一種黃霉素發(fā)酵生產(chǎn)工藝的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及一種黃霉素發(fā)酵生產(chǎn)工藝。
【背景技術(shù)】
[0002]現(xiàn)有的黃霉素發(fā)酵生產(chǎn)工藝中，一直采用豆油作為生產(chǎn)菌的主要碳源，但是豆油的價(jià)格較貴，如何降低生產(chǎn)成本，而又能夠得到發(fā)酵效果好的黃霉素是本領(lǐng)域技術(shù)人員所要解決的技術(shù)問(wèn)題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明提供了一種黃霉素發(fā)酵生產(chǎn)工藝，生產(chǎn)成本低，發(fā)酵效果好。
[0004]新疆有豐富的棉籽油資源，價(jià)格比豆油低廉，本發(fā)明采用棉籽油替代豆油作為生產(chǎn)菌的碳源，發(fā)酵水平相當(dāng)，而成本卻能夠有效降低。
[0005]本發(fā)明提供一種黃霉素發(fā)酵生產(chǎn)工藝，是用含有棉籽油的培養(yǎng)基培養(yǎng)黃霉素生產(chǎn)菌得到的，所述黃霉素生產(chǎn)菌為\Streptomyces bambergiensisXJ-1510
[0006]作為優(yōu)選方案，所述培養(yǎng)基分為種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基；每10ml種子培養(yǎng)基中棉籽油的含量為0.05-0.15go
[0007]作為優(yōu)選方案，每10ml發(fā)酵培養(yǎng)基中棉籽油的含量為1.0g-4.0。
[0008]作為優(yōu)選方案，每10ml種子培養(yǎng)基的配方為:玉米淀粉3.0g、玉米漿0.5g、豆柏粉2.0g、棉籽油0.lg、碳酸鈣0.3g、磷酸二氫鉀0.2g、α -淀粉酶0.0I g/g干淀粉，純凈水余量；pH值7.2?7.5。
[0009]作為優(yōu)選方案，每10ml發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為:玉米淀粉3.0g、玉米漿0.5g、豆柏粉2.5g、棉籽油3.0g、磷酸氫二鉀0.0lg、碳酸鈣0.3g、α -淀粉酶0.004g/g干淀粉、硫酸銨
0.3g、硫酸鎂0.2g、氯化鈷0.0OOlg、硫酸亞鐵0.00003g、聚氧丙稀聚氧乙稀甘油醚0.05g、脂肪醇聚氧乙烯醚0-25 0.3g，純凈水余量；pH6.9?7.1。
[0010]作為進(jìn)一步地優(yōu)選方案，步驟如下:
(O將黃霉素生產(chǎn)菌菌種接入已滅菌的種子培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度35-37°C，搖床轉(zhuǎn)速220-260轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)18-26小時(shí)獲得搖瓶種子培養(yǎng)液；
(2)將上述搖瓶種子培養(yǎng)液通過(guò)無(wú)菌操作轉(zhuǎn)入已滅菌的種子罐，培養(yǎng)基使用種子培養(yǎng)基，攪拌轉(zhuǎn)速120-160r/min，罐溫35_37°C培養(yǎng)40_48h，獲得種子罐種子培養(yǎng)液；
(3)將上述種子罐種子培養(yǎng)液轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐培養(yǎng)，培養(yǎng)基使用發(fā)酵培養(yǎng)基，攪拌轉(zhuǎn)速80-130r/min ;溫度32°C?37°C，罐壓0.05 MPa,每分鐘內(nèi)通氣比1:0.6-1:1.1 ;發(fā)酵170-230 小時(shí)。
[0011]作為優(yōu)選方案，步驟(I)中接種量為0.45-0.55 _升菌液/50 _升培養(yǎng)基。
[0012]本發(fā)明的黃霉素發(fā)酵生產(chǎn)工藝發(fā)酵效果好，生產(chǎn)成本低，從圖1中可以看出，用棉籽油代替豆油，發(fā)酵水平相當(dāng)。
【附圖說(shuō)明】
[0013]附圖用來(lái)提供對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步理解，并且構(gòu)成說(shuō)明書(shū)的一部分，與本發(fā)明的實(shí)施例一起用于解釋本發(fā)明，并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的限制。在附圖中:
圖1為棉籽油和豆油分別作為培養(yǎng)基原料時(shí)的黃霉素效價(jià)對(duì)比，其中，橫坐標(biāo)為小時(shí)，縱坐標(biāo)為效價(jià)值(單位/毫升)。
【具體實(shí)施方式】
