以花生根提取防癌劑白藜蘆醇的方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于生物提取領(lǐng)域，公開了以花生根提取防癌劑白藜蘆醇的方法，其包括如下步驟：步驟1）浸泡和粉碎，步驟2）混勻和提取，步驟3）濃縮、提取以及過濾，步驟4）水解，步驟5）干燥。本發(fā)明方法操作簡單，成本低廉，產(chǎn)品純度和收率高，提取時間縮短，工業(yè)化應(yīng)用前景廣闊。
【專利說明】
以花生根提取防癌劑白藜蘆醇的方法[0001]
技術(shù)領(lǐng)域
[0002]本發(fā)明屬于生物提取領(lǐng)域，具體涉及以花生根提取防癌劑白藜蘆醇的方法。
[0003]【背景技術(shù)】
[0004]白藜蘆醇是多酚類化合物，中文別名:3，4 ’，5-三羥基芪;虎杖甙元；芪三酚;芪三酚；3,4’，5_三羥基芪；3,4’，5_三羥基二苯乙烯；(E)-5-[2-(4-羥苯基)-乙烯基]-1，3-苯二酚，3,4,5_三羥基反式(E)-3,5,4’_三羥基芪。白藜蘆醇是一種生物性很強(qiáng)的天然多酚類物質(zhì)，又稱為芪三酚，是腫瘤的化學(xué)預(yù)防劑，可作為防癌劑使用，也是對降低血小板聚集，預(yù)防和治療動脈粥樣硬化、心腦血管疾病的化學(xué)預(yù)防劑。白藜蘆醇是一種對人類健康有著顯著保健作用的天然活性物質(zhì)，已引起國際社會的普遍關(guān)注。
[0005]在1939年首次發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇，20世紀(jì)70年代首次發(fā)現(xiàn)葡萄中含有這種物質(zhì)，后來人們發(fā)現(xiàn)虎杖、花生、桑椹等植物中也含有這種成分。天然白藜蘆醇是一種天然活性成分， 它能以游離態(tài)(順式、反式)和糖苷結(jié)合態(tài)(順式、反式)2種形式在植物中分布及生物合成， 且均具有抗氧化效能，其中反式異構(gòu)體的生物活性強(qiáng)于順式，是葡萄中的一種重要的植物抗毒素。人們對其自然資源進(jìn)行了廣泛的研究，至少在21個科、31個屬的72種植物中發(fā)現(xiàn)了白藜蘆醇，如:葡萄科的葡萄屬、蛇葡萄屬，豆科的落花生屬、決明屬、槐屬，百合科的藜蘆屬，桃金娘科的桉屬，寥科的寥屬等。
[0006]天然植物虎杖中含有大量的虎杖甙(又名白藜蘆醇甙)和白藜蘆醇從中提取白藜蘆醇并且取得了可喜的進(jìn)展，但由于其原料虎杖為中藥，原料來源較少，從中提取白黎蘆醇存在與藥爭源。近年來研究結(jié)果表明，花生紅衣與花生根中也含有相當(dāng)多的白藜蘆醇。雖然花生根含量比虎杖中要低，但原料來源豐富，價格低廉。近年來，已經(jīng)有多篇文獻(xiàn)對提取工藝進(jìn)行了研究，但是仍然存在提取率低、提取成本高以及操作工藝繁瑣等缺陷。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有技術(shù)中白藜蘆醇提取工藝提取率低、提取成本高以及操作工藝繁瑣等缺陷，提供了以花生根提取防癌劑白藜蘆醇的方法。
[0008]本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的:以花生根提取防癌劑白藜蘆醇的方法，其包括如下步驟:步驟1)浸泡和粉碎，步驟2)混勻和提取，步驟3)濃縮、提取以及過濾，步驟4)水解，步驟 5)干燥。
