專利名稱：用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶ⅳ抗體的elisa試劑盒及其方法與運(yùn)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域，特別涉及用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的間接ELISA試劑盒及其方法與運(yùn)用。
背景技術(shù)：
類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)是一種以滑膜炎為基本病理改變，以慢性破壞性關(guān)節(jié)病變?yōu)樘卣鞯娜硇宰陨砻庖卟?，大多病情呈進(jìn)行性，最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)纖維性或骨性強(qiáng)直而嚴(yán)重致殘，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量。未經(jīng)正確治療的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎可遷延不愈，甚至導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形。作為自身免疫性疾病，致病抗原驅(qū)動的自身反應(yīng)性CD4+T細(xì)胞活化是類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)病的核心途徑。對于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的診斷，現(xiàn)在主流仍然沿用1987年美國風(fēng)濕病學(xué)學(xué)會RA的分類標(biāo)準(zhǔn)，其主要靠臨床表現(xiàn)并排除其他關(guān)節(jié)炎從而對RA進(jìn)行判斷。另外，X線改變和類風(fēng)濕因子也是判斷RA的常用標(biāo)準(zhǔn)。但上述方法操作繁瑣且特異性不高，且不適用于早期診斷。眾所周知，RA的病理改變從滑膜組織開始逐漸向軟骨到骨發(fā)展。RA在早期若未得到有效治療，將會引起關(guān)節(jié)功能障礙甚至勞動力喪失，并導(dǎo)致全身多臟器受累進(jìn)而危及生命。如果能盡早對RA病情做出診斷，及早治療，從而阻止或延緩其發(fā)展，將能有效的提高RA 的治療效果并減少其并發(fā)癥的發(fā)生。而針對RA早期有高度敏感性和特異性的檢測指標(biāo)是實(shí)現(xiàn)RA早期診斷和治療的前提。早期診斷指標(biāo)中，IL-8、IL-6水平在巨細(xì)胞病毒DNA陽性的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者中升高和CMV基因組出現(xiàn)之間存在聯(lián)系，但特異性和敏感性低。在RA自身抗體作為檢測指標(biāo)方面類風(fēng)濕因子(RF)存在靈敏度低的缺點(diǎn)；在早期RF陰性的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病人中可 53. 3%的病人抗核周因子(APF)呈陽性，但APF抗原片的保存時(shí)間較短(僅為1 2周)，檢測穩(wěn)定性低fa抗體在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中陽性率為40%，特異性為98. 9%，但類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎早期僅約23% ；過氧化物還原酶IV和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的相關(guān)性研究尚未有人報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
有鑒于此，本發(fā)明的目的之一在于提供一種試劑盒，該試劑盒能快速檢測過氧化物還原酶IV抗體的含量，操作簡單，成本低廉。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為
1、用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒，所述ELISA試劑盒包括抗體捕獲劑、酶標(biāo)二抗和底物。2、根據(jù)1所述的用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒， 所述抗體捕獲劑為過氧化物還原酶IV作不小于5 μ g/mL的稀釋。3、根據(jù)1所述的用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒，抗體捕獲劑附于固相支持物上。4、根據(jù)3所述的用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒， 所述固相支持物為酶標(biāo)板或生物芯片。