莉的陰性樣品10g，，向其中加入乙醇30ml，經(jīng)超聲處理30分鐘后進行過濾；過濾后將濾液和殘渣分離，收集濾液，揮去乙醇；向所述殘渣中加甲醇Iml 溶解作為陰性對照溶液；按照薄層色譜法試驗，所述供試品溶液、對照藥材溶液和陰性對照溶液各5μ 1，分別點于同一個硅膠GF254薄層板上，以體積比為8 2 I. 5正己烷-醋酸乙酯-甲醇為展開劑，展開、取出并晾干，置于波長為254nm的紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材相應(yīng)的位置上顯相同的暗褐色斑點，且陰性對照無干擾。本發(fā)明所述的治療寒性黃水病的藥物，其原料藥為西藏棱子芹50-150份、喜馬拉雅紫茉莉50-150份、蒺藜50-150份、黃精50-150份、天冬50-150份；與《衛(wèi)生部頒藥品標準》中記載的五根散處方西藏棱子芹100g、喜馬拉雅紫茉莉100g、蒺藜100g、黃精100g、天冬IOOg相比，其進一步擴大了用于治療寒性黃水病的藥物中原料藥的可選范圍，經(jīng)過申請人多年的研究發(fā)現(xiàn)，在本發(fā)明所述的原料藥的重量份范圍內(nèi)，都可以實現(xiàn)歸于寒性黃水病的有效治療。最為重要的是，本發(fā)明所述的用于治療寒性黃水病的藥物克服了多年來藏藥領(lǐng)域一直沿用傳統(tǒng)五根散的配方，而沒有對五根散配方進行任何改進性研究的問題，其對傳統(tǒng)五根散配方進行了進一步的研究，豐富了治療寒性黃水病的藥物范疇。此外，申請人在上述擴展性研究中還發(fā)現(xiàn)，所述用于治療寒性黃水病的藥物的粒徑對于其藥物的療效有著至關(guān)重要的關(guān)系，并經(jīng)過多年的研究發(fā)現(xiàn)，只有藥物粒徑在0. I 100 μ m的上述藥物才可以實現(xiàn)對寒性黃水病有效的治療，粒徑太小(小于0.1 μ m)容易由于粉碎后的藥物表面積將原粉碎前的藥物表面積增加較大，導(dǎo)致藥物的吸濕性及化學(xué)活動性等亦相應(yīng)地增加，藥物更易吸潮變質(zhì)，藥物內(nèi)部的揮發(fā)性成分更易散失，從而影響了藥物的藥效；藥物的粒徑也不能太大(大于100 μ m)，粒徑太大會導(dǎo)致藥物的有效溶出度降低，滲透能力差且生物利用度也很低，所以也不利于藥物藥效的發(fā)揮。本發(fā)明所述的用于治療寒性黃水病的藥物的制備方法，其在精選原料藥的基礎(chǔ)上，對原料藥進行了超微粉碎，限制超微粉碎的粒徑為0. I 100 μ m，之后對經(jīng)超微粉碎后的原料進行滅菌等后續(xù)處理。該制備方法摒棄了傳統(tǒng)五根散制備方法中對原料藥進行簡單粗粉碎的方法，通過進行特定粒徑的超微粉碎，保證了制備得到的藥物可以更為充分地發(fā)揮其自身的藥效。在上述制備過程中，優(yōu)選對經(jīng)粉碎后的原料藥混合物進行滅菌處理的溫度為180°C，設(shè)置該溫度一方面保證了對原料藥混合物有效的滅菌，另一方面不至于因為滅菌溫度太高而影響原料藥的藥性發(fā)揮。對于本發(fā)明所述的用于治療寒性黃水病的藥物可以根據(jù)需要設(shè)計成各種不同的劑型，諸如片齊IJ、懸浮齊U、沖劑顆粒、膠囊、水丸、蜜丸等，上述劑型的變化不會對藥物的藥效產(chǎn)生任何影響。此外，本發(fā)明所述的治療寒性黃水病藥物的質(zhì)量檢測方法，目的在于實現(xiàn)對藥物穩(wěn)定性測試的同時實現(xiàn)對藥物中原料藥的專屬性鑒別。