一種山香酸a的制備方法及抗腫瘤應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明公開(kāi)了一種植物提取物的制備方法及應(yīng)用，特別涉及一種山香酸A的制備 方法及抗腫瘤應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 山香酸 A (Hyptatic acid A)，無(wú)色棱晶，mp. 298-304°C，分子式為 C3tlH48O5，分子量 為 488.71。
[0003] 山香酸A是從唇形科（Labiatae)頭狀山香辦piis capiiaia Jacq.地上部分中 分離得到一種三萜類(lèi)化合物。藥理研宄表明，山香酸A具有細(xì)胞毒活性，對(duì)A-549、HCT-8、 P388呈細(xì)胞毒活性。其ED50 ( μ g/ml)依次為5. 9、4. 2、6. 7。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為滿足臨床需要，擴(kuò)大用藥品種，更好地治療癌癥，，提供一種山香酸A的制備方 法及抗腫瘤應(yīng)用。
[0005] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案： 一種山香酸A的制備方法，其特征在于包括以下步驟：取頭狀山香地上部分原料粉碎， 加入5-10倍量50%-99%甲醇溶液，超聲提取2-3次，提取液縮后加入大孔樹(shù)脂柱中吸附，先 用3-9倍量10%-50%甲醇溶液洗脫，再用5-10倍60%-90%甲醇溶液洗脫，洗脫液濃縮調(diào)節(jié) ph3-5,加入乙酸乙酯充分?jǐn)嚢?，收集乙酸乙酯層，濃縮所得固體用高速逆流色譜儀分離，收 集流分減壓干燥即得。
[0006] 所述的大孔樹(shù)脂可選HZ816、HPD100、AB-8和DlOl中的一種。
[0007] 所述的高速逆流色譜儀分離條件為：取石氯仿、甲醇、水，按3-7:2-5:1-3混合，取 上相做固定相、下相為流動(dòng)相，主機(jī)轉(zhuǎn)速7〇〇 -l〇〇〇rpm，流速為l-3ml/min。
[0008] 所述制備的山香酸A，在其口服配方中添加腸吸收促進(jìn)劑，包含中鏈脂肪酸鹽、膽 酸鹽、鵝去氧膽酸鹽、殼聚糖及其衍生物中的一種或幾種。
[0009] 采用本法制備山香酸A，工藝簡(jiǎn)便易操作，制備量大，產(chǎn)品得率高，而且低污染；添 加腸吸收促進(jìn)劑，有利于提高生物利用度。
[0010] 下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限 于下列實(shí)施方式。
【具體實(shí)施方式】 [0011] 實(shí)施例1 : 山香酸A的制備 取頭狀山香地上部分粉碎，稱(chēng)20kg，用8倍90%甲醇溶液超聲提取30分鐘，提取3次， 提取液減壓濃縮后加入HZ816大孔樹(shù)脂柱中吸附，用5倍柱體積50%甲醇溶液洗脫，再用8 倍柱體積85%甲醇溶液洗脫，洗脫液濃縮調(diào)節(jié)ph4,加入乙酸乙酯充分?jǐn)嚢瑁占宜嵋阴?層，得固體粗提物。取氯仿、甲醇、水，按3:2:1混合，充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜 管做固定相，開(kāi)轉(zhuǎn)主機(jī)，轉(zhuǎn)速800rpm，同時(shí)泵入下相做流定相，建立動(dòng)態(tài)平衡后，流速調(diào)節(jié)為 2ml/min，用流動(dòng)相溶解浸膏，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，蒸發(fā)光散射檢測(cè)器在線監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)成分， 連續(xù)制備，流分回收試劑，得山香酸Al. 2g，經(jīng)HPLC檢測(cè)，含量99. 5%。
[0012] 實(shí)施例2: 山香酸A的抗腫瘤應(yīng)用 1、材料 動(dòng)物：昆明種小鼠，雌雄各半性，體重20±2g，由南京中醫(yī)藥大學(xué)提供。
