一種拉科酰胺類似物的分離方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及一種拉科酰胺類似物的分離方法。
【背景技術(shù)】
[0002]
[0003] 拉科酰胺，一種新型N-甲基-D-天門(mén)冬氨酸（NMDA)受體甘氨酸位點(diǎn)拮抗劑，它可 選擇性促進(jìn)鈉通道緩慢失活并調(diào)節(jié)塌陷反應(yīng)介導(dǎo)蛋白22 (CRMP22)，屬于新一類功能性氨基 酸，具有全新雙重機(jī)制作用的抗癲癇藥物。在中國(guó)癲癇已經(jīng)成為神經(jīng)科僅次于頭痛的第二 大常見(jiàn)病，我國(guó)對(duì)抗癲癇藥物有著巨大需求，而拉科酰胺的作用機(jī)制不同于已上市的其他 抗癲癇藥，對(duì)現(xiàn)有藥物無(wú)法控制癥狀的患者有較好的療效，因此拉科酰胺的臨床用量需求 較大，市場(chǎng)前景好，其原料藥與制劑的開(kāi)發(fā)都具有重要意義。
[0004]
[0005] 目前在文獻(xiàn)中報(bào)道過(guò)的拉科酰胺合成方法多以中間體式III通過(guò)脫保護(hù)再上乙 ?；玫嚼契０?，如原研公司的專利CN101928230A、浙江九洲藥業(yè)股份有限公司的專利 CN102020589A 以及中國(guó)專利 CN103319366A。
[0006] 眾所周知，為了確保藥品安全，須對(duì)藥物質(zhì)量進(jìn)行嚴(yán)格控制，藥物含量測(cè)定、未知 雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)鑒定和雜質(zhì)限量是藥物質(zhì)量控制的有效方法，雜質(zhì)分析是藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的重要 內(nèi)容。目前，國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)拉科酰胺類似物的報(bào)道。
[0007] 因此，本領(lǐng)域亟需對(duì)拉科酰胺類似物進(jìn)行分離、鑒定并合成。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明所要解決的問(wèn)題是為了克服現(xiàn)有技術(shù)中缺乏拉科酰胺在合成過(guò)程中產(chǎn)生 的類似物的分離、鑒定并合成等缺陷，而提供了一種拉科酰胺類似物的分離方法。本發(fā)明的 拉科酰胺類似物是對(duì)拉科酰胺進(jìn)行質(zhì)量控制的必需品；本發(fā)明的分離方法可以高效地分離 得到上述的類似物。
[0009] 發(fā)明人在研發(fā)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，中間體式III的合成過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生雜質(zhì)，對(duì)終產(chǎn)品拉 科酰胺的質(zhì)量和收率的影響很大。如果反應(yīng)條件不當(dāng)，生成雜質(zhì)過(guò)多，就會(huì)在后面步驟中被 衍生化產(chǎn)生更多更復(fù)雜的雜質(zhì)，會(huì)嚴(yán)重影響拉科酰胺的藥物質(zhì)量和最終收率，因此，中間體 式III的質(zhì)量控制至關(guān)重要。我方將其分離鑒定，發(fā)現(xiàn)其結(jié)構(gòu)如式I所示。
[0010] 本發(fā)明提供了一種如式I所示的拉科酰胺類似物的分離方法，其包括下列步驟：
[0011]
[0012] (a)將拉科酰胺類似物的反應(yīng)母液進(jìn)行水洗、酸洗再水洗；
[0013] (b)減壓濃縮蒸除有機(jī)溶劑，得到油狀物；
[0014] (C)將所述的油狀物進(jìn)行正相柱層析或高效液相制備色譜，得到式I化合物即可；
