介孔分子印跡熒光探針的制備及其檢測四環(huán)素類抗生素的制作方法
【專利摘要】介孔分子印跡熒光探針的制備及其檢測四環(huán)素類抗生素，它涉及一種四環(huán)素類抗生素殘留檢測的方法。本發(fā)明的目的是要解決現(xiàn)有檢測四環(huán)素類抗生素殘留的方法存在樣品預(yù)處理過程繁瑣，分析時間長且成本高的問題，及現(xiàn)有的分子印跡聚合物?量子點(diǎn)復(fù)合材料對目標(biāo)分子的選擇性差、比表面積較小及吸附量低的問題。制備方法：一、分子印跡聚合物的制備；二、Mn摻雜ZnS量子點(diǎn)的制備；三、介孔分子印跡熒光探針的制備。使用方法：將介孔分子印跡熒光探針加入到含有四環(huán)素類抗生素的樣品溶液中，超聲使其分散均勻后進(jìn)行熒光檢測。本發(fā)明制備的介孔分子印跡熒光探針選擇性好，靈敏度高。
【專利說明】
介孔分子印跡熒光探針的制備及其檢測四環(huán)素類抗生素
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種四環(huán)素類抗生素殘留檢測的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 四環(huán)素類抗生素是最常用的抗生素，除了用于治療自身疾病，在動物養(yǎng)殖、水產(chǎn)養(yǎng) 殖方面也有廣泛應(yīng)用，然而抗生素的大量濫用已經(jīng)嚴(yán)重威脅到人們的身體健康。目前我國 常用檢測抗生素的方法有液相色譜法或液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用法，液相色譜法雖然具有分離 效果好的優(yōu)點(diǎn)，但用于低濃度加標(biāo)樣品的檢測時結(jié)果重現(xiàn)性差、分析成本高且分析時間長。 液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用法對靈敏度，重現(xiàn)性，選擇性的要求非常高，樣品預(yù)處理過程繁瑣，勞 動時間大且分析成本較高。因此，研究一種高效、快捷、低成本的方法用來檢測四環(huán)素類抗 生素殘留對人類健康和生態(tài)文明是相當(dāng)重要的。
[0003] 分子印跡技術(shù)是從仿生角度采用人工方法制備對特定分子具有專一性結(jié)合作用 聚合物的技術(shù)。分子印跡聚合物制備方便，性能穩(wěn)定。量子點(diǎn)是一種新型半導(dǎo)體熒光材料， 具有熒光量子產(chǎn)率高、斯托克斯位移大的優(yōu)點(diǎn)。若能將分子印跡聚合物與量子點(diǎn)進(jìn)行結(jié)合， 制備得到的復(fù)合材料便可以既具有分子印跡聚合物的高選擇性，又可以具有量子點(diǎn)的熒光 特性。Liu等（Liu J X,Chen H,Lin Z,Lin J M.Preparation of Surface Imprinting Polymer Capped Mn-Doped ZnS Quantum Dots and Their Application for Chemiluminescence Detection of 4-Nitrophenol in Tap Water.Anal.Chem.2010,82: 7380-7386)，以及專利CN 104877163 A和CN 103724570 A分別制備得到了基于分子印跡聚 合物-量子點(diǎn)復(fù)合材料的熒光探針，并分別應(yīng)用于選擇性分離分析對硝基苯酚、菊酯類農(nóng)藥 和氨基甲酸酯類農(nóng)藥。在這些復(fù)合材料中，模板分子與功能單體是通過非共價鍵結(jié)合，得到 的產(chǎn)物對目標(biāo)分子選擇性稍差。此外，這些復(fù)合材料比表面積較小，吸附量較低。