[0014]以下的實(shí)施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。
[0015]菌株和培養(yǎng)基:
1.黃霉素生產(chǎn)菌:斑伯鏈霉菌Streptcmycesbambergiensis YJ-151:由浙江錢(qián)江生物技術(shù)有限公司饋贈(zèng)；
2.培養(yǎng)基:
2.1.種子培養(yǎng)基(g/100ml):玉米淀粉:3.0、玉米漿0.5、豆柏粉2.0、棉籽油(食用棉籽油三級(jí)以上)0.05-0.15、碳酸鈣0.3、磷酸二氫鉀0.2、α -淀粉酶0.0I g/g干淀粉，pH值7.2 ?7.5。
[0016]2.2.發(fā)酵培養(yǎng)基(g/100ml):玉米淀粉3.0、玉米漿0.5、豆柏粉2.5、棉籽油(食用棉籽油三級(jí)以上)1.0-4.0、磷酸氫二鉀0.01、碳酸鈣0.3、α -淀粉酶0.004g/g干淀粉、硫酸銨0.3、硫酸鎂0.2、氯化鈷0.0001、硫酸亞鐵0.00003、聚氧丙烯聚氧乙烯甘油醚(消泡劑)0.05、脂肪醇聚氧乙烯醚0-25 (乳化劑)0.3、pH6.9?7.1。
[0017]本發(fā)明的黃霉素發(fā)酵生產(chǎn)工藝步驟如下:
(I)將冷凍管保藏的生產(chǎn)菌種Streptcmyces bambergiensis YJ-151號(hào)菌種接入已滅菌的種子培養(yǎng)基中，接種量為0.45-0.55毫升菌液/50毫升培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度35-37 °C，搖床轉(zhuǎn)速220-260轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)18-26小時(shí)獲得搖瓶種子培養(yǎng)液。
[0018](2)將上述搖瓶種子培養(yǎng)液通過(guò)無(wú)菌操作轉(zhuǎn)入已滅菌的種子罐，培養(yǎng)基使用種子培養(yǎng)基，攪拌轉(zhuǎn)速120_160r/ min，罐溫35_37°C培養(yǎng)40_48h，獲得種子罐種子培養(yǎng)液。
[0019](3)將上述種子罐種子培養(yǎng)液轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐培養(yǎng)，培養(yǎng)基使用發(fā)酵培養(yǎng)基，攪拌轉(zhuǎn)速80-130r/ min;溫度 32°C ?37 °C ,罐壓 0.05 MPa,每分鐘內(nèi)通氣比(v/ (v.min)) =1:0.6-1:1.1o
[0020](4)從36h開(kāi)始每24h檢測(cè)一次黃霉素效價(jià)，發(fā)酵170-230小時(shí)，得到黃霉素。
[0021](5)結(jié)論:結(jié)果參見(jiàn)圖1，從圖1中可以看出，用棉籽油代替豆油，發(fā)酵水平相當(dāng)。
[0022]實(shí)施例1
本發(fā)明的黃霉素發(fā)酵生產(chǎn)工藝步驟如下:
(I)將冷凍管保藏的生產(chǎn)菌種Streptcmyces bambergiensis YJ-151號(hào)菌種接入已滅菌的種子培養(yǎng)基中，接種量為0.50毫升菌液/50毫升培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度36 °C，搖床轉(zhuǎn)速240轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)22小時(shí)獲得搖瓶種子培養(yǎng)液。
[0023]種子培養(yǎng)基的配方為:玉米淀粉:3.0g、玉米漿0.5g、豆柏粉2.0g、棉籽油(食用棉籽油三級(jí)以上)0.10g、碳酸鈣0.3g、磷酸二氫鉀0.2g、α -淀粉酶0.0I g/g干淀粉，加水至 100ml，pH 為 7.3。
[0024](2)將上述搖瓶種子培養(yǎng)液通過(guò)無(wú)菌操作轉(zhuǎn)入已滅菌的種子罐，培養(yǎng)基使用種子培養(yǎng)基，攪拌轉(zhuǎn)速140r/ min，罐溫36°C培養(yǎng)44h，獲得種子罐種子培養(yǎng)液。
[0025](3)將上述種子罐種子培養(yǎng)液轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐培養(yǎng)，培養(yǎng)基使用發(fā)酵培養(yǎng)基，攪拌轉(zhuǎn)速I(mǎi)lOr/ min ;溫度 34°C ,罐壓 0.05 MPa,每分鐘內(nèi)通氣比(v/ (v.min) ) =1:0.8。
[0026]發(fā)酵培養(yǎng)基配方為:玉米淀粉3.0g、玉米漿0.5g、豆柏粉2.5g、棉籽油(食用棉籽油三級(jí)以上)3.0g、磷酸氫二鉀0.0lg、碳酸鈣0.3g、α -淀粉酶0.004g/g干淀粉、硫酸銨0.3g、硫酸鎂0.2g、氯化鈷0.0OO