該質(zhì)量檢測方法，采用待測樣品、對照藥材以及缺蒺藜、缺西藏棱子芹、缺喜馬拉雅紫茉莉的陰性對照溶液進行薄層測試，從而實現(xiàn)了對本發(fā)明所述的用于治療寒性黃水病藥物的穩(wěn)定性測試，同時也實現(xiàn)了對藥物中蒺藜、西藏棱子芹以及喜馬拉雅紫茉莉的專屬性鑒別。本發(fā)明具有下述優(yōu)點I.本發(fā)明所述的用于治療寒性黃水病的藥物在傳統(tǒng)藏藥五根散的基礎(chǔ)上，對其進行了進一步的拓展性研究，擴大了用于治療寒性黃水病的藥物中原料藥的可選范圍；并經(jīng)過研究更深層次地發(fā)現(xiàn)藥物粒徑對治療寒性黃水病的藥物藥效的影響，只有藥物粒徑在
O.I 100 μ m的上述藥物才可以實現(xiàn)對寒性黃水病有效的給藥抗炎治療，避免了粒徑太小容易導(dǎo)致藥物吸潮變質(zhì)，藥物內(nèi)部的揮發(fā)性成分更易散失，從而影響了藥物的藥效；也避免了藥物的粒徑太大導(dǎo)致藥物的有效溶出度降低，滲透能力差且生物利用度也很低的問題； 進一步推動了藏藥領(lǐng)域?qū)τ谥委熀渣S水病的藥物研究。2.本發(fā)明所述的用于治療寒性黃水病的藥物優(yōu)選其粒徑為O. 1_60μπι，最優(yōu)選粒徑為1-40 μ m，設(shè)置上述粒徑可以更好地提高藥物的有效溶出度和生物利用度。3.本發(fā)明所述的用于治療寒性黃水病的藥物通過對藥物粒徑的有效選擇，不需要添加任何化學(xué)合成的穩(wěn)定劑，即可以全方位地提高藥物的有效溶出度以及生物利用度，使
用安全。4.本發(fā)明所述的制備用于治療寒性黃水病的藥物的方法，將對藥物中原料藥的粉碎限定其粒徑為O. 1-100 μ m，實現(xiàn)了對原料藥的超微粉碎，使得制備得到的用于治療寒性黃水病的藥物能夠更好地發(fā)揮其藥效；該方法簡單易行，容易產(chǎn)業(yè)化，具有廣闊的市場前
旦
-5^ O5.本發(fā)明所述的用于治療寒性黃水病的藥物的質(zhì)量檢測方法，摒棄了只能在宏觀上觀察藥物形狀從而判斷其穩(wěn)定性的測試方式，采用理化測試手段實現(xiàn)了對藥物本質(zhì)的穩(wěn)定性測試，且在實現(xiàn)測定藥物穩(wěn)定性的同時也實現(xiàn)了對藥物專屬性的鑒別，從而保證了對藥物有效成分的準確、快速、穩(wěn)定、靈敏的檢測，更加保證了藥物的質(zhì)量，實現(xiàn)了對藥物質(zhì)量的高可控性。
具體實施例方式實施例I精選西藏棱子芹、喜馬拉雅紫茉莉、蒺藜、黃精、天冬五味原料藥，除雜后分別晾干；將上述晾干后的原料藥分別粉碎成粒徑為1-40 μ m的超微細粉；選取上述經(jīng)粉碎后的西藏棱子芹50份、喜馬拉雅紫茉莉50份、蒺藜50份、黃精50份、天冬50份進行充分混合； 之后對經(jīng)混合后的原料藥進行密封包裝，即得散劑。實施例2精選西藏棱子芹、喜馬拉雅紫茉莉、蒺藜、黃精、天冬五味原料藥，除雜后，分別烘干；將上述經(jīng)烘干后的原料藥分別粉碎成粒徑為1-10 μ m的超微細粉；選取上述經(jīng)粉碎后的西藏棱子芹30份、喜馬拉雅紫茉莉50份、蒺藜60份、黃精80份、天冬100份進行充分混合，然后加入微晶纖維素進行制粒，再加入滑石粉，混合均勻后壓片，最后進行包裝即可。實施例3精選西藏棱子芹、喜馬拉雅紫茉莉、蒺藜、黃精、天冬五味原料藥，除雜后，分別烘干；將上述經(jīng)烘干后的原料藥分別粉碎成粒徑為10-30 μ m的超微細粉；選取上述經(jīng)粉碎后的西藏棱子芹80份、喜馬拉雅紫茉莉100份、蒺藜150份、黃精100份、天冬100份進行充分混合，混合均勻后制成丸劑。