[0004] 本發(fā)明在合成材料的過程中，功能單體首先通過共價鍵和模板分子結(jié)合，模板分 子被洗脫掉后，印跡孔穴與模板分子再結(jié)合時是通過氫鍵作用。這樣既保留了共價鍵良好 的選擇性，也通過氫鍵作用提高了方向性，有利于模板分子的快速結(jié)合和釋放。此外，我們 將介孔硅作為印跡基體，不僅能夠有效記憶、保留結(jié)合位點(diǎn)的識別空穴，而且有序的孔道也 會使模板分子快速進(jìn)入孔道內(nèi)部，接近識別位點(diǎn)，超高的比表面積還能夠大大增加吸附量。 本發(fā)明旨在制備一種介孔分子印跡熒光探針，用于四環(huán)素類抗生素殘留的檢測。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是要解決現(xiàn)有檢測四環(huán)素類抗生素殘留的方法存在樣品預(yù)處理過 程繁瑣，分析時間長且成本高的問題，及現(xiàn)有的分子印跡聚合物-量子點(diǎn)復(fù)合材料對目標(biāo)分 子的選擇性差、比表面積較小及吸附量低的問題。而提供一種利用介孔分子印跡熒光探針 檢測四環(huán)素類抗生素殘留的方法。
[0006] 介孔分子印跡熒光探針的制備方法，具體是按以下步驟完成的：
[0007] -、分子印跡聚合物的制備:將模板分子（四環(huán)素類抗生素，包括土霉素、四環(huán)素、 金霉素、氯霉素、地美環(huán)素、強(qiáng)力霉素、米諾環(huán)素或美他環(huán)素)與四氫呋喃以及異氰酸丙基三 乙氧基硅烷混合，在80~100°C下攪拌20~24h(氮?dú)獗Ｗo(hù)），攪拌速度為300~380r/min，隨 后通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將四氫呋喃去除掉，得到預(yù)聚合溶液;再將預(yù)聚合溶液、表面活性劑[聚 環(huán)氧乙烷-聚環(huán)氧丙烷-聚環(huán)氧乙烷三嵌段共聚物(P123)或十六烷基三甲基溴化銨]、交聯(lián) 劑正硅酸乙酯、體積分?jǐn)?shù)為50%~60%乙醇水溶液加入到錐形瓶中，最后加入2~4mol/L NaOH溶液，室溫下攪拌2~3h后放入高溫反應(yīng)釜中于110~130°C反應(yīng)40~50h，反應(yīng)結(jié)束后 進(jìn)行抽濾，得到固體產(chǎn)物，固體產(chǎn)物用蒸餾水離心洗滌3~5次后加入到80~90°C乙醇溶液 中加熱回流20~30h(目的是除去表面活性劑），烘干后再將固體產(chǎn)物和體積分?jǐn)?shù)為80%~ 90 %二甲基亞砜水溶液混合，在140~180°C下攪拌8~1 Oh(目的是除去模板分子），反應(yīng)結(jié) 束后將混合液抽濾再用蒸餾水離心洗滌3~5次，得到分子印跡聚合物;步驟一中所述的模 板分子的質(zhì)量與異氰酸丙基三乙氧基硅烷的體積比為lg:4~10mL;步驟一中所述的模板分 子的質(zhì)量與四氫呋喃的體積比為1 g: 20~40mL;步驟一中所述的預(yù)聚合溶液的體積與表面 活性劑的質(zhì)量比為1 mL: 8~12 g;步驟一中所述的預(yù)聚合溶液與交聯(lián)劑的體積比為1:40~ 50;步驟一中所述的交聯(lián)劑與體積分?jǐn)?shù)為50%~60%乙醇水溶液的體積比為1:30~40;步 驟一中所述的預(yù)聚合溶液與NaOH溶液的體積比為1:15~20;步驟一中所述的固體產(chǎn)物的質(zhì) 量與體積分?jǐn)?shù)為80 %~90 %二甲基亞砜水溶液的體積比為lg: 20~30mL;
[0008] 二、Mn摻雜ZnS量子點(diǎn)的制備:首先將硫酸鋅、氯化錳和蒸餾水加入到錐形瓶中，在 氮?dú)鈿夥占皵嚢杷俣葹?00~380r/min的條件下反應(yīng)10~30min，然后以20~40滴/min的滴 速將物質(zhì)的量濃度為2~3mmol/mL的硫化鈉水溶液滴加到錐形瓶中，持續(xù)通入氮?dú)獠⒃谙?同的攪拌速度下繼續(xù)反應(yīng)25~35min，反應(yīng)結(jié)束后用蒸餾水離心洗滌3~5次，烘干得到Mn摻 雜ZnS量子點(diǎn)；步驟二中所述的氯化錳和硫酸鋅的物質(zhì)的量之比為1:12~13;步驟二中所述 的氯化猛的物質(zhì)的量和蒸餾水的體積比為lmmo 1:70~90mL;步驟二中所述的硫酸鋅和硫化 鈉的物質(zhì)的量之比為1:0.9~1.1;