[0015] 所述的拉科酰胺類似物的反應(yīng)母液的制備方法，包括下述步驟：在有機(jī)溶劑和水 的兩相溶劑中，在堿和相轉(zhuǎn)移催化劑的存在下，將式II化合物與甲基化試劑進(jìn)行取代反 應(yīng)，得到即可；
[0016]
[0017] 在所述的分離方法中，所述的酸可為本領(lǐng)域后處理中常規(guī)的酸，較佳地為經(jīng)水稀 釋后的酸，更佳地為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的磷酸水溶液。
[0018] 在所述的分離方法中，所述的正相柱層析的條件較佳地為：流動(dòng)相為正己烷或石 油醚，與乙酸乙酯的混合液，進(jìn)行洗脫。
[0019] 在所述的分離方法中，所述的正相柱層析的色譜柱的內(nèi)徑較佳地為30_ ;所述的 正相柱層析的色譜柱的長(zhǎng)度較佳地為400mm。
[0020] 在所述的分離方法中，所述的正相柱層析的填料較佳地為硅膠；所述的硅膠較佳 地為100目~200目的硅膠。
[0021] 在所述的分離方法中，所述的正相柱層析的流動(dòng)相中，較佳地，當(dāng)所述的流動(dòng)相為 正己烷和乙酸乙酯時(shí)，正己烷和乙酸乙酯的體積比為2~5(例如3);當(dāng)所述的流動(dòng)相為石 油醚和乙酸乙酯時(shí)，石油醚和乙酸乙酯的體積比為2~4(例如2. 5)。
[0022] 在所述的分離方法中，所述的正相柱層析的洗脫體積較佳地為5~10個(gè)柱體積， 例如7或8個(gè)柱體積。
[0023] 在所述的分離方法中，較佳地，所述的正相柱層析的洗脫液經(jīng)蒸餾除去溶劑，得到 式I化合物。
[0024] 在所述的分離方法中，所述的高效液相制備色譜的條件較佳地為：流動(dòng)相A為乙 腈或甲醇，流動(dòng)相B為水，進(jìn)行梯度洗脫。
[0025] 在所述的分離方法中，所述的高效液相制備色譜的色譜柱較佳地為Varian L&L4002 ;所述的高效液相制備色譜的色譜柱的內(nèi)徑較佳地為50mm ;所述的高效液相制備 色譜的色譜柱的長(zhǎng)度較佳地為200mm。
[0026] 在所述的分離方法中，所述的高效液相制備色譜的填料較佳地為PLRP-S ;所述的 高效液相制備色譜的填料的粒徑較佳地為10 μ m，孔徑較佳地為10nm。
[0027] 在所述的分離方法中，所述的梯度洗脫較佳地為0 - 15min，A:B = 30:70 ; 15 - 55111丨11，4:8 = 30:70 - 80:20;55 - 65111丨11，4:8 = 90:10，進(jìn)行線性梯度洗脫。
[0028] 在所述的分離方法中，所述的高效液相制備色譜的流速較佳地為100mL/min。
[0029] 在所述的分離方法中，所述的高效液相制備色譜的檢測(cè)波長(zhǎng)較佳地為210nm。
[0030] 在所述的分離方法中，所述的高效液相制備色譜的溫度較佳地為25°C~35°C。
[0031 ] 在所述的分離方法中，所述的高效液相制備色譜的洗脫液較佳地經(jīng)蒸餾除去溶 劑，得到式I化合物。
[0032] 在所述的拉科酰胺類似物的反應(yīng)母液的制備方法中，所述的有機(jī)溶劑可為本領(lǐng)域 該類反應(yīng)常規(guī)的有機(jī)溶劑，較佳地為甲苯或二氯甲烷，更佳地為甲苯。
[0033] 在所述的拉科酰胺類似物的反應(yīng)母液的制備方法中，所述的有機(jī)溶劑與式II化 合物的體積摩爾比可為本領(lǐng)域該類反應(yīng)常規(guī)的體積摩爾比，較佳地為4L/mol~5L/mol，例 如 4. 8L/mol。
[0034] 在所述的拉科酰胺類似物的反應(yīng)母液的制備方法中，所述的水與式II化合物的 體積摩爾比可為本領(lǐng)域該類反應(yīng)常規(guī)的體積摩爾比，較佳地為〇. lL/mol~0. 5L/mol，更佳 地為 0· 17L/mol ~0· 28L/mol，例如 0· 24L/mol。