5、根據(jù)1所述的用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒， 所述生物標(biāo)本為血清、尿液、細(xì)胞、組織物或血漿。6、根據(jù)5所述的用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒， 所述生物標(biāo)本為血清，所述血清為不大于200倍體積稀釋的血清稀釋液。7、根據(jù)1所述的用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒， 所述酶標(biāo)二抗為辣根酶標(biāo)記山羊抗人IgM作不大于4000倍稀釋的稀釋液。8、根據(jù)1所述的用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒， 所述抗體捕獲劑與酶標(biāo)二抗的用量體積比為1:1。
本發(fā)明的目的之二在于提供上述試劑盒的用途，該用途能彌補(bǔ)過氧化物還原酶IV抗體檢測領(lǐng)域的技術(shù)空白，并為類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎及其它免疫性疾病提供了診斷思路，特別適用于生物標(biāo)本的檢測。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為
9、1-8所述的用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒在檢測過氧化物還原酶IV抗體含量的應(yīng)用。10、根據(jù)9所述的用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒的應(yīng)用，所述ELISA試劑盒在制備檢測類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎試劑盒中的應(yīng)用。11、根據(jù)9所述的用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒的應(yīng)用，所述ELISA試劑盒檢測待測血清與正常人血清的過氧化物還原酶IV抗體的含量， 當(dāng)待測血清的OD45tlnm值大于0. 257為過氧化物還原酶IV抗體陽性，小于或等于0. 257為過氧化物還原酶IV抗體陰性。本發(fā)明的目的之三在于提供過氧化物還原酶IV抗體含量的方法，該方法敏感性高，操作簡單。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為
12、運(yùn)用1-8任一項(xiàng)所述ELISA試劑盒檢測過氧化物還原酶IV抗體含量的方法，a、將生物標(biāo)本與ELISA試劑盒中的抗體捕獲劑接觸并保溫；b、將未結(jié)合的生物標(biāo)本分離，得抗原-抗體復(fù)合物；C、在步驟b所得的抗原-抗體復(fù)合物加入ELISA試劑盒中的酶標(biāo)二抗，得雙抗復(fù)合物；d、檢測結(jié)合于抗體捕獲劑的過氧化物還原酶IV抗體的含量。13、根據(jù)12所述的運(yùn)用ELISA試劑盒檢測過氧化物還原酶IV抗體含量的方法，所述方法還包括將步驟d所得的過氧化物還原酶IV抗體的含量與正常人過氧化物還原酶IV 抗體的含量進(jìn)行比較判斷。14、根據(jù)12所述的運(yùn)用ELISA試劑盒檢測過氧化物還原酶IV抗體含量的方法，步驟a中，將抗體捕獲劑包被酶標(biāo)板，將待測生物標(biāo)本與抗體捕獲劑接觸，保溫并用封閉液封閉；所述生物標(biāo)本為不大于200倍體積稀釋的血清稀釋液，所述抗體捕獲劑為過氧化物還原酶IV作小于5 μ g/ml的稀釋液。15、根據(jù)12所述的運(yùn)用ELISA試劑盒檢測過氧化物還原酶IV抗體含量的方法，
5步驟b中，將步驟a中保溫并用封閉液封閉的酶標(biāo)板洗滌將未結(jié)合的生物標(biāo)本分離，得抗原-抗體復(fù)合物。16、根據(jù)12所述的運(yùn)用ELISA試劑盒檢測過氧化物還原酶IV抗體含量的方法，步驟c中，在步驟b所得的抗原-抗體復(fù)合物加入ELISA試劑盒中的酶標(biāo)二抗進(jìn)行保溫反應(yīng)， 得雙抗夾心復(fù)合物；所述酶標(biāo)二抗為辣根酶標(biāo)記山羊抗人IgM作不大于4000倍稀釋的稀釋液。17、根據(jù)12所述的運(yùn)用ELISA試劑盒檢測過氧化物還原酶IV抗體含量的方法，步驟d中，在步驟c所得的雙抗復(fù)合物中加入底物避光顯色后，加入終止液終止反應(yīng)得顯色樣品液，通過測顯色樣品液的OD45tlnm值檢測結(jié)合于抗體捕獲劑的過氧化物還原酶IV抗體的含量。
