專(zhuān)利名稱(chēng)：：用于免疫色譜的試驗(yàn)器具以及使用該器具的半定量方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及使用免疫學(xué)色譜(免疫色譜法)，對(duì)檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)進(jìn)行半定量的試驗(yàn)器具，以及使用該試驗(yàn)器具進(jìn)行的半定量方法。
背景技術(shù)：
：免疫色譜用試驗(yàn)器具是以含有血清或血漿的血液、尿等體液等作為檢樣，用于檢測(cè)血清檢樣中的抗HBs抗原、檢測(cè)血清或血漿檢樣中的抗梅毒密螺旋體抗體、判定血型、檢測(cè)尿檢樣中的人絨毛膜促性腺激素(hCG)等。圖5是以往的免疫色譜用試驗(yàn)器具的一個(gè)例子的示意圖，圖5(a)是免疫色譜用試驗(yàn)器具的平面圖，圖5(b)是其側(cè)面圖。圖5(c)是與圖5(a)同樣的圖，但表示使用后的免疫色譜用試驗(yàn)器具。圖5(a)和(b)所示的免疫色譜用試驗(yàn)器具11中，在片狀的基體12上設(shè)置樣品墊13。使用試驗(yàn)器具11時(shí)，將該樣品墊13浸漬在作為測(cè)定對(duì)象的檢樣中。被樣品墊13吸收的檢樣由于毛細(xì)管現(xiàn)象而向與該樣品墊13相鄰接設(shè)置的試劑墊14移動(dòng)。試劑墊14中擔(dān)栽有標(biāo)記抗體或抗原。被樣品墊13吸收的檢樣到達(dá)試劑墊14，則擔(dān)載于試劑墊14的標(biāo)記抗體或抗原溶出。檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)與標(biāo)記抗體或抗原形成復(fù)合物。含有這些物質(zhì)的檢樣通過(guò)毛細(xì)管現(xiàn)象向與試劑墊14相鄰接設(shè)置的多孔體15移動(dòng)。到達(dá)多孔體15的復(fù)合物通過(guò)毛細(xì)管現(xiàn)象向下游方向移動(dòng)(圖中，以樣品墊13—側(cè)為上游一側(cè))。多孔體15上設(shè)置有固定了抗體或抗原的反應(yīng)區(qū)域16。通過(guò)毛細(xì)管現(xiàn)象而移動(dòng)至多孔體l5中的抗原、抗體或上述復(fù)合物被反應(yīng)區(qū)域16捕獲。如圖5(c)所示，該捕獲可通過(guò)在該區(qū)域16的顯色16，確認(rèn)。這樣，通過(guò)目視即可確認(rèn)檢樣中是否有測(cè)定對(duì)象物質(zhì)。在試驗(yàn)器具ll的更下游一側(cè)，設(shè)置有吸收檢樣中其它成分和未被捕獲的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)等的吸收墊17。使用圖示的免疫色鐠用試驗(yàn)器具，還可以對(duì)檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)進(jìn)行半定量。例如，設(shè)置多個(gè)對(duì)各種測(cè)定對(duì)象物質(zhì)的檢測(cè)靈敏度不同的反應(yīng)區(qū)域16，根據(jù)產(chǎn)生顯色16，的區(qū)域16的數(shù)目，可以對(duì)檢樣中測(cè)定對(duì)象物質(zhì)進(jìn)行半定量。上述免疫色譜用試驗(yàn)器具、以及使用該試驗(yàn)器具檢測(cè)檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)的方法、或?qū)υ摐y(cè)定對(duì)象物質(zhì)進(jìn)行半定量的方法記載于專(zhuān)利文獻(xiàn)l-6中。專(zhuān)利文獻(xiàn)1中，記載的是使用以免疫色譜法為原理的片狀試驗(yàn)器具，對(duì)液體中的抗原或抗體進(jìn)行測(cè)定的方法。但是，該文獻(xiàn)中并沒(méi)有公開(kāi)、暗示對(duì)抗原或抗體進(jìn)行半定量，也未公開(kāi)、暗示在多孔體上具有顯示標(biāo)準(zhǔn)顯色的區(qū)域的試驗(yàn)器具。專(zhuān)利文獻(xiàn)2中記載的是使用色素標(biāo)記的抗原或抗體測(cè)定液體中是否存在抗原或抗體的試驗(yàn)器具。但是，該文獻(xiàn)中并未公開(kāi)、暗示對(duì)抗原或抗體進(jìn)行半定量，也未公開(kāi)、暗示在多孔體上具有顯示標(biāo)準(zhǔn)顯色區(qū)域的試驗(yàn)器具。專(zhuān)利文獻(xiàn)3記載的是用于對(duì)檢樣溶液中的抗原或抗體進(jìn)行定量的試驗(yàn)器具。該試驗(yàn)器具的特征在于由上游至下游具有多個(gè)固定有逐漸增加的量的捕獲試劑的反應(yīng)區(qū)域，根據(jù)顯色的反應(yīng)區(qū)域數(shù)目對(duì)分析對(duì)象進(jìn)行定量。其必須要件是反應(yīng)區(qū)域?yàn)槎鄠€(gè)，但設(shè)置多個(gè)反應(yīng)區(qū)域使得制備步驟繁雜，不優(yōu)選。另外，對(duì)于該試驗(yàn)器具，并未公開(kāi)、暗示在多孔體上具有顯示標(biāo)準(zhǔn)顯色的區(qū)域。專(zhuān)利文獻(xiàn)4記載的是用于對(duì)檢樣溶液中的抗原或抗體進(jìn)行半定量的試驗(yàn)器具。該試驗(yàn)器具沿顆粒標(biāo)記的抗原或抗體、檢樣溶液的展開(kāi)方向具有排成一列的多個(gè)反應(yīng)區(qū)域，通過(guò)夾層法的原理，半定量地推測(cè)抗原或抗體的量。其必須要件是反應(yīng)區(qū)域?yàn)槎鄠€(gè)，但設(shè)置多個(gè)反應(yīng)區(qū)域使得制備步驟繁雜，不優(yōu)選。另外，對(duì)于該試驗(yàn)器具，并未公開(kāi)、暗示在多孔體上具有顯示標(biāo)準(zhǔn)顯色的區(qū)域。專(zhuān)利文獻(xiàn)5記載的是使用在同一個(gè)膜上具備呈現(xiàn)一定色調(diào)的部分和呈現(xiàn)檢樣濃度依存性的色調(diào)的部分的免疫學(xué)色譜分析片，向該免疫學(xué)色譜分析片上注入未知濃度的檢樣，進(jìn)行色譜展開(kāi)，然后對(duì)呈現(xiàn)一定色調(diào)的部分的色調(diào)和呈現(xiàn)檢樣濃度依存性色調(diào)的部分的色調(diào)進(jìn)行光學(xué)濃度測(cè)定或者目視讀取，以測(cè)定未知檢樣的濃度的方法。