專利名稱：水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合微生態(tài)水懸浮劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖中的生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種復(fù)合微生態(tài)水懸浮劑，具體涉及一種水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合微生態(tài)水懸浮劑。
背景技術(shù)：
水產(chǎn)微生態(tài)制劑，是利用魚蝦蟹等動(dòng)物體內(nèi)或養(yǎng)殖水體中的有益微生物或促進(jìn)物質(zhì)經(jīng)特殊加工工藝而形成的活菌制劑?？捎糜谒w中微生態(tài)調(diào)控、凈化水質(zhì)，能產(chǎn)生生物效應(yīng)或生態(tài)效應(yīng)，也可用于調(diào)整或維持動(dòng)物腸道內(nèi)微生態(tài)平衡，達(dá)到預(yù)防疾病、促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物健康生長的目的。自二十世紀(jì)中葉以來，隨著養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，抗生素、喹乙醇、喹若酮等藥物飼料添加劑在世界范圍內(nèi)得到廣泛應(yīng)用。該藥物飼料添加劑在防治疾病、促進(jìn)動(dòng)物生長等方面作用十分明顯，但由此產(chǎn)生的副作用以及引起病原菌產(chǎn)生的抗藥性、毒性、“三致”(致畸、致癌、致突變)等弊端也逐漸顯露出來。殘毒、污染環(huán)境、威脅人類健康的問題現(xiàn)已成為世界各國養(yǎng)殖工作者和衛(wèi)生工作者十分關(guān)注的熱點(diǎn)。隨著動(dòng)物微生態(tài)制劑在畜牧等方面上的廣泛應(yīng)用，在水產(chǎn)業(yè)上的應(yīng)用也越來越引起人們的重視，其良好的效果已被大量的實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)實(shí)踐所證實(shí)。微生態(tài)制劑具有投入小、收益大、無殘毒、無抗藥性、不污染環(huán)境等優(yōu)點(diǎn)，充分顯示了利用微生態(tài)防治技術(shù)的優(yōu)越性，它必然成為二十一世紀(jì)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展方向。關(guān)于水產(chǎn)養(yǎng)殖用微生態(tài)制劑的研究和應(yīng)用，國內(nèi)外已進(jìn)行了大量的研究工作，概括起來主要集中在利用單一菌劑或復(fù)合菌劑改善養(yǎng)殖水體水質(zhì)，或防止水產(chǎn)動(dòng)物的某些疾病，應(yīng)用較廣泛的劑型是粉劑、水劑，但由于粉劑在干燥過程中容易造成菌體的死亡，導(dǎo)致產(chǎn)品有效活菌數(shù)含量低，加上粉劑的生產(chǎn)工藝較為復(fù)雜，能耗高，而水劑在貯存過程中容易沉淀和變質(zhì)，嚴(yán)重地影響使用效果。中國專利CN101717724A、CN101735951A、CN101878858A、 CN1498865A、CN101147529A, CN1594551A、CN101376877A、和 CN1016^157A 等分別公開了用于水產(chǎn)養(yǎng)殖水體凈化、修復(fù)養(yǎng)殖水環(huán)境修復(fù)、凈化水質(zhì)的復(fù)合微生態(tài)制劑及制備方法，雖然這些方法除了具有可以降低養(yǎng)殖水體中的有機(jī)污染物、氨氮、亞硝酸鹽、C0D、B0D含量等，還具有可以促進(jìn)有益藻類繁殖、提高養(yǎng)殖體的抗病能力的功效，但這些專利產(chǎn)品為固體制劑或液體制劑，存在生產(chǎn)工藝復(fù)雜、產(chǎn)品菌種存活率低、沉淀、能耗和成本高、使用效果不穩(wěn)定等缺點(diǎn)。