一種利用菊粉進(jìn)行雙歧桿菌培養(yǎng)的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及雙歧桿菌培養(yǎng)領(lǐng)域，尤其涉及一種利用菊粉進(jìn)行雙歧桿菌培養(yǎng)的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]雙歧桿菌具有抗腫瘤、抗衰老、降血壓等多重功效，尤其是對(duì)腸胃病效果神奇，它能有效阻斷胃腸病源，快速殺滅致病菌，并增強(qiáng)胃腸功能，提高胃腸免疫力。此后100多年，雙歧桿菌得到廣泛運(yùn)用，但雙歧桿菌含量低、活性差、難保存。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]根據(jù)以上技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種利用菊粉進(jìn)行雙歧桿菌培養(yǎng)的方法，其具體操作步驟為:
(1)首先進(jìn)行原種液體培養(yǎng)，將雙歧桿菌菌種放入?yún)捬跖囵B(yǎng)器皿中進(jìn)行培養(yǎng)，所述培養(yǎng)基內(nèi)需要放置經(jīng)殺菌處理的培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基由植物蛋白胨、胰胨、酵母浸膏、葡萄糖、鹽溶液、蒸餾水構(gòu)成，培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)器皿放置在通風(fēng)處，確保培養(yǎng)器皿處理低溫狀態(tài)；
(2)然后進(jìn)行多級(jí)菌種培養(yǎng)，所述多級(jí)培養(yǎng)分為一級(jí)靜態(tài)培養(yǎng)、動(dòng)態(tài)培養(yǎng)、二級(jí)靜態(tài)培養(yǎng)，所述一級(jí)靜態(tài)培養(yǎng)時(shí)將土豆、菊粉進(jìn)行蒸煮，蒸煮后將其攪拌并混合在一起，然后將其放入作為培養(yǎng)基放入培養(yǎng)液中備用，再將上述步驟中的菌種接種到培養(yǎng)液中；動(dòng)態(tài)培養(yǎng)時(shí)取一級(jí)靜態(tài)培養(yǎng)液，但培養(yǎng)皿換為無色透明試劑瓶，將試劑瓶進(jìn)行滅菌，滅菌后放入培養(yǎng)液，然后接種一級(jí)菌種10%后，每隔5小時(shí)晃動(dòng)1分鐘，培養(yǎng)24-96小時(shí)，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到1.0億CFU\g時(shí)終止培養(yǎng)，室溫下保存?zhèn)溆?動(dòng)態(tài)培養(yǎng)后進(jìn)行二級(jí)靜態(tài)培養(yǎng)，取植物蛋白胨、肝提取液、玉米漿、酵母膏、肉牛浸膏、西紅柿培養(yǎng)基放入蒸餾水中進(jìn)行溶解，溶解后將菊粉進(jìn)行蒸煮，蒸煮后將菊粉和上述溶解液進(jìn)行混合，以此作為培養(yǎng)基，然后進(jìn)行二級(jí)菌種接種，接種20%后靜置，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到1.8億CFU\g時(shí)終止培養(yǎng)，室溫下保存?zhèn)溆茫?br> (3)最后進(jìn)行固體培養(yǎng)，利用玉米粉、大米粉、菊粉、全脂乳粉、肝提取液、玉米漿、酵母膏、肉牛浸膏進(jìn)行固體培養(yǎng)基制作，然后對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行冷卻滅菌，然后將三級(jí)液態(tài)菌種浸入到固體培養(yǎng)內(nèi)，然后將浸入菌種的固體培養(yǎng)基放入培養(yǎng)房內(nèi)進(jìn)行靜置發(fā)酵培養(yǎng)，當(dāng)細(xì)胞達(dá)至IJ6億CFU\g時(shí)終止培養(yǎng)。
[0004]所述西紅柿浸出液的制備方法為:將新鮮西紅柿洗凈稱重后切碎，加等量蒸餾水在100°C水浴中加熱，時(shí)時(shí)攪拌，約90min，然后用絨布過濾，校正pH 7.0，分裝三角瓶，115°〇高壓滅菌15?20min。
[0005]所述肝提取液的制備方法為:稱取新鮮豬肝1000g，切成小塊或絞碎，加蒸餾水至2000mL，混勾，置冰箱中過夜，第二天煮沸15?20min，絨布過濾，并擠壓收集全部濾液，加水補(bǔ)足原量，分裝三角瓶，115°C高壓滅菌15?20min。
[0006]所述菊粉的制備方法為:首先將菊芋清洗粉碎，加入菊芋質(zhì)量的1-2倍質(zhì)量體積的水混勻后用栗打入浸提罐;然后添加纖維素酶和果膠酶進(jìn)行浸提:往浸提罐里加入纖維素酶和果膠酶，得菊粉浸提液;酶加量為酶活與菊芋質(zhì)量比，其中纖維素酶的加量為0.01?
