防治植物真菌病害的多粘類芽袍桿菌及其生產(chǎn)方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及株防治植物真菌病害的多粘類芽抱桿菌及其生產(chǎn)方法，屬于生物農(nóng)藥技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明采用的菌株是多粘類芽抱桿菌EBL一06菌株，分離自小麥葉面，保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)：CGMCC No.2377。該菌株可以防治植物多種真菌病害，提高作物產(chǎn)量c本發(fā)明利用味精廢水來發(fā)酵多粘類芽抱桿菌，制備生防菌劑，該下藝生產(chǎn)的多粘類芽抱桿菌生防劑能有效防治多種植物真菌病害，并且生產(chǎn)成本低廉，操作簡(jiǎn)單，還可以有效利用味精廢水，減少環(huán)境污染。
【專利說明】
防治植物真菌病害的多粘類芽袍桿菌及其生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于生物農(nóng)藥技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]根據(jù)味精生產(chǎn)過程中廢水所含污染物情況可分成三類:一是高濃度高酸度有機(jī)廢水即離交尾液;二是其它中高濃度有機(jī)廢水;三是不需處理直接外排的冷卻降溫水。離交尾液是通過離子交換法提取谷氨酸后剩余的“廢液”，它既含有豐富的有機(jī)質(zhì)，還含有N、P、K等少量無機(jī)敖及其它微量元素，這些物質(zhì)都可為生物生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)。其它中高濃度有機(jī)廢水包括:淀粉廢水、制糖廢水、發(fā)酵洗灌廢水、精制廢水等。淀粉廢水和制糖廢水除了含有一定的有機(jī)污染物質(zhì)外，還有一些懸浮物質(zhì);發(fā)酵洗灌廢水與離交尾液所含成分基本相同，只是含量較低;精制廢水有時(shí)呈酸性，有時(shí)呈堿性，有機(jī)物污染物質(zhì)含量較高，這些有機(jī)廢也是微生物資源開發(fā)比較理想的營(yíng)養(yǎng)來源之一。但是，這些廢水如果得不到合理利用，不僅會(huì)對(duì)環(huán)境造成嚴(yán)重污染，而且使資源白白浪費(fèi)掉。目前，眾多味精廢水處理技術(shù)大致分為兩步，一是提取廢水中的谷氨酸菌體單細(xì)胞蛋白，通過此步分離菌體，常用物化方法進(jìn)行處理(如絮凝、離心等方法)；二是提取菌體后廢液的處理，使其達(dá)到排放標(biāo)準(zhǔn)或處理后用于工廠回用，這也是眾多味精廢水處理技術(shù)所面臨的關(guān)鍵問題，常采用生物處理方法(如厭氧發(fā)酵、生物膜法，SBR法等)。
[0003]多粘類芽飽桿菌在自然界中分布廣泛，是一種重要的生防菌，對(duì)多種植物真菌、細(xì)菌病害均有較好的防治作用。多粘類芽抱桿菌對(duì)動(dòng)植物真菌、細(xì)菌病原物具有廣譜抗性，利用大孔吸附樹脂對(duì)多粘類抱桿菌產(chǎn)生的抗真菌活性物質(zhì)的吸附、解吸性能，篩選出其最佳解吸劑，該活性物質(zhì)對(duì)熱、紫外線穩(wěn)定，對(duì)胰蛋白酶、蛋白酶K有一定的耐受性，對(duì)氯仿部分敏感，對(duì)酸穩(wěn)定，對(duì)堿敏感?？梢宰鳛槲⑸锓柿暇鷦┲械囊环N成分分解秸桿，有效解決農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中一方面農(nóng)業(yè)垃圾過多，污染水體和環(huán)境，處理困難，另一方面化肥，農(nóng)藥使用過多，土壤惡化的矛盾。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的日的是提供一種能夠在植物葉際與根際定植，并且對(duì)多種病原菌具有拈抗作用的生防菌一多粘類芽抱桿菌EBL-06菌株，同時(shí)提供一種利用味精廢水生產(chǎn)該生防菌劑的方法。本發(fā)明所提供的生防菌株是由我們實(shí)驗(yàn)室從小麥的葉面上分離篩選出來的。將其編號(hào)為EBL-06，保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏日期為二零零八年二月二十六日，分類命名為多粘類芽抱桿菌。保藏編號(hào)為= CGMCC N0.2377。該菌株具有下列性質(zhì):I菌落形態(tài)特征該菌株在I3DA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，單個(gè)菌落呈半玻璃珠狀，邊緣整齊，表面粘稠，與培養(yǎng)基結(jié)合緊密，菌落中心乳黃色。