實施例4精選西藏棱子芹、喜馬拉雅紫茉莉、蒺藜、黃精、天冬五味原料藥，除雜后，分別干燥；將上述干燥后的原料藥分別粉碎成粒徑為O. 1-1 μ m的超微細粉；選取上述經(jīng)粉碎后的西藏棱子芹100份、喜馬拉雅紫茉莉100份、蒺藜150份、黃精100份、天冬100份進行充分混合，然后加入羧甲基淀粉鈉進行制粒，再加入滑石粉，混合均勻后壓片，最后進行包裝即可。實施例5精選西藏棱子芹、喜馬拉雅紫茉莉、蒺藜、黃精、天冬五味原料藥，除雜后，分別干燥；將上述干燥后的原料藥分別粉碎成粒徑為O. 1-60 μ m的超微細粉；選取上述經(jīng)粉碎后的西藏棱子芹80份、喜馬拉雅紫茉莉50份、蒺藜150份、黃精50份、天冬80份進行充分混合，然后加入羧甲基淀粉鈉進行制粒，即得顆粒劑。實施例6精選西藏棱子芹、喜馬拉雅紫茉莉、蒺藜、黃精、天冬五味原料藥，除雜后，分別干燥；將上述干燥后的原料藥分別粉碎成粒徑為60-100 μ m的超微細粉；選取上述經(jīng)粉碎后的西藏棱子芹50份、喜馬拉雅紫茉莉50份、蒺藜100份、黃精100份、天冬100份進行充分混合，然后加入微晶纖維素進行制粒，裝入膠囊，即得膠囊劑。實施例7精選西藏棱子芹、喜馬拉雅紫茉莉、蒺藜、黃精、天冬五味原料藥，除雜后分別晾干；將上述晾干后的原料藥分別粉碎成粒徑為60-100 μ m的藥粉；選取上述經(jīng)粉碎后的西藏棱子芹100份、喜馬拉雅紫茉莉100份、蒺藜100份、黃精100份、天冬100份進行充分混合；然后將混合后的藥粉裝入膠囊，即得膠囊劑。在上述實施例1-7中，加入的輔料除了微晶纖維素和羧甲基淀粉鈉外，還可以向其中添加淀粉或者可變性淀粉，作為可以變換的實施方式，本發(fā)明也可以加入微晶纖維素、 羧甲基淀粉鈉、淀粉或者可變性淀粉中的一種或者多種作為制備本發(fā)明所述用于治療寒性黃水病的藥物中的輔料。實施例8精選西藏棱子芹、喜馬拉雅紫茉莉、蒺藜、黃精、天冬五味原料藥，除雜后，分別置于烘干機內(nèi)于50°C下進行烘干；將上述經(jīng)烘干后的原料藥分別粉碎成粒徑為40-60μπι的超微細粉；選取上述經(jīng)粉碎后的西藏棱子芹80份、喜馬拉雅紫茉莉80份、蒺藜80份、黃精 80份、天冬80份進行充分混合，并于180°C下進行滅菌處理；之后向經(jīng)滅菌處理后的原料藥混合物中加入適量甘露醇、羥丙甲纖維素、蛋白糖、香橙粉、谷氨酸鈉以及羧甲基淀粉鈉中的任一種并混勻，最后進行包裝即可。實施例9精選西藏棱子芹、喜馬拉雅紫茉莉、蒺藜、黃精、天冬五味原料藥，除雜后，分別置于烘干機內(nèi)于60°C下進行烘干；將上述經(jīng)烘干后的原料藥分別粉碎成粒徑為10-40μπι的超微細粉；選取上述經(jīng)粉碎后的西藏棱子芹100份、喜馬拉雅紫茉莉100份、蒺藜100份、黃精100份、天冬100份進行充分混合，并于180°C下進行滅菌處理；之后向經(jīng)滅菌處理后的原料藥混合物中加入適量甘露醇、羥丙甲纖維素并混勻，最后進行包裝即可。實施例10精選西藏棱子芹、喜馬拉雅紫茉莉、蒺藜、黃精、天冬五味原料藥，除雜后，分別置于烘干機內(nèi)于80°C下進行烘干；將上述經(jīng)烘干后的原料藥分別粉碎成粒徑為60-100 μ m的超微細粉；選取上述經(jīng)粉碎后的西藏棱子芹150份、喜馬拉雅紫茉莉150份、蒺藜150份、黃精150份、天冬150份進行充分混合，并于180°C下進行滅菌處理；之后向經(jīng)滅菌處理后的原料藥混合物中加入適量蛋白糖、香橙粉、谷氨酸鈉以及羧甲基淀粉鈉并混勻，最后進行包裝即可。