18、根據(jù)12所述的運(yùn)用ELISA試劑盒檢測過氧化物還原酶IV抗體含量的方法，所述方法還包括陰性對照組和空白對照組，所述陰性對照組為源自于正常人的生物標(biāo)本。19、根據(jù)18所述的運(yùn)用ELISA試劑盒檢測過氧化物還原酶IV抗體含量的方法，所述待測生物標(biāo)本的OD45tlnm值大于陰性對照組樣本的OD45tlnm值平均值與其2倍標(biāo)準(zhǔn)方差之和時(shí)，判定為過氧化物還原酶IV抗體陽性，述待測生物標(biāo)本的OD45tlnm值小于或等于陰性對照組樣本的OD45tlnm值平均值與其2倍標(biāo)準(zhǔn)方差之和時(shí)為陰性。本發(fā)明的有益效果在于本試劑盒能特異性的檢測過氧化物還原酶IV抗體的含量，其成本低，敏感性佳；運(yùn)用本試劑盒檢測過氧化物還原酶IV抗體的含量，并與正常人的過氧化物還原酶IV的抗體水平進(jìn)行比較，可特異性教高的診斷類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，所以該試劑盒可以制備成類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診斷試劑盒，尤其適用于早期診斷。


為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將結(jié)合附圖對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述，其中
圖1為間接ELISA法檢測初診RA、復(fù)診RA及正常人血清中過氧化物還原酶IV抗體的分析圖。圖2為過氧化物還原酶IV間接法ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線，橫坐標(biāo)為小鼠抗人單克隆抗體稀釋倍數(shù)，縱坐標(biāo)為不同稀釋倍數(shù)抗體所對應(yīng)的OD450值。
具體實(shí)施例方式為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)的描述。本實(shí)施例中所述抗原包被物人過氧化物還原酶IV的獲得是通過構(gòu)建原核表達(dá)質(zhì)粒、轉(zhuǎn)化表達(dá)菌并發(fā)酵培養(yǎng)，收集到大量的含有過氧化物還原酶IV的菌體沉淀，辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的山羊抗人IgM，作為間接法ELISA的二抗；進(jìn)一步確定了人過氧化物還原酶IV包被濃度和檢測血清的最佳濃度范圍及陰陽性臨界值的確定，制定了一種特異性和敏感性高的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎過氧化物還原酶IV抗體檢測方法，其能捕獲7. Sng/ mL過氧化物還原酶IV抗體。實(shí)施例過氧化物還原酶IV抗體間接法ELISA試劑盒及其方法與運(yùn)用一包被物人過氧化物還原酶IV的制備
構(gòu)建人過氧化物還原酶IV表達(dá)質(zhì)粒，用PET原核表達(dá)系統(tǒng)制備重組抗原TRX-過氧化物還原酶IV融合蛋白。1根據(jù)GenBank中檢索到的人過氧化物還原酶IV成熟蛋白序列編碼，設(shè)計(jì)合成編碼過氧化物還原酶IV蛋白的DNA ；
2分別在DNA5'端和3'端設(shè)計(jì)EcoR I和Hind III酶切位點(diǎn)，經(jīng)聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)、 構(gòu)建重組質(zhì)粒PET過氧化物還原酶IV ； 3在BL21 (DE3)經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)； 4 Ni-NTA親和層析制備TRX-過氧化物還原酶IV ；
5通過DNA測序、融合蛋白的相對分子質(zhì)量分析及Western印跡來鑒定TRX-過氧化物還原酶IV質(zhì)粒及表達(dá)的過氧化物還原酶IV抗原的正確性。二、過氧化物還原酶IV抗體的間接法ELISA試劑盒及其方法與運(yùn)用 1、實(shí)驗(yàn)材料
1.1、試劑
辣根酶標(biāo)記山羊抗人IgM購自Lifescience公司；辣根酶標(biāo)記山羊抗小鼠IgG (H+L) 購自北京中山生物技術(shù)公司；小鼠抗人過氧化物還原酶IV單克隆抗體購自Abcam公司； 1.2、儀器
紫外分光光度儀Backmen公司。1.3、主要試劑配制
封閉液加入IOmL封閉液貯液到90mlTBS中，在-15 _25°C穩(wěn)定保存。0. 5%封閉液加入5mL封閉液貯液到95mLTBS中，在-15 _25°C穩(wěn)定保存。血清稀釋液用0. 5%的封閉液稀釋一抗。HRP標(biāo)記的抗小鼠或人IgG用0. 5%的封閉液稀釋為1 :10000倍，得到二抗工作液。包被液0. 85M (PH 9. 6)碳酸鹽緩沖液1. 59g Na2CO3加2. 93g NaHCO3，三蒸水定容1000mL。洗滌液0. OlM pH7. 4 PBS +吐溫-20 (T)使最終質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 05%。 底物溶液磷酸鹽-檸檬酸緩沖液(ρΗ5·0 5·5) :0. IM檸檬酸Μ. 3mL加入25. 7ml 0. 2M Na2HPO4 · Iffl2O加入鄰苯二胺40. Omg,定容至50mL,臨用前加0. 