本發(fā)明技術(shù)將飲料生產(chǎn)技術(shù)引入水產(chǎn)用微生態(tài)水懸浮劑的生產(chǎn)，可以有效地減少產(chǎn)品沉淀的發(fā)生，降低菌體的死亡率及生產(chǎn)成本等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合微生態(tài)水懸浮劑，該制劑能有效分解養(yǎng)殖水體中的大分子有機(jī)物，降低水體中氨氮、硝態(tài)氮含量，且具有生產(chǎn)工藝簡單、成本和能耗低、有效活菌數(shù)高、適應(yīng)性強(qiáng)、易于批量生產(chǎn)的特點(diǎn)，解決了目前市場上水產(chǎn)用微生態(tài)制劑存在的產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定、使用效果不理想、有效活菌數(shù)存活率低、產(chǎn)品沉淀及生產(chǎn)成本高等問題。
為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是一種水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合微生態(tài)水懸浮劑，該懸浮劑按重量百分比是由以下組分混合后用膠體磨粉碎至粒徑為2-5 μ m 而成枯草芽孢桿菌發(fā)酵液10-25%、納豆芽孢桿菌發(fā)酵液15-30%、側(cè)胞芽孢桿菌發(fā)酵液 20-35%、丁酸梭狀芽孢桿菌發(fā)酵液5-15%、酵母菌發(fā)酵液5-10%、抑菌劑5-6. 5%、穩(wěn)定劑 0. 45-0. 65 %、分散劑 0.1-0.3%，pH 值為 4. 5-5. 5。上述抑菌劑為NaCl或(NH4) 2S04中的一種或兩種。上述穩(wěn)定劑為羧甲基纖維素鈉、 黃原膠或瓜爾膠中的一種或幾種。上述分散劑為三聚磷酸鈉、或焦磷酸鈉中的一種或兩種。本發(fā)明中用到的菌種均為現(xiàn)有技術(shù)，保藏號(hào)分別為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis) :ACCC11062、CGMCC2548、或 CGMCC1222 ；側(cè)胞芽孢桿菌(Bacillus lateraporus) :CGMCC1755或CGMCC9701 ；納豆芽孢桿菌(Bacillussubtilis natto) =CCTCC M207147、CGMCC 0724 或 ATCC 6051 ；丁酸梭狀芽孢桿菌(Clostridium butyricum) JSMCB 或 ATCC 25755 ；酵母屬酵母菌(Saccharomyces SP.) CGMCC 1147、CGMCC 0702 或 CGMCC 0133。本發(fā)明中用到的菌種的發(fā)酵液的制備也為現(xiàn)有技術(shù)，其中枯草芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌發(fā)酵液的制備按每IOOmL水加2_4g玉米淀粉、 1-2. 5g豆餅粉、0. 05-0. 3gKH2P04、0. 05-0. 15g MgSO4 ·7Η20、0· 05-0. 15gMnS04 ·Η20、0· 1-0. 3g CaC03、及 0. 15-0. 35g 豆油的比例將玉米淀粉、豆餅粉、KH2PO4, MgSO4 · 7H20、MnSO4 · H2O, CaCO3、及豆油溶于水中，調(diào)節(jié)pH值為7. 2-7.6，在121-123 °C滅菌25-30分鐘，冷卻至 30-40°C，再分別以2-5體積％的接種量分別接入活化的枯草芽孢桿菌和納豆芽孢桿菌，在 30-37°C條件下培養(yǎng)48-7池，分別得到枯草芽孢桿菌發(fā)酵液和納豆芽孢桿菌發(fā)酵液；側(cè)胞芽孢桿菌發(fā)酵液的制備按每IOOmL水加2_4g葡萄糖、l_2g豆餅粉、 0. 05-0. 2g ΚΗ2Ρ04、0· 05-0. 15gMgS04 · 7Η20、0· 05-0. 15gMnS04 · H20,0. 1-0. 3gCaC03、及 0. 