[0009] 三、介孔分子印跡熒光探針的制備:將步驟一中制得的分子印跡聚合物、步驟二中 制得的Mn慘雜ZnS量子點(diǎn)、硅烷偶聯(lián)劑(疏丙基二甲氧基硅烷或疏丙基二乙氧基硅烷）、體積 分?jǐn)?shù)為85 %~95 %乙醇水溶液加入到錐形瓶中，室溫下攪拌20~30h，反應(yīng)結(jié)束所得固體產(chǎn) 品用蒸餾水離心洗滌3~5次，烘干得到介孔分子印跡熒光探針;步驟三中所述的分子印跡 聚合物與Mn摻雜ZnS量子點(diǎn)的質(zhì)量比為1:0.5~1;步驟三中所述的分子印跡聚合物的質(zhì)量 與硅烷偶聯(lián)劑的體積比為lg:l~2mL;步驟三中所述的分子印跡聚合物的質(zhì)量與體積分?jǐn)?shù) 為85%~95%乙醇水溶液的體積比為lg:30~40mL。
[0010] 上述介孔分子印跡熒光探針在檢測四環(huán)素類抗生素殘留中的應(yīng)用，具體是按以下 步驟完成的:首先將介孔分子印跡熒光探針與一定濃度的四環(huán)素類抗生素樣品溶液混合并 將混合液pH調(diào)節(jié)至7~8,超聲1~2min使其均勾分散，室溫下靜置10~15min后使用焚光分 光光度計進(jìn)行熒光分析，即完成介孔分子印跡熒光探針檢測四環(huán)素類抗生素殘留；所述的 介孔分子印跡熒光探針的質(zhì)量與四環(huán)素類抗生素樣品溶液的體積比為lmg:l~5mL。
[0011] 本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)：1、本發(fā)明提供的介孔分子印跡熒光探針的制備方法操作簡單，適用 性廣;2、分子印跡聚合物聚合時，模板分子與功能單體首先通過共價鍵結(jié)合，模板分子被洗 脫掉之后，特定的結(jié)合位點(diǎn)與模板分子通過氫鍵作用再聚合，兼具共價鍵和非共價鍵結(jié)合 的優(yōu)點(diǎn)，如選擇性強(qiáng)，方向性高;3、介孔硅作為分子印跡基體，使結(jié)合位點(diǎn)位于介孔骨架上， 則不僅能夠有效記憶、保留結(jié)合位點(diǎn)的識別空穴，而且有序的孔道也會使模板分子快速進(jìn) 入孔道內(nèi)部，接近識別位點(diǎn)，比表面積高達(dá)400~500m2/g，大大增加了吸附量;4、本發(fā)明具 有分子印跡技術(shù)及量子點(diǎn)的優(yōu)點(diǎn)，例如選擇性好，當(dāng)其應(yīng)用于復(fù)雜樣品前處理時，可以很好 的清除基體干擾且步驟簡單，測定的加標(biāo)回收率可達(dá)90%~100%，此外基于量子點(diǎn)的熒光 檢測大大降低了分析時間，整個分析時間在20min之內(nèi)即可完成;5、基于介孔分子印跡熒光 探針的建立，提供了檢測四環(huán)素類抗生素殘留的新方法，降低了分析成本50%~70%，簡化 分析步驟，提高了分析效率，在復(fù)雜樣品前處理中具有廣闊的應(yīng)用前景。
【附圖說明】
[0012] 圖1是實(shí)施例1制備的介孔分子印跡熒光探針的透射電子顯微鏡照片;從圖中可以 看出明顯的介孔結(jié)構(gòu)；
[0013] 圖2是實(shí)施例1制備的介孔分子印跡焚光探針?biāo)降葴鼐€及孔徑大小分布；由圖 可知，BET表面積為482.15m2/g;孔徑體積為0.51cm 3/g;運(yùn)用BJH孔徑分布函數(shù)計算得到該介 孔孔徑的平均直徑為4.4nm;此外還可以看出，在相對壓力由0.4上升到0.6時，吸附量不斷 增加，說明在該熒光探針表面存在相當(dāng)數(shù)量的分布均勻的介孔結(jié)構(gòu);這種結(jié)構(gòu)會降低傳質(zhì) 阻力，改善位點(diǎn)結(jié)合性及材料的形貌使其更易識別模板分子，從而提高其選擇性和結(jié)合能 力；