該方法的特征在于在同一個(gè)膜上具有對(duì)照顯色區(qū)域和檢樣濃度依存性顯色區(qū)域，但該對(duì)照顯色區(qū)域是使用與檢樣不同的固定化抗體和標(biāo)記抗體進(jìn)行顯色，步驟繁雜，同時(shí)調(diào)節(jié)成相當(dāng)于特定檢樣濃度的顯色并不容易。專(zhuān)利文獻(xiàn)6記栽的是在檢樣通過(guò)毛細(xì)管現(xiàn)象在其上移動(dòng)的多孔體上直接印刷判定線(xiàn)的種類(lèi)標(biāo)識(shí)的免疫色譜用試驗(yàn)器具。如專(zhuān)利文獻(xiàn)6所述，在檢樣通過(guò)毛細(xì)管現(xiàn)象在其上移動(dòng)的多孔體上進(jìn)行印刷的想法是專(zhuān)利文獻(xiàn)6以前所沒(méi)有的，在該多孔體上設(shè)置對(duì)測(cè)定對(duì)象物質(zhì)濃度的測(cè)定有用的標(biāo)識(shí)，該想法是以前完全沒(méi)有的。專(zhuān)利文獻(xiàn)l:日本特開(kāi)平7-55808號(hào)公報(bào)專(zhuān)利文獻(xiàn)2:日本特開(kāi)平10-73592號(hào)公報(bào)專(zhuān)利文獻(xiàn)3:日本特開(kāi)平5-5743號(hào)公報(bào)專(zhuān)利文獻(xiàn)4:日本特開(kāi)平8-278305號(hào)公報(bào)專(zhuān)利文獻(xiàn)5:日本特開(kāi)2001-83153號(hào)公報(bào)專(zhuān)利文獻(xiàn)6:日本特開(kāi)2001-13143號(hào)公報(bào)
發(fā)明內(nèi)容因此，本發(fā)明的目的在于提供使用免疫色譜法、制備容易、且容易對(duì)檢樣中所含的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)濃度進(jìn)行半定量的新型試驗(yàn)器具，以及使用該試驗(yàn)器具的半定量方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供具有檢樣通過(guò)毛細(xì)管現(xiàn)象可移動(dòng)的多孔體的免疫色鐠用試驗(yàn)器具(以下稱(chēng)為"本發(fā)明的試驗(yàn)器具")，上述免疫色譜用試驗(yàn)器具具有(1)以可移動(dòng)的狀態(tài)配置可與上述檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的被標(biāo)記的抗體或抗原的區(qū)域；(2)以固定在上述多孔體上的狀態(tài)配置可與上述測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的抗體或抗原的區(qū)域；以及(3)以固定在上述多孔體上的狀態(tài)配置與上述測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特定濃度下的顯色相對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)顯色的區(qū)域；通過(guò)將上述區(qū)域(2)中產(chǎn)生的顯色與上述標(biāo)準(zhǔn)顯色進(jìn)行比較，對(duì)上述檢樣中的上述測(cè)定對(duì)象物質(zhì)進(jìn)行半定量。作為本發(fā)明的試驗(yàn)器具的優(yōu)選方案，可列舉上述(2)的以固定在上述多孔體上的狀態(tài)配置可與上述測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的抗體或抗原的區(qū)域、和上述(3)的以固定在上述多孔體上的狀態(tài)配置與上述測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特定濃度下的顯色相對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)顯色的區(qū)域，相對(duì)于展開(kāi)溶劑的展開(kāi)方向橫排(直列)或豎排(並列)配置。作為本發(fā)明的試驗(yàn)器具的另一優(yōu)選方案，可列舉上述試驗(yàn)器具，其中，上述(l)的以可移動(dòng)的狀態(tài)配置可與上述檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的被標(biāo)記的抗體或抗原的區(qū)域中所使用的標(biāo)記用色素、和上述(3)的以固定在上述多孔體上的狀態(tài)配置與上述測(cè)定對(duì)象物質(zhì)的特定濃度下的顯色相對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)顯色的區(qū)域中所使用的標(biāo)準(zhǔn)顯色用色素為同一色素。本發(fā)明還提供使用本發(fā)明的試驗(yàn)器具對(duì)檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)進(jìn)行半定量的方法。本發(fā)明的試驗(yàn)器具通過(guò)對(duì)固定在免疫色譜用試驗(yàn)器具多孔體上的產(chǎn)生的顯色進(jìn)行比較，可容易地對(duì)檢樣中所含的測(cè)定對(duì)^物;進(jìn)行半定量。本發(fā)明的試驗(yàn)器具中，由于具有以固定在多孔體上的狀態(tài)配置可與測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的抗體或抗原的區(qū)域(反應(yīng)區(qū)域)、以及以固定在上述多孔體上的狀態(tài)配置與測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特定濃度下的顯色相對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)顯色的區(qū)域，因此，可以在相同條件下對(duì)反應(yīng)區(qū)域的顯色和標(biāo)準(zhǔn)顯色進(jìn)行比較，可得到高的精度。本發(fā)明的試驗(yàn)器具只要具有至少一個(gè)反應(yīng)區(qū)域和顯示標(biāo)準(zhǔn)顯色的區(qū)域即可進(jìn)行半定量，因此，與為了進(jìn)行半定量而必須有多個(gè)反應(yīng)區(qū)域的試驗(yàn)器具相比，可以簡(jiǎn)便地制造。另外，對(duì)于顯示標(biāo)準(zhǔn)顯色的區(qū)域，無(wú)需經(jīng)過(guò)抗體、抗原等即可將色素等直接固定在多孔體上，因此與必須經(jīng)過(guò)抗體、抗原等進(jìn)行固定的試驗(yàn)器具相比，可簡(jiǎn)便地制造。