2菌體形態(tài)特征菌體桿狀，革蘭氏染色顯陽(yáng)性，芽抱端生，包囊膨大。3碳源利用能力可以利用碳源:Q-環(huán)式糊精;肝糖;D-葡糖胺酸;衣康酸;D-半乳糖酸Y-內(nèi)醋;D-半乳糖醛酸;2-環(huán)式糊精;肝糖;D-葡糖胺酸;衣康酸；D-半乳糖酸Y-內(nèi)醋;D-半乳糖醛酸；2-輕基苯甲酸;4-輕基苯甲酸;L-精氨酸;L-天門冬酞胺;L-絲氨酸;甘氨酞-L-谷氨酸;D-木糖;D-甘露醇;苯乙胺。不可利用碳源:丙酮酸甲酷;D-纖維二糖;P-甲基-D-葡萄糖昔；i_赤醉糖醇;N-乙酞-D葡萄糖氨;D，L-U-磷酸甘油;U-丁酮酸;Y-經(jīng)丁酸;L-苯丙氨酸;L-蘇氨酸;腐胺。對(duì)真菌拈抗能力菌株在TOA固體培養(yǎng)基上表現(xiàn)出對(duì)灰葡萄抱霉、黃瓜黑星病的病原菌原菌、木霉菌等的高效拈抗效果。5[0 021 J 2、液體種子制備:向高壓滅菌的土顯液體培養(yǎng)基中，接種多粘類芽抱桿菌，25-35攝氏度培養(yǎng)，得到液體種子。4、液態(tài)發(fā)酵:向經(jīng)過預(yù)處理的廢水中接種5% (體積)的液體種子，于25-35°C，通無菌空氣培養(yǎng)24-72小時(shí)。[O。2315、后處理:培養(yǎng)好的發(fā)酵液經(jīng)細(xì)菌計(jì)數(shù)后，包裝使用。
【具體實(shí)施方式】
[0005]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說明:
[0006]由本發(fā)明技術(shù)方案生產(chǎn)的多粘類芽抱桿菌生防劑能夠高效防治多種真菌類植物病害，而且無公害，生產(chǎn)成本低，并且有效地利用了味精廢水。以下通過具體實(shí)施例詳細(xì)說明本發(fā)明的實(shí)施，目的在于幫助讀者更好地理解本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)，但不作為對(duì)本發(fā)明實(shí)施范圍的限定。實(shí)施例1:多粘類芽抱桿菌生物農(nóng)藥制備種子培養(yǎng)基制備:稱取200g 土豆，切碎，于兒自來水中煮沸30分鐘，過濾除去殘?jiān)?，加?0g葡萄糖，定容至IL，即得土豆培養(yǎng)基。分裝入5個(gè)IL的三角瓶中，滅菌20min。發(fā)酵培養(yǎng)基制備:經(jīng)過絮凝除去細(xì)菌蛋白的味精廢水比加入1L自來水稀釋，并用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至6.0。液體種子制備:向土豆液體培養(yǎng)基中接種多粘類芽抱桿菌，于30°C，搖瓶，恒溫?fù)u床振蕩培養(yǎng)24小時(shí)，得到液體種子。發(fā)酵產(chǎn)品:將上述發(fā)酵培養(yǎng)基裝罐到1L的發(fā)酵罐中，121°C滅菌1min，按照5%的接種量接種液體種子，在30°C恒溫，通無菌空氣的條件下，發(fā)酵2至3天，取樣計(jì)數(shù)后，無菌條件下分裝。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一株具有防治植物病害作用的多粘類芽抱桿菌，其特征在于:該多粘類芽抱桿菌保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào):CGMCC N0.2377。2.權(quán)利要求1所述的多粘類芽抱桿菌，其特征在于:該菌株在POA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，單個(gè)菌落呈半玻璃珠狀，邊緣整齊，表面粘稠，與培養(yǎng)基結(jié)合緊密，菌落中心乳黃色，菌體桿狀，革蘭氏染色顯陽(yáng)性，芽抱端生。3.用權(quán)利要求上所述多粘類芽抱桿菌來制備抗植物病害生防劑的生產(chǎn)方法，其特征在于:在主要成分為味精廢水的培養(yǎng)基中接種權(quán)利要求1所述的多粘類芽抱桿菌。4.權(quán)利要求3所述的生產(chǎn)方法，其特征在于:將味精廢水用水稀釋5-15倍，調(diào)節(jié)pH為5-7，高壓滅菌，接種權(quán)利要求1所述的多粘類芽抱桿菌，于25-35 °C，通無菌空氣培養(yǎng)24-72小時(shí)。
【文檔編號(hào)】C12N1/20GK106010994SQ201510679719
【公開日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2015年10月12日
【發(fā)明人】劉明明
【申請(qǐng)人】劉明明