實施例U精選西藏棱子芹、喜馬拉雅紫茉莉、蒺藜、黃精、天冬五味原料藥，除雜后，分別置于烘干機內(nèi)于60°C下進行烘干；將上述經(jīng)烘干后的原料藥分別粉碎成粒徑為1-60 μ m的超微細粉；選取上述經(jīng)粉碎后的西藏棱子芹100份、喜馬拉雅紫茉莉50份、蒺藜90份、黃精 80份、天冬150份進行充分混合，并于180°C下進行滅菌處理；之后向經(jīng)滅菌處理后的原料藥混合物中加入適量甘露醇、羥丙甲纖維素、蛋白糖、香橙粉、谷氨酸鈉以及羧甲基淀粉鈉并混勻，最后進行包裝即可。
在上述實施例1-11中對原料藥進行超微粉碎，之后采用的是AccuSiZer780/APS 檢測儀對經(jīng)粉碎后的原料藥顆粒進行粒徑檢測。實施例12對上述實施例1-11中制備得到的用于治療寒性黃水病的藥物進行質(zhì)量檢測，檢測步驟如下(I)取待測用于治療寒性黃水病的藥物樣品20g，加氯仿50ml，加熱回流4小時， 脫去脂溶性成分和部分游離皂甙元并進行過濾，將濾液棄去后得到藥渣；向所述藥渣中加入濃度為2mol/L的鹽酸50ml水解2小時，棄去酸水液；將藥渣用水洗至中性后烘干得到殘渣；向所述殘渣中加入氯仿50ml，之后加熱回流4小時，提出水解甙元并進行過濾，收集濾液，自然揮至Iml作為供試品溶液；另取蒺藜對照藥材2g，加氯仿50ml，加熱回流4小時，脫去脂溶性成分和部分游離皂甙元并進行過濾，將濾液棄去后得到藥渣；向所述藥渣中加入濃度為2mol/L的鹽酸50ml 水解2小時，棄去酸水液；將藥渣用水洗至中性后烘干得到殘渣；向所述殘渣中加入氯仿 50ml，之后加熱回流4小時，提出水解甙元并進行過濾，收集濾液，自然揮至Iml制成對照藥材溶液；再取缺蒺藜的陰性樣品20g，加氯仿50ml，加熱回流4小時，脫去脂溶性成分和部分游離皂甙元并進行過濾，將濾液棄去后得到藥渣；向所述藥渣中加入濃度為2mol/L的鹽酸50ml水解2小時，棄去酸水液；將藥渣用水洗至中性后烘干得到殘渣；向所述殘渣中加入氯仿50ml，之后加熱回流4小時，提出水解甙元并進行過濾，收集濾液，自然揮至Iml制成陰性對照溶液；按照薄層色譜法試驗，取所述供試品溶液、對照藥材溶液和陰性對照溶液各ΙΟμΙ，分別點于同一個以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為 5 2.5 I. 5的環(huán)己烷-醋酸乙酯-氯仿溶液為展開劑，展開、取出并晾干，噴以原料茴香醛、冰醋酸和硫酸的體積比為I : 50 O. 5的茴香醛硫酸溶液，在105°C下加熱至斑點顯色
10清晰，供試品色譜中，在與對照藥材相應(yīng)的位置上顯相同的黃色斑點，且陰性對照無干擾；(2)取待測用于治療寒性黃水病的藥物樣品10g，向其中加入乙醇30ml，經(jīng)超聲處理30分鐘后進行過濾；過濾后將濾液和殘渣分離，對濾液進行收集，并揮去乙醇；向所述殘渣中加入甲醇Iml溶解作為供試品溶液；另取西藏棱子芹對照藥材2g，向其中加乙醇10ml，經(jīng)超聲處理30分鐘后進行過濾；過濾后將濾液和殘渣分離，對濾液進行收集，并揮去乙醇；向所述殘渣中加入甲醇Iml 溶解作為對照藥材溶液；再取缺西藏棱子芹的陰性樣品10g，向其中加入乙醇30ml，經(jīng)超聲處理30分鐘后進行過濾；過濾后將濾液和殘渣分離，對濾液進行收集，并揮去乙醇；向所述殘渣中加入甲醇Iml溶解作為陰性對照溶液；按照薄層色譜法試驗，取所述供試品溶液、對照藥材溶液和陰性對照溶液各5μ 