另外，并不間接地經(jīng)過(guò)抗原抗體反應(yīng)等反應(yīng)，因此在使用本試驗(yàn)器具時(shí)，上述標(biāo)準(zhǔn)顯色的色調(diào)完全不受各種使用條件不同的影響。圖l是本發(fā)明試驗(yàn)器具的一個(gè)實(shí)施方案的示意圖。圖2是圖1的試驗(yàn)器具的側(cè)面圖。圖3是將本發(fā)明的試驗(yàn)器具浸漬在調(diào)節(jié)成各種濃度的hCG中后，觀察標(biāo)準(zhǔn)顯色8和顯色6'的顯色度程度隨時(shí)間變化的圖。圖4中，圖4(a)-(e)是實(shí)施例中使用的試驗(yàn)器具的平面圖，圖4(a)是浸漬到尿檢樣中之前的未使用的試驗(yàn)器具，圖4(b)是使用hCG濃度為25IU/L的檢樣實(shí)施半定量后的試驗(yàn)器具，圖4(c)是使用hCG濃度為1000IU/L的檢樣實(shí)施半定量后的試驗(yàn)器具，圖4(d)是使用hCG濃度為10000IU/L的檢樣實(shí)施半定量后的試驗(yàn)器具，圖4(e)是使用hCG濃度為01U/L(陰性)的檢樣實(shí)施半定量后的試驗(yàn)器具。圖5中，圖5(a)是以往的免疫色譜用試驗(yàn)器具的示意圖，通過(guò)平面圖表示試驗(yàn)器具。圖5(b)是圖5(a)所示試驗(yàn)器具的側(cè)面圖。圖5(c)是與圖5(a)同樣的圖，但表示使用后的試驗(yàn)器具。符號(hào)說(shuō)明1:試驗(yàn)器具2:基體3:樣品墊4:試劑墊5:多孔體6:反應(yīng)區(qū)域6，顯色7:吸收墊8:標(biāo)準(zhǔn)顯色9:區(qū)域9，顯色11:試驗(yàn)器具12:基體13:樣品墊14:試劑墊15:多孔體16:反應(yīng)區(qū)域16，:顯色17:吸收墊20:保護(hù)膜21:透明部分22:窗口23、23，、23":不透明部分具體實(shí)施方式以下參照附圖，對(duì)本發(fā)明的試驗(yàn)器具進(jìn)行說(shuō)明。圖1是本發(fā)明試驗(yàn)器具的一個(gè)實(shí)施方案的示意圖，圖2是圖1所示試驗(yàn)器具的側(cè)面圖。圖l和圖2所示的試驗(yàn)器具1在片狀的基體2上形成樣品墊3、試劑墊4、多孔體5和吸收墊7。試驗(yàn)器具1中，試劑墊4、多孔體5和吸收墊7被保護(hù)膜20覆蓋。以下，對(duì)本發(fā)明的試驗(yàn)器具l的各構(gòu)成要素進(jìn)行說(shuō)明。圖1所示的試驗(yàn)器具1中，各構(gòu)成要素在片狀的基體2上形成。基體2采用在免疫色譜法中不會(huì)吸收或透過(guò)通過(guò)各構(gòu)成要素中的檢樣、并且檢樣接觸時(shí)不會(huì)使檢樣改性的材料制作。所述材料有醫(yī)療用具中使用的塑料材料，具體來(lái)說(shuō)例如有氯乙烯、聚乙烯、乙烯乙酸乙烯酯樹(shù)脂、聚丙烯、聚碳酸酯、聚氨酯、聚苯乙烯、有機(jī)硅樹(shù)脂、氟樹(shù)脂、聚對(duì)苯二曱酸乙二醇酯、聚酰胺、ABS樹(shù)脂等?；w2可以是由表面實(shí)施了疏水疏油加工的紙制的。樣品墊3是滴加檢樣或浸漬到檢樣中的部位，檢樣中存在不溶性物質(zhì)時(shí)，也用作除去該不溶性物質(zhì)的濾器。從該角度考慮，樣品墊3可侈'J舉孑14至為20jim—100nm、優(yōu)選30fim—40pm的3一纟只造布或多孑L質(zhì)膜，但并不限于此。作為樣品墊3可使用的材料只要是可以采集一定量的檢樣、為親水性的、具有濾器功能即可，沒(méi)有特別限定，例如有再生纖維素、乙酸纖維素、硝酸纖維素、聚丙烯腈、乙烯乙酸乙烯酯、聚氨酯、聚甲基丙烯酸曱酯、尼龍樹(shù)脂、玻璃纖維、紙漿(pulp)、棉、人造絲、丙烯酸類(lèi)(r夕y少)、聚酯等，但并不限于此。滴加到樣品墊3中的檢樣由于毛細(xì)管現(xiàn)象而向下游方向、即試劑墊4方向移動(dòng)。以下，在本說(shuō)明書(shū)中，將試驗(yàn)器具1的樣品墊3—側(cè)稱(chēng)為上游一側(cè)，將其相對(duì)的一側(cè)稱(chēng)為下游一側(cè)。另外，滴加到樣品墊3中的檢樣也指將樣品墊3浸漬在檢樣中，從而樣品墊3中含有的檢樣。試劑墊4的材質(zhì)與樣品墊3同樣，可以列舉非織造布或多孔質(zhì)膜，但沒(méi)有特別限定。可與檢樣中測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的抗體或抗原以用色素等標(biāo)記物質(zhì)標(biāo)記的狀態(tài)擔(dān)載于試劑墊4?？膳c測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的抗體或抗原可根據(jù)測(cè)定對(duì)象物質(zhì)適當(dāng)選擇。測(cè)定對(duì)象物質(zhì)為尿檢樣中的人絨毛膜促性腺激素(hCG)時(shí)，可以使用抗hCG抗體，更具體地說(shuō)，可以使用抗hCG小鼠多克隆抗體、抗hCG小鼠單克隆抗體等。測(cè)定對(duì)象物質(zhì)為甲胎蛋白(AFP)時(shí)，可以使用抗AFP抗體，測(cè)定對(duì)象物質(zhì)為抗HIV抗體時(shí)，可以^吏用HIV抗原肽等。測(cè)定對(duì)象物質(zhì)為半定量所必需的癌癥標(biāo)志(癌v—力一)一前列腺特異性抗原(PSA)時(shí)，例如可以使用抗人PSA兔抗體等。標(biāo)記物質(zhì)只要是可視性地發(fā)色的物質(zhì)即可，沒(méi)有特別限定，例如可以是以膠體金為代表的膠體金屬(金屬3口—K)、膠體非金屬(非金屬3口^0、染料溶膠或分散染料等染料顆粒、膠乳顆粒或著色微粒等。其中，從發(fā)色性?xún)?yōu)異、色調(diào)和粒徑豐富、對(duì)抗體或抗原的標(biāo)記方法有多種等角度考慮，優(yōu)選用染料或顏料著色的膠乳微粒或聚苯乙烯微粒。另外，該標(biāo)記方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員所周知的，有吸附的方法或化學(xué)鍵合的方法等。特別優(yōu)選用染料或顏料著色的粒徑為0.5nm以下、優(yōu)選粒徑為0.05-0.5jim的球狀或大致呈球狀的膠乳微粒或聚苯乙烯微粒。最優(yōu)選藍(lán)色膠乳(力卜？亍;y夕7)。被標(biāo)記的抗體或抗原以可移動(dòng)的狀態(tài)擔(dān)載于試劑墊4。