[0009]具體地，所述方法包括如下步驟:步驟1):將花生秧下部的根剪下來，浸泡在5%(w/w)的氯化鈉溶液中120min，然后取出， 洗凈晾干，粉碎成10-50目的粉末；步驟2):將步驟1)所得粉末與硅藻土按照1:1的質(zhì)量比混合均勻得到混合物，然后添加占混合物10倍重量的60%(v/v)的乙醇浸泡30min，再加熱至50-55°C，回流提取60-100min， 收集提取液；步驟3):將步驟2)得到的提取液蒸餾回收乙醇，然后將殘液濃縮至稠漿狀提取液，再添加兩倍體積的95%(v/v)的乙醇攪拌均勾，靜置30-50min，再添加l%(w/w)的活性炭，200轉(zhuǎn)/ min攪拌30min，停止攪拌，過濾，收集濾液；步驟4):將濾液蒸餾回收乙醇，然后往殘液中添加10%的稀硫酸調(diào)節(jié)pH為2.5,維持在70 °(:攪拌水解4-6小時，再添加1M的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)水解液的pH為7;步驟5 ):將步驟4)的水解液置于4 °C的條件下12小時，過濾，減壓干燥，得到白黎蘆醇提取物。
[0010]本發(fā)明還公開了按照所述的方法獲得的白黎蘆醇提取物，其可作為防癌劑使用。
[0011]本發(fā)明取得的有益效果主要但不限于以下幾點(diǎn):提取工藝中采用硅藻土與花生根粉末混合，可通過硅藻土的吸附作用，使得細(xì)胞壁穩(wěn)定性進(jìn)一步下降，細(xì)胞脹裂過程加劇，提高白黎蘆醇的浸出率，同時吸附力較小，容易解離， 而且硅藻土的成本小于樹脂等吸附材料，減輕了企業(yè)負(fù)擔(dān)；花生根經(jīng)鹽環(huán)境逆境脅迫，可以誘導(dǎo)活性分子的分泌，而且使得細(xì)胞壁處于不穩(wěn)定狀態(tài)，白藜蘆醇含量相應(yīng)增加，提高了白藜蘆醇的產(chǎn)量；優(yōu)化了乙醇萃取的料液比和溫度等提取參數(shù)，使用酸堿水解，避免了使用酶水解，節(jié)約了企業(yè)成本；采用本發(fā)明提取方法生產(chǎn)成本低，而且溶劑消耗少成本低廉，產(chǎn)品純度和收率高，提取時間縮短，操作步驟簡單，工業(yè)化應(yīng)用前景廣闊。【具體實(shí)施方式】
[0012]為了使本技術(shù)領(lǐng)域的人員更好地理解本申請中的技術(shù)方案，下面將結(jié)合本申請具體實(shí)施例，對本發(fā)明進(jìn)行更加清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本申請一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒旧暾堉械膶?shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都應(yīng)當(dāng)屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。[0〇13] 實(shí)施例1以花生根提取防癌劑白藜蘆醇的方法，其包括如下步驟:步驟1):將花生秧下部的根剪下來，浸泡在5%(w/w)的氯化鈉溶液中120min，然后取出， 洗凈晾干，粉碎成10目的粉末；步驟2):將步驟1)所得粉末與硅藻土按照1:1的質(zhì)量比混合均勻得到混合物，然后添加占混合物10倍重量的60%( v/v)的乙醇浸泡30min，再加熱至50°C，回流提取60min，收集提取液；步驟3):將步驟2)得到的提取液蒸餾回收乙醇，然后將殘液濃縮至稠漿狀提取液，再添加兩倍體積的95%(v/v)的乙醇攪拌均勾，靜置30min，再添加l%(w/w)的活性炭，200轉(zhuǎn)/min 攪拌30min，停止攪拌，過濾，收集濾液；步驟4):將濾液蒸餾回收乙醇，然后往殘液中添加10%(w/w)的稀硫酸調(diào)節(jié)pH為2.5,維持在70°C攪拌水解4小時，再添加1M的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)水解液的pH為7;步驟5 ):將步驟4)的水解液置于4 °C的條件下12小時，過濾，減壓干燥，得到白黎蘆醇提取物;經(jīng)HPLC檢測提取物中白黎蘆醇的含量為35.1%，收率為82.6%。