1， 分別點于同一個以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為8 1.8 0.2 正己烷-醋酸乙酯-甲醇溶液為展開劑，展開、取出并晾干，噴以10%的磷鑰酸試液，在 105°C下加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材相應(yīng)的位置上顯相同的深紫色斑點，且陰性對照無干擾；(3)取待測用于治療寒性黃水病的藥物樣品10g，向其中加入乙醇30ml，經(jīng)超聲處理30分鐘后進行過濾；過濾后將濾液和殘渣分離，收集濾液，揮去乙醇；向所述殘渣中加甲醇Iml溶解作為供試品溶液；另取喜馬拉雅紫茉莉?qū)φ账幉?g，向其中加乙醇10ml，向其中加入乙醇30ml，經(jīng)超聲處理30分鐘后進行過濾；過濾后將濾液和殘渣分離，收集濾液，揮去乙醇；向所述殘渣中加甲醇Iml溶解作為對照藥材溶液；再取缺喜馬拉雅紫茉莉的陰性樣品10g，，向其中加入乙醇30ml，經(jīng)超聲處理30分鐘后進行過濾；過濾后將濾液和殘渣分離，收集濾液，揮去乙醇；向所述殘渣中加甲醇Iml 溶解作為陰性對照溶液；按照薄層色譜法試驗，所述供試品溶液、對照藥材溶液和陰性對照溶液各5μ 1，分別點于同一個硅膠GF254薄層板上，以體積比為8 2 I. 5正己烷-醋酸乙酯-甲醇為展開劑，展開、取出并晾干，置于波長為254nm的紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材相應(yīng)的位置上顯相同的暗褐色斑點，且陰性對照無干擾。經(jīng)上述方法檢測后，檢測結(jié)果顯示上述制備得到的用于治療寒性黃水病的藥物質(zhì)
量穩(wěn)定。溶出度測試表征本發(fā)明進一步對制備得到的用于治療寒性黃水病的藥物進行有效溶出度的測定， 該測定方法主要是通過測定待測藥物樣品中黃精多糖的含量來測定藥物有效溶出度的，詳細方法如下取本發(fā)明用于治療寒性黃水病的藥物I. 0g，精密稱定，將其置于IOOml容量瓶中， 并加入體積百分含量為0. 9%的鹽酸溶液，將其放在37°C的水浴中放置12h，略加振搖之后放冷，補加溶出介質(zhì)至刻度。取少量樣品液，經(jīng)微孔濾膜過濾，使用分光光度法測定并計算， 此含量作為100%溶出的量。測定結(jié)果為本發(fā)明所述的用于治療寒性黃水病的藥物中黃精多糖的含量為42. 50%。
分光光度法測定黃精多糖含量(I)對照品溶液的制備精密稱取經(jīng)105°C干燥至恒重的無水葡萄糖16. 635mg, 置于50ml量瓶中，加蒸餾水溶解并稀釋至刻度后搖勻即可(每Iml中含無水葡萄糖 O. 3327mg)。(2)線性關(guān)系的考察精密吸取對照品溶液0ml、0. lml、0. 2ml、0. 3ml、0. 4ml、
0.5ml,0. 6ml，分別置于IOml量瓶中，加水至刻度并搖勻。分別精密量取上述各溶液2. Oml, 置于具塞試管中，并分別精密加入4%苯酚溶液I. Oml搖勻，然后迅速精密滴加濃硫酸 7. 0ml，利用渦流混懸器對上述滴加硫酸后的溶液快速混勻，置于40°C水浴中保溫30min， 取出后置于冰水浴中放置5min;另取蒸餾水2. 0ml，與上述操作同法加入4%苯酚溶液和硫酸，以此溶液作為空白對照。按照分光光度法2005年版《中國藥典(一部)》附錄VB，在 582nm波長處測定吸收度，以吸收度(Y)為縱坐標，無水葡萄糖含量(X)為橫坐標進行回歸處理，得回歸方程為Y = O. 0419X-0. 