這里，以可移動(dòng)的狀態(tài)擔(dān)載是指在未使用時(shí)、即試劑墊4為干燥的狀態(tài)下，被標(biāo)記的抗體或抗原保持在試劑墊4中，使用時(shí)，即由于檢樣的到達(dá)使試劑墊4濕潤(rùn)時(shí)，被標(biāo)記的抗體或抗原變得可移動(dòng)。為此，試劑墊4必須是不吸附被標(biāo)記的抗體或抗原的材料，如果是吸附材料，則可以預(yù)先用另外的BSA等惰性蛋白質(zhì)進(jìn)行封閉處理而使用。這樣，被標(biāo)記的抗體或抗原例如在含浸在試劑墊4中后，通過(guò)冷凍干燥，可保持在試劑墊4中。因此，試驗(yàn)器具1中，試劑墊4形成了以可移動(dòng)的狀態(tài)配置可與檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的被標(biāo)記的抗體或抗原的區(qū)域。滴加到樣品墊3中的檢樣由于毛細(xì)管現(xiàn)象向試劑墊4移動(dòng)。因此，優(yōu)選試劑墊4的孔徑與樣品墊3的孔徑相同或比樣品墊3的孔徑小。試齊,J塾4的孑14圣可以是1nm-50|un，優(yōu)選5jim—30nm。圖1和圖2所示的試驗(yàn)器具1中，為了使檢樣利用毛細(xì)管現(xiàn)象的移動(dòng)容易，形成樣品墊3和試劑墊4部分層疊的狀態(tài)。不過(guò)，只要是檢樣可通過(guò)毛細(xì)管現(xiàn)象適當(dāng)?shù)匾苿?dòng)，樣品墊3與試劑墊4可以只是相鄰接地配置，也可以制成同一個(gè)墊。檢樣到達(dá)試劑墊4，則檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)與墊4中的被標(biāo)記的抗體或抗原通過(guò)毛細(xì)管現(xiàn)象而向下游方向、即向多孔體5移動(dòng)。測(cè)定對(duì)象物質(zhì)與被標(biāo)記的抗原或抗體存在抗原和抗體關(guān)系時(shí)，兩者的一部分或全部形成抗原-抗體復(fù)合物，它們也向下游方向、即多孔體5移動(dòng)。圖1和圖2所示的試驗(yàn)器具1中，為了使該移動(dòng)容易進(jìn)行，試劑墊4與多孔體5形成部分層疊的狀態(tài)。不過(guò)，只要檢樣可通過(guò)毛細(xì)管現(xiàn)象適當(dāng)移動(dòng)，試劑墊4和多孔體5可以只是相鄰接配置，也可以是試劑墊4兼作多孔體5使用，也可以相反兼用。多孔體5是結(jié)構(gòu)具有海綿狀的微孔、或者具有網(wǎng)眼狀，檢樣可通過(guò)毛細(xì)管現(xiàn)象移動(dòng)的介質(zhì)。圖1和圖2所示的試驗(yàn)器具1中，是以片狀的多孔質(zhì)膜表示。多孔體5的材料只要是可實(shí)施免疫色譜法即可，沒(méi)有特別限定，具體來(lái)說(shuō)，例如可以列舉以纖維素、纖維素衍生物、硝酸纖維素、乙烯乙酸乙烯酯、聚氨酯、聚甲基丙烯酸曱酯、尼龍樹(shù)脂、聚偏二氟乙烯(PVDF)等多孔性合成聚合物等作為原料的織造布、非織造布或膜、玻璃纖維濾器、各種濾紙等，優(yōu)選使用纖維素、纖維素衍生物、多孔性合成聚合物，特別優(yōu)選使用硝酸纖維素。多孔體5的孑145可以例舉1nm-30Jim,優(yōu)選1jim-20fim。多孔體5具有固定了可與測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的抗體或抗原的區(qū)域6(反應(yīng)區(qū)域)。固定于區(qū)域6的抗體或抗原可根據(jù)測(cè)定對(duì)象物質(zhì)適當(dāng)選擇。具體來(lái)說(shuō)，當(dāng)測(cè)定對(duì)象物質(zhì)為hCG時(shí)，可以使用抗hCG抗體，更具體地說(shuō)，可以使用抗hCG小鼠多克隆抗體、抗hCG小鼠單克隆抗體等。測(cè)定對(duì)象物質(zhì)為AFP時(shí)，可以使用抗AFP抗體。測(cè)定對(duì)象物質(zhì)為抗HIV抗體時(shí)，可以使用HIV抗原肽等。測(cè)定對(duì)象物質(zhì)為PSA時(shí)，可以使用抗PSA小鼠單克隆抗體、抗PSA兔抗體等。另夕卜，對(duì)于這些的固定方法，例如多孔體5為硝酸纖維素或尼龍等時(shí)，可以直接涂布上述抗體或抗原的溶液，干燥，即可容易地固定。如果是通過(guò)直接涂布、干燥無(wú)法固定的玻璃纖維濾器或?yàn)V紙等多孔體，則通過(guò)實(shí)施多孔體的活化、或固定的抗體或抗原的活化等前處理可容易地進(jìn)行固定，這些固定方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的技術(shù)。由于毛細(xì)管現(xiàn)象而移動(dòng)至多孔體5中的抗原、抗體和/或復(fù)合物被固定在區(qū)域6中的抗體或抗原捕獲。捕獲了含有標(biāo)記物質(zhì)的抗原、抗體和/或復(fù)合物，則能夠以在區(qū)域6產(chǎn)生的顯色進(jìn)行確認(rèn)。這里，在區(qū)域6產(chǎn)生的顯色的色調(diào)依存于所使用的免疫色譜法(試劑的組合)和檢樣中測(cè)定對(duì)象物質(zhì)的濃度。例如，由檢樣中的抗原與保持在試劑墊4中的標(biāo)記抗體形成的復(fù)合物被反應(yīng)區(qū)域中的固定化抗體捕獲時(shí)，檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)濃度高，則在區(qū)域6中捕獲的復(fù)合物增加，因此產(chǎn)生強(qiáng)色調(diào)的顯色，如果檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)的濃度低，則在區(qū)域6中被捕獲的復(fù)合物減少，呈現(xiàn)弱色調(diào)的顯色。另一方面，例如檢樣中的抗原與保持在試劑墊4中的標(biāo)記抗原形成竟?fàn)幏磻?yīng)，如果在反應(yīng)區(qū)域中，標(biāo)記抗原被固定化抗體捕獲，則如果檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)濃度高，區(qū)域6中捕獲的標(biāo)記抗原減少，因此呈現(xiàn)弱色調(diào)的顯色，檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)的濃度低，區(qū)域6中捕獲的標(biāo)記抗原增加，因此呈現(xiàn)強(qiáng)色調(diào)的顯色。多孔體5具有固定了與測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特定濃度下的顯色相對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)顯色8的區(qū)域。