[0014]圖3是實(shí)施例1制備的介孔分子印跡熒光探針熒光猝滅機(jī)理圖；如圖a中所示，熒光 猝滅可歸因于Mn摻雜ZnS量子點(diǎn)表面的氨基和金霉素模板分子表面的羥基之間的電子轉(zhuǎn) 移，這種電子轉(zhuǎn)移會使得量子點(diǎn)表面的氨基基團(tuán)和金霉素模板分子之間形成一種復(fù)合物， 量子點(diǎn)的能量轉(zhuǎn)移到復(fù)合物上，使其熒光猝滅;此外，如b圖所示，也可用分子軌道理論解釋 熒光猝滅機(jī)理;Mn摻雜ZnS量子點(diǎn)的電子吸收紫外光后從基態(tài)價電子帶激發(fā)到導(dǎo)帶，隨后， 激發(fā)態(tài)電子返回到基態(tài);在返回過程中，量子點(diǎn)可以發(fā)出熒光;此外，當(dāng)存在金霉素模板分 子時，金霉素和量子點(diǎn)表面的氨基基團(tuán)之間會形成氫鍵，這種強(qiáng)的相互作用力會導(dǎo)致量子 點(diǎn)和金霉素之間發(fā)生電子轉(zhuǎn)移，激發(fā)態(tài)的電子可以直接躍迀到復(fù)合物的分子最低空余軌 道，復(fù)合物的能級高于量子點(diǎn)，所以量子點(diǎn)的激發(fā)態(tài)電子可在不發(fā)光的情況下回到基態(tài)，導(dǎo) 致量子點(diǎn)熒光猝滅，從而達(dá)到檢測金霉素的目的；
[0015] 圖4是不同濃度的模板分子對實(shí)施例1制備的介孔分子印跡熒光探針的熒光強(qiáng)度 的St ern-Vo lmer方程擬合圖；考察的模板分子濃度為50~1000ng/mL，米用Stern-Vo lmer方 程對其進(jìn)行分析;在Fo/F = KSVCq+l式中，F(xiàn)o表示沒有加入猝滅劑模板分子時的熒光強(qiáng)度，F(xiàn) 表示加入猝滅劑模板分子時的焚光強(qiáng)度，Ksv為Stern-Volmer猝滅常數(shù)，Cq為樣品中加的猝 滅劑模板分子的濃度;通過實(shí)驗(yàn)得到Fo/F = 0.0013Cq+0.9906，在50~1000ng/mL的線性范 圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)R2為〇. 9995;
[0016] 圖5是不同濃度模板分子對實(shí)施例1制備的介孔分子印跡熒光探針的熒光猝滅光 譜圖；在加入金霉素模板分子之前，由于Mn2+從4T 1躍迀到6A1使得從介孔分子印跡熒光探針 在595nm左右有一個強(qiáng)的吸收峰，隨著模板分子濃度的增大，熒光猝滅逐漸加強(qiáng);這是由于 這種介孔分子印跡熒光探針的印跡空腔與模板分子之間有特定的相互作用，使其對模板分 子具有特異選擇性。
【具體實(shí)施方式】 [0017] 實(shí)施例1:
[0018] 本實(shí)施方式是介孔分子印跡熒光探針的制備，具體是按以下步驟完成的：
[0019] 一、分子印跡聚合物的制備:將1.5g金霉素固體與30mL四氫呋喃及6mL異氰酸丙基 三乙氧基硅烷混合，在100°C下攪拌反應(yīng)24h(氮?dú)獗Ｗo(hù)），攪拌速度為350r/min，隨后通過旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將四氫呋喃去除掉，得到預(yù)聚合溶液;再將〇. 〇5mL預(yù)聚合溶液、0.45g十六烷基三 甲基溴化銨、2.25mL正硅酸乙酯、67.5mL體積分?jǐn)?shù)為56%乙醇水溶液加入到錐形瓶中，最后 加入0.875mL 2mol/L NaOH溶液，室溫下攪拌2h后放入高溫反應(yīng)釜中于120°C反應(yīng)48h，反應(yīng) 結(jié)束后進(jìn)行抽濾，得到固體產(chǎn)物，固體產(chǎn)物用蒸餾水離心洗滌3~5次后加入到85°C乙醇溶 液中加熱回流24h(目的是除去十六烷基三甲基溴化銨），烘干后再將lg固體產(chǎn)物和30mL體 積分?jǐn)?shù)為85%二甲基亞砜水溶液混合，在160°C下攪拌8h(目的是除去模板分子），反應(yīng)結(jié)束 后將混合液抽濾再用蒸餾水離心洗滌3次，得到分子印跡聚合物；