0.5U/g，果膠酶的加量為10?100U/g，浸提溫度50°C，浸提時(shí)間為20min?60min ;再進(jìn)行菊粉浸提液除雜脫色:菊粉浸提液中加入石灰乳調(diào)節(jié)pH至11_13，80°C靜置30min，再用磷酸調(diào)節(jié)至PH6，過濾，濾液中加入其質(zhì)量0.5%?2%的活性炭，80°C攪拌20~30min，得除雜脫色的浸提液;最后進(jìn)行濃縮噴霧干燥:除雜脫色的浸提液通過減壓蒸餾或膜濃縮方式濃縮，得菊粉濃度20%?30%的菊粉濃縮液;對(duì)菊粉濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，得到菊粉粉末成品。
[0007]本發(fā)明的有益效果為:現(xiàn)代人生活節(jié)奏加快，工作壓力增大，由此而引發(fā)的各種腸胃疾病尤其普遍，高活性的長型雙歧桿菌更能直接補(bǔ)充有益菌，調(diào)整人體微生態(tài)平衡。本發(fā)明改變了傳統(tǒng)的培養(yǎng)基，利用菊粉進(jìn)行培養(yǎng)，菊粉中含有大量的菊糖，菊糖可以預(yù)防便秘及治療肥胖癥膳食纖維減少食物在胃腸的停留時(shí)間，以及增加糞便量，有效地治療便秘。菊糖可以提高內(nèi)容物的黏度，降低食物從胃進(jìn)入小腸的速度，從而降低饑餓感，減少食物的攝食量，起到減肥作用，本發(fā)明利用菊粉對(duì)雙歧桿菌進(jìn)行培養(yǎng)，雙歧桿菌在培養(yǎng)過程中將菊糖進(jìn)行吸收可以有效的提高雙歧桿菌的活性和吸收效果，促進(jìn)雙歧桿菌在人體腸內(nèi)發(fā)酵后可產(chǎn)生乳酸和醋酸，能提高鈣、磷、鐵的利用率，促進(jìn)鐵和維生素D的吸收。
【具體實(shí)施方式】
[0008]根據(jù)實(shí)施例所示，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步說明:
實(shí)施例1
一種利用菊粉進(jìn)行雙歧桿菌培養(yǎng)的方法，其具體操作步驟為:首先進(jìn)行原種液體培養(yǎng)，將雙歧桿菌菌種放入?yún)捬跖囵B(yǎng)器皿中進(jìn)行培養(yǎng)，所述培養(yǎng)基內(nèi)需要放置經(jīng)殺菌處理的培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基由植物蛋白胨、胰胨、酵母浸膏、葡萄糖、鹽溶液、蒸餾水構(gòu)成，培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)器皿放置在通風(fēng)處，確保培養(yǎng)器皿處理低溫狀態(tài);然后進(jìn)行多級(jí)菌種培養(yǎng)，所述多級(jí)培養(yǎng)分為一級(jí)靜態(tài)培養(yǎng)、動(dòng)態(tài)培養(yǎng)、二級(jí)靜態(tài)培養(yǎng)，所述一級(jí)靜態(tài)培養(yǎng)時(shí)將土豆、菊粉進(jìn)行蒸煮，蒸煮后將其攪拌并混合在一起，然后將其放入作為培養(yǎng)基放入培養(yǎng)液中備用，再將上述步驟中的菌種接種到培養(yǎng)液中；動(dòng)態(tài)培養(yǎng)時(shí)取一級(jí)靜態(tài)培養(yǎng)液，但培養(yǎng)皿換為無色透明試劑瓶，將試劑瓶進(jìn)行滅菌，滅菌后放入培養(yǎng)液，然后接種一級(jí)菌種10%后，每隔5小時(shí)晃動(dòng)1分鐘，培養(yǎng)24-96小時(shí)，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到1.0億CFU\g時(shí)終止培養(yǎng)，室溫下保存?zhèn)溆?；?dòng)態(tài)培養(yǎng)后進(jìn)行二級(jí)靜態(tài)培養(yǎng)，取植物蛋白胨、肝提取液、玉米漿、酵母膏、肉牛浸膏、西紅柿培養(yǎng)基放入蒸餾水中進(jìn)行溶解，溶解后將菊粉進(jìn)行蒸煮，蒸煮后將菊粉和上述溶解液進(jìn)行混合，以此作為培養(yǎng)基，然后進(jìn)行二級(jí)菌種接種，接種20%后靜置，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到1.8億CFU\g時(shí)終止培養(yǎng)，室溫下保存?zhèn)溆?；最后進(jìn)行固體培養(yǎng)，利用玉米粉、大米粉、菊粉、全脂乳粉、肝提取液、玉米漿、酵母膏、肉牛浸膏進(jìn)行固體培養(yǎng)基制作，然后對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行冷卻滅菌，然后將三級(jí)液態(tài)菌種浸入到固體培養(yǎng)內(nèi)，然后將浸入菌種的固體培養(yǎng)基放入培養(yǎng)房內(nèi)進(jìn)行靜置發(fā)酵培養(yǎng)，