即，試驗(yàn)器具1中，使用含有特定濃度(以下稱(chēng)為"基準(zhǔn)濃度")的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)的檢樣時(shí)，具有與在區(qū)域6中發(fā)生的顯色相等色調(diào)的區(qū)域在多孔體5上形成。另外，標(biāo)準(zhǔn)顯色8的固定方法也可以利用與上述反應(yīng)區(qū)域同樣的固定化方法。本發(fā)明的試驗(yàn)器具中，通過(guò)對(duì)存在于各試驗(yàn)器具l多孔體5上的、在區(qū)域6中發(fā)生的顯色的色調(diào)和標(biāo)準(zhǔn)顯色8的色調(diào)進(jìn)行比較，可以容易地對(duì)檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)進(jìn)行半定量。即，由檢樣中的抗原與保持在試劑墊4中的標(biāo)記抗體形成的復(fù)合物被反應(yīng)區(qū)域的固定化抗體捕獲時(shí)，區(qū)域6發(fā)生的顯色的色調(diào)如果比標(biāo)準(zhǔn)顯色8的色調(diào)弱，則檢樣中測(cè)定對(duì)象物質(zhì)的濃度比基準(zhǔn)濃度低。如果在區(qū)域6中發(fā)生的顯色的色調(diào)比標(biāo)準(zhǔn)顯色8的色調(diào)強(qiáng)，則檢樣中測(cè)定對(duì)象物質(zhì)的濃度比基準(zhǔn)濃度高。在區(qū)域6中發(fā)生的顯色的色調(diào)與標(biāo)準(zhǔn)顯色8的色調(diào)相同程度時(shí)，則檢樣中測(cè)定對(duì)象物質(zhì)的濃度與基準(zhǔn)濃度程度相同。另外，如果在區(qū)域6中不發(fā)生顯色，則表示檢樣中不存在測(cè)定對(duì)象物質(zhì)，或者在檢出靈敏度以下。因此，本發(fā)明的試驗(yàn)器具1通過(guò)區(qū)域6中是否顯色，即可以對(duì)測(cè)定對(duì)象物質(zhì)進(jìn)行特定靈敏度下的定性評(píng)價(jià)。通過(guò)使用光學(xué)濃度計(jì)等對(duì)在區(qū)域6中發(fā)生的顯色的色調(diào)與標(biāo)準(zhǔn)顯色8的色調(diào)進(jìn)行比較，可以準(zhǔn)確地測(cè)定檢樣中測(cè)定對(duì)象物質(zhì)的濃度。在多孔體5中，檢樣通過(guò)毛細(xì)管現(xiàn)象在其內(nèi)部移動(dòng)，因此，優(yōu)選標(biāo)準(zhǔn)顯色8固定在多孔體5的表面。這里，標(biāo)準(zhǔn)顯色8優(yōu)選為標(biāo)記擔(dān)載于試劑墊4的抗體或抗原所使用的標(biāo)記物質(zhì)。因此，優(yōu)選例舉以膠體金為代表的膠體金屬、膠體非金屬、染料溶膠或分散染料等染料顆粒、膠乳顆?；蛑⒘５取Ｆ渲?，從發(fā)色性?xún)?yōu)異、色調(diào)和粒徑豐富、對(duì)抗體或抗原的標(biāo)記方法有多種等角度考慮，優(yōu)選用染料或顏料著色的膠乳微?；蚓郾揭蚁┪⒘?。另外，該標(biāo)記方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員所周知的，有吸附的方法或化學(xué)鍵合的方法等。特別優(yōu)選用染料或顏料著色的、粒徑為0.5|im以下、優(yōu)選粒徑為0.05-0.5jrni的球狀或大致呈球狀的膠乳微?；蚓郾揭蚁┪⒘！Ｗ顑?yōu)選藍(lán)色膠乳。標(biāo)準(zhǔn)顯色8只要是與測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特定濃度下的顯色為同一色調(diào)，可以使用色素、染料、顏料等，也可以用其它物質(zhì)形成。優(yōu)選以固定于上述多孔體上的狀態(tài)配置可以與測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的抗體或抗原的區(qū)域(反應(yīng)區(qū)域6)、和以固定在上述多孔體上的狀態(tài)配置與測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特定濃度下的顯色相對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)顯色的區(qū)域(標(biāo)準(zhǔn)顯色8)相對(duì)于展開(kāi)溶劑的展開(kāi)橫排或豎排配置，最優(yōu)選橫排。另外，優(yōu)選兩者位于相鄰近的位置。具體來(lái)說(shuō)，優(yōu)選兩者的距離在20mm以?xún)?nèi)，更優(yōu)選在10mm以?xún)?nèi)。展開(kāi)溶劑只要是通?？稍跈z樣中含有的溶劑即可，沒(méi)有特別限定。例如有水(包括檢樣中所含的水分)；生理食鹽水；丙酮等有機(jī)溶劑等。展開(kāi)溶劑的展開(kāi)方向在圖1中是由樣品墊3向吸收墊7的方向。另外，以可移動(dòng)的狀態(tài)配置可以與檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的被標(biāo)記的抗體或抗原的區(qū)域(試劑墊4)所使用的標(biāo)記用色素、和以固定在上述多孔體上的狀態(tài)配置與測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特定濃度下的顯色同一色素，進(jìn)一步優(yōu)選為膠乳顆粒。標(biāo)準(zhǔn)顯色8所顯示的基準(zhǔn)濃度或檢測(cè)靈敏度可根據(jù)測(cè)定對(duì)象物質(zhì)的種類(lèi)、試驗(yàn)器具的用途適當(dāng)選擇。例如，試驗(yàn)器具1用于測(cè)定尿檢樣中的hCG量時(shí)，優(yōu)選檢測(cè)靈敏度為25IU/L、基準(zhǔn)濃度為1000IU/L。hCG的檢測(cè)靈敏度為25IU/L時(shí)，可通過(guò)區(qū)域6有無(wú)顯色來(lái)進(jìn)行妊娠診斷?；鶞?zhǔn)濃度設(shè)定為1000IU/L時(shí)，可以進(jìn)行宮外孕、流產(chǎn)早產(chǎn)、絨毛膜瘤的預(yù)后判定等評(píng)價(jià)。結(jié)果，以hCG濃度25IU/L和1000IU/L為標(biāo)準(zhǔn)，通過(guò)一次測(cè)定，即可以對(duì)檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)進(jìn)行半定量。