15mL體積分?jǐn)?shù)為30%的 H202。終止劑22. 2mL硫酸加入蒸餾水177. 8mL。1.4、待測樣品5例RA滑膜組織由北京大學(xué)附屬人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科栗占國教授提供；534例RA (其中初診67例、復(fù)診467例)、65例0A、120例SLE、10例硬皮病 (scleroderma)、15例皮肌炎(dermatomyositis)及120例正常對照(NC)血液標(biāo)本源自西南醫(yī)院。將收集的促凝血液標(biāo)本4°C過夜后經(jīng)3，OOOrpm離心30分鐘，取上清，IOOul分裝，-70°C保存。2、過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒及其方法與運(yùn)用
2.1、最佳過氧化物還原酶IV包被濃度和檢測血清稀釋倍數(shù)的確定
采用方陣滴定法，具體步驟如下(1)將含10μ g/ul重組表達(dá)的人過氧化物還原酶IV 按照如下濃度稀釋(5μ g/ml、10y g/ml、20y g/ml、50y g/ml、100y g/ml)，100y L/ 孔加于酶標(biāo)板中，置4°C濕盒孵育12小時(shí)，洗板機(jī)洗滌3次，5min/次，拍干；(2)加入100 μ 1/孔封閉液，4°C濕盒封閉過夜，洗板機(jī)洗滌3次，5min/次，拍干；(3)待測血清按照1 :20、1 :50、
71 :100,1 :200倍稀釋，100 μ 1/孔，37°C濕盒作用lh，洗板機(jī)洗滌10次，3min/次，拍干；(4) 將HRP標(biāo)記的山羊抗人IgG按照1 :4000稀釋，100 μ 1/L，加入酶標(biāo)板中，37°C濕盒孵育30 分鐘，洗板機(jī)洗滌10次，3min/次，拍干；酶標(biāo)二抗按照已確定比例1 :4 000使用；(5)加入 TMB底物100μ 1/孔，37°C避光顯色5min后，加入100 μ 1/孔2mol/L硫酸終止反應(yīng)；(6)檢測用酶標(biāo)儀測OD45tlnm值。同時(shí)以1%的BSA/PBS溶液作空白對照，以P/N值最大的人過氧化物還原酶IV包被物濃度和待測血清稀釋度為最佳工作濃度。分別將人過氧化物還原酶IV包被物和待測血清作系列稀釋，進(jìn)行方陣試驗(yàn)，結(jié)果見表1。方陣滴定結(jié)果顯示，人過氧化物還原酶IV包被濃度為50μ g/ml，待測血清1 :200 倍稀釋時(shí)，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎血清OD45tlnm值大于1.0，陰陽性血清OD45tlnm比值(P / N)最大為 10. 45 ；人過氧化物還原酶IV包被濃度為20 μ g/ml，待測血清1 :200倍稀釋時(shí)，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎血清OD45tlnm值大于1.0，陰陽性血清OD45tlnm比值(P / N)為10. 08，僅比最大陰陽性血清 OD450nm比值小0. 37，考慮抗原包被成本，因此選擇人過氧化物還原酶IV包被濃度為20 μ g/ ml為最佳包被濃度；待測血清1 :200倍稀釋為最佳稀釋濃度。
權(quán)利要求
1.用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒，其特征在于所述 ELISA試劑盒包括抗體捕獲劑、酶標(biāo)二抗和底物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒，其特征在于所述抗體捕獲劑為過氧化物還原酶IV作終濃度不小于5 μ g/mL的稀釋液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒，其特征在于抗體捕獲劑附于固相支持物上。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒，其特征在于所述固相支持物為酶標(biāo)板或生物芯片。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒，其特征在于所述生物標(biāo)本為血清、尿液、細(xì)胞、組織物或血漿。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒，其特征在于所述生物標(biāo)本為血清，所述血清為不大于200倍體積稀釋的血清稀釋液。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒，其特征在于所述酶標(biāo)二抗為辣根酶標(biāo)記的山羊抗人IgM作不大于4000倍稀釋的稀釋液。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒，其特征在于所述抗體捕獲劑與酶標(biāo)二抗用量體積比為1:1。