0101，r = O. 9997。(3)供試品溶液的制備采用漿法，轉(zhuǎn)速為100r/min，溫度為(37. O ±2) °C，配制體積百分含量為O. 9%的鹽酸溶液作溶出介質(zhì)，取900ml上述溶出介質(zhì)各6份；取傳統(tǒng)五根散和本發(fā)明用于治療寒性黃水病的藥物適量，每組6份，分別置于溶出介質(zhì)中進行試驗。在試驗開始后 5min、lOmin、15min、20min、30min、40min、50min、60min 和 80min 這九個時間點取溶液8ml，取出后立即補充同溫度新鮮介質(zhì)8ml ;精密吸取各時間點取樣溶液lml，置于25ml 量瓶中，加水至刻度并搖勻；精密量取上述加水至25ml的溶液2ml，向其中加入乙醇IOml 并攪拌，之后對其進行離心處理；向經(jīng)離心處理后的沉淀中加水IOml進行溶解，對經(jīng)溶解后的沉淀精密量取2ml，置于具塞試管中，按照標準曲線的制備項下操作，依照(2)線性關(guān)系的考察項下的內(nèi)容依法測定吸收度。測定方法及結(jié)果精密吸取供試品溶液各2ml，同法測定吸收度，以100%溶出量作參比，各時間點樣品含量與其比較，計算累計溶出百分率，結(jié)果見表I。表I五根散制劑中總多糖累計溶出百分率([士 SD, η = 6)
上述溶出度測試表征是以前述實施例I中制備得到的治療寒性黃水病的藥物作為待測試品得到的測試數(shù)據(jù)。由上述數(shù)據(jù)可知，本發(fā)明所述的用于治療寒性黃水病的藥物，對其原料藥材進行特定粒徑范圍的超微粉碎，粉碎后破壁率大大提高，與溶媒的接觸面更大，擴散面也更大， 藥物的擴散速度也更快；另外，隨著藥材粉末的微細化，粒度變小，比表面積增大，滲透壓升高，增大了和溶出介質(zhì)間的有效接觸面積，加快固體藥物的溶解、釋放，使得原料藥有效成分的溶出速率加快，從而提高了生物利用度，以達到更佳臨床療效的目的?？寡姿幚頊y試本發(fā)明所述的用于治療寒性黃水病的藥物，其具有較好的抗炎效果，藥理實驗如下對其進行抗炎藥理實驗時所使用的藥劑為弗氏完全佐劑、硫化鋇(A. R)、五根散以及本發(fā)明制備得到的用于治療寒性黃水病的藥物。所采用的儀器包括電子天平和雙足平衡痛覺測試儀。實驗體為SD大鼠，體重220±20g，4月齡雌鼠(該實驗體由蘭州大學(xué)動物實驗室提供)。經(jīng)熱痛覺測試選擇上述70只雌鼠，隨機分為7組，分別設(shè)置為空白組、模型組、 五根散組、給藥組1(0. 1-60 μ m粒徑低劑量)、給藥組11(0. 1-100 μ m粒徑)、給藥組 111(0. 1-60 μ m粒徑高劑量)、給藥組IV(1-40 μ m粒徑)。將大鼠左膝關(guān)節(jié)脫毛后注射弗氏完全佐劑造模，造模12h后，空白組和模型組灌服等體積生理鹽水，五根散組和給藥組分別按照表I中劑量灌胃，給藥6h后采用雙足平衡痛覺測試儀測試。測得雙足Am值，SPSS11. 5軟件方差分析顯示，模型組與其他各組均有極顯著性差異(P < O. 01)，說明造模成功，且五根散組、給藥組I、給藥組II、給藥組III與給藥組IV 均有抗炎作用。給藥組I和五根散組之間無統(tǒng)計學(xué)差異，和給藥組II之間具有顯著性差異 (P < O. 05)，和給藥組III、IV間均具有極顯著性差異(P < O. 01);給藥組III和給藥組II、IV間均具有顯著性差異(P < O. 05)，和給藥組I及模型組有極顯著性差異(P < O. 01)。