15-0. 35g豆油的比例將葡萄糖、豆餅粉、KH2P04、MgS04 ·7Η20、Μι^04 'H2CKCaCOy及豆油溶于水中，調(diào)節(jié)ΡΗ7. 5-7. 8，在121-123°C下滅菌20-25分鐘，冷卻至30_40°C，再以2_4體積％ 的接種量接入活化的側(cè)胞芽孢桿菌，在30-35°C條件下培養(yǎng)48-7池，得到側(cè)胞芽孢桿菌發(fā)酵液；丁酸梭狀芽孢桿菌發(fā)酵液的制備按每IOOmL水加3_5g葡萄糖、l_2g胰蛋白胨、0. 1-0. 3g (NH4)2SO4^O. 3-0. 5g Κ2ΗΡ04、0· 05-0. Ig MgSO4 · 7Η20、0· 01-0. 05gMnS04 · H2O, 0. 08-0. 12g NaHCO3,及 0. 1-0. 3g CaCO3 的比例將葡萄糖、胰蛋白胨、(NH4)2S04、K2HPO4, MgSO4 · 7H20、MnSO4 · H2O, NaHC03、及 CaCO3 溶于水中，調(diào)節(jié) pH7. 2-7. 4，在 121_123°C下滅菌 25-30分鐘，冷卻至30-40°C，再以3_5體積％的接種量接入活化的丁酸梭狀芽孢桿菌，在 35-40°C條件下培養(yǎng)36-4 ，得到丁酸梭狀芽孢桿菌發(fā)酵液；酵母菌發(fā)酵液的制備按每IOOmL水加2_3g葡萄糖、l_2g豆餅粉、 0. 5-1. 5g (NH4)2SO4^O. 1-0. 3g ΚΗ2Ρ04、0· 05-0. 15g MgSO4 · 7H20、及 0. 1-0. 3g CaCO3 的比例將葡萄糖、豆餅粉、(NH4)2SCV KH2PO4, MgSO4 · 7H20、及CaCO3溶于水中，在121_123°C下滅菌 20-25分鐘，冷卻至20-30°C，再以5_8體積％的接種量接入活化的酵母菌，在下培養(yǎng)，得到酵母菌發(fā)酵液；與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)1、本發(fā)明的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合微生態(tài)水懸浮劑能持久使養(yǎng)殖水體中的有機(jī)污染物、氨氮、硝態(tài)氮、COD和BOD的含量明顯降低。2、本發(fā)明方法所使用的菌種包括了好養(yǎng)菌和厭氧菌，既可降低好氧水體環(huán)境中各種有害物質(zhì)的含量，也可降降解如底泥等厭氧環(huán)境中殘留的飼料及水產(chǎn)動(dòng)物的糞便，從而改善水質(zhì)。3、本發(fā)明方法與固體發(fā)酵產(chǎn)品和液體發(fā)酵產(chǎn)品相比，具有生產(chǎn)工藝簡單、能耗低、 菌種死亡率低、進(jìn)入水體后啟動(dòng)快、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定、不產(chǎn)生沉淀、無三廢和易于規(guī)?；a(chǎn)等特點(diǎn)。4、本發(fā)明方法采用的丁酸梭狀芽孢桿菌，可抑制腸道有害菌，促進(jìn)有益菌生長；減少腸內(nèi)氨、胺含量(這兩種物質(zhì)會(huì)損害肝功能)；產(chǎn)生多種維生素，如維生素K等；產(chǎn)生多種酶類，與化肥或水產(chǎn)用有機(jī)肥料聯(lián)合使用時(shí)，能提高飼料利用率，促進(jìn)動(dòng)物生長。
具體實(shí)施例方式首先，分別制備枯草芽孢桿菌發(fā)酵液、納豆芽孢桿菌發(fā)酵液、側(cè)胞芽孢桿菌發(fā)酵液、丁酸梭狀芽孢桿菌發(fā)酵液、及酵母菌發(fā)酵液，其中枯草芽孢桿菌發(fā)酵液、及納豆芽孢桿菌發(fā)酵液的制備取玉米淀粉3g、豆餅粉 1. 5g、KH2PO4O. lg、MgSO4 · 7H20 0. lg、MnSO4 · H2O 0. 08g、CaCO3O. 2g、豆油 0. 2g 溶于 IOOmL 水中，調(diào)節(jié)PH7.5，在122°C條件下滅菌觀分鐘，冷卻至35°C后，以3% (V/V)的接種量接入活化的枯草芽孢桿菌，在35°C條件下培養(yǎng)60h，得到枯草芽孢桿菌發(fā)酵液；取玉米淀粉3g、豆餅粉 1. 