[0014]實(shí)施例2以花生根提取防癌劑白藜蘆醇的方法，其包括如下步驟:步驟1):將花生秧下部的根剪下來，浸泡在5%(w/w)的氯化鈉溶液中120min，然后取出， 洗凈晾干，粉碎成50目的粉末；步驟2):將步驟1)所得粉末與硅藻土按照1:1的質(zhì)量比混合均勻得到混合物，然后添加占混合物10倍重量的60%(v/v)的乙醇浸泡30min，再加熱至55°C，回流提取lOOmin，收集提取液；步驟3):將步驟2)得到的提取液蒸餾回收乙醇，然后將殘液濃縮至稠漿狀提取液，再添加兩倍體積的95%(v/v)的乙醇攪拌均勾，靜置50min，再添加l%(w/w)的活性炭，200轉(zhuǎn)/min 攪拌30min，停止攪拌，過濾，收集濾液；步驟4):將濾液蒸餾回收乙醇，然后往殘液中添加10%(w/w)的稀硫酸調(diào)節(jié)pH為2.5,維持在70°C攪拌水解6小時，再添加1M的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)水解液的pH為7;步驟5 ):將步驟4)的水解液置于4 °C的條件下12小時，過濾，減壓干燥，得到白黎蘆醇提取物;經(jīng)HPLC檢測提取物中白黎蘆醇的含量為35.3%，收率為83.1%。
[0015]對比例1操作工藝同實(shí)施例1，不同在于缺少步驟1)浸泡到氯化鈉溶液的步驟;經(jīng)HPLC檢測提取物中白黎蘆醇的含量為27.5%，收率為63.9%。
[0016]對比例2操作工藝同實(shí)施例1，不同在于缺少步驟2)添加硅藻土的步驟;經(jīng)HPLC檢測提取物中白黎蘆醇的含量為28.9%，收率為69.5%。
[0017]最后，還需要注意的是，以上列舉的僅是本發(fā)明的若干個具體實(shí)施例。顯然，本發(fā)明不限于以上實(shí)施例，還可以有許多變形。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能從本發(fā)明公開的內(nèi)容直接導(dǎo)出或聯(lián)想到的所有變形，均應(yīng)認(rèn)為是本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.以花生根提取防癌劑白藜蘆醇的方法，其包括如下步驟:步驟1)浸泡和粉碎，步驟2) 混勻和提取，步驟3)濃縮、提取以及過濾，步驟4)水解，步驟5)干燥。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟:步驟1):將花生根剪下來，浸泡在5%(w/w)的氯化鈉溶液中120min，然后取出，洗凈晾 干，粉碎成10-50目的粉末；步驟2):將步驟1)所得粉末與硅藻土按照1:1的質(zhì)量比混合均勻得到混合物，然后添加 占混合物10倍重量的60%(v/v)的乙醇浸泡30min，再加熱至50-55°C，回流提取60-100min， 收集提取液；步驟3):將步驟2)得到的提取液蒸餾回收乙醇，然后將殘液濃縮至稠漿狀提取液，再添 加兩倍體積的95%(v/v)的乙醇攪拌均勾，靜置30-50min，再添加l%(w/w)的活性炭，200轉(zhuǎn)/ min攪拌30min，停止攪拌，過濾，收集濾液；步驟4):將濾液蒸餾回收乙醇，然后往殘液中添加10%的稀硫酸調(diào)節(jié)pH為2.5,維持在70 °(:攪拌水解4-6小時，再添加1M的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)水解液的pH為7;步驟5):將步驟4)的水解液置于4°C的條件下12小時，過濾，減壓干燥，得到白黎蘆醇提 取物。3.按照權(quán)利要求1-2任其一所述的方法獲得的白黎蘆醇提取物。
【文檔編號】C07C37/82GK106008173SQ201610337866
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月22日
【發(fā)明人】陳佩, 董景峰, 謝來賓, 王鵬亭, 柴行, 周秋云, 謝海濤
【申請人】深圳市先康達(dá)生物科技有限公司