實驗結(jié)果說明給藥組I的抗炎作用和傳統(tǒng)五根散組的效果接近；給藥組III的抗炎作用明顯優(yōu)于傳統(tǒng)劑型五根散和給藥組I (P < O. 01)，且優(yōu)于給藥組II (P < O. 05)。給藥組II的抗炎效果介于給藥組I和給藥組III之間；給藥組IV的作用效果優(yōu)于給藥組III (P < O. 05)， 明顯優(yōu)于五根散組、給藥組I和給藥組II (P < O. 01)。結(jié)果如表2。表2大鼠雙足平衡痛覺測試Λ m值
權(quán)利要求
1.一種治療寒性黃水病藥物的質(zhì)量檢測方法，所述治療寒性黃水病的藥物包括如下重量份的原料藥西藏棱子芹50-150份、喜馬拉雅紫茉莉50-150份、蒺藜50-150份、黃精 50-150份、天冬50-150份；所述藥物的粒徑為O. Γ ΟΟ μ m ；所述檢測方法包括如下步驟(1)取待測用于治療寒性黃水病的藥物樣品20g，加氯仿50ml，加熱回流4小時，脫去脂溶性成分和部分游離皂甙元并進行過濾，將濾液棄去后得到藥渣；向所述藥渣中加入濃度為2mol/L的鹽酸50ml水解2小時，棄去酸水液；將藥渣用水洗至中性后烘干得到殘渣；向所述殘渣中加入氯仿50ml，之后加熱回流4小時，提出水解甙元并進行過濾，收集濾液，自然揮至O. 6 Iml作為供試品溶液；另取蒺藜對照藥材2g，加氯仿50ml，加熱回流4小時，脫去脂溶性成分和部分游離皂甙元并進行過濾，將濾液棄去后得到藥渣；向所述藥渣中加入濃度為2mol/L的鹽酸50ml水解 2小時，棄去酸水液；將藥渣用水洗至中性后烘干得到殘渣；向所述殘渣中加入氯仿50ml， 之后加熱回流4小時，提出水解甙元并進行過濾，收集濾液，自然揮至0.6 Iml制成對照藥材溶液；再取缺蒺藜的陰性樣品20g，加氯仿50ml，加熱回流4小時，脫去脂溶性成分和部分游離皂甙元并進行過濾，將濾液棄去后得到藥渣；向所述藥渣中加入濃度為2mol/L的鹽酸 50ml水解2小時，棄去酸水液；將藥渣用水洗至中性后烘干得到殘渣；向所述殘渣中加入氯仿50ml，之后加熱回流4小時，提出水解甙元并進行過濾，收集濾液，自然揮至O. 6 Iml制成陰性對照溶液；按照薄層色譜法試驗，取所述供試品溶液、對照藥材溶液和陰性對照溶液各10μ 1，分別點于同一個以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為5:2. 5:1. 5的環(huán)己烷-醋酸乙酯-氯仿溶液為展開劑，展開、取出并晾干，噴以原料茴香醛、冰醋酸和硫酸的體積比為1:50:0. 5的茴香醛硫酸溶液，在105°C下加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材相應(yīng)的位置上顯相同的黃色斑點，且陰性對照無干擾；(2)取待測用于治療寒性黃水病的藥物樣品10g，向其中加入乙醇30ml，經(jīng)超聲處理30 分鐘后進行過濾；過濾后將濾液和殘渣分離，對濾液進行收集，并揮去乙醇；向所述殘渣中加入甲醇Iml溶解作為供試品溶液；另取西藏棱子芹對照藥材2g，向其中加乙醇10ml，經(jīng)超聲處理30分鐘后進行過濾；過濾后將濾液和殘渣分離，對濾液進行收集，并揮去乙醇；向所述殘渣中加入甲醇Iml溶解作為對照藥材溶液；再取缺西藏棱子芹的陰性樣品10g，向其中加入乙醇30ml，經(jīng)超聲處理30分鐘后進行過濾；過濾后將濾液和殘渣分離，對濾液進行收集，并揮去乙醇；向所述殘渣中加入甲醇 Iml溶解作為陰性對照溶液；按照薄層色譜法試驗，取所述供試品溶液、對照藥材溶液和陰性對照溶液各5 μ I，分別點于同一個以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為8:1. 