例如，測(cè)定血液中的PSA量時(shí)，優(yōu)選檢測(cè)靈敏度為lng/ml，基準(zhǔn)濃度為4ng/ml。PSA的檢測(cè)靈敏度為1ng/ml時(shí)，可通過(guò)區(qū)域6有無(wú)顯色來(lái)診斷前列腺肥大，基準(zhǔn)濃度設(shè)定為4ng/ml時(shí)，可以診斷前列腺癌。結(jié)果，通過(guò)一次操作，以PSA濃度lng/ml和4ng/ml作為基準(zhǔn)，即可以對(duì)檢樣中的PSA濃度進(jìn)行半定量。如上所述，在多孔體5中移動(dòng)的檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)的部分或全部被固定在區(qū)域6中的抗體或抗原捕獲。而檢樣中的其它成分和未被捕獲的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)等則由多孔體5中向下游方向移動(dòng)。圖1和圖2所示的試驗(yàn)器具中，設(shè)置了用于吸收這些物質(zhì)的吸收墊7。吸收墊7只要是可以吸收由多孔體5中移動(dòng)來(lái)的檢樣并保持，即沒(méi)有特別限定。因此，吸收墊7可廣泛使用濾紙、非織造布、多孔質(zhì)膜等以往以吸收液體并保持在其內(nèi)部為目的所使用的物質(zhì)。吸收墊7可以含有硅膠等具有吸水性、吸濕性的物質(zhì)。如上所述，檢樣中不含有測(cè)定對(duì)象物質(zhì)時(shí)、或者即使含有也在檢測(cè)靈敏度以下時(shí)，區(qū)域6不發(fā)生顯色，試驗(yàn)器具1在外觀上與未使用時(shí)相比沒(méi)有變化。因此，本發(fā)明的試驗(yàn)器具1優(yōu)選具有用于確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)束的結(jié)構(gòu)。圖1和圖2所示的試驗(yàn)器具1中，在多孔體5的固定標(biāo)準(zhǔn)顯色8的區(qū)域的更下游一側(cè)設(shè)置了在檢樣到達(dá)時(shí)發(fā)色的區(qū)域9。在覆蓋多孔體5的保護(hù)膜20中，覆蓋該區(qū)域9的部分設(shè)置成透明的窗口22。圖1中，保護(hù)膜20中，部分21和22為透明的，23、23，、23"為不透明的。圖l和圖2所示的試驗(yàn)器具1中，該區(qū)域9和窗口22形成確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)束的結(jié)構(gòu)。即，由多孔體5中移動(dòng)來(lái)的檢樣到達(dá)區(qū)域9，則發(fā)色，通過(guò)窗口22可確認(rèn)該發(fā)色。由此可以確i人試驗(yàn)結(jié)束。出于上述目的，區(qū)域9中含浸或固定有各種發(fā)色劑。區(qū)域9中含浸或固定的發(fā)色劑可以是通過(guò)與規(guī)定pH的液態(tài)試樣接觸而發(fā)色的發(fā)色劑，具體來(lái)說(shuō)，可列舉例如曙紅B、焰紅染料B、苯紅紫4B、剛果紅、溴酴藍(lán)、溴甲酚綠、2，5-二硝基苯酚或它們的相關(guān)物質(zhì)。另外，發(fā)色劑可以是在檢樣到達(dá)區(qū)域9時(shí)由于其水分而發(fā)色的物質(zhì)。還可以是在多孔體5的窗口22上游側(cè)的區(qū)域、例如被不透明部分23，覆蓋的區(qū)域含浸水溶性的色素，在檢樣到達(dá)時(shí)溶解，溶解在檢樣中并移動(dòng)的色素通過(guò)窗口22進(jìn)行確認(rèn)。與被標(biāo)記的抗原或抗體特異性反應(yīng)的成分，例如使用標(biāo)記抗hCG小鼠單克隆抗體時(shí)，將抗小鼠羊抗體等固定在區(qū)域9，也可以達(dá)到該目的。將與測(cè)定不相關(guān)的標(biāo)記抗體或標(biāo)記生物素或匙孔血藍(lán)蛋白等保持在試劑墊4中，將與上述標(biāo)記抗體特異性反應(yīng)的抗體或抗原或者抗生物素蛋白或者抗匙孔血藍(lán)蛋白抗體固定在區(qū)域9中，也可以達(dá)到上述目的。以上，利用附圖對(duì)本發(fā)明的試驗(yàn)器具進(jìn)行了詳細(xì)說(shuō)明，但本發(fā)明的試驗(yàn)器具并不限于圖示的方案。本發(fā)明的試驗(yàn)器具是具有檢樣通過(guò)毛細(xì)管現(xiàn)象可移動(dòng)的多孔體的免疫色譜用試驗(yàn)器具，可廣泛使用具有下述(l)-(3)的區(qū)域的(1)以可移動(dòng)的狀態(tài)配置可與上述檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的被標(biāo)記的抗體或抗原的區(qū)域；(2)以固定在上述多孔體上的狀態(tài)配置可與上述測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的抗體或抗原的區(qū)域；以及(3)以固定在上述多孔體上的狀態(tài)配置與上述測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特定濃度下的顯色相對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)顯色的區(qū)域。因此，本發(fā)明的試驗(yàn)器具可以象日本特表平1-503174號(hào)公報(bào)、日本特開(kāi)平6-180320號(hào)公報(bào)、日本特開(kāi)平6-160388號(hào)公報(bào)所述的免疫色譜用試驗(yàn)裝置那樣，具有收容多孔體等構(gòu)成要素的外殼。本發(fā)明的圖中所例舉的保護(hù)膜20在本發(fā)明的試驗(yàn)器具中并不是必須的。固定在多孔體上的反應(yīng)區(qū)域和/或標(biāo)準(zhǔn)顯色的形狀并不限于圖示的線(xiàn)狀，可以是其它形狀。另外，多孔體上也可以固定與各測(cè)定對(duì)象物質(zhì)的不同濃度下的顯色相對(duì)應(yīng)的多個(gè)反應(yīng)區(qū)域和/或標(biāo)準(zhǔn)顯色。本發(fā)明的試驗(yàn)器具可適用于來(lái)自生物的各種液體試樣。所述液體試樣具體可列舉血液、血漿、血清、唾液、尿、糞便提取液、組織提取液等。