[0020] 二、Mn摻雜ZnS量子點(diǎn)的制備:首先將25mmol硫酸鋅、2mmol氯化錳和80mL蒸餾水加 入到錐形瓶中，在氮?dú)鈿夥占皵嚢杷俣葹?50r/min的條件下反應(yīng)20min，然后以30滴/min的 滴速將物質(zhì)的量濃度為2.5mmol/mL的硫化鈉水溶液滴加到錐形瓶中，持續(xù)通入氮?dú)獠⒃谙?同的攪拌速度下繼續(xù)反應(yīng)30min，反應(yīng)結(jié)束后用蒸餾水離心洗滌3次，烘干得到Mn摻雜ZnS量 子點(diǎn)；
[0021] 三、介孔分子印跡熒光探針的制備：將〇.25g步驟一中制得的分子印跡聚合物、 0.12 5g步驟二中制得的Mn摻雜ZnS量子點(diǎn)、0.4mL巰丙基三甲氧基硅烷、8mL體積分?jǐn)?shù)為 87.5%乙醇水溶液加入到錐形瓶中，室溫下攪拌24h，反應(yīng)結(jié)束所得固體產(chǎn)品用蒸餾水離心 洗滌3次，烘干得到介孔分子印跡熒光探針。
[0022] 實(shí)施例2:
[0023] 本實(shí)施方式是一種介孔分子印跡熒光探針在檢測金霉素中的應(yīng)用，具體是按以下 步驟完成的：分別將〇.2g介孔分子印跡熒光探針與濃度為50~1000ng/mL的金霉素樣品溶 液混合并將混合液pH調(diào)節(jié)至8,超聲2min使其均勻分散，室溫下靜置lOmin后依次使用熒光 分光光度計進(jìn)行熒光分析，即完成介孔分子印跡熒光探針檢測金霉素中的應(yīng)用；其熒光檢 測條件設(shè)置如下： 工作模式：發(fā)射掃描； 激發(fā)波段：紫外可見； 起始波長：500nm;: 終止波長：700nm;
[0024] 掃描間隔：lnm; 負(fù)高壓：550V; 激發(fā)狹縫：l〇nm:; 發(fā)射狹縫：H)nm; ?I I描M度：240rmi/min 激發(fā)波 1C': 300nm
[0025]結(jié)果表明，由本發(fā)明建立的方法得到的金霉素的加標(biāo)回收率為92.1 %~97.5%， 相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(1?0)為2.5%~4.9%，被分析的金霉素的檢出限為1〇1^/111匕
【主權(quán)項】
1. 介孔分子印跡熒光探針的制備方法，具體是按以下步驟完成的： 一、 分子印跡聚合物的制備：將模板分子與四氫呋喃以及異氰酸丙基三乙氧基硅烷混 合，在80~100°C下攪拌20~24h(氮?dú)獗Ｗo(hù)），攪拌速度為300~380r/min，隨后通過旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)儀將四氫呋喃去除掉，得到預(yù)聚合溶液;再將預(yù)聚合溶液、表面活性劑、交聯(lián)劑正硅酸乙 酯、體積分?jǐn)?shù)為50%~60%乙醇水溶液加入到錐形瓶中，最后加入2~4mol/L NaOH溶液，室 溫下攪拌2~3h后放入高溫反應(yīng)釜中于110~130°C反應(yīng)40~50h，反應(yīng)結(jié)束后進(jìn)行抽濾，得 到固體產(chǎn)物，固體產(chǎn)物用蒸餾水離心洗滌3~5次后加入到80~90°C乙醇溶液中加熱回流20 ~30h(目的是除去表面活性劑），烘干后再將固體產(chǎn)物和體積分?jǐn)?shù)為80%~90%二甲基亞 砜水溶液混合，在140~180°C下攪拌8~10h(目的是除去模板分子），反應(yīng)結(jié)束后將混合液 抽濾再用蒸餾水離心洗滌3~5次，得到分子印跡聚合物;步驟一中所述的模板分子的質(zhì)量 與異氰酸丙基三乙氧基硅烷的體積比為lg:4~10mL;步驟一中所述的模板分子的質(zhì)量與四 氫呋喃的體積比為lg: 20~40mL;步驟一中所述的預(yù)聚合溶液的體積與表面活性劑的質(zhì)量 比為1 m L: 8~12 g;步驟一中所述的預(yù)聚合溶液與交聯(lián)劑的體積比為1:4 0~5 0;步驟一中所 述的交聯(lián)劑與體積分?jǐn)?shù)為50 %~60 %乙醇水溶液的體積比為1:30~40;步驟一中所述的預(yù) 聚合溶液與NaOH溶液的體積比為1:15~20;步驟一中所述的固體產(chǎn)物的質(zhì)量與體積分?jǐn)?shù)為 80%~90%二甲基亞砜水溶液的體積比為1 g: 20~30mL; 二、 Μη摻雜ZnS量子點(diǎn)的制備:首先將硫酸鋅、氯化錳和蒸餾水加入到錐形瓶中，在氮?dú)?