8:0. 2正己烷-醋酸乙酯-甲醇溶液為展開劑，展開、取出并晾干，噴以質(zhì)量百分含量為10%的磷鑰酸試液，在105°C下加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材相應(yīng)的位置上顯相同的深紫色斑點，且陰性對照無干擾；(3)取待測用于治療寒性黃水病的藥物樣品10g，向其中加入乙醇30ml，經(jīng)超聲處理30分鐘后進行過濾；過濾后將濾液和殘渣分離，收集濾液，揮去乙醇；向所述殘渣中加甲醇 Iml溶解作為供試品溶液；另取喜馬拉雅紫茉莉?qū)φ账幉?g，向其中加乙醇10ml，向其中加入乙醇30ml，經(jīng)超聲處理30分鐘后進行過濾；過濾后將濾液和殘渣分離，收集濾液，揮去乙醇；向所述殘渣中加甲醇Iml溶解作為對照藥材溶液；再取缺喜馬拉雅紫茉莉的陰性樣品10g，，向其中加入乙醇30ml，經(jīng)超聲處理30分鐘后進行過濾；過濾后將濾液和殘渣分離，收集濾液，揮去乙醇；向所述殘渣中加甲醇Iml溶解作為陰性對照溶液；按照薄層色譜法試驗，所述供試品溶液、對照藥材溶液和陰性對照溶液各5 μ 1，分別點于同一個硅膠GF254薄層板上，以體積比為8:2:1. 5正己烷-醋酸乙酯-甲醇為展開劑，展開、取出并晾干，置于波長為254nm的紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材相應(yīng)的位置上顯相同的暗褐色斑點，且陰性對照無干擾。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的質(zhì)量檢測方法，其特征在于，所述藥物的粒徑為O.1-60 μ m。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的質(zhì)量檢測方法，其特征在于，述藥物的粒徑為1-40μ m。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的質(zhì)量檢測方法，其特征在于，所述原料藥的重量份為西藏棱子芹100份、喜馬拉雅紫茉莉100份、蒺藜100份、黃精100份、天冬100份。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療寒性黃水病的藥物，包括如下重量份的原料藥西藏棱子芹50-150份、喜馬拉雅紫茉莉50-150份、蒺藜50-150份、黃精50-150份、天冬50-150份；所述藥物的粒徑為0.1~100um。本發(fā)明所述的藥物具有較高的藥物有效溶出度、藥物滲透能力和生物利用度，具有較好的藥效。本發(fā)明還進一步公開了上述用于治療寒性黃水病藥物的制備方法以及其專用的質(zhì)量檢測方法，使用該質(zhì)量檢測方法有效地實現(xiàn)了在控制藥物穩(wěn)定性的同時有效鑒別藥物中藥物原料藥的專屬性。
文檔編號G01N30/90GK102590432SQ201210032140
公開日2012年7月18日 申請日期2009年7月20日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月20日
發(fā)明者張國霞, 張櫻山, 李波, 陳麗娟 申請人:甘肅奇正藏藥有限公司