[0035] 在所述的拉科酰胺類似物的反應(yīng)母液的制備方法中，所述的有機(jī)溶劑與所述的水 的體積比可為本領(lǐng)域該類反應(yīng)常規(guī)的體積比，較佳地為17~28,例如20。
[0036] 在所述的拉科酰胺類似物的反應(yīng)母液的制備方法中，所述的堿可為本領(lǐng)域該類反 應(yīng)常規(guī)的堿，較佳地為無(wú)機(jī)堿，更佳地為氫氧化鈉和/或氫氧化鉀。
[0037] 在所述的拉科酰胺類似物的反應(yīng)母液的制備方法中，所述的堿與式II化合物的 摩爾比可為本領(lǐng)域該類反應(yīng)常規(guī)的摩爾比，較佳地為3~5,例如4. 2。
[0038] 在所述的拉科酰胺類似物的反應(yīng)母液的制備方法中，所述的相轉(zhuǎn)移催化劑可為本 領(lǐng)域該類反應(yīng)常規(guī)的相轉(zhuǎn)移催化劑，較佳地為季銨鹽相轉(zhuǎn)移催化劑，更佳地為四丁基溴化 銨。
[0039] 在所述的拉科酰胺類似物的反應(yīng)母液的制備方法中，所述的相轉(zhuǎn)移催化劑與式II 化合物的摩爾比可為本領(lǐng)域該類反應(yīng)常規(guī)的摩爾比，較佳地為0. 1~0. 15,例如0. 12。
[0040] 在所述的拉科酰胺類似物的反應(yīng)母液的制備方法中，所述的甲基化試劑可為本領(lǐng) 域該類反應(yīng)常規(guī)的甲基化試劑，較佳地為碘甲烷、硫酸二甲酯和對(duì)甲苯磺酸甲酯中的一種 或多種，更佳地為硫酸二甲酯。
[0041] 在所述的拉科酰胺類似物的反應(yīng)母液的制備方法中，所述的甲基化試劑與式II 化合物的摩爾比可為本領(lǐng)域該類反應(yīng)常規(guī)的摩爾比，較佳地為3~5,例如4。
[0042] 在所述的拉科酰胺類似物的反應(yīng)母液的制備方法中，所述的取代反應(yīng)的溫度可為 本領(lǐng)域該類反應(yīng)常規(guī)的溫度；較佳地為〇°C~50°C，更佳地為25°C~35°C。溫度超過(guò)45°C 時(shí)會(huì)導(dǎo)致Boc-保護(hù)基的脫除，從而收率下降。
[0043] 在所述的拉科酰胺類似物的反應(yīng)母液的制備方法中，所述的取代反應(yīng)的時(shí)間較佳 地為3h~100h，例如21h、40h、96h。在3h~IOOh范圍內(nèi)，反應(yīng)時(shí)間越長(zhǎng)，收率越高。
[0044] 本發(fā)明還提供了上述如式I所示的拉科酰胺類似物作為標(biāo)準(zhǔn)品在下述由式II化 合物制備式ΠΙ化合物的反應(yīng)中的終點(diǎn)控制的應(yīng)用，
[0045]
〇
[0046] 本發(fā)明中，取代基Boc-為本領(lǐng)域常規(guī)所知的叔丁氧羰基。
[0047] 其中，所述的應(yīng)用較佳地包括下述步驟：將如式I所示的拉科酰胺類似物標(biāo)準(zhǔn)品 溶液和所述反應(yīng)的反應(yīng)液分別進(jìn)行高效液相色譜檢測(cè)，根據(jù)如式I所示的拉科酰胺類似物 標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖的保留時(shí)間確定反應(yīng)液中相關(guān)物質(zhì)的峰，并根據(jù)峰面積計(jì)算反應(yīng)液中式I化 合物的含量，從而最終實(shí)現(xiàn)反應(yīng)終點(diǎn)的控制。
[0048] 其中，所述的高效液相色譜的條件優(yōu)選如下：流動(dòng)相A為0. 005~0. 02mol/L磷酸 二氫鉀溶液，pH值為2. 8~3. 2,流動(dòng)相B為乙腈，以流動(dòng)相A :流動(dòng)相B按體積比為（55~ 65) : (45~35)進(jìn)行洗脫，柱溫為20~30°C，檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm，流速為I. 0~2. OmL/min， 進(jìn)樣量15~25 μ L，如式I所示的拉科酰胺類似物