這些液體試樣中所含有的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)可以是發(fā)揮抗原或抗體功能的各種蛋白質(zhì)或肽、復(fù)合蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、復(fù)合脂質(zhì)、核酸、凝集素、糖鏈或具有這些的化合物、生物素、抗生物素蛋白、激素、酶、酶底物、酶抑制劑、受體、配體、藥物、藥物代謝產(chǎn)物、分析對(duì)象物質(zhì)的衍生物等，更具體地說(shuō)，可以例舉人絨毛膜促性腺激素(hCG)、促黃體生成素(LH)、曱胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、人胎盤(pán)催乳素(hPL)、P2微球蛋白((32m)、鐵蛋白、HBs抗原、雌激素、PSA等以及它們的抗體。本發(fā)明中，優(yōu)選利用抗體、抗原、核酸、抗生物素蛋白、生物素，特別優(yōu)選抗體或抗原。本發(fā)明的試驗(yàn)器具也適用于將上述列舉的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)品溶解于生理食鹽水等中制備的溶液。實(shí)施例以下，通過(guò)實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的試驗(yàn)器具。本實(shí)施例中，使用圖l和圖2所示的試驗(yàn)器具1。試驗(yàn)器具1的各構(gòu)成如下所示?；w2:聚酯制，長(zhǎng)125mmx寬8mmx厚0.25mm樣品墊3:粘接長(zhǎng)30mmx寬8mmx厚0.3mm的非織造布(^yy—if，旭化成社制)。試劑墊4:在長(zhǎng)15mmx寬8mmx厚0.3mm的非織造布(玻璃纖維，^求7社制)上填充被標(biāo)記的抗體(結(jié)合有用藍(lán)色染料著色的膠乳顆粒(粒徑0.3jim的球狀顆粒)作為標(biāo)記物質(zhì)的抗hCG小鼠單克隆抗體)并冷凍干燥所得。將其粘接在基體2上。樣品墊3和試劑墊4的端部層疊(層疊長(zhǎng)約4mm)。多孔體5:將硝酸纖維素膜(長(zhǎng)25mmx寬8mmx厚235fim，孔徑約8jim)粘接在基體2上。多孔體5和試劑墊4的端部層疊(層疊長(zhǎng)2mm)。在多孔體5上涂布1.5mg/ml的抗hCG小鼠單克隆抗體，干燥，從而使該單克隆抗體固定在區(qū)域6中。標(biāo)準(zhǔn)顯色8:將與作為標(biāo)記物使用的物質(zhì)相同的膠乳顆粒(用藍(lán)色染料著色)固定在多孔體5的表面，以此作為標(biāo)準(zhǔn)顯色8，使其與濃度為1000IU/L(基準(zhǔn)濃度)的hCG在區(qū)域6被抗體捕獲時(shí)的顯色為同一色調(diào)。作為表示試驗(yàn)結(jié)束的指標(biāo)，在比多孔體5的標(biāo)準(zhǔn)顯色8下游側(cè)的區(qū)域9含浸曙紅B作為發(fā)色劑，并干燥。吸收墊7:將長(zhǎng)20mmx寬8mmx厚0.4mm的非織造布(玻璃纖維，r7外7y社制)粘接在基體2上。保護(hù)膜除了樣品墊3，將試驗(yàn)器具1的上部用具有透明部分21、22和不透明部分23、23，、23"的保護(hù)膜(聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯制)覆蓋。使用該試驗(yàn)器具1，以人絨毛膜促性腺激素(hCG)作為測(cè)定對(duì)象物質(zhì)，實(shí)施半定量。將hCG(國(guó)立醫(yī)藥品食品衛(wèi)生研究所制)用含有0.1%BSA的生理食鹽水稀釋?zhuān)筯CG濃度為以下各種濃度，將試驗(yàn)器具1的樣品墊3部分在該溶液中浸漬約3秒鐘。接著，將試驗(yàn)器具1在水平方向靜置約3分鐘，保護(hù)膜20位于上面。在窗口22明確地產(chǎn)生表示反應(yīng)結(jié)束的顯色9，時(shí)，用光密度計(jì)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)顯色8與區(qū)域6的顯色6，。這里，使用hCG濃度為0IU/L(陰性)、25IU/L、100IU/L、250IU/L、500IU/L、1000IU/L和10000IU/L的檢樣。以下，以由光密度計(jì)得到的數(shù)值表示各濃度的檢樣在區(qū)域6的顯色6，的顯色度程度。[表l<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>通過(guò)光密度計(jì)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)顯色8的顯色度程度值為9800。陰性檢樣幾乎不發(fā)色，在25IU/L時(shí)發(fā)色，隨著濃度的升高，發(fā)色也增強(qiáng)，在1000IU/L下顯示與標(biāo)準(zhǔn)顯色同等的發(fā)色，在更高濃度下顯示比標(biāo)準(zhǔn)顯色更強(qiáng)的發(fā)色，可用作半定量的試驗(yàn)器具。再使用該試驗(yàn)器具l，確認(rèn)顯色度是否隨時(shí)間變化。即，將試驗(yàn)器具1以樣品墊3浸沒(méi)的方式在經(jīng)濃度調(diào)節(jié)的檢樣中浸漬約3秒鐘。接著，將試驗(yàn)器具1水平靜置約3-30分鐘，使保護(hù)膜位于上面，用光密度計(jì)測(cè)定各時(shí)間下的標(biāo)準(zhǔn)顯色8和區(qū)域6的顯色6，。這里，使用hCG濃度為0IU/L(陰性)、25IU/L、500IU/L、1000IU/L和106IU/L的檢樣。圖3和下表中表示了由光密度計(jì)得到的顯色度程度的數(shù)值隨時(shí)間變化的情況。[表2<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>顯色度是將各濃度測(cè)定三次所得的平均值。標(biāo)準(zhǔn)顯色的數(shù)值是各濃度測(cè)定三次(共15次)的平均值。觀察30分鐘之內(nèi)隨時(shí)間的變化，標(biāo)準(zhǔn)顯色8或各濃度下的區(qū)域6的顯色6'中的發(fā)色是在試驗(yàn)開(kāi)始后5-10分鐘后顯示峰，然后伴隨著對(duì)多孔體5的檢樣供應(yīng)量減少，多孔體5干燥，從而顯色度降低。由測(cè)定開(kāi)始，隨著時(shí)間的推移，陰性檢樣幾乎不發(fā)色，在25IU/L下開(kāi)始發(fā)色，在1000IU/L下呈現(xiàn)幾乎與標(biāo)準(zhǔn)顯色同等的發(fā)色，在更高濃度下顯示比標(biāo)準(zhǔn)顯色更強(qiáng)的發(fā)色，這種傾向沒(méi)有變化，可用作半定量的試驗(yàn)器具。表1、表2和圖3所示的本試驗(yàn)結(jié)果是以光密度計(jì)測(cè)定的結(jié)果的數(shù)值表示，在目視判定中，通過(guò)有無(wú)顯色以及與標(biāo)準(zhǔn)顯色的強(qiáng)弱，也得到了同樣的結(jié)果。