氣氛及攪拌速度為300~380r/min的條件下反應(yīng)10~30min，然后以20~40滴/min的滴速將 物質(zhì)的量濃度為2~3mmol/mL的硫化鈉水溶液滴加到錐形瓶中，持續(xù)通入氮?dú)獠⒃谙嗤?攪拌速度下繼續(xù)反應(yīng)25~35min，反應(yīng)結(jié)束后用蒸餾水離心洗滌3~5次，烘干得到Μη摻雜 ZnS量子點(diǎn)；步驟二中所述的氯化錳和硫酸鋅的物質(zhì)的量之比為1:12~13;步驟二中所述的 氯化猛的物質(zhì)的量和蒸餾水的體積比為lmmo 1:70~90mL;步驟二中所述的硫酸鋅和硫化鈉 的物質(zhì)的量之比為1:0.9~1.1; 三、 介孔分子印跡熒光探針的制備:將步驟一中制得的分子印跡聚合物、步驟二中制得 的Μη摻雜ZnS量子點(diǎn)、硅烷偶聯(lián)劑、體積分?jǐn)?shù)為85 %~95%乙醇水溶液加入到錐形瓶中，室 溫下攪拌20~30h，反應(yīng)結(jié)束所得固體產(chǎn)品用蒸餾水離心洗滌3~5次，烘干得到介孔分子印 跡熒光探針;步驟三中所述的分子印跡聚合物與Μη摻雜ZnS量子點(diǎn)的質(zhì)量比為1:0.5~1;步 驟三中所述的分子印跡聚合物的質(zhì)量與硅烷偶聯(lián)劑的體積比為lg:l~2mL;步驟三中所述 的分子印跡聚合物的質(zhì)量與體積分?jǐn)?shù)為85%~95%乙醇水溶液的體積比為lg:30~40mL。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的介孔分子印跡熒光探針的制備方法，其特征在于步驟一中所 述的模板分子為四環(huán)素類抗生素，包括土霉素、四環(huán)素、金霉素、地美環(huán)素、強(qiáng)力霉素、米諾 環(huán)素或美她環(huán)素。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的介孔分子印跡熒光探針的制備方法，其特征在于步驟一中所 述的表面活性劑為聚環(huán)氧乙烷-聚環(huán)氧丙烷-聚環(huán)氧乙烷三嵌段共聚物(P123)或十六烷基 三甲基溴化銨。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的介孔分子印跡熒光探針的制備方法，其特征在于步驟三中所 述的硅烷偶聯(lián)劑為疏丙基二甲氧基硅烷或疏丙基二乙氧基硅烷。5. 權(quán)利要求1~4任何一項所述方法制備介孔分子印跡熒光探針在檢測四環(huán)素類抗生 素殘留中的應(yīng)用。6.如權(quán)利要求5所述的介孔分子印跡熒光探針在檢測四環(huán)素類抗生素殘留中的應(yīng)用， 具體是按以下步驟完成的:首先將介孔分子印跡熒光探針與一定濃度的四環(huán)素類抗生素樣 品溶液混合并將混合液pH調(diào)節(jié)至7~8,超聲1~2min使其均勾分散，室溫下靜置10~15min 后使用熒光分光光度計進(jìn)行熒光分析，即完成介孔分子印跡熒光探針檢測四環(huán)素類抗生素 殘留；所述的介孔分子印跡熒光探針的質(zhì)量與四環(huán)素類抗生素樣品溶液的體積比為lmg:l ~5mL〇
【文檔編號】G01N21/64GK105820585SQ201610214652
【公開日】2016年8月3日
【申請日】2016年4月8日
【發(fā)明人】陳立鋼, 張靚, 賈麗娜
【申請人】東北林業(yè)大學(xué)