[0013] 細(xì)胞株：Sarc〇ma 180腹水型瘤株（S180)，由中國(guó)科學(xué)院上海藥物研宄所提供。
[0014] 2、方法 取50只小鼠，每只小鼠左腋下接種S18tl瘤液，次日隨機(jī)分成5組，每組10只，分別為生 理鹽水對(duì)照組（NS組)、陽(yáng)性對(duì)照組、山香酸A低劑量組（lmg/kg)、中劑量組（2mg/kg)、高劑 量組（4mg/kg)。接種24h后山香酸A給藥組灌胃給藥，連續(xù)7，陽(yáng)性對(duì)照組試驗(yàn)期間腹腔注 射2次，隔日給藥。期間，每日觀察小鼠的一般活動(dòng)、皮毛、糞便等情況。最后一次給藥24h 后斷頸處死，稱(chēng)重，并計(jì)算抑瘤率。
[0015] 3、結(jié)果 本發(fā)明植物提取組合物對(duì)小鼠 S18tl皮下荷瘤有明顯的抑制作用，抑瘤率為 68. 32-74. 26%，結(jié)果見(jiàn)表 1。
[0016] 抑瘤率（％)=( 1-治療組平均瘤重/空白對(duì)照組平均瘤重）X% 表1本發(fā)明植物提取組合物對(duì)S18tl皮下荷瘤小鼠的抑瘤作用（n=10，I 土S)
注：與陽(yáng)性對(duì)照組相比，#P < 0. 01。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種山香酸A的制備方法，其特征在于包括以下步驟：取頭狀山香地上部分原料粉 碎，加入5-10倍量50%-99%甲醇溶液，超聲提取2-3次，提取液縮后加入大孔樹(shù)脂柱中吸 附，先用3-9倍量10%-50%甲醇溶液洗脫，再用5-10倍60%-90%甲醇溶液洗脫，洗脫液濃縮 調(diào)節(jié)ph3-5,加入乙酸乙酯充分?jǐn)嚢?，收集乙酸乙酯層，濃縮所得固體用高速逆流色譜儀分 離，收集流分減壓干燥即得。2. 據(jù)權(quán)利要求1所述的山香酸A的制備方法，其特征在于所述的大孔樹(shù)脂可選HZ816、 HPDKKKAB-8 和 DlOl 中的一種。3. 據(jù)權(quán)利要求1所述的山香酸A的制備方法，其特征在于所述的高速逆流色譜儀分離 條件為：取石氯仿、甲醇、水，按3-7:2-5:1-3混合，取上相做固定相、下相為流動(dòng)相，主機(jī)轉(zhuǎn) 速 700-1000rpm，流速為 l_3ml/min。4. 根據(jù)權(quán)利要求1~3所述方法制備的山香酸A，在其口服配方中添加腸吸收促進(jìn)劑。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的山香酸A，其特征在于腸吸收促進(jìn)劑包含中鏈脂肪酸鹽、膽酸 鹽、鵝去氧膽酸鹽、殼聚糖及其衍生物中的一種或幾種。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種植物提取物的制備方法及應(yīng)用，尤其涉及一種山香酸A的制備方法及抗腫瘤應(yīng)用。制備方法包括以下步驟：取頭狀山香地上部分粉碎，加入5-10倍量50%-99%甲醇溶液，超聲提取2-3次，提取液縮后加入大孔樹(shù)脂柱中吸附，先用3-9倍量10%-50%甲醇溶液洗脫，再用5-10倍60%-90%甲醇溶液洗脫，洗脫液濃縮調(diào)節(jié)ph3-5，加入乙酸乙酯充分?jǐn)嚢瑁占宜嵋阴?，濃縮所得固體用高速逆流色譜儀分離，收集流分減壓干燥即得。采用本發(fā)明制備方法，工藝操作簡(jiǎn)便、得率高，污染小，適合高純度山香酸A的生產(chǎn)。山香酸A具有抗腫瘤促進(jìn)作用，在其口服配方中添加腸吸收促進(jìn)劑，利于提高生物利用度。
【IPC分類(lèi)】C07J63/00, A61P35/00, A61K31/56
【公開(kāi)號(hào)】CN104945461
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510265993
【發(fā)明人】劉東鋒, 楊成東
【申請(qǐng)人】南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司
【公開(kāi)日】2015年9月30日
【申請(qǐng)日】2015年5月22日