圖4是表示實(shí)施半定量前后試驗(yàn)器具1的平面圖。圖4(a)是浸漬到檢樣中之前的未使用的試驗(yàn)器具，(b)是使用hCG濃度為25IU/L的尿檢樣實(shí)施半定量后的試驗(yàn)器具，(c)是使用hCG濃度為1000IU/L的檢樣實(shí)施半定量后的試驗(yàn)器具，(d)是使用hCG濃度為10000IU/L的檢樣實(shí)施半定量后的試驗(yàn)器具，(d)是使用hCG濃度為OHJ/L(陰性)的檢樣實(shí)施半定量后的試驗(yàn)器具。由圖4可知，實(shí)施了半定量之后的試驗(yàn)器具1可通過(guò)在窗口22發(fā)生的顯色9，確認(rèn)(圖4(b)-(e))。使用陰性檢樣的例子中，在區(qū)域6未發(fā)生顯色，由透明部分21只確認(rèn)了標(biāo)準(zhǔn)顯色8。而含有hCG的檢樣中，可以觀察到表示hCG與被標(biāo)記的抗體的復(fù)合物在區(qū)域6被抗體捕獲的顯色6，。該顯色6，因檢樣中hCG濃度不同而出現(xiàn)色調(diào)差異。具體來(lái)說(shuō)，在使用hCG濃度比基準(zhǔn)濃度低的25IU/L的檢樣的例子中，顯色6，比標(biāo)準(zhǔn)顯色8的色調(diào)弱很多(圖4(b))。在使用hCG濃度與基準(zhǔn)濃度相等的1000IU/L的檢樣的例子中，顯色6，的色調(diào)與標(biāo)準(zhǔn)顯色8大至相同(圖4(c))。使用hCG濃度比基準(zhǔn)濃度高的10000IU/L的檢樣的例子中，顯色6，的色調(diào)比標(biāo)準(zhǔn)顯色8強(qiáng)(圖4(d))。產(chǎn)業(yè)實(shí)用性本發(fā)明涉及使用免疫學(xué)色譜(免疫色譜法)對(duì)檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)進(jìn)行半定量的試驗(yàn)器具；以及使用該試驗(yàn)器具的半定量方法。權(quán)利要求1.試驗(yàn)器具，該試驗(yàn)器具是具有檢樣通過(guò)毛細(xì)管現(xiàn)象可移動(dòng)的多孔體的免疫色譜用試驗(yàn)器具，上述用于免疫色譜的試驗(yàn)器具有(1)以可移動(dòng)的狀態(tài)配置可與上述檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的被標(biāo)記的抗體或抗原的區(qū)域；(2)以固定在上述多孔體上的狀態(tài)配置可與上述測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的抗體或抗原的區(qū)域；以及(3)以固定在上述多孔體上的狀態(tài)配置與上述測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特定濃度下的顯色相對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)顯色的區(qū)域；將上述區(qū)域(2)發(fā)生的顯色與上述標(biāo)準(zhǔn)顯色進(jìn)行比較，可以對(duì)上述檢樣中的上述測(cè)定對(duì)象物質(zhì)進(jìn)行半定量。2.權(quán)利要求l所述的試驗(yàn)器具，其中，上述(2)的以固定在上述多孔體上的狀態(tài)配置可與上述測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的抗體或抗原的區(qū)域、和上述(3)的以固定在上述多孔體上的狀態(tài)配置與上述測(cè)定對(duì)象開(kāi)方向橫排或豎排配置。、；、'、3.權(quán)利要求1或2所述的試驗(yàn)器具，其中，上述(l)的以可移動(dòng)的狀態(tài)配置可與上述檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的被標(biāo)記的抗體或抗原的區(qū)域所使用的標(biāo)記用色素、和上述(3)的以固定在上述多孔體上的狀態(tài)配置與上述測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特定濃度下的顯色相對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)顯色的區(qū)域所使用的標(biāo)準(zhǔn)顯色用色素為同一色素。4.使用權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的試驗(yàn)器具對(duì)檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)進(jìn)行半定量的方法。全文摘要作為使用免疫色譜法可容易地對(duì)檢樣中所含的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)進(jìn)行半定量的新型試驗(yàn)器具，本發(fā)明提供具有檢樣通過(guò)毛細(xì)管現(xiàn)象可移動(dòng)的多孔體的免疫色譜用試驗(yàn)器具，上述用于免疫色譜的試驗(yàn)器具具有(1)以可移動(dòng)的狀態(tài)配置可與上述檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的被標(biāo)記的抗體或抗原的區(qū)域；(2)以固定在上述多孔體上的狀態(tài)配置可與上述測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特異性結(jié)合的抗體或抗原的區(qū)域；以及(3)以固定在上述多孔體上的狀態(tài)配置與上述測(cè)定對(duì)象物質(zhì)特定濃度下的顯色相對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)顯色的區(qū)域；通過(guò)上述區(qū)域(2)發(fā)生的顯色與上述標(biāo)準(zhǔn)顯色進(jìn)行比較，可以對(duì)檢樣中的測(cè)定對(duì)象物質(zhì)進(jìn)行半定量。本發(fā)明還提供使用該試驗(yàn)器具的半定量方法。文檔編號(hào)G01N33/543GK101120253SQ20068000334公開(kāi)日2008年2月6日申請(qǐng)日期2006年1月27日優(yōu)先權(quán)日2005年1月28日發(fā)明者佐藤尚文,牧野純一申請(qǐng)人:持田制藥株式會(huì)社