9.權(quán)利要求1-8所述的用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶IV抗體的ELISA試劑盒在檢測過氧化物還原酶IV抗體含量的應(yīng)用。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的ELISA試劑盒的應(yīng)用，其特征在于所述ELISA試劑盒在制備檢測類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎試劑盒中的應(yīng)用。
11.根據(jù)權(quán)利要求9所述的ELISA試劑盒的應(yīng)用，其特征在于所述ELISA試劑盒檢測待測血清與正常人血清的過氧化物還原酶IV抗體的含量，當(dāng)待測血清的OD45tlnm值大于 0. 275為過氧化物還原酶IV抗體陽性，小于或等于0. 275為過氧化物還原酶IV抗體陰性。
12.運(yùn)用權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述ELISA試劑盒檢測過氧化物還原酶IV抗體含量的方法，a、將生物標(biāo)本與ELISA試劑盒中的抗體捕獲劑接觸并保溫；b、將未結(jié)合的生物標(biāo)本分離，得抗原-抗體復(fù)合物；C、在步驟b所得的抗原-抗體復(fù)合物加入ELISA試劑盒中的酶標(biāo)二抗，得雙抗復(fù)合物；d、檢測結(jié)合于抗體捕獲劑的過氧化物還原酶IV抗體的含量。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的運(yùn)用ELISA試劑盒檢測過氧化物還原酶IV抗體含量的方法，其特征在于所述方法還包括將步驟d所得的過氧化物還原酶IV抗體的含量與正常人過氧化物還原酶IV抗體的含量進(jìn)行比較判斷。
14.根據(jù)權(quán)利要求12所述的運(yùn)用ELISA試劑盒檢測過氧化物還原酶IV抗體含量的方法，其特征在于步驟a中，將抗體捕獲劑包被酶標(biāo)板，將待測生物標(biāo)本與抗體捕獲劑接觸， 保溫并用封閉液封閉；所述生物標(biāo)本為不大于200倍體積稀釋的血清稀釋液，所述抗體捕獲劑為過氧化物還原酶IV作不小于5 μ g/ml的稀釋液。
15.根據(jù)權(quán)利要求12所述的運(yùn)用ELISA試劑盒檢測過氧化物還原酶IV抗體含量的方法，其特征在于步驟b中，將步驟a中保溫并用封閉液封閉的酶標(biāo)板洗滌將未結(jié)合的生物標(biāo)本分離，得抗原-抗體復(fù)合物。
16.根據(jù)權(quán)利要求12所述的運(yùn)用ELISA試劑盒檢測過氧化物還原酶IV抗體含量的方法，其特征在于步驟c中，在步驟b所得的抗原-抗體復(fù)合物加入ELISA試劑盒中的酶標(biāo)二抗進(jìn)行保溫反應(yīng)，得雙抗夾心復(fù)合物；所述酶標(biāo)二抗為辣根酶標(biāo)記山羊抗人IgM作不大于4000倍稀釋的稀釋液。
17.根據(jù)權(quán)利要求12所述的運(yùn)用ELISA試劑盒檢測過氧化物還原酶IV抗體含量的方法，其特征在于步驟d中，在步驟c所得的雙抗復(fù)合物中加入底物避光顯色后，加入終止液終止反應(yīng)得顯色樣品液，通過測顯色樣品液的OD45tlnm值檢測結(jié)合于抗體捕獲劑的過氧化物還原酶IV抗體的含量。
18.根據(jù)權(quán)利要求12所述的運(yùn)用ELISA試劑盒檢測過氧化物還原酶IV抗體含量的方法，其特征在于所述方法還包括陰性對照組和空白對照組，所述陰性對照組為源自于正常人的生物標(biāo)本。
19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的運(yùn)用ELISA試劑盒檢測過氧化物還原酶IV抗體含量的方法，其特征在于所述待測生物標(biāo)本的OD45tlnm值大于陰性對照組樣本的OD45tlnm值平均值與其 2倍標(biāo)準(zhǔn)方差之和時(shí)，判定為過氧化物還原酶IV抗體陽性，待測生物標(biāo)本的OD45tlnm值小于或等于陰性對照組樣本的OD45tlnm值平均值與其2倍標(biāo)準(zhǔn)方差之和時(shí)為陰性。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，特別涉及用于檢測生物標(biāo)本中的過氧化物還原酶Ⅳ抗體的ELISA試劑盒及其方法與運(yùn)用，所述ELISA試劑盒包括抗體捕獲劑、酶標(biāo)二抗、底物；本試劑盒能特異性的檢測過氧化物還原酶Ⅳ抗體的含量，其成本低，敏感性佳；運(yùn)用本試劑盒檢測過氧化物還原酶Ⅳ抗體的含量，并與正常人的過氧化物還原酶Ⅳ的抗體水平進(jìn)行比較，判斷過氧化物還原酶Ⅳ抗體是否為陽性。
文檔編號G01N33/543GK102346186SQ20111002563
公開日2012年2月8日 申請日期2011年1月24日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月24日
發(fā)明者吳喬, 吳玉章 申請人:中國人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)