5g、KH2PO4O. lg、MgSO4 · 7H20 0. lg、MnSO4 · H2O 0. 08g、 CaCO3O. 2g、豆油0. 2g溶于IOOmL水中，調(diào)節(jié)pH7. 5，在122°C條件下滅菌觀分鐘，冷卻至 35°C后，以4% (V/V)的接種量分別接入活化的納豆芽孢桿菌，在35°C條件下培養(yǎng)60h，得到納豆芽孢桿菌發(fā)酵液。側(cè)胞芽孢桿菌發(fā)酵液的制備取葡萄糖3g、豆餅粉1. 5g, KH2PO4O. 13g、MgS04 · 7H20 0. lg、MnSO4 · H2O 0. lg、CaCO3O. 2g、豆油 0. 25g 溶于 IOOmL 水中，調(diào)節(jié) pH7. 6，在 122°C條件下滅菌22分鐘，冷卻至35°C后，以3% (V/V)的接種量接入活化的側(cè)胞芽孢桿菌，在32°C條件下培養(yǎng)60h，得到側(cè)胞芽孢桿菌發(fā)酵液。丁酸梭狀芽孢桿菌發(fā)酵液的制備取葡萄糖4g、胰蛋白胨1. 5g、(NH4)2SO4O. 2g、 K2HPO4O. 4g、MgSO4 · 7Η20· 08g、MnSO4 · H2O 0. 02g、NaHCO3O. lg、CaCO3O. 2g 溶于 IOOmL 水中， 調(diào)節(jié)pH7.3，在121°C條件下滅菌30分鐘，冷卻至30°C，以4% (V/V)的接種量接入活化的丁酸梭狀芽孢桿菌，在36°C條件下培養(yǎng)46h，得到丁酸梭狀芽孢桿菌發(fā)酵液。酵母菌發(fā)酵液的制備取葡萄糖2. 5g、豆餅粉1. 5g、(NH4)2SO4O. 8g、KH2PO4O. 15g、 MgSO4 · 7Η20· lg、CaCO3O. 2g溶于IOOmL水中，在121°C條件下滅菌25分鐘，冷卻至25°C，以 7% (V/V)的接種量接入活化的酵母菌，在條件下培養(yǎng)36h，得到酵母菌發(fā)酵液。實(shí)施例1 按重量百分比取枯草芽孢桿菌發(fā)酵液16. 5%、納豆芽孢桿菌發(fā)酵液20%、側(cè)胞芽孢桿菌發(fā)酵液27.2%、丁酸梭狀芽孢桿菌發(fā)酵液23 %、酵母菌發(fā)酵液7 %、抑菌劑5. 6 %、穩(wěn)定劑0. 5%、分散劑0. 2 %，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH4. 6后，用膠體磨粉碎至粒徑為3. 5 μ m，即得成
P
ΡΠ O實(shí)施例2
取枯草芽孢桿菌發(fā)酵液10 %、納豆芽孢桿菌發(fā)酵液30 %、側(cè)胞芽孢桿菌發(fā)酵液 30 %、丁酸梭狀芽孢桿菌發(fā)酵液15%、酵母菌發(fā)酵液9. 45 %、抑菌劑5 %、穩(wěn)定劑0. 45 %、分散劑0. 1 %，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH5. 0后再用膠體磨粉碎至膠體粒徑為2. 5 μ m，即得成品。實(shí)施例3 取枯草芽孢桿菌發(fā)酵液25 %、納豆芽孢桿菌發(fā)酵液16 %、側(cè)胞芽孢桿菌發(fā)酵液 23. 55%,丁酸梭狀芽孢桿菌發(fā)酵液20%、酵母菌發(fā)酵液8%、抑菌劑6. 5%、穩(wěn)定劑0. 65%、 分散劑0. 3 %，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH5. 5后再用膠體磨粉碎至膠體粒徑為5 μ m即得成品。實(shí)施例4 取本發(fā)明產(chǎn)品300_500mL，倒入IOkg用開水溶化的1 %的紅糖水中，攪拌均勻，在 37-40°C下活化1-2小時(shí)，于1畝養(yǎng)殖池塘中(水深1. 0-1. 5米)均勻潑灑，每15天左右使用一次；或在化肥(每次每畝施用^ig)或水產(chǎn)用有機(jī)肥料(每次每畝施用IOKg)施用2-3 天后，按上述方法施用本發(fā)明產(chǎn)品1000-1500mL。以沒有潑灑本發(fā)明產(chǎn)品、施有同量化肥、及施有同量水產(chǎn)用有機(jī)肥料的同面積的養(yǎng)殖池塘作為對(duì)照，其他飼養(yǎng)條件不變。結(jié)果表明本發(fā)明產(chǎn)品與化肥聯(lián)合使用，鯉魚、草魚、鳊魚、及鰱魚分別較單施化肥時(shí)增產(chǎn)7. 1 %、12. 7%、5. 9%和6% ；與水產(chǎn)用有機(jī)肥料使用，鯉魚、草魚、鳊魚、及鰱魚分別較單施水產(chǎn)用有機(jī)肥料時(shí)增產(chǎn)13. 7%,8. 3%,6. 2%和31. 8%；池塘內(nèi)有機(jī)污染物、氨氮、 亞硝態(tài)氮、和COD的含量與不使用本產(chǎn)品的對(duì)照相比，降解率分別提高67. 3%,34. 17%, 7. 31%和 53. 65%。
權(quán)利要求
1.一種水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合微生態(tài)水懸浮劑，其特征在于該懸浮劑按重量百分比由以下組分混合后用膠體磨粉碎至粒徑為2-5μπι而成枯草芽孢桿菌發(fā)酵液10-25%、納豆芽孢桿菌發(fā)酵液15-30 %、側(cè)胞芽孢桿菌發(fā)酵液20-35 %、丁酸梭狀芽孢桿菌發(fā)酵液5-15 %、 酵母菌發(fā)酵液5-10%、抑菌劑5-6. 5%、穩(wěn)定劑0. 45-0. 65%、分散劑0. 1-0.3%, ρΗ值為 4· 5 5· 5 ο
2.如權(quán)利要求1所述的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合微生態(tài)水懸浮劑，其特征在于所述抑菌劑為 NaCl或(NH4)2SO4中的一種或兩種。
3.如權(quán)利要求1所述的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合微生態(tài)水懸浮劑，其特征在于所述穩(wěn)定劑為羧甲基纖維素鈉、黃原膠或瓜爾膠中的一種或幾種。
4.如權(quán)利要求1所述的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合微生態(tài)水懸浮劑，其特征在于所述分散劑為三聚磷酸鈉、或焦磷酸鈉中的一種或兩種。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合微生態(tài)水懸浮劑，其是以枯草芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌、側(cè)胞芽孢桿菌、凝結(jié)芽孢桿菌和酵母菌發(fā)酵液為有效成分，調(diào)節(jié)pH值后添加穩(wěn)定劑、抑菌劑、分散劑，經(jīng)過膠體磨粉碎后，得到的一種對(duì)水體環(huán)境無公害、安全、儲(chǔ)存期長的水產(chǎn)用復(fù)合微生態(tài)懸浮劑。其可以有效降低水產(chǎn)養(yǎng)殖水體中的有機(jī)污染物、氨態(tài)氮、亞硝態(tài)氮和COD的含量，改善水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境。本發(fā)明水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合微生態(tài)水懸浮劑可單獨(dú)使用，也可與化肥和水產(chǎn)用有機(jī)肥料聯(lián)合使用。其生產(chǎn)過程簡單、設(shè)備投資小、無污染、產(chǎn)品貨架期長，對(duì)水產(chǎn)健康養(yǎng)殖和水產(chǎn)可持續(xù)發(fā)展具有重要的意義。
文檔編號(hào)C02F3/34GK102517237SQ20111045287
公開日2012年6月27日 申請(qǐng)日期2011年12月30日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月30日
發(fā)明者蘭時(shí)樂, 李立恒, 毛小偉, 肖調(diào)義